红细胞CD35在抗原激活淋巴细胞免疫反应中的作用

目的探讨红细胞CD35在抗原激活淋巴细胞免疫反应中的作用。方法用淋巴细胞分离液分离健康成人ACD抗凝全血获得淋巴细胞悬液(1×106/ml)和红细胞悬液(1×108/ml),以灭活腹水癌细胞S180(1×106/ml)作为激活抗原,以自体血浆作为反应基质,考察红细胞对淋巴细胞的调控能力,流式细胞仪检测淋巴细胞表面CD25的表达阳性率。单抗封闭红细胞CD35或EDTA破坏补体,观察淋巴细胞CD25表达的变化。结果CD35单抗封闭后淋巴细胞CD25表达量(18·22%±4·27%)明显降低;EDTA破坏补体后,淋巴细胞CD25表达量(18·79%±3·90%)比ACD抗凝组(23·29%±4·40%)明显降低,与CD35阻断组基本相同,但仍高于Hanks′液对照组(13·19%±2·96%)。结论红细胞CD35和血浆补体对抗原激活淋巴细胞免疫反应起着重要的调控作用;血浆中还存在其他调控淋巴细胞活化的机制。促进红细胞表面CD35分子表达、保持血浆补体活性对提高淋巴细胞免疫活性有着重要意义。     

芥子气中毒对人体淋巴细胞影响的研究

为了解芥子气对免疫系统的影响 ,笔者对“8·4”芥子气中毒事件中 4 4名中毒人员进行了T细胞花环试验、T淋巴细胞转化试验及T细胞亚群测定试验 ,现总结分析如下。1　临床资料1.1　对象　收治中毒人员 4 4名 ,男 39名 ,女 5名 ,年龄 8～ 5 5岁 ,平均 2 9岁。根据中毒的轻重度分 :特重者 5名 ,重度者 16名 ,中度者 11名 ,轻度者 12名。1.2　方法　清晨抽取中毒人员的静脉血 5ml(严格无菌操作 ,用肝素抗凝 ) ,分别进行T细胞花环试验、T淋巴细胞转化试验及免疫荧光法T细胞亚群测定试验。2　结　果4 4名中毒人员中只有 2名特重患者表现异常 :T…     

血管组织工程基质材料及管形支架的制备

目的：几种血管基质材料的制作及比较。方法：采用EDC交联胶原和粘多糖材料；采用戊二醛和热交联得到明胶加壳聚糖材料；应用去垢剂，渗透压改变和核酸酶消化的方法，对猪主动脉进行去细胞处理，得到完整的去细胞纤维支架。采用直接模具成型，形成多种管形支架。结果：得到明胶加壳聚糖、完整的猪主动脉去细胞纤维支架等几种基质材料；管形支架外径1cm，内径0．6～0．8cm，放置培养液中10d，可保持管腔形状，不塌陷，不变形。结论：明胶加壳聚糖三维结构好，主动脉脱细胞基质仍显致密，采用模具直接成型、冷冻干燥技术相结合，可以得到多种管状的可降解基质支架。     

原发性失眠患者外周血淋巴细胞亚群与NK细胞及其活化性受体表达水平及意义

目的探讨原发性失眠患者外周血淋巴细胞亚群与NK细胞及其活化性受体的表达水平。方法选取北部战区总医院心理科收治的33例原发性失眠患者为观察组,另选取同期健康体检者11例为健康组。采用流式细胞术检测两组外周血淋巴细胞亚群比例、NK细胞的活化性受体和细胞毒活性。结果与健康组比较,观察组患者NK细胞表面NKp30受体表达降低(P<0.05);NKp30受体表达与匹兹堡睡眠质量指数量表评分呈负相关(P<0.05);与健康组比较,靶细胞刺激后观察组NK细胞脱颗粒作用减弱(P<0.05)。结论原发性失眠患者外周血中NK细胞表面NKp30受体表达减少,NK细胞脱颗粒作用减弱。失眠越严重,NKp30表达越低,脱颗粒作用减弱越显著。     

一种改进的分离TIL方法的初步建立

本文对10例手术切除膀胱移行细胞癌新鲜组织标本,采用改进法分离肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL),与经典法比较,证实该法能提高TIL的分离纯度。     

三种脱钙液对骨组织脱钙后切片染色效果分析

在病理工作中,骨组织的脱钙处理是一大技术难题。骨组织是一种坚硬的结缔组织,由细胞、基质和纤维组成,纤维是和胶原纤维一样的骨胶原纤维,其基质含大量固定的无机盐。骨组织内共有骨母细胞、骨细胞、破骨细胞三种细胞,要顺利制出一张质量较好的组织切片并非易事,基本要求是切片完整,染色后各种骨细胞的细胞核及胞浆清晰,细胞外胶原对比度好。目前使用的脱钙方法有很多种,可以分为酸类脱钙液、螯合剂脱钙液、电解法脱钙液等。     

人外周血淋巴细胞体外辐射敏感性的评定

本文报道了31例(男性20例,女性11例;18～46岁)正常成人外周血淋巴细胞经X线体外照射后增殖能力的实验结果。标本采用全血和经葡聚糖-泛影钠密度梯度法分离的单核的细胞;照射剂量为0～400拉德;用集落形成和淋巴细胞刺激试验(LST)对照射细胞进行辐射敏感性分析。各实验组又分别用植物血凝素(PHA)、刀豆球蛋白A(Con-A)、A蛋白(PA)、美洲商陆(PWM)或结核菌素纯蛋白衍化物(PPD)作为促进细胞分裂的丝裂原,并用经2500拉德照射过的淋巴细胞作为刺激细胞,经0～400拉德照射后的淋巴细胞作为反应细胞,进行单向淋巴细胞混合培养(MLC)。分析不同方法所得的结果表明:用集落形成的方法检测淋巴细胞的辐射敏感性较LST更为灵敏,比较全血照射和分离的淋巴细胞照射后淋巴细胞的D_(37)值,发现全血照射在大部分的实验组中D_(37)值较相应淋巴细胞照射组为低。作者认为全血照射对淋巴细胞的损伤作用更大,其机理可能与密度梯度法分离的淋巴细胞中含更多的辐射抗性细胞有关,也不排除血内其他细胞的间接或直接影响。现将实验结果择要列表如下:     

低剂量辐射对脐血免疫细胞功能影响的初步研究

目的 观察低剂量辐射对脐血淋巴细胞增殖，CD25分子表达，IL－2水平和NK细胞活性的影响。方法：（1）采用^3H-TdR掺入法和^3H-TdR释放法检测62mGy,124mGy,186mGy 射线照射新鲜分离的脐血淋巴细胞增殖和NK细胞活性。（2）采用单克隆抗体直接免疫荧光标记流式细胞术和酶联免疫吸附实验检测62mGy γ射线照射新鲜分离的脐血淋巴细胞在不同时间（12h,24h,48h）CD25分子表达和培养上清液的IL－2水平。结果 在一定剂量范围内的低剂量辐射显著促进脐血淋巴细胞增殖和增强NK细胞活性。62mGy γ射线照射后脐血淋巴细胞CD25表达和IL－12水平显著上调，CD25表达和IL－2的水平随时间推移逐步增高。结论 在一定剂量范围内的低剂量辐射能促进淋巴细胞的增殖，活化和成熟，增强NK细胞活性。低剂量辐射对脐血免疫细胞存在兴奋效应。可能加速脐血移植时造血功能和免疫功能的重建，这可能增加移植物抗白血病效应，降低其复发，显示出临床应用前景。     

创伤血清免疫抑制物对淋巴细胞功能的影响

在以往的研究中，笔者发现创伤家兔血清中存在一分子量约９０００的免疫抑制性异常蛋白．在本研究中，进一步观察了该抑制物对脾淋巴细胞功能的影响．实验方法：脾淋巴细胞转化，采用ＣｏｎＡ刺激微量同位素掺入法；ＩＬ－２诱生，采用ＣＴＬＬ－２细胞增殖法；ＩＬ－２Ｒ蛋白表达，采用间接荧光抗体染色，流式细胞计测定；并用核酸杂交法检测了ＩＬ－２及ＩＬ－２ＲｍＲＮＡ转录水平．结果表明，这种创伤血清免疫抑制物可抑制淋巴细胞的增殖母化，降低淋巴细胞合成和表达ＩＬ－２及ＩＬ－２Ｒ，并对ＩＬ－２及ＩＬ－２ＲｍＲＮＡ的转录水平有明显的抑制作用．提示这种异常蛋白对淋巴细胞的抑制作用发生于ｍＲＮＡ转录前水平，可能与细胞对起始信号的识别受阻有关．     

140m氦氧饱和-166m巡回潜水对潜水员免疫功能的影响

目的 调查大深度饱和潜水对潜水员免疫功能的影响。方法 分别采用^3H-胸腺嘧啶核苷掺入法，同位素^3H—TdR掺入法和速率散射比浊法对8名参加140m饱和-166m巡回潜水的潜水员的T淋巴细胞转化、NK细胞活性、IgG、IgA、IgM及补体C3、C4含量进行了检测。结果 T细胞转化试验和NK细胞活性、IgG、IgA、IgM和补体C3、C4水平都在正常值范围之内。结论 在此次大深度饱和潜水中潜水员免疫功能没有受到明显影响。     

补体在缺血再灌注损伤中的作用及机制

补体系统在缺血再灌注时通过多种途径被激活,形成大量的活化片段.这些片段在缺血再灌注损伤中发挥着重要作用,它们通过直接作用和对白细胞与内皮细胞的间接作用造成组织器官损伤.目前抗补体的药物虽较多,但真正用于临床的十分有限.笔者现就缺血再灌注时补体的激活途径,活化补体成分引起损伤的作用机制及防治研究进展综述如下.     

神经病理性疼痛大鼠脊髓背角补体C3 mRNA及蛋白表达的研究

目的 观察神经病理性疼痛(NPP)大鼠脊髓背角补体C3 mRNA及蛋白的表达,探讨补体活化在NPP发病机制中的作用.方法 84只健康雄性SD大鼠随机分为7组:正常对照组、假手术1、3、7天组和慢性坐骨神经压迫损伤(CCI)1、3、7天组(n=12).CCI组大鼠左侧坐骨神经松结扎,假手术组暴露左侧坐骨神经,不做其他处理.分别于建模后1、3、7天测定大鼠热痛阈值和机械痛阈值,并通过RT-PCR、免疫比浊和免疫组化等方法 观察大鼠脊髓背角C3 mRNA及蛋白表达情况.结果 CCI组大鼠坐骨神经结扎后1天即出现明显的机械和热痛过敏,结扎后3天和7天动物处在高水平的痛敏状态.假手术组大鼠未见明显的行为学变化.脊髓背角补体C3 mRNA及蛋白的表达水平,CCI组大鼠在坐骨神经结扎后1、3、7天升高,且激活程度呈上升趋势,而假手术组与正常对照组间无明显差异.结论 NPP大鼠脊髓背角补体C3 mRNA及蛋白呈高表达状态,补体的这种变化可能在NPP的发生发展中发挥作用.     

红细胞膜I型补体受体在高脂血症中的变化

目的:探讨高脂血症中红细胞膜Ⅰ型补体受体(RBC—CR_1)的变化。方法:采用补体致敏酵母多糖,测定高脂血症患者RBC—CR_1的变化。结果:血浆中载脂蛋白B(apoB),甘油三酯(TG),总胆固醇(TC)和红细胞膜(RBC—m)TC,载脂蛋白A(ApoA),ApoA/ApoB升高者RBC—CR_1花环率降低,与对照组比较,差异显著,分别为对照组13.9±2.2％,高脂血症组10.5±2.6％(P<0.01)。结论:高脂血症患者红细胞免疫粘附功能调节降低,脂类代谢失衡造成免疫复合物的堆积,封闭了红细胞膜上CR_1的位点,阻碍了免疫复合物充分粘附在红细胞膜上,使其不能及时清除大量的沉积脂质,促进了动脉粥样硬化形成。     

Ⅱ号氟碳代血液临床应用及对补体影响的观察

我们对29名手术、2名脑梗塞及1名急性乐果重度中毒病人输注Ⅱ号氟碳代血液(FCBS),并观察了对其中20名病人补体系统的影响。31例输后无不良反应,脑梗塞及乐果中毒各1例有较好疗效。CH_(50),C_3及IgG于输后l天内分别降至输前的50%,65.8%和77%,输后3天CH_(30)恢复至输前水平,C_3和IgG分别回升至输前的86.27%(P<0.05)和83.8%(P>O.05)。IgA和IgM输注前后无显著变化。本文结果表明,Ⅱ号FCBS是安全、有效的代血液,具有广泛临床应用的前景。     

补体激活在流感病毒介导的肺部炎性损伤中的作用及眼镜蛇毒因子干预的实验研究

目的：揭示流感病毒介导的小鼠肺部炎性损伤机制,为研发治疗病毒性肺炎的有效药物提供理论和技术依据。方法建立流感PR8感染小鼠动物模型,利用实时荧光定量PCR、ELISA、病理切片等方法检测小鼠肺部炎症因子、补体分子及病理变化;按照50μg／（kg·24 h）的剂量腹腔注射眼镜蛇毒因子（CVF）,监测小鼠体质量、存活率、炎症因子等变化。结果与对照组相比,PR8流感模型组小鼠肺组织中补体调节分子Crry、CD59表达显著下降（P＜0．01）,补体分子C9和补体成分受体C3aR、C5aR表达显著升高（P＜0．01）,血清中促炎因子TNF-α、IL-6、IFN-γ高表达,抗炎因子IL-2低表达（P＜0．05）;经CVF药物干预后,小鼠体质量下降缓慢,存活率升高,肺指数降低（P＜0．05）,抗炎因子IL-2表达明显升高（P＜0．05）,促炎因子IL-6、TNF-α、INF-γ表达显著下降。结论补体激活参与了流感病毒介导的肺部炎性损伤;通过CVF干预,抑制了补体激活,可提高感染小鼠存活率,降低肺指数,延缓病程。     

重组人sCR1蛋白对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨可溶性补体受体1型（sCR1）蛋白对大鼠肢体缺血再灌注（I/R）损伤的保护作用。方法制作大鼠肢体I/R模型;采用解放军153中心医院检验中心制备的重组人sCR1蛋白对大鼠模型进行早期干预,观察0、4、8 h时间点sCR1蛋白干预组与生理氯化钠溶液对照组I/R损伤肌组织细胞形态学、髓过氧化物酶（MPO）、丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）表达水平变化。结果 sCR1蛋白干预组的MDA、MPO、LDH表达水平明显低于对照组,以I/R 4 h组相差最为显著（P〈0.01）。组织细胞形态学变化：sCR1蛋白干预组在相同时间点均较对照组肌组织结构变性明显减轻。结论对大鼠肢体I/R模型进行sCR1蛋白早期干预可明显减轻大鼠后肢骨骼肌I/R损伤。     

脊髓损伤后胶质瘢痕形成中补体的作用

由于外伤性脊髓损伤(SCI)发生率不断增高,后果严重,其致残率与耗费高,常遗留瘫痪等后遗症,给家庭及社会造成严重的负担,因此,加强SCI再生修复研究具有重要的现实意义.大量证据表明,胶质瘢痕是中枢神经再生修复的主要障碍之一,补体与胶质瘢痕的形成关系密切.本文就SCI后补体在胶质瘢痕形成中的作用作一综述.     

高原肺水肿患者体液免疫功能的初步观察

本文对海拔3658米(拉萨)处的14例健康人(对照组)和11例高原肺水肿患者治疗前后的免疫球蛋白、补体C_3、C_4和C-反应性蛋白进行了单向免疫扩散定量测定对比观察。发现高原肺水肿患者免疫球蛋白含量显著高于对照组,补体系统无显著变化,C-反应性蛋白治疗前显著高于治疗后和对照组。提示本病的发生和急性炎症的形成中,体液免疫是一个重要的促发因素。表明该病确为非感染性炎症。     

高温环境对补体活性的影响

本研究采用琼脂糖单向免疫扩散法,测定了34只受热兔血清总补体活性,结果表明,动物进入(38℃)高温仓后1h和3h,血清总补体活性分别为28.62±8.26u/ml,12.32±4.30u/ml,明显低于对照组(40.48±13.03u/ml),本研究旨在观察高温环境不同时间,对动物总补体活性的影响,及对机体健康的影响程度,为在高温环境下工作,及野战军训指战员提供保健指导。     

军用固体运动饮料对机体补体活性影响的实验研究

目的 :探讨军用固体运动饮料对机体补体活性影响程度。方法 :采用琼脂糖平板溶血法 ,进行血清总补体活性测定。结果 :单纯游泳组、高温运动组和高温游泳组总补体活性与对照组比较明显降低 ,P <0 0 1;而药物运动组和药物游泳组总补体活性已接近正常 ,与对照组比较无显著差异 ,P >0 0 5。结论 :提示军用固体运动饮料有明显提高机体补体活性的作用。