高致病性禽流感H5N1病毒研究进展

1997年8月发现首例人禽流感病例以来,不断有人禽流感病例发生,截至2007年3月1日,WHO报道的经实验室确证的H5N1禽流感感染者共277例,死亡167例,死亡率超过50％。目前WHO对禽流感的预警是3级,即是一种新的流感亚型,已经在人类中引起严重疾病,但还没有在人类中持续传播流行。本文就目前H5N1禽流感病毒来源,跨越物种传播的机制,致病力决定因素及人间传播能力等几个关键的基础问题研究进展进行综述。     

高致病性禽流感H5N1病毒研究进展

1997年8月发现首例人禽流感病例以来,不断有人禽流感病例发生,截至2007年3月1日,WHO报道的经实验室确证的H5N1禽流感感染者共277例,死亡167例,死亡率超过50%。目前WHO对禽流感的预警是3级,即是一种新的流感亚型,已经在人类中引起严重疾病,但还没有在人类中持续传播流行。本文就目前H5N1禽流感病毒来源,跨越物种传播的机制,致病力决定因素及人间传播能力等几个关键的基础问题研究进展进行综述。     

加强监测是应对流感大流行的基础

高致病性禽流感病毒H5N1自1997年发生18人感染6人死亡疫情以来,一直受到国际社会的高度关注,特别是自2003年以来高致病禽流感病毒H5N1动物疫情在亚洲已成地方性流行,并且已经蔓延到欧洲和非洲.人感染病例以及发生人感染病例的国家和地区不断扩大,2003年底以来,截止2006年3月15日,全球新发人禽流感（H5N1）病例数已上升至176例,其中死亡97例.我国自2005年10月第一例禽流感病毒H5N1感染病例确诊以来一共有15例,其中10例死亡.高致病性禽流感病毒H5N1目前不仅对禽类带来巨大威胁,严重影响国家的经济发展,而且对人类健康也带来巨大的威胁,会不会由H5N1禽流感病毒导致一次流感大流行已引起全球的高度关注.流感大流行的发生一般应包括以下几个条件：（1）一种新的流感病毒亚型感染人或一种已经消失很长时间的旧亚型的重现;（2）人群普遍缺乏免疫力;（3）具有一定的发病率和病死率;（4）能够在人群广泛传播.目前H5N1病毒可以说具备了前3个条件,到目前为止还没有具备人传人的能力,一旦病毒发生变异具备第4条就有可能导致流感大流行,如何应对流感大流行已得到各国政府和各种国际组织的高度重视.流感大流行的应对涉及各个方面,其中包括疫苗、药物、检测技术以及医疗救治和宣传教育等各个方面,而对禽流感病毒的监测是各种应对措施的基础.……     

广东省2例城市型人感染高致病性禽流感（H5N1）病例的流行病学调查

目的通过对2例城市人禽流感病例的流行病学调查、分析，探讨无直接病死禽暴露情况下的可能感染来源，为进一步防控禽流感提供科学依据。方法采用现场流行病学、血清学调查的方法；荧光定量PCR、ELISA、RT—PCR和应急监测等方法进行调查、诊断。结果2例感染高致病性禽流感病毒（H5NI）确诊病例未发现有明确病死禽接触史，但发病前到过甚至多次到过农贸市场；密切接触者中没有发生不明原因肺炎病例，未发现人一人传播证据。结论2例人感染高致病性禽流感病例均属城市型感染个案，非人传人病例，感染来源可能与农贸市场环境有关。     

聚焦中国人用禽流感疫苗研制

今年秋冬以来，禽流感疫情在全球再度爆发，造成大量家禽被扑杀，多人因感染病毒而死亡。截至目前，我国已有5个省份发生了禽流感疫情，防控形势相当严峻。     

北京市1例人感染H9N2禽流感病例的流行病学调查与分析

目的 分析北京市人感染H7N9禽流感疫情强化监测中发现的1例人感染H9N2禽流感病例流行病学调查情况,为今后科学防控人感染H9N2禽流感疫情提供参考.方法 采用现场流行病学和实验室检测相结合的方法,收集病例流行病学资料,采集并检测病例、暴露环境和密切接触者等标本,分析流行病学特征和可能的感染来源.结果 病例发病第3日和第7日咽拭子标本检测均为H9N2禽流感病毒核酸阳性.病例发病前10天内无禽类接触史,但病例平时活动有暴露于H9N2禽流感病毒污染环境的可能.密切接触者在医学观察期内均未出现流感样症状.结论 该病例为北京市首例成人感染H9N2禽流感确诊病例,同时也是北京市第二例H9N2禽流感确诊病例.医疗机构加强流感样病例监测是及时发现人感染H9N2禽流感病例的重要手段.     

人禽流感酶联免疫诊断方法的建立及其初步应用

目的建立人禽流感H5抗体的酶联免疫检测方法（ELISA）。方法用ELISA法检测疑似高致病性禽流感患者及正常人群血清标本中H5IgG抗体。结果23例疑似高致病性禽流感患者血清样品中有4例H5IsG抗体阳性，阳性率为17．40％，与血凝抑制试验（HI）和微量中和试验（NI）相比较，三者符和率为100％。234例正常人群血清H5 IgG抗体检测均为阴性。结论建立的ELISA方法可用于高致病性人禽流感的血清样品初步筛查。     

高致病性禽流感研究进展

禽流感（Avian influenza,AI or bird flu）是禽流行性感冒的简称,它是指由禽流感病毒引起的一种动物传染病,常发生在禽,有时也发生在低等哺乳类动物,至今在人仅有偶发病例。禽流感病毒（Avian influenza Virus，AIV），根据其对鸡致病性的不同分为高致病性、中致病性和低，非致病性的，而不是对人而言。高致病性的为H5和H7亚型病毒中一些毒株，中致病性的主要指H9N2和H6N8亚型毒株。其他的毒株均为低，非致病性的。     

人禽流感研究现状

人禽流行性感冒(人禽流感)(avian-human influenza)是由禽甲型流感病毒中某些亚型的毒株引起的急性呼吸道传染病。禽流感(avian influenza，AI)这个名称在我国可能已家喻户晓。然而，过去一段时间曾把它称之为鸡瘟(fowl plague)，因它在禽中所表现出的症状为全身系统中毒症状或急性呼吸窘迫综合征，与人流感症状相差甚远。鸡瘟于1878年首次报道于意大利，1901年证实其病原为滤过性病原体，1955年才证实其病原为甲型流感病毒的一员。     

湖北省首例人感染H5N6禽流感病例流行病学调查

目的 对湖北省首例人感染H5N6禽流感病例的流行病学资料进行分析,探讨病例发现过程、调查处理措施、实验室检测方法,为防控人感染H5N6禽流感疫情提供依据.方法 采用描述性流行病学方法,分析湖北省首例人感染H5N6禽流感病例诊治过程、密切接触者信息,开展现场流行病学调查,并采集病例、密切接触者、活禽市场外环境标本进行实验室检测分析.结果 患者2016年4月9日发病,体温40℃,有活禽市场暴露史.发病早期采集的下呼吸道标本(痰液、气管分泌液)为H5N6禽流感病毒核酸阳性,而上呼吸道标本H5N6禽流感病毒核酸检测均为阴性.患者无外出史和H5N6禽流感病例接触史.患者经两个月的治疗痊愈出院.密切接触者58人均未出现发热和呼吸道感染症状.采集病例经常路过的两家活禽市场和一家土鸡专卖店外环境标本共36份,其中检出H5N6禽流感病毒核酸1 1份,阳性率为30.56％.结论 该病例为湖北省首例人感染H5N6禽流感病例,属本地感染的散发病例,未出现人传人.传播途径可能为:活禽市场通过禽-环境-人的途径传播.在病例诊断中,下呼吸道标本(尤其是痰液、气管分泌液)具有重要意义.另外,尽早应用奥司他韦对病例的成功救治起到了重要的作用.     

人感染H7N9禽流感病毒的流行特征分析

目的分析人感染H7N9禽流感病毒的流行特征,并对人感染H7N9禽流感与外界环境导致发病之间的关联进一步了 解遥方法分析自然因素尧社会因素对人感染H7N9病毒流行特征的特点尧影响因素遥结果收集我科室68 例人感染H7N9禽流感 病毒病例,根据地区分布有3 例死亡曰根据年龄比较,逸60 岁的有45 例,臆60 岁的有23 例曰根据性别院男性38 例,女性30 例曰 根据职业院离退休人员有22 例,农民有26 例,其他职业有20 例曰根据接触禽类史情况院确定与禽类接触史的有14 例,剩余为不 确定是否有接触史的有54 例曰根据按月份院3 月21 例,4 月47 例曰比较发病至入院隔离时间院有33 例入院时间明确,当天入院 患者有11 例,最长在12 d后入院曰比较发病时间和检测时间院在进行H7N9检测中,有21 例是在4 d内,47 例在9 d内遥结论 人感染H7N9禽流感病毒的流行特征经过分析后,未能明确传染和流行特征遥因此,需要对疫情加强监测,对自然尧社会因素的 作用进行深入研究     

1997—1998年在香港从人群中分离出禽流感病毒A（H5N1）的最新情况

在香港，到1998年1月6日为止，已明确16例确诊和3例疑似禽流感病毒A（H5N1）感染的病例。确诊病例为分离到流感A（H5N1）病毒或是通过对流感病毒A（H5N1）进行中和试验发生血清学反应的病例。疑似病例为有类流感样疾病和初步的实验室证据的病例。本文报道了香港卫生部门和美国疾病控制中心对流感A（H5N1）进行流行病学调查和实验室研究的结果。首发病例是一个3岁小孩，已于1997年5月死于呼吸衰竭。其余的15个确诊病例当中有5例在11月发病，其余10例在12月发病，3例疑似病例则均在12月份发病。确诊病例的年龄分布介于1～60岁之间（平均1…     

禽流感与公共卫生

近年来，H5N1亚型高致病性禽流感在东南亚多个国家爆发，给养禽业带来沉重打击。H5N1亚型禽流感病毒还在越南、泰国、印尼、柬 埔寨和中国引起160多人感染，导致半数以上感染者死亡。禽流感这一重大禽类疫病，目前已成为公共卫生面临的最大威胁。本文对流感及流感病毒、H5N1亚型禽流感病毒跨越禽-哺乳动物种间屏障的分子机制进行了综述，并对今后禽流感的防治提出了建议。     

中国禽流感疫情呈五大特点发挥中医药防控作用

卫生部副部长兼国家中医药管理局局长佘靖11月14日说，应针对中国辽宁等七省区今年发生的禽流感疫情特点，组织精干的中医药专家队伍，加强中医药防控人感染高致病性禽流感的临床研究和人员培训，发挥中医药防控人感染高致病性禽流感的作用。     

广东地区人禽流感H5N1毒株的核蛋白基因变异和进化

目的通过对人禽流感H5N1毒株核蛋白（NP）基因序列的变异分析，揭示毒株NP基因变异与进化。方法检测广东地区人禽流感H5N1毒株NP基因核苷酸序列，同时检索全球人禽流感H5N1毒株NP基因序列，采用DNAStar5．0软件对检索的人禽流感H5N1毒株NP基因核苷酸序列进行比对和分析；并结合流行病学资料对变异毒株进行进化速度分析。结果1997--2006年45株毒株胛基因核苷酸序列同源性分成3类，1997--1998年毒株为第1类，2004--2005年毒株为第2类，2003年毒株和2006年毒株为第3类；NP基因35个氨基酸位点全部置换，占7．03％（35／498）；2003—2006年H5N1毒株通过氨基酸第430位（1〈430T）位点的置换，增加一个糖基化位点（NGT430-432；GD—01—06毒株第370位发生N3加S变异；增加一个糖基化位点（NES368.370）。同义变异中，NP基因Ks（同义变异速度）值为2．03×10^-5～2．55×10^-5核苷酸／d，Ka（错义变异速度）值为1．58×10^-6～3．10×10^-6核苷酸／d，检验发现进化无明显选择性压力存在。结论1997--1998年毒株、2004--2005年毒株、2003年毒株和2006年毒株NP基因核苷酸有差异；2003--2006年人禽流感H5N1毒株NP基因增加一个糖蛋白位点、GD-01—06毒株再增加一个糖蛋白位点可能改变毒株抗原性。人禽流感H5N1毒株在自然界变异频繁，随着其自然进化，H5N1毒株具有人．人传播能力的概率较大。     

北京市首例人感染H9N2禽流感病例的流行病学调查

目的 分析2016年12月北京市朝阳区确诊的l例人感染H9N2禽流感病例流行病学特征.方法 访谈病例发病前后的相关知情人,调查病例发病经过和可能感染来源.采集病例、密切接触者及环境标本,应用实时荧光定量PCR(real-timePCR)方法,检测甲型流感病毒及H9N2禽流感病毒特异的核酸片段.对病例咽拭子标本和l件阳性环境标本中的H9N2禽流感病毒血凝素(Hemagglutinin,HA)基因进行序列测定和分析.结果 病例表现为轻症流感样病例症状,发病前15天曾有活禽市场暴露史.该市场环境标本中H9N2禽流感病毒阳性率为18.2％ (2/11).病例咽拭子标本与市场环境标本中病毒的HA基因高度同源,氨基酸相似度为100％,在进化关系上同属于欧亚系的Y280分支.4名密切接触者在医学观察期内未出现过发热、咳嗽等呼吸道症状.结论 病例感染来源与活禽市场环境暴露有关.加强流感监测以及活禽市场的管理对于防控人感染禽流感疫情具有重要意义.     

人感染H7N9禽流感疫情形势与应对策略

自2013年3月31日上海市和安徽省发现人感染H7N9禽流感确诊病例后,多省市陆续报告新增病例,疫情波及区域不断扩大.我国反应迅速,多部门合作,形成联防联控工作机制,采取了一系列有效的措施[1],如关闭活禽市场,加强高危人群和禽类的病原学监测等,从而遏制了疫情进一步扩大[2].本文就目前全国人感染H7N9禽流感疫情形势以及应对策略进行了评述.     

成批烧伤病人的救治体会

我院自2000年5月至2006年12月救治8批60例烧伤病人，取得了较好的效果。 一、临床资料 本组病例60例，其中，男性52例，女性8例，年龄18—54岁，烧伤面积10％-97％。烧伤深度Ⅱ-Ⅲ度，重度与特重烧伤28例，合并不同程度的吸人性损伤29例，合并骨折5例，颅脑外伤3例。[第一段]     

抗人禽流感病毒H5N1人源化单链抗体噬菌体文库的构建和筛选

目的 利用抗人禽流感病毒H5N1 IgG抗体阳性的人禽流感康复患者外周血淋巴细胞,构建人源化Fv段单链抗体(seFv)噬菌体文库,并筛选与禽流感病毒相关蛋白有结合活性的scFv抗体文库.方法 提取人外周血淋巴细胞总RNA,逆转录成cDNA,以其为模板,利用家族特异性IgG基因的引物,扩增重链和轻链的可变区基因,并用合成的连接子将轻链和重链基因连接成单链抗体片段后,重组到噬菌粒载体pCANTAB5E中.将重组噬菌粒载体电转化大肠杆菌TG1,酶切和PCR鉴定抗体库的重组率,通过测定噬菌体抗体库的滴度计算抗体库的库容,用特异性禽流感病毒相关蛋白筛选表达的单链抗体.结果 构建了源于人禽流感康复患者血清的scFv抗体文库,库容为3.75×104;筛选出与禽流感病毒相关蛋白有结合活性的scFv抗体文库.结论 成功构建了抗人禽流感病毒H5N1的人源scFv噬菌体抗体库,并筛选出特异性结合人禽流感病毒相关蛋白的单链抗体,为进一步制备快速检测试剂和治疗研究提供了基础数据.     

采用反向遗传学技术构建H5亚型禽流感疫苗株

目的构建重组H5亚型禽流感疫苗株。方法采用RT-PCR技术，分别扩增鹅源高产禽流感病毒A／Goose／Dalian／3／01（H9N2）的6条内部基因片段、高致病性禽流感病毒株A／Goose／HLJ／QFY／04（H5N1）的血凝素（HA）基因和N3亚型参考株A／Duck／Germany／1215／73（H2N3）的神经氨酸酶（NA）基因，并对HA1和HA2连接肽处的5个碱性氨基酸（R-R-R-K-K）的编码序列进行缺失与修饰，然后分别构建这8个基因的转录与表达载体，将其共转染293T／MDCK混合培养细胞单层，对拯救出的重组病毒进行表型分析。结果利用反向遗传学技术拯救出了全部基因都源于禽流感病毒的疫苗株，其基因序列符合设计要求包括删除HA基因的毒力相关序列，疫苗株的表型为H5N3。结论构建成功重组禽流感疫苗株rH5N3，为制备H5亚型禽流感疫苗打下了坚实的基础。