鼻咽癌中p27^kip1表达及其与临床病理特征相关研究

目的检测p27^kip1蛋白在鼻咽癌中的表达,分析其与临床病理特征的关系。方法收集60例手术活检切取的鼻咽癌组织蜡块,与30例非肿瘤鼻咽组织石蜡标本作比较。应用免疫组织化学技术检测鼻咽癌组织中p27^kip1蛋白的表达,回顾性研究鼻咽癌患者的临床病理特征。结果p27^kip1蛋白在鼻咽癌细胞核和细胞质中均有表达。鼻咽癌组织中细胞核表达阳性率为46．7％（28／60）,低于非肿瘤鼻咽组织细胞核表达的90％（27／30）,P〈0．01;而在细胞质中阳性率为68．3％（41／60）,显著高于非肿瘤鼻咽组织的细胞质表达的20％（6／30）,P〈0．01。未发现p27^kip1蛋白在细胞核和细胞质表达与鼻咽癌原发灶的范围和局部侵犯程度有关,但p27^kip1蛋白胞核表达与淋巴结转移、远处转移和TNM临床分期有关;细胞质表达仅与淋巴结转移和TNM临床分期有关,可见p27^kip1蛋白胞核表达与临床病理的关系更为密切。结论与非肿瘤鼻咽组织相比,p27^kip1蛋白为细胞核低表达、细胞质高表达。鼻咽癌中p27^kip1蛋白存在不同于非肿瘤鼻咽组织的错误的核质定位,其在细胞核中表达的减少或丢失可能与鼻咽癌的恶性发展有关,提示p27^kip1蛋白的异常表达和定位可能涉及鼻咽癌的分期和转移。     

鼻咽癌组织中p16基因的缺失、高甲基化和蛋白的表达及其临床意义

目的探讨鼻咽癌组织中p16基因的缺失、高甲基化和蛋白的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学EnVision法检测90例鼻咽非角化性癌(NKC)组织p16蛋白的表达缺失,聚合酶链反应和甲基化酶切方法检测23例NKC组织p16基因缺失和高甲基化。结果90例NKC中p16蛋白表达阴性率为46.7%(42/90),而对照组的阴性率为0(0/30),P<0.05。p16蛋白表达与NKC患者的5年生存率有明显的相关性,生存期5年内者,其缺失率为60.0%(36/60);生存期5年以上者,其缺失率为20.0%(6/30),P<0.05。有、无远处器官转移的病例p16蛋白阴性率分别为81.8%(9/11)和41.8%(33/79),P<0.05。而有、无颅底破坏和(或)颅神经侵犯病例p16蛋白阴性率分别为41.7%(10/24)和48.5%(32/66),P>0.05。23例NKC中未检测到p16基因外显子1的缺失,但有10例p16基因外显子2的缺失,缺失率为43.4%(10/23);同时检测到2例外显子1的异常甲基化,高甲基化率为8.7%(2/23);总突变率为52.1%(12/23)。结论在NKC的发生发展过程中,p16基因缺失起着重要的作用。p16蛋白表达与NKC患者的5年生存率和远处转移有一定的相关性,而与NKC的局部组织侵犯无明显相关性。     

p27^kip1在胃癌中的表达及与临床病理分期和预后的关系

目的：探讨p27^kip1在胃癌中的表达状况及其预后价值。方法：应用免疫组化技术（S－P法）检测了p27^kip1在67例胃癌中的表达。结果：p27^kip1在胃癌中的阳性表达率为50．7％表达呈异质性。p27^kip1的表达与胃癌的浸润深度（P＜0．05）、淋巴结转移（P＜0．005）、分化程度（P＜0．05）及临床病理分期（P＜0．005）显著相关,而与肿瘤大小、部位无关。结论：p27^kip1在胃癌中低表达反映了其恶性进展,是一个有价值的预后因子。     

胃肠道类癌中p27^kipl、PCNA表达及p16基因缺失

目的：探讨p27^kipl、PCNA及p16与胃肠道类癌转移的关系。方法：采用免疫组化SABC法检测25例胃肠道类癌组织中p27^kipl和PCNA蛋白表达，同时用PCR法检测p16基因的缺失情况。结果：p27^kipl在胃肠道癌阳性表达率为64％（16／25），PCNA I－Ⅱ级和Ⅲ-Ⅳ级表达率分别为56％、44％。2种蛋白阳性表达率与分化程度无相关性（P＞0．05），与淋巴结转移相关（P＜0．05）。p27^kipl与PCNA表达负相关。p16基因纯合性缺失率为48％（12／25），其缺失率与类癌分化程度和淋巴结转移无关。结论：p27^kipl低表达、PCNA高表达与胃肠道类癌转移有关，胃肠道；类癌的发生与p16基因缺失有关，但可能为早期分子事件。     

鼻咽癌组织中Gli1蛋白表达及其临床意义

目的：探讨鼻咽癌( nasopharyngeal carcinoma,NPC)组织中Gli1蛋白表达及其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测77例NPC及20例慢性鼻咽黏膜炎组织中Gli1蛋白表达,分析其表达与NPC临床病理特征的关系。结果 Gli1蛋白在NPC组织(57．14%)中的表达高于慢性鼻咽黏膜炎组织(30%),差异有统计学意义(P<0．05)。 Gli1蛋白表达与肿瘤淋巴结转移有关( P <0．05)。结论 Gli1蛋白在NPC组织中表达上调,可能与NPC的侵袭、转移有关。     

p53和bcl-2蛋白过度表达与大肠癌生物学行为的关系

目的：探讨p53蛋白和bcl－2蛋白共同表达与大肠癌生物学行为的关系。方法：应用免疫组织化学染色ABC法检测p53蛋白及bcl－2蛋白在67例大肠癌组织中的表达。结果：全阴性组和p53阴性bcl－2阳性组的PCNA增殖指数低于p53阳性bcl－2阴性组及全阳性组（P＜0．01或P＜0．05）。全阳性、p53阳性bcl－2阴性组及p53阴性bcl－2阳性组均多呈浸润性生长（P＜0．01或P＜0．05）。全阳组浸润深度多至浆膜外（P＜0．01或P＜0．05）。两蛋白全阴性组5年生存率高（P＜0．05）。P53和bcl－2蛋白表达与大肠癌Dukes分期、淋巴结转移和组织学类型均无统计学意义。结论：bcl－2蛋白表达对细胞增殖的相关性不大。主要是p53蛋白的作用。只要有1种蛋白表达时大肠癌即多呈浸润性生长，两种蛋白全部阳性组浸润深度较深，蛋白全部阴性组的预后较好，提示p53和bcl－2蛋白的表达情况可部分地反映大肠癌的生物学行为。     

鼻咽癌中p27kip1表达及其与临床病理特征相关研究

目的 检测p27kip1蛋白在鼻咽癌中的表达,分析其与临床病理特征的关系.方法 收集60例手术活检切取的鼻咽癌组织蜡块,与30例非肿瘤鼻咽组织石蜡标本作比较.应用免疫组织化学技术检测鼻咽癌组织中p27kip1蛋白的表达,回顾性研究鼻咽癌患者的临床病理特征.结果 p27ksp1蛋白在鼻咽癌细胞核和细胞质中均有表达.鼻咽癌组织中细胞核表达阳性率为46.7%(28/60),低于非肿瘤鼻咽组织细胞核表达的90%(27/30),P＜0.01;而在细胞质中阳性率为68.3%(41/60),显著高于非肿瘤鼻咽组织的细胞质表达的20%(6/30),P＜0.01.未发现p27kip1蛋白在细胞核和细胞质表达与鼻咽癌原发灶的范围和局部侵犯程度有关,但p27kip1蛋白胞核表达与淋巴结转移、远处转移和TNM临床分期有关;细胞质表达仅与淋巴结转移和TNM临床分期有关,可见p27kip1蛋白胞核表达与临床病理的关系更为密切.结论 与非肿瘤鼻咽组织相比,p27kip1蛋白为细胞核低表达、细胞质高表达.鼻咽癌中p27kip1蛋白存在不同于非肿瘤鼻咽组织的错误的核质定位,其在细胞核中表达的减少或丢失可能与鼻咽癌的恶性发展有关,提示p27kip1蛋白的异常表达和定位可能涉及鼻咽癌的分期和转移.     

流式细胞术测定食管癌中PCNA、p27的表达

目的 探讨细胞周期调控蛋白PCNA、p27在食管癌中的表达以及与食管癌的分化和淋巴结转移的关系。方法 采用流式细胞术定量检测65例食管鳞状细胞癌上PCNA、p27蛋白的表达强弱(用荧光指数FI表示)。结果 PCNA在低分化型(G3)鳞癌上的表达量明显高于分化型(G1，G2)鳞癌(P=0．0002)；p27在低分化型鳞癌上的表达量明显低于分化型鳞癌(P=0．0042)。PCNA与p27呈负相关。该两种基因蛋白的表达强弱均与淋巴结转移无关。结论 PCNA、p27的表达强弱与食管癌的分化密切相关。     

Cyclin D1和p16、p27在脑胶质瘤中的表达及其与PCNA的相关性

目的检测Cyclin D1和p16、p27以及PCNA在脑胶质瘤中的表达状况,以探讨不同病理类型脑胶质瘤中各自的表达及其相关性.方法应用免疫组化S-P法,检测12例正常脑组织、58例脑胶质瘤组织中Cyclin D1、p16、p27及PCNA表达及其特征.结果Cyclin D1在由低度恶性胶质瘤向高度恶性胶质瘤转化中阳性表达逐渐增强(χ2检验,P＜0.005,χ2=51.67);而p16、p27阳性表达却是随着胶质瘤恶性程度的升高而降低(χ2检验,P值均＜0.005,χ2分别为15.41和12.81).Cyclin D1与PCNA呈正相关,rs=0.745;p16和p27与PCNA呈负相关,rs分别为-0.566和-0.612.结论脑胶质瘤中Cyclin D1的表达程度对胶质瘤的细胞增殖活性起促进作用,而p16、p27的表达则起抑制作用.     

p62/SQSTM1在鼻咽癌中的表达

目的:研究p62在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞、组织中的表达情况及其自身抗体在外周血中的水平,探究p62与NPC发生、转移的关系及其在临床中的应用价值.方法:采用Western印迹法和免疫组织化学染色法分别检测NPC细胞株NP69,6-10B和5-8F和NPC患者组织中的p62表达;ELISA检测患者血清中抗p62抗体浓度,并分析其与临床病理特征的关系.结果:p62在NP69,6-10B和5-8F细胞中的表达水平依次升高(P＜0.05);NPC组织中p62高表达,其水平与患者有无转移(x2=9.332,P=0.002)有关.NPC患者血清中抗p62水平较慢性鼻咽炎组明显升高(t=-4.653,P＜0.001),且抗p62抗体水平与患者是否转移有关(t=14.255,P=0.016);血清抗p62抗体筛查NPC的最佳临界值为51.82 μg/L,判别是否发生转移的临界值为62.03 μg/L.结论:p62高表达与NPC发生及转移密切相关,组织中p62蛋白和血清中抗p62抗体可能作为NPC病情监测和判断预后的新指标.     

Ⅲ期鼻咽癌p53蛋白表达与生物学行为及预后的关系及其与p53基因突变、潜伏膜蛋白-1表达的相关研究

目的：探讨Ⅲ期鼻咽分化型非角化性鳞癌中P53蛋白的表达与生物学行为及预后的关系,以及P53蛋白表达与P53基因突变和潜伏膜蛋白（LMP）－1蛋白表达的关系。方法：应用免疫组织化学EnVison法和聚合酶链反应－单链构象多态性分析（PCR－SSCP）检测58Ⅲ例鼻咽分化型非角化性鳞癌标本。结果：58份Ⅲ期鼻咽分化型非角化性鳞癌中,P53蛋白总阳性率为65．5％（3858）,生存期在5年以下的患者阳性率为82．1％（32／39）,5年以上患者31．6％（6／19）,两组间P53蛋白表达差异有显著性意义（P＜0．05）,P53蛋白表达在有预底侵袭组为74．4％（29／39）,无颅底侵袭组为47．4％（919）,两组间差异有显著性意义（P＜0．05）,PCR－SSCP检测15例P53蛋白阳性的病例,P53基因5－8外显子突变率为0（0／15）,LMP－1蛋白免疫组织化学总阳性率为72．4％（42／58）,与P53蛋白表达呈正相关关系（r=0.504)。结论：本组Ⅲ期鼻咽分化型非角化性鳞癌患者中P53蛋白表达与P53基因突变无相关关系。与LMP－1蛋白的表达相关,P53蛋白的表达阳性率随着患者生存期的延长而降低,有颅底侵袭组P53蛋白表达阳性率高于无颅底侵袭组。     

Association of Epstein-Barr virus infection with p53 protein accumulation but not bcl-2 protein in nasopharyngeal carcinoma

AIMS: The aim of this study was to investigate the association of Epstein-Barr virus (EBV) infection with status of p53 protein expression in nasopharyngeal carcinoma (NPC). The expression of EBV gene and gene product, p53 protein and bcl-2 protein in NPC was histopathologically studied. METHODS AND RESULTS: In-situ hybridization using oligonucleotide probe to EBV-encoded small RNAs (EBERs) and immunohistochemistry using monoclonal antibodies against EBV latent membrane protein 1 (LMP1), p53 protein and bcl-2 proteins were performed in 56 primary NPCs. EBERs were detected in 46 (82%) cases and LMP1 in 17 (30%) cases. While 30 of 32 (94%) cases in differentiated nonkeratinizing carcinoma (NKC, WHO type 2) and 16 of 17 (94%) cases in undifferentiated carcinoma (UC, WHO type 3) showed EBERs expression, neither five cases of keratinizing squamous cell carcinoma (KSCC, WHO type 1) nor two cases of adenocarcinoma showed EBERs. bcl-2 protein was detected in 50 (89%) cases, but its expression did not depend on expression of LMP1. p53 protein was detected in 31 (55%) cases, and there was a correlation between expression of EBERs and p53 protein (P < 0.05) but not between LMP1 and p53 protein. CONCLUSION: In this study, close association of NKC and UC but not KSCC with the latent infection with EBV was demonstrated. The induction of bcl-2 protein by LMP1, as shown in vitro, was not demonstrated. The association between overexpression of p53 protein and the presence of EBV suggests that some EBV-encoded protein, which may be different from LMP1, may play a role for nuclear accumulation of p53 protein.     

应用组织微阵列技术分析各期鼻咽癌组织p16的表达

目的　构建高通量组织微阵列 /组织芯片 (high throughputtissuemicroarray/tissuechip) ,明确p16基因表达与鼻咽癌的相关性及探讨组织芯片技术的可行性。方法　用组织阵列仪制备按不同临床分期排布的组织芯片 ,然后用免疫组织化学LSAB法检测一张组织芯片上 2 5 9例鼻咽活检组织样本中p16蛋白表达 ,并分析p16蛋白表达在鼻咽癌组织的分布状况及其与临床分期的相关性。结果在正常鼻咽黏膜组织、Ⅰ～Ⅳ期及未分期鼻咽癌组织中p16蛋白的缺失情况分别为 0 / 18、3/ 3、86 3%(38/ 44 )、86 8% (5 9/ 6 8)、82 1% (2 3/ 2 8)、88 8% (87/ 98)。鼻咽癌组织中p16蛋白表达率低于鼻咽非癌组织 (χ2 =82 5 8,P <0 0 0 1) ,p16蛋白表达与鼻咽癌的临床分期无显著相关性 (χ2 =0 0 9,P =0 76 9)。结论　鼻咽癌中p16蛋白的高频缺失提示p16基因在鼻咽癌的发生发展中起重要作用 ,而这种表达缺失在早晚期鼻咽癌中的一致性又提示p16蛋白缺失是鼻咽癌形成过程中的一个早期事件。应用组织芯片大规模高效检测临床组织样本是可行的 ,具有快速、方便、经济、准确的特点。     

Differential expression of cdk inhibitors p16, p21cip1, p27kip1, and cyclin E in cervical cytological smears prepared by the ThinPrep method

Our objective was to correlate p16, p21cip1, p27kip1, and cyclin E protein expression with the degree of dysplasia on ThinPrep Papanicolaou (Pap) smears using a modified immunoperoxidase staining. Smears read as normal, atypical squamous cells of undetermined significance (ASC-US), low-grade squamous intraepithelial lesion (LSIL), or high-grade SIL (HSIL) were identified and tested for high-risk human papillomavirus (HR-HPV). Additional smears were processed for immunoperoxidase for p16, p21cip1, p27kip1, and cyclin E. Thirty-four smears were satisfactory for study. The p16 was positive in all nine HSIL, in four of nine LSIL, and in one of seven ASC-US. The p27kip1 was positive in all nine HSIL, in eight of nine LSIL, and in one of seven ASC-US. The p21cip1 was positive in all nine HSIL, in one of nine LSIL, and in one of seven ASC-US. Cyclin E was positive in seven of nine HSIL and in one of nine LSIL and in none of the ASC-US smears. Normal smears were negative for all the antigens. There was poor correlation of protein expression and HR-HPV infection. We concluded that p16, p21cip1, p27kip1, and cyclin E can be demonstrated on Pap smears and they are expressed differentially in dysplastic cells, with highest expression in HSIL. The p21cip1 and cyclin E showed the greatest correlation with HSIL.     

曲古菌素A抑制血清诱导血管平滑肌细胞p27kip1表达的降解

目的：探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A（TSA）对血管平滑肌细胞（VSMCs）p27kip1表达的影响和调控机制。方法:半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测p27kip1 mRNA水平，蛋白印迹测定p27kip1和skp2蛋白表达，荧光分光光度法测定20S蛋白酶体活性。结果:100 μg/L TSA不影响VSMCs中p27kip1的mRNA水平。100 μg/L TSA显著抑制血清诱导的p27kip1蛋白下调，并延长p27kip1蛋白的半衰期。100 μg/L TSA抑制血清诱导的skp2表达上调，且skp2表达与相应时点p27kip1蛋白呈负相关。100 μg/L TSA对20S蛋白酶体活性物无影响。结论:TSA对VSMCs的p27kip1表达调控不是在转录水平上，而是通过翻译后机制抑制血清诱导VSMCs的p27kip1蛋白降解，其机制可能与TSA抑制泛素连接酶亚单位skp2表达有关。     

LMP1调节鼻咽上皮与鼻咽癌组织中p27与RPLP0蛋白的表达

目的: 观察p27和核糖体磷酸化蛋白大亚基P0(RPLP0)蛋白在潜伏膜蛋白1(LMP1)阳性鼻咽癌细胞中的表达,揭示蛋白质之间的相互作用规律及临床病理学意义。方法: 采用Western blotting分析p27和RPLP0蛋白表达与LMP1表达之间的关系,S-P免疫组织化学染色检测LMP1、p27和RPLP0蛋白在30例鼻咽上皮组织和60例鼻咽低分化鳞状细胞癌中表达,并分析其临床病理学意义。结果: (1)LMP1在鼻咽上皮和鼻咽低分化鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为73.3%和90.0%;(2)与LMP1(-)组织比较,p27蛋白在LMP1(+)的鼻咽上皮和鼻咽低分化鳞状细胞癌中表达降低,而RPLP0蛋白表达与之相反;(3)p27蛋白和RPLP0蛋白表达与鼻咽癌患者年龄、LMP1蛋白的表达、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05),患者年龄小、LMP1(-)、无淋巴结转移、TNM I期和II期时,p27蛋白表达阳性率较高,而RPLP0蛋白表达则反之(P<0.05)。结论: LMP1在鼻咽上皮和鼻咽低分化鳞状细胞癌中下调p27和上调RPLP0蛋白的表达;鼻咽癌患者年龄小、LMP1(-)、无淋巴结转移、TNM I期和II期时,p27蛋白表达阳性率较高,而RPLP0蛋白表达则与之相反。     

Expression of p21<Superscript>cip1</Superscript>, p27<Superscript>kip1</Superscript>, and p16<Superscript>INk4a</Superscript> Cyclin-Dependent Kinase Inhibitors in Papillary Thyroid Carcinoma: Correlation with Clinicopathological Factors

In a variety of human malignancies, aberrant expression of proteins involved in the control of cell-cycle progression has been reported. In this study, p21^cip1, p27^kip1, and p16^INk4a cyclin-dependent kinase inhibitors were analyzed to evaluate their usefulness in clinical management of papillary thyroid carcinoma (PTC). Archived material derived from 46 cases of PTC was analyzed immunohistochemically. Protein expression was ascertained on tissue microarrays, and results were correlated with clinicopathological features of the patients. Positive immunostaining was observed in 14 (30,4%) p21^cip1, 26 (56,5%) p27^kip1, and 14 (30,4%) p16^INk4a cases. No significant correlation between p21^cip1 or p27^kip1 and clinical factors was found. In contrast, p16^INk4a expression showed a significant correlation with initial extension of the disease. Therefore, 45.8% of patients with loco-regional extension were p16^INk4a positive, whereas overexpression was only seen in 15.7% of cases with intrathyroid disease (p < 0.05). Moreover, all patients with simultaneous p16^INk4a positivity and lack of p27^kip1 staining (four patients) presented lymph node metastases. In contrast, only 12 (28.5%) of the remaining patients showed lymph node tumor involvement. In conclusion, p16^INk4a expression suggests extrathyroid neck extension of PTC. This effect is enhanced when p27^kip1 is negative. We think that their analysis by immunohistochemistry could be useful in the management of patients with PTC.     

12(S)-HETE对大鼠系膜细胞和肾小球内p27~(kip1)表达的影响

目的:探讨12-脂氧化酶的活性代谢产物12(S)-HETE对系膜细胞和肾小球内p27~(kip1)表达的影响.方法:12(S)-HETE刺激的系膜细胞和皮下包埋的微型渗透泵长期持续恒速注入12(S)-HETE刺激的大鼠提取的肾小球来观察p27~(kip1)的表达.采用总蛋白量/细胞数的比值作为细胞肥大的评价指标,利用RT-PCR和Western blot方法检测p27~(kip1) mRNA和蛋白的表达.结果:12(S)-HETE刺激能够直接诱导系膜细胞发生肥大.12(S)-HETE刺激的系膜细胞内p27~(kip1)mRNA水平没有变化,而p27~(kip1)蛋白的表达明显增加.然而,在微型渗透泵持续恒速注入12(S)-HETE刺激的大鼠提取的肾小球内p27kip1mRNA水平和蛋白的表达均增加.结论:12(S)-HETE能够通过促进p27~(kip1)的高表达而参与细胞周期的调控,是引起肾小球系膜细胞和肾小球肥大、衰老的重要原因之一.