左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠骨钙素和降钙素含量的影响

目的：探讨左归丸防治骨质疏松症的机理。方法：以卵巢切除所致的骨质疏松大鼠为模型。采用骨组织形态计量学方法测定胫骨骨小梁体积百分比（TBV%），骨小梁吸收表面百分比（TRS%）和骨小梁形成表面百分比（TFS%），采用放射免疫分析法测定外周血清中雌二醇（E2），骨钙素（BGP）和降钙素（CT）的含量。结果：左归丸能使胫骨TBV%显著增高，使TRS%和TFS%显著降低，大鼠切除卵巢后，在E2含量大幅度降低的同时。BGP含量明显增加，CT含量明显降低，左归丸对E2含量无显著影响，但能使CT含量增加。使BGP含量降低。结论：左归丸能使CT含量增加是其防治骨质疏松症的机理之一。     

补肾益肝方对卵巢切除所致大鼠骨质疏松症的治疗作用

目的:探讨补肾益肝方对骨质疏松症的治疗作用.方法:以卵巢切除所致的骨质疏松大鼠为动物模型,采用骨组织形态计量学方法测定胫骨TBV%、TRS%、TFS%、MAR、OWS和mAR.结果:大鼠切除卵巢后,胫骨TBV%显著降低,TRS%以及TFS%、MAR、OWS和mAR均显著增高,从而表明卵巢切除所造成的是一种骨吸收大于骨形成的高转换型骨质疏松症.给大鼠灌服补肾益肝方后,能使上述情况发生逆转,即能使TBV%显著增高,使TRS%以及TFS%、MAR、OWS和mAR均显著降低.结论:补肾益肝方对骨质疏松症具有良好的治疗作用.     

针刺对去卵巢骨质疏松模型大鼠骨密度、骨形态计量学的影响

目的:观察针刺对去卵巢骨质疏松模型大鼠骨密度、骨计量的影响。方法:雌性SD大鼠50只按随机数字表法分成空白对照组、假手术组(sham)、模型组(OVX)、己烯雌酚组、电针组各10只。行双侧卵巢切除术复制骨质疏松模型,造模饲养13周后开始治疗。分别给予己烯雌酚灌胃,针刺穴取"三阴交"、"足三里"、"肾俞"、"脾俞",连接电针每次15 min,所有治疗均连续5d,休息2 d,共治疗13周。治疗结束后,测量全身骨密度(BMD),处死大鼠取左侧胫骨近端1/3,制作不脱钙骨切片,观察骨小梁体积百分比(TBV%)、骨小梁吸收表面百分比(TRS%)、骨小梁形成表面百分比(TFS%)、类骨质平均宽度(OSW)、骨小梁矿化率(MAR)、骨皮质矿化率(m AR)。结果:与假手术组比较,模型组大鼠BMD显著降低,胫骨TBV%显著降低,TRS%、TFS%、OSW、MAR和m AR均显著升高;与模型组比较电针组大鼠BMD明显增高,胫骨TBV%明显增高,TRS%、TFS%、OSW、MAR和m AR均明显降低。结论:针刺可以提高去卵巢后大鼠的骨密度和大鼠胫骨TVB%,同时降低大鼠胫骨TRS%、TFS%、OSW、MAR和m AR,提示针刺治疗骨质疏松主要是通过对骨吸收的影响发挥作用。     

滋补肾阴方与温补肾阳方对卵巢切除所致骨质疏松大鼠IL-1和IL-6活性的影响

目的 :对比观察滋补肾阴方与温补肾阳方对卵巢切除所致骨质疏松大鼠白细胞介素 1(IL 1)和白细胞介素 6 (IL 6 )活性的影响。方法 :将 5 5只雌性大鼠随机分为正常对照组、假手术组、卵巢切除组、滋阴组和补阳组。于卵巢切除 1周后 ,给大鼠灌胃给药 ,连续给药 3个月。采用骨组织形态计量学方法对大鼠胫骨进行形态计量 ;分别采用小鼠胸腺细胞检测法和IL 6依赖株细胞增殖反应检测法测定IL 1和IL 6的活性。结果 :卵巢切除 3个月后 ,大鼠胫骨骨小梁体积百分比 (TBV % )明显降低 ,骨小梁吸收表面百分比(TRS % )和骨小梁形成表面百分比 (TFS % )皆显著增高。同时 ,IL 1和IL 6活性亦显著增高。给大鼠灌服滋补肾阴方和温补肾阳方后 ,均能使上述指标发生逆转 ,但程度有所不同 ,温补肾阳方的效果要明显优于滋补肾阴方。结论 :温补肾阳方对IL 1、IL 6活性的抑制作用明显强于滋补肾阴方 ,这是其对卵巢切除所致大鼠骨质疏松的预防作用之所以优于滋补肾阴方的机理之一。     

滋阴补肾法对卵巢切除所致骨质疏松大鼠骨髓基质细胞IL-1和成骨细胞IL-6表达的影响

目的:通过观察滋阴补肾法对卵巢切除所致骨质疏松大鼠骨髓基质细胞IL-1和成骨细胞IL-6表达的影响,探讨其治疗骨质疏松症的机理.方法:将大鼠随机分为5组,即空白对照组、假手术组、模型组、雌激素组和补肾组.摘除大鼠双侧卵巢3个月后,灌胃给予左归丸,共给药3个月.采用骨组织形态计量学的方法对大鼠胫骨不脱钙骨切片进行形态计量;采用免疫组化和原位杂交的方法分别检测骨髓基质细胞IL-1和成骨细胞IL-6蛋白和mRNA的表达.结果:与模型组比较,补肾组大鼠胫骨TBV%显著增高,TRS%以及TFS%、MAR、OSW和mAR均明显降低;同时,其骨髓基质细胞IL-1和成骨细胞IL-6蛋白和mRNA的表达皆显著降低.结论:滋阴补肾法能使骨髓基质细胞IL-1和成骨细胞IL-6表达降低,是其能够治疗骨质疏松症的机理之一.     

补肾健脾方对大鼠脾肾两虚型骨质疏松症的治疗作用

目的:深入探讨补肾健脾方对脾肾两虚型大鼠骨质疏松症的治疗作用,并为骨质疏松发生过程中脾肾相关性研究提供实验依据。方法:建立脾肾两虚型大鼠骨质疏松模型,并在此基础上,分别给予阳性对照药、补肾方药、补脾方药及补肾健脾方药进行治疗。给药3个月结束后,采用骨组织形态计量学方法检测反映骨量的指标骨小梁体积百分比(TBV%),反映骨吸收情况的指标骨小梁吸收表面百分比(TRS%)以及反映骨形成情况的指标骨小梁形成表面百分比(TFS%)、类骨质平均宽度(OSW)、骨小梁矿化率(MAR)和骨皮质矿化率(mAR)。结果:与假手术组相比,脾肾两虚模型组大鼠胫骨TBV%显著降低(P0.01),TRS%、TFS%、OSW、MAR和mAR显著增高(P0.01)。与脾肾两虚模型组相比,补肾组、健脾组、补肾健脾组、己烯雌酚组TBV%均显著增高(P0.05,P0.01),TRS%、TFS%、OSW、MAR和mAR均显著降低(P0.01)。与健脾组相比,补肾组及补肾健脾组的TBV%明显增高(P0.05,P0.01),TRS%和TFS%明显降低(P0.05,P0.01);且补肾健脾组对上述指标的逆转较补肾组更为显著(P0.05,P0.01)。结论:健脾法、补肾法和补肾健脾法对脾肾两虚型大鼠骨质疏松症均具有治疗作用,其中补肾健脾法的效果最佳。提示在骨质疏松症的发生过程中,中医的脾肾两脏是密切相关的。     

“肾主骨”机理研究——左归丸对Hepcidin、Fpn1及OPG/RANKL mRNA表达的影响

目的:从Hepcidin对其下游OPG/RANKL通路调节的角度,初步探讨左归丸对骨质疏松症的作用机理,并为进一步揭示"肾主骨"理论的科学内涵提供实验依据。方法:60只雌性SD大鼠按随机数字表法分为空白对照组12只,假手术组12只,造模组36只共3组,造模组大鼠实行双侧卵巢切除术以制作骨质疏松症模型。造模结束后再将造模组大鼠随机分为OVX组、E2组、左归丸组,每组各12只,开始给予相应药物。给药3个月后,检测大鼠胫骨骨量(TBV%)、骨吸收(TRS%)和骨形成(TFS%、OSW、MAR、mAR)情况;采用原位杂交法检测各组大鼠肝组织中Hepcidin mRNA及胫骨骨髓中Fpn1、OPG及RANKL mRNA的表达。结果:OVX组大鼠胫骨TBV%较假手术组显著降低,而TRS%、TFS%、OSW、MAR、mAR较假手术组均有显著增高;与OVX组比较,左归丸组的TBV%显著增高,而TRS%、TFS%、OSW、MAR、mAR水平明显低于OVX组。与假手术组比较,OVX组大鼠肝脏中Hepcidin的mRNA表达强度均明显降低,大鼠胫骨骨髓中Fpn1和RANKL mRNA表达强度则明显增强,OPG mRNA的表达强度明显降低。与OVX组比较,左归丸组的大鼠肝组织中Hepcidin mRNA表达强度明显增高,胫骨骨髓中OPG mRNA表达强度明显增高,Fpn1和RANKL mRNA表达强度则明显下调。结论:左归丸可通过提高Hepcidin水平,增加与受体Fpn1的结合,进而对下游OPG/RANKL信号通路起到一定的调节作用,使OPG表达上调而下调RANKL的表达,从而降低破骨细胞活性,减少骨量丢失,这是其能够治疗骨质疏松症的机理之一。     

骨碎补对卵巢切除所致大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理探讨

目的:探讨骨碎补对卵巢切除所致大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理。方法:将60只雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、阳性对照组和骨碎补组5组,每组12只。摘除大鼠双侧卵巢1个月后,灌胃给予骨碎补水煎剂,给药3个月。采用骨组织形态计量学的方法对大鼠胫骨不脱钙骨切片进行形态计量;采用ELISA方法检测外周血清中IL-1、IL-6、BGP、CT含量。结果:与模型组比较,骨碎补组大鼠胫骨TBV%显著增高,TRS%、TFS%、MAR、mAR显著降低;外周血清中IL-1、IL-6、BGP显著降低,CT显著升高。结论:骨碎补对卵巢切除所致的大鼠骨质疏松症具有一定的治疗作用,具体体现在调节去卵巢所致的骨代谢高转换状态,能降低外周血清中IL-1、IL-6含量以及提高CT水平是其治疗机理之一。     

左归丸对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠血清中E_2、PTH含量的影响

目的:探讨左归丸对糖皮质激素性骨质疏松症的治疗作用及机理。方法:将42只雌性Wistar大鼠随机分为3组:空白对照组12只,模型组15只,左归丸组15只。造模给药8周后,采用骨组织形态计量学方法对不脱钙骨切片进行形态计量,并采用ELISA法检测大鼠外周血血清中E2、PTH的含量。结果:与空白对照组相比,模型组大鼠胫骨TBV%及TFS%显著降低,TRS%显著增高;且大鼠血清中PTH含量显著增高,E2含量则显著降低。而左归丸组大鼠TBV%则显著高于模型组,TFS%亦显著增高,TRS%虽无差异,但有明显降低趋势;且血清中PTH含量显著降低,E2含量较之模型组显著增高。结论:左归丸可使糖皮质激素所致骨质疏松大鼠血清中PTH的水平下调,同时上调E2水平,使其紊乱状态基本恢复正常,这可能是其治疗糖皮质激素所致大鼠骨质疏松症的机理之一。     

补肾健骨方对卵巢切除所致骨质疏松大鼠外周血清中TNF-α的影响

目的:探讨补肾健骨方治疗骨质疏松症的机理.方法:切除大鼠的双侧卵巢造成骨质疏松模型.采用骨组织形态汁量学方法对胫骨不脱钙骨切片进行形态计量;采用放射免疫分析方法测定大鼠外周血清中TNF-α的含量.结果:切除大鼠卵巢后,胫骨TBV%显著降低,而TRS%以及TFS%、MAR和mAR皆显著增高,表明卵巢切除所造成的是一种骨吸收大于骨形成的高转换型骨质疏松模型.而补肾健骨方能使上述指标发生逆转.同时,大鼠外周血清中TNF-α含量显著增高,而该方能使之降低.结论:补肾健骨方对卵巢切除所致的骨质疏松症有明显的治疗作用,而能使TNF-α含量降低是其治疗机理之一.     

左归丸对去卵巢所致大鼠骨质疏松症的治疗作用

目的：探讨左归丸对骨质疏松症的治疗作用。方法：以卵巢切除所致的骨质疏松大鼠为动物模型,采用骨组织形态计量学方法测定胫骨TBV％、TRS％、TFS％、AFS％、MAR、BFR、OWS和mAR。结果：大鼠切除卵巢后,胫骨TBV%显著降低,TRS％以及TFS％、AFS％、MAR、BFR、OWS和mAR均显著提高,从而表明卵巢切除所造成的是一种骨吸收大于骨形成的高转移型骨质疏松症。给大鼠灌服左归丸后,能使上述指标发生逆转。结论：左归丸对去卵巢所致大鼠骨质疏松症具有一定的治疗作用。     

温补肾阳方对去卵巢所致骨质疏松大鼠IL-1和IL-6活性的影响

目的：探讨温补肾阳方防治骨质疏松症的机理。方法：以卵巢切除所致的骨质疏松大鼠为模型,采用骨组织形态计量学方法测定胫骨TBV％、TRS％和TFS％,分别采用小鼠胸腺细胞检测法和依赖株细胞增殖反应检测法测定IL-1和IL-6的活性。结果：温补肾阳方能使胫骨TBV％显著增高,使TRS％和TFS％均显著降低,并能使之降低到与正常大鼠相当的水平。大鼠切除卵巢后,IL-1和IL-6活性显著增高,而温补肾阳方时这两者均有明显的抑制作用。结论：温补肾阳方能够抑制IL-1、IL-6的活性是其防治绝经后骨质疏松症的机理之一。     

温补肾阳方对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用

目的：探讨温补肾阳方对骨质疏松症的治疗作用。方法：以卵巢切除所致的骨质疏松大鼠为动物模型,采用骨组织形态计量学方法测定胫骨TBV％、TRS％、TFS％、AFSN、MAR、BFR、OWS和mAR。结果：大鼠切除卵巢后,胫骨TBV％降低,TRS％以及TFS％、AFS％、MAR、BFR、OWS和mAR均显著增高,从而表明卵巢切除所造成的是一种骨吸收大于骨形成的高转换型骨质疏松症。给大鼠灌服温补肾阳方后,能使上述情况发生逆转,即能使TBV％显著增高,使TRS％以及TFS％、AFS％、MAR、BFR、OWS和mAR均显著降低,并能使之降低到与正常大鼠相当的水平。结论：温补肾阳方对骨质疏松症具有良好的治疗作用。     

骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠骨密度和骨组织形态计量学影响

目的 :以卵巢切除雌性大鼠为模型 ,观察骨碎补总黄酮对骨质疏松模型大鼠的组织形态计量学的影响。方法 :去卵巢制作模型 ,制作不脱钙骨切片及染色 ,采用LeicaQwin图象分析系统进行骨组织形态计量。结果 :对胫骨骨小梁体积百分比 (TBV % )的影响 ,与模型组比较 ,骨碎补总黄酮小剂量组和中剂量组的TBV %明显增高 ;对胫骨骨小梁吸收表面百分比 (TRS % )的影响 ,与模型组比较 ,骨碎补总黄酮小剂量组、中剂量组的TRS %显著降低 ;对胫骨骨小梁形成表面百分比 (TFS % ) ,活性生成表面百分比 (AFS % ) ,骨小梁矿化率 (MAR)和骨小梁骨生成率(BFR)的影响 ,骨碎补总黄酮小剂量组、中剂量组的TFS % ,AFS % ,MAR ,BFR较模型组皆明显降低 ;对胫骨类骨质平均宽度 (OSW)和骨皮质矿化率 (mAR)的影响 ,骨碎补总黄酮中剂量组的OSW和mAR与模型组比较 ,明显降低 ;骨碎补总黄酮小剂量组与之相比 ,有下降的趋势 ,但无统计学意义。结论 :给去卵巢大鼠灌服骨碎补总黄酮 6个月后 ,TBV %明显增高 ,TRS %以及TFS % ,AFS % ,MAR ,BFR ,OSW ,mAR均明显降低 ,表明骨碎补总黄酮对卵巢切除所致的骨质疏松症具有明显的防治作用。     

骨质疏松症脾肾两虚型病证结合动物模型的建立

目的:建立骨质疏松症脾肾两虚型动物模型,为中医药治疗骨质疏松症的研究提供工具。方法:采用雌性大鼠卵巢切除法建立肾虚型骨质疏松模型,在此基础上灌胃给予200%大黄浓煎液以建立脾肾两虚型骨质疏松模型,并采用骨组织形态计量学方法检测大鼠胫骨的骨量、骨形成及骨吸收情况以对建立的模型进行验证。结果:脾虚模型组和脾肾两虚模型组大鼠均毛色不光、食量减少、体重下降、行为迟缓、喜聚堆、弓背蜷缩、稀便等与临床脾虚证相似的证候特征。与假手术组相比,肾虚及脾肾两虚模型组大鼠胫骨TBV%显著降低,TRS%、TFS%、OSW、MAR和mAR显著增高,而脾虚模型组则无明显差异。与肾虚模型组相比,脾肾两虚模型组TBV%的降低,TRS%和TFS%的升高更为明显。结论:去卵巢能够造成大鼠肾虚型骨质疏松症,而单纯给予大黄浓煎剂可造成大鼠脾虚但不能导致骨质疏松症。若将去卵巢和灌胃给予大黄2种方法合用,可造成大鼠脾肾两虚型骨质疏松症,且发病程度较单纯去卵巢明显加重。该模型有明显的脾虚证候特征,且其骨质疏松的病理过程与人类绝经后骨质疏松症相似,能反映脾肾两虚型骨质疏松患者的发病特点,具有可行性。     

绵萆薢对去卵巢大鼠股骨生物力学及骨形态计量学的影响

目的探讨绵萆薢水煎液对雌性大鼠去卵巢后股骨生物力学及骨计量学指标的影响.方法雌性未孕大鼠随机分为假手术组、去卵巢组、绵萆薢高(4 g/kg·d)、中(2 g/kg·d)、低(1 g/kg·d)剂量组,每组均为5只.连续给药12周后,三点弯曲法测量股骨生物力学指标,并分别进行HE染色、Von Kossa染色及四环素荧光标记观察,以骨计量学方法分别测定骨小梁体积百分比TBV(%)、骨小梁类骨质表面TOS(%)、类骨质宽度MOSW(μm)、四环素单标表面MdS(%)、四环素双标表面DMds(%)、双/单标表面比DMds/MdS(%)、骨形成表面百分比TFS(%)、骨吸收表面百分比TRS(%)、骨矿化沉积率MAR(μm/d)、骨矿化延迟时间MLT(d).结果大鼠去卵巢3个月后股骨的最大载荷、挠度、最大应变分别为125.78±15.48(N)、1.87±0.22(mm)和9.34±1.10(%),均明显低于假手术组(P＜0.05,P＜0.01);各剂量绵萆薢可以不同程度地减少其最大载荷、最大应力的降低.去卵巢3个月后大鼠股骨骨体积较假手术组明显降低(P＜0.01),四环素单标表面、双标表面、双单标比及类骨质表面、类骨质宽度、破骨表面、矿化率均明显增加(P＜0.01);绵萆薢中、高剂量组的骨体积均明显高于模型组(P＜0.05),四环素单标表面、双标表面、双/单标比、骨吸收表面、类骨质表面、类骨质宽度、矿化沉积率均明显低于模型组(P＜0.05),骨矿化延迟时间稍短于模型组(P＞0.05).结论绵萆薢在一定程度上可以增加去卵巢大鼠股骨的骨小梁体积,降低骨转换率,改善部分生物力学指标.     

壮骨伸筋胶囊对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗及其作用机制

目的:研究壮骨伸筋胶囊(Zhuanggu Shenjin capsule,ZGSJC)对去卵巢骨质疏松大鼠的治疗作用,探讨ZGSJC治疗绝经后骨质疏松的机制。方法:将去卵巢大鼠随即分为模型组,阳性药结合雌激素组,ZGSJC高、中、低剂量组(生药5.42,2.71,1.36 g·kg-1),另设假手术组,每组12只。实验结束,取右侧胫骨制作不脱钙骨切片,用于骨形态计量学考察;左侧胫骨提取蛋白后用蛋白免疫印迹法测定Ⅰ型胶原蛋白表达。结果:与假手术比,模型组大鼠骨小梁体积百分率(TBV)显著降低(P0.01),骨小梁吸收表面百分率(TRS),骨小梁形成表面百分率(TFS),骨小梁矿化率(MAR),类骨质平均宽度(OSW),骨皮质矿化率(m AR)显著增高(P0.01),Ⅰ型胶原蛋白表达显著降低(P0.01);与模型组比,ZGSJC能够显著抑制TBV%的降低(P0.01),抑制TRS,TFS,MAR,m AR的升高(P0.01,P0.05),提高Ⅰ型胶原蛋白表达(P0.01),对OSW则无明显作用。结论:壮骨伸筋胶囊对卵巢切除所致大鼠骨质疏松具有一定的治疗作用,具体体现在调节去卵巢所致的骨代谢高转换状态,能提高Ⅰ型胶原蛋白表达含量。