血清氯化物酶法测定

目的　建立血清氯化物的α 淀粉酶及其底物 2 氯 4 硝基苯 α D 麦芽三糖苷 (CNP G3)直接测定方法。方法　根据氯离子是α 淀粉酶的激动剂原理建立氯化物测定方法 ,并做方法学评价。结果　测定结果的平均偏差率为 0 4 6 % ;线性范围 5 0～1 5 0mmol/L ;平均回收率为 1 0 0 6 2 % ;批内CV <1 2 4 % ,日间CV <1 86 % ,总CV1 4 5 %～ 2 2 4 % ;加入高浓度的维生素C、葡萄糖、蔗糖、果糖、α 淀粉酶、三酰甘油、血红蛋白、胆红素、钙离子、溴离子、碘离子、氟离子、硫氰酸钾、对硝基酚、叠氮钠和硫酸铵均未显示干扰。与硫氰酸汞比色法 (MTC) ( x±s)比较 :MTC法 (X) :(95 6 6± 1 4 .4 5 )mmol/L ,酶法 (Y) :(95 6 2± 1 4 .93)mmol/L ,t=0 .0 78,P >0 5 ,Y =1 .0 1 6X - 1 .5 87,r=0 .984 ,n =93,P <0 .0 0 1 ;与离子选择电极法 (ISE) ( x±s)比较 :ISE法 (X) :(99.0 0±1 3.1 1 )mmol/L ,本法 (Y) (98.6 1± 1 2 .70 )mmol/L ,t=0 .1 4 0 ,P >0 .5 ,Y =0 .96 2X +3.375 ,r=0 .993,n =4 4 ,P <0 .0 0 1。溶解的工作试剂 (R1、R2 ) 2～ 8℃冷藏至少可以稳定 1 4天。结论　该方法测定成本低 ,准确、精密、线性范围宽 ,稳定性好 ,在抗卤族元素溴、碘及硫氰酸等阴离子的干扰方面 ,显著优于其他方法     

血清氯化物酶法测定

目的建立血清氯化物的α-淀粉酶及其底物2-氯-4-硝基苯-α-D-麦芽三糖苷(CNP-G3)直接测定方法。方法根据氯离子是α-淀粉酶的激动剂原理建立氯化物测定方法,并做方法学评价。结果测定结果的平均偏差率为0.46%;线性范围50~150mmol/L;平均回收率为100.62%;批内CV<1.24%,日间CV<1.86%,总CV1.45%~2.24%;加入高浓度的维生素C、葡萄糖、蔗糖、果糖、α-淀粉酶、三酰甘油、血红蛋白、胆红素、钙离子、溴离子、碘离子、氟离子、硫氰酸钾、对硝基酚、叠氮钠和硫酸铵均未显示干扰。与硫氰酸汞比色法(MTC)(x±s)比较:MTC法(x):(95.66±14.45)mrnol/L,酶法(Y):(95.62±14.93)mmol/L,t=0.078,P>0.5,Y=1.016X-1.587,r=0.984,n=93,P<0.001;与离子选择电极法(ISE)(x±s)比较:ISE法(X):(99.00±13.11)mmol/L,本法(Y)(98.61±12.70)mmol/L,t=0.140,P>0.5,Y=0.962X+3.375,r=0.993,n=44,P<0.001。溶解的工...     

液体试剂与干粉试剂酶法测定血清总二氧化碳的实验对比

目的　评价液体试剂与干粉试剂酶法测定血清总二氧化碳 (TCO2 )的可靠性。方法　依据美国国家临床实验室标准化委员会 (NCCLS)有关文件对 2种试剂测定血清TCO2 进行相关性比较并对其线性、精密度进行评价。结果　液体试剂与干粉试剂相关良好 (r =0 .976 0 ) ,预期相对偏差在 15mmol/L时为 0 .0 7% ,在 2 5mmol/L时为 0 .16 % ,在 5 0mmol/L时为 0 .2 2 %。 2种试剂的线性范围均较宽 ,线性回归方程分别为Y =0 .995 9X - 1.4 2 92和Y =0 .9787X - 0 .5 74 8,r分别为 0 .9998和 0 .9997。 2种试剂的精密度均很好 ,其批内不精密度及总不精密度 (CV)均 <6 .1%。结论　液体试剂与干粉试剂测定血清中的TCO2 的相关性、线性、精密度均很好 ,具有可比性 ,而液体试剂使用更为方便。     

糖化血红蛋白不同测定法的评价

目的　对 3种测定糖化血红蛋白的方法进行方法学评价。方法　用离子交换高效液相层析 (HPLC)法 (X)、微柱亲和层析手工法 (Y1)、胶乳凝集免疫法 (Y2 )测定糖化血红蛋白 ,进行线性范围、回收率、精密度、干扰因素及参考范围的分析。结果　X、Y1、Y2 法的线性范围分别为 2 .8%～ 18%、3.6 %～ 15 .3%、2 .3%～15 .5 %。3种方法的平均回收率均在 95 %～ 10 4 %以内 ,批内、批间平均变异系数 (CV )均 <5 %。 10 .2mmol/L三酰甘油、8.0mmol/L胆固醇、6 84 μmol/L胆红素、10 .1%的HbF对 3种方法均无干扰。Y1法测定结果显著高于X法 (P <0 .0 1) ,回归方程 :Y1=1.15X - 0 .17(r =0 .86 ,P <0 .0 1) ;Y2 法与X法的测定结果差异有显著性(P <0 .0 5 ) ,Y2 法的测定结果偏低 ,回归方程 :Y2 =1.0 4X - 0 .6 9(r =0 .92 ,P <0 .0 1) ;X、Y1、Y2 法的参考范围分别是 4 .3%～ 6 .7%、3.5 %～ 8.3%、3.6 %～ 6 .7%。结论　与HPLC法相比 ,微柱亲和层析手工法测定结果偏高 ,而胶乳凝集免疫法的测定结果偏低。     

8个临床检测系统检测α-淀粉酶与参考测量程序的比对分析

目的观察不同临床检测系统与参考测量程序测定α-淀粉酶(Amy)的可比性。方法根据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP9-A2文件,用8个临床检测系统与参考测量程序分别测定患者血清、国际和国内实验室间比对样本、商用校准品及质控品的Amy活性水平,并进行比对。以卫生部临床检验中心室间质评Amy允许总误差的1/2为标准,评价临床检测系统检测血清Amy结果的临床可接受性。结果 8个临床检测系统(依次编号为Y1～Y8)与参考测量程序(X)测定血清样本的相关性方程分别为Y1=0.934 7X-2.375 0、Y2=0.801 6X+13.901 4、Y3=1.139 7X+13.979 5、Y4=0.829 3X+0.702 4、Y5=0.830 6X+5.826 9、Y6=0.791 0X+12.195 8、Y7=0.728 4X-0.826 5、Y8=0.721 9X+44.318 0。其中,Y1、Y2、Y5、Y6系统检测患者血清Amy结果为临床可接受,而Y4、Y7系统经参考测量程序赋值新鲜血清校准后检测结果为临床可接受。结论用参考测量程序赋值的新鲜血清对临床检测系统进行校准可提高不同检测系统间检测Amy的可比性;建立参考测量程序是保证不同检测系统间Amy检测结果可比性的关键。     

血清a-淀粉酶不同底物测定方法结果对比

目的探讨临床血清标本采用不同底物血清淀粉酶测定结果的差异。方法罗氏AMY试剂（以5亚乙基-G7-PNP作为底物）与某国产AMY试剂（以Ga1—G2-CNP作为底物）,利用日立7170C全自动生化分析仪进行临床标本平行测定试验。结果罗氏AMY试剂（X）与国产AMY试剂（Y）相关性方程为Y=0．9001X-2．0761,R^2=0．9982,差异有统计学意义。结论不同底物血清AMY测定结果存在明显差异,其临床参考区间应根据使用方法不同而分别制定。     

血清结合胆红素酶法测定在自动生化分析仪上的应用

目的　建立酶法测定血清结合胆红素的全自动分析方法 ,并在肝胆疾病患者中临床应用。方法　通过试剂的合理组合 ,分析参数和操作程序的设定 ,建立结合胆红素 (CB)的全自动分析方法 ,同时对总胆红素进行自动化酶法测定。结果　酶法CB测定 :精密度 ,批内n =2 0 , x =6 .4 8μmol/L ,s=0 .11,CV =1.7%和n =2 0 , x =77.9μmol/L ,s=0 .4 2 ,CV =0 .5 3% ;批间n =10 , x =9.4 6 μmol/L ,s=0 .17,CV =1.83%和n =10 , x =5 9.7μmol/L ,s=1.4 3,CV =2 .39% ;线性范围至少可达 340 μmol/L ;比对实验 :与Beckman重氮法试剂 (在BeckmanCX7型生化分析仪上 )比较 ,Y(酶法 ) =0 .75 9X1- 2 .82、r =0 .991,与IagnosticumRT重氮法试剂 (日立 76 0 0 0 2 0型分析仪 )比较 ,Y =0 .84 1X2 - 4 .39、r=0 .96 3。临床研究显示 :与重氮法直接胆红素值相比 ,本法测定CB值能够更灵敏地反映黄疸患者的胆红素分泌功能。结论　建立的CB全自动分析方法具有良好的分析特性 ,可在临床推广应用。     

两种试剂测定血清α-淀粉酶的方法比对和偏倚评估

目的 对两种试剂测定血清α-淀粉酶(AMY)进行方法比对和偏倚评估.方法 按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9-A2文件,以安徽信灵试剂测定血清AMY为比较方法(X),以上海科华试剂为实验方法(Y),检测 40份患者新鲜血清,对结果进行方法比对及偏倚评估.结果 两种试剂测定血清AMY回归方程Y=0.960X-3.535,相关系数(r)=0.999 8,医学决定水平处(Xc)的预期偏倚(Bc)为 7.5 U/L,相对偏倚 7.5%.结论 两种试剂测定血清AMY具有良好的相关性,科华试剂存在负偏倚,但偏倚在临床可接受范围内.     

2-氯-4-硝基苯-α-L-岩藻糖苷测定α-L-岩藻糖苷酶及性能评价

目的 应用2-氯-4-硝基苯-α-L-岩藻糖苷(CNP-AFU)建立检测α-L-岩藻糖苷酶(AFU)活力的动力学法,用于血清中AFU活性测定.方法 基于动力学反应特点,对缓冲液离子强度、pH值、底物浓度等最佳反应条件及各种实验参数进行研究.用该法在AU400全自动生化分析仪上进行相应的性能分析研究.结果 该法最低检出限为2.5 U/L,线性范围可达250 U/L(r=0.999 4),批内CV＜3%,批间CV＜5%,回收率为101.3%.结论 本法灵敏度高,线性、精密度好,结果准确,且操作简便快速,适用于全自动生化分析仪操作.     

酶循环法测定血清总胆汁酸

目的　建立血清总胆汁酸 (TBA)测定的酶循环法。方法　基于用脱氢酶 辅酶体系循环底物的原理 ,建立了本法。结果　本法灵敏度 5 0 μmol/L ,A40 5nm ,1cm>0 .15 ;线性达 180 μmol/L ;批内CV <1.87% ,日间CV <2 .94 % ,总CV <3 .64% ;与普通酶显色法比较 :Y =0 .92 1X - 1.4 2 6,r=0 .9982 ,n =64。胆红素 <85 0 μmol/L、血红蛋白 <5 g/L、抗坏血酸 <2 .84mmol/L、乳酸 <2 4mmol/L、乳酸脱氢酶 <10 0 0 0U/L时 ,对结果无显著干扰。结论　本法灵敏度高 ,线性、精密度好 ,几乎无干扰 ,是一种理想的TBA测定方法。     

SYNCHRON CX9 Systems测定葡萄糖和尿素的2种方法比较

目的　了解SYNCHRONCX9Systems全自动生化分析仪在检测葡萄糖 (Glu)与尿素 (Urea)中电极法与化学法性能。方法　分别对 2种方法测定Glu和Urea进行了精密度试验、线性评价试验及方法对比试验。结果　 (1)精密度 :电极法CV值为 1.4 9%～ 6 .4 1%。化学法CV值为 1.33%～ 3.0 5 %。 (2 )线性 :电极法测定Glu和Urea的线性范围分别为 0～ 2 5 .0mmol/L和 0～ 5 2 .0mmol/L ,而化学法为 0 .5～ 35 .0mmol/L和 1.5～35 .0mmol/L。 (3)方法对比实验 :以化学法为实验方法 (X) ,电极法为比较方法 (Y)。Glu :^Y =1.0 10X -0 .10 6 ;r=0 .996 6。Urea :^Y =0 .96 2X 0 .38,r =0 .9973。结论　SYNCHRONCX9Systems全自动生化分析仪在检测血样本Glu与Urea时 ,2种方法的精密度、线性及方法对比实验均符合临床要求。     

胆固醇脱氢酶测定血清胆固醇方法的建立

目的　评价胆固醇脱氢酶测定法在临床应用的可行性。方法　胆固醇酯在胆固醇酯酶的作用下 ,水解为游离胆固醇 ,后者被胆固醇脱氢酶还原为胆烷 4 烯 3 酮 ,同时 β NAD+ 还原为 β NADH +H+ 。联胺能清除其反应产物胆烷 4 烯 3 酮 ,使反应完全。结果　回收率为 99.9%和 10 0 .1% ,在 1.1～ 2 0 .2 8mmol/L内为线性 ;批内CV为 0 .2 9%～ 0 .39% ,批间CV为 0 .4 2 %～ 0 .4 5 % ;乳酸脱氢酶无影响 ;与化学比色法 (X1)和胆固醇氧化酶法 (X2 )比较 ,回归方程分别为Y =0 .992X1- 0 .0 0 6 ,r =0 .997;Y =0 .989X2 - 0 .0 4 8,r =0 .999。结论　本法结果准确、可靠、易自动化。     

应用高效毛细管电泳技术快速分离尿肌酐

目的　建立 1种快速测定尿中肌酐浓度的毛细管电泳方法。方法　用pH2 .5、0 .1mmol/L磷酸作为电泳缓冲液 ,利用非涂层石英毛细管 48.5cm× 5 0 μm(id) ,采用外标法定量 ,检测波长 191nm。 结果　本法在34 .5～ 8840 μmol/L浓度范围内呈良好的线性 (r =0 .998) ,日内和日间变异系数分别为 3.5 %、6 .2 %,平均回收率 94.7%。与苦味酸法有良好的相关性 (Y =1.0 0 4X 0 .0 0 4,r =0 .998,n =45 )。结论　本法线性范围宽、简单、快速 ,可应用于临床样品的检测。     

慢性肺原性心脏病患者血浆心钠素、C型利尿利钠因子的测定及临床意义

目的观察慢性肺原性心脏病患者血浆心钠素 (ANP)和 C型利尿利钠因子 (CNP)的变化及与 Pa O2 的关系。方法采用放射免疫分析法 ,检测 30例肺心病急性发作期及缓解期患者血浆 ANP和 CNP的水平 ,同时行动脉血气分析 ,并和 2 0例健康体检者对照。结果肺心病患者急性加重期和缓解期血浆 ANP水平 (6 0 9.2 1± 16 6 .6 5 )ng/L,(2 87.0 6± 10 9.0 6 ) ng/L、CNP水平 (73.38± 33.2 9) ng/L,(4 3.18± 9.6 8) ng/L 明显高于对照组 (5 0 .77±2 6 .89) ng/L,(16 .89± 9.16 ) ng/L(P值均 <0 .0 0 1) ;急性加重期血浆 ANP、CNP水平显著高于缓解期 (P值均 <0 .0 0 1) ;肺心病组动脉血氧分压 (Pa O2 )急性加重期 (5 0 .82± 15 .2 3) m m Hg明显低于缓解期 (77.5 7± 10 .0 8) m m Hg(P<0 .0 0 1) ;肺心病组急性加重期和缓解期血浆 ANP、CNP水平与 Pa O2 均呈显著负相关 (r=- 0 .6 0 ,P<0 .0 0 1;r=- 0 .5 7,P<0 .0 1;r=- 0 .48,P<0 .0 1,r=- 0 .79,P<0 .0 0 1) ;肺心病组急性加重期和缓解期血浆 ANP与 CNP水平均呈显著正相关 (r=0 .5 7,P<0 .0 1;r=0 .49,P<0 .0 1)。结论 ANP和 CNP间彼此相互作用 ,在肺心病发生和发展中起重要的作用。     

孕产妇失血性休克肺损伤的影响因素

目的 :探讨孕产妇失血性休克肺损伤的影响因素。方法 :对 18例因失血性休克而死亡的孕产妇的肺组织进行肺损伤程度 (Y)评分 ,并计数肺微血管床的白细胞滞留数 (X1 )。采用多元线性回归和相关方法 (逐步回归法 )分析X1 、出血持续时间 (X2 )、孕期 (X3)、是否输注高渗盐溶液 (X4 )、出血量 (X5)及患者年龄 (X6 )对 Y的影响。结果 :Y与 X1 、X2呈正相关 (相关系数为 0 .86 4和 0 .85 6 ) ,Y与 X3、X4 呈负相关 (相关系数为 - 0 .912和 - 0 .75 2 ) ;建立最优回归方程 Y=5 .839 0 .0 0 8173X1 0 .0 35 2 8X2 - 0 .0 1393X3,方程经方差分析 F等于 6 9.4 90 ,P=0 .0 0 0 <0 .0 5 ,各变量回归系数经 t检验 ,P值均小于 0 .0 5。变量 X4 、X5、X6 被剔除。结论 :白细胞在孕产妇失血性休克肺损伤中发挥重要作用 ,出血持续时间越长 ,孕期越短 ,肺损伤越重。输注高渗盐溶液可减轻肺损伤 ,但其重要性较低。     

偶氮氯膦Ⅰ显色8-羟基喹啉-5-磺酸褪色法测定血清镁

目的建立灵敏度高、选择性好、基本无干扰的血清镁偶氮氯膦Ⅰ显色8-羟基喹啉-5-磺酸褪色测定法。方法在pH9.8的三羟甲基氨基甲烷(Tris)缓冲介质中,偶氮氯膦Ⅰ与镁络合显色,加入8-羟基喹啉-5-磺酸使镁解离,测定吸光度的下降来分析血清镁。对反应条件和方法性能进行系统研究。结果线性范围为0~3.0mmol／L,回收率为98.5％~99.3％,平均98.9％。平均批内变异系数(CV)和批间变异系数(CV)分别为1.10％和1.88％。与甲基麝香草酚蓝比色法(MTB)(X1)比较:Y=1.003X1-0.025,r=0.995;与Calmagite比色法(X2)比较:Y=0.991X2 0.014,r=0.993;胆红素高达420μmol／L,血红蛋白10g／L,钙10.0mmol／L及intralipid高达12g／L时均对该法无显著干扰。结论该法具有简便、快速、基本无干枕和灵敏可靠的优点,适合血清镁的手工测定和自动分析。     

偶氮氯膦Ⅰ测定血清钙

目的建立灵敏度高、选择性好、试剂稳定的血清钙测定方法.方法在pH9.6的2-氨基-2-甲基-1,3-丙二醇(AMP)缓冲介质中,以偶氮氯膦I作显色剂,8-羟基喹啉-5-磺酸为掩蔽剂,分光光度法测定血清钙.对反应条件和方法性能进行系统研究.结果该方法显色络合物最大吸收波长为580 nm,线性范围达5.0 mmol/L,回收率为98.8%～99.1%,平均99.0%.批内变异系数(CV)和批间变异系数(CV)分别为0.95%和1.74%.与邻甲酚酞络合酮(OCPC)(X1)比较:Y=1.003X1-0.036,r=0.996;与偶氮胂Ⅲ(X2)比较:Y=1. 001X2-0.030,r=0.997;与酶速率(X3)法比较:Y=0.999X3-0.045,r=0.998.在血清胆红素高达412 μmol/L,血红蛋白7 g/L,镁2.50 mmol/L及Intralipid高达8 g/L时均对该法无显著干扰.结论该法具有简便、快速、试剂稳定和灵敏可靠的优点,适合血清钙的手工测定和自动分析.     

氨甲喋呤治疗急性胰腺炎的实验研究

目的 :观察氨甲喋呤 (MTX)对急性胰腺炎时炎症性细胞因子和抗炎症细胞因子的调节作用 ,探讨氨甲喋呤治疗急性胰腺炎的作用机制。方法 :实验用雄性 SD大鼠随机分为 3组 :1正常对照组 (6只 ) ;2胰腺炎组 (8只 ) :采用开腹胰管注射质量分数为 5 %的牛磺胆酸钠 (1.0 m l/ kg)制备急性胰腺炎模型 ;3氨甲喋呤组(6只 ) :胰腺炎诱导成功后 0 .5小时静注氨甲喋呤 (1.2 m g/ kg)。制模后 2、6和 2 4小时处死动物 ,分别取血查肿瘤坏死因子α(TNFα)、白介素 1(IL 1)、IL 6、IL 10和转移生长因子β(TGFβ)及胰淀粉酶、胰腺湿重、白细胞计数。结果 :急性胰腺炎时血中炎症细胞因子和抗炎症细胞因子均显著升高 ;使用氨甲喋呤治疗后 ,上述细胞因子均下降 ,其中 TNFα、IL 1和 IL 6在 2、6、2 4小时均明显下降 (P均 <0 .0 5 ) ,IL 10和TGFβ在 2 4小时均下降明显 (P均 <0 .0 5 ) ;制模后 2 4小时大鼠胰腺湿重〔(1.5 3± 0 .13) g〕和血淀粉酶含量〔(1817.2 5± 4 5 9.35 ) U/ L〕均较正常对照组〔(0 .5 3± 0 .0 9) g和 (374 .2 0± 92 .84 ) U/ L〕增高 ;经氨甲喋呤治疗后 2 4小时 ,胰腺湿重和淀粉酶均明显下降〔(0 .88± 0 .13) g和 (76 6 .33± 373.37) U / L ,P均 <0 .0 5〕。结论 :氨甲喋呤可以同时抑制急性胰腺炎时     

血清Gal-3、α1-AGP、SFRP5水平与急性心肌梗死经皮冠状动脉介入治疗术后预后不良的关系

目的 探究血清半乳糖凝集素-3(Gal-3)、α1酸性糖蛋白(α1-AGP)、分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)水平与急性心肌梗死(AMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后预后结局的关系。方法 回顾性选取2019年3月至2022年3月在上海交通大学医学院附属瑞金医院行PCI的AMI患者150例,根据患者术后预后结局不同将患者分为两组：对照组(n=80,未发生主要不良心血管事件,预后较好)和观察组(n=70,发生主要不良心血管事件,患者预后不良)。收集两组患者的一般临床资料,采用酶联免疫吸附试验测定治疗前后患者的血清Gal-3、SFRP5水平,全自动胶乳免疫比浊法检测患者治疗前后的α1-AGP水平,比较两组间各指标差异。采用受试者工作特征(ROC)曲线探究血清Gal-3、α1-AGP、SFRP5水平对AMI患者PCI术后发生预后不良结局预后的预测价值。结果 治疗14 d后,两组Gal-3、SFRP5水平均有所提高,α1-AGP有所降低,治疗后,观察组Gal-3、α1-AGP水平分别为(8.65±1.23)ng/mL、(152.20±10.10)mg/mL,均高于对照组[(7.89±...     

2-(4羟基偶氮苯)苯甲酸测定血清清蛋白方法的研究

目的利用2-(4羟基偶氮苯)苯甲酸(HABA)为反应底物测定血清清蛋白。方法采用终点法测定,并进行一系列方法学评价实验。结果线性可至70g/L,全自动分析批内CV=1.1%,批间CV=2.2%,平均回收率100.6%,参考值35.76～55.82g/L,用BCG法(Y)与HABA法(X)测定50份标本,进行比较,r=0.993,Y=0.894X 4.30。结论该法具有简便、快速,特异性强,标本用量少,干扰性小等优点。