辣根过氧化物酶—抗辣根过氧化物酶复合物(PAP)制备及质量鉴定

非标记抗体酶免疫试验是由 sternberger 等首先提出的一种较新的免疫实验方法。它以某一抗体为中间介质,应用免疫反应的方式将酶结合到受检标本中相应的抗原物质上。由于该试验的各个步骤均以抗原、抗体特异性结合的方式进行,具有高度的选择性,并能最大限度地保存辣根过氧化物酶(HRP)的活性,与标记法酶联免疫吸附试验相比,具有特异性强、敏感性高、背     

用辣根过氧化物酶方法研究大白鼠咬肌的神经元

本文用 HRP 酶标法对支配大白鼠咬肌的神经元部位进行了研究。结果如下:(1)大白鼠咬肌感觉神经元位于同侧三叉神经中脑核全长,有集中于桥脑部的趋势。大白鼠三叉神经半月节分为大、小两个节,咬肌感觉神经元位于同侧半月小节内。(2)大白鼠咬肌运动神经元位于同侧三叉神经运动核全长,比较集中于头侧份和中间份。在横的方向上,主要分布于外侧份、中间份。在背腹方向上,分布于背腹各部——在三叉神经运动核尾侧平面位于腹侧;在中间平面背腹均有;在头侧平面集中于背侧。没有发现支配咬肌不同部位的神经元,在三叉神经运动核咬肌运动区内有局部定位关系。(s)支配大白鼠咬肌的感觉神经元(中脑孩)较运动神经元更快更深地被HRP 标记。     

用辣根过氧化物酶追溯周围神经联系法

<正> 辣根过氧化物酶(Herseradish peroxidase)最早由Richard(1960)等人用来研究肾近端小管的早期吸收情况,将HRP注入鼠静脉内,离隔一定时间进行观察。70年代Kristensen是将HRP用于神经系统联系的创始,他的第一部分工作即是将     

用于慢性实验的玻璃微电极推进器(摘要)

记录正常清醒动物单个神经细胞的电位活动是一项新的技术,对阐明动物行为的某些本质是一种好的方法,近年来已被一些研究者运用于对动物行为的研究。但是此法在记录时要微电极穿过硬脑膜(颅骨事先开孔),故多采用尖端强度较大的金属微电极(如钨、铂、铱等)但这种电极茎杆较粗,对脑组织损害较大,尤其在做深部结构记录时不理想。采用玻璃微电极作记录较为理想,但它的尖端强度不够,不能刺穿硬脑膜。国外少数报导(如Rokogax Woody等)在做实验时需用立体定位仪将动物头部固定,在解剖显微镜的     

用辣根过氧化物酶研究神经联系的方法及实验体会

辣根法开始用于周围神经,至1972年Lavail等首次用于中枢神经系。利用逆向轴浆运输可得到中枢某些神经核团的传入联系,对神经解剖学的研究起了很大的推动作用。此法具有操作较简便、易于观察及所需时间较短等优点,在国外已广泛地被应用于中枢神经系统的研究。近两年来此方法在国内正在开展。在此简要地介绍此法以     

单克隆抗体的辣根过氧化物酶标记

<正> 单克隆抗体(下称单抗)由于仅有唯一特异抗原结合位点,其标记较多克隆抗体困难,尤其应用IgM单抗则更为困难。作者用戊二醛二步法,过碘酸钠氧化法。和戊二醛-过碘酸钠氧化法标记IgM单抗均未成功。而用改良过碘酸钠氧化法得到满意效果。     

辣根过氧化物酶结合物的质量鉴定

辣根过氧化物酶(HRP)和抗HBs(山羊IgG)按戊二醛二步法、苯醌法和改良过碘酸盐法交联反应分别制成酶结合物,用琼脂扩散、二氨基联苯胺染色法对酶结合物定性,并测定其HRP浓度和活性、羊IgG浓度和抗HBs免疫活性,阐明标记率(A403nm/A280nm)的含义,通过ELISA检测表明标记率可作为评价酶结合物质量的指标,且其计算简便。     

损伤的植物性神经在体外对辣根过氧化物酶(HRP)的摄取

作者研究的目的是为了观察交感神经的损伤部位在体外摄取 HRP 的机制,选用280—350克豚鼠,用5%丝线结扎肠系膜下神经节远端2.5厘米处的腹下神经,取下标本保留在用25mg HRP(SIGMAⅡ)溶于一滴氧化组织培养基内,置于37℃水浴中24小时,整个孵育期通以95%氧/5%/二氧化     

麦芽凝集素辣根过氧化物酶、类霍乱原结合辣根过氧化物酶及辣根过氧化物酶—四甲基联苯胺法成色脑切片的保存时间探讨

目前,辣根过氧化物酶(HRP)法已被推广和改进,在HRP束路追踪技术中,四甲基联苯胺(TMB)因其灵敏度高又无致癌作用而被广泛采用.一般认为TMB反应产物易受高pH、酒精、温度、紫外线照射等因素影响而退色.TMB呈色时加钼酸铵再稳定,有利于切片的保存.能保存多久.其消退程度如何,采用麦芽凝集素辣根过氧化物酶(WGA-HRP)、类霍乱原结合辣根过氧化物酶(CB-HRP)及HRP(Sigma VI)法制作的切片,保存时间上有无明显差别是本文研究的目的所在.     

辣根过氧化物酶标记抗体的定量研究

本文制备了用NaIO_4(盐析)法、NaIO_4(G-200)和戊二醛(GA)二步法(盐析)标记的三种HRPO标记抗体。免疫化学鉴定结果,NaIO_4法比GA二步法酶标抗体的E/P比值高,酶的标记率也高。用抗核抗体鼠肝冷冻切片和流乙病毒感染鼠脑石蜡切片进行棋盘滴定结果,NaIO_4(盐析)法的棋盘滴度也较GA(盐析)二步法高。因此认为NaIO_4法优于GA二步法。 以不同量的酶对抗体制备了5种酶标抗体。免疫化学鉴定结果,标抗的酶量、酶活力和E/P比值随着酶加入量的增多而增高。抗核抗体和流乙抗体的棋盘滴度与E/P比值呈一致关系。E/P比值为2.67者可获得抗核抗体(2560)和流乙抗体(1280)的高棋盘滴度。     

应用改良的辣根过氧化物酶与单克隆抗体结合的方法提高ELISA的敏感性(文摘)

辣根过氧化物酶(HRPO)是非同位素免疫测定和免疫组化分析最常用的酶之一。应用偏过碘酸钠法可最有效地进行HRPO与抗体的化学结合,但由于该法中加入HRPO与IgG的克分子比为4和HRPO的强氧化作用,可导致特异性抗体的活性下降,并形成大的凝集物,从而产生明显的非特异性     

介绍一种较敏感的辣根过氧化物酶(HRP)蓝色反应法

Adler首先介绍Benzidine作为过氧化物酶反应中的成色剂。Straus(1964)通过研究大白鼠肾脏中的HRP分布的实验,观察了影响Benzidine蓝色反应及其反应产物稳定性的因素。他认为弱酸和低温是形成蓝色反应产物的主要条件。由于蓝色反应产物不稳定,他建议     

在面神经干引入辣根过氧化物酶四种方法的比较

自Kristensson开创应用辣根过氧化物酶(HRP)于神经系统的研究中并首先应用于周围神经系统以来,HRP在周围神经的应用,大多为将HRP注射于神经元的终末部位。例如Kristensson将HRP注射于舌肌;Brownson注射于交感神经节;李继硕注射于膀胱;山田、陶之理注射于胃等。在周围神经干中直接给以HRP的报告并不多见。     

辣根过氧化物酶标记的纯视细胞层移植

目的　利用HRP标记Wistar鼠的视细胞 ,观察移植的纯视细胞在受体的分布。　方法　 30 %的HRP标记Wistar鼠视细胞 ,经外路途径移入皇家外科学院鼠 (RoyalCollegeofSurgeonRat,RCS)的视网膜下腔 ,术后 2周取RCS鼠眼做冰冻切片 ,组织化学染色法染色 ,普通光学显微镜下观察。　结果　在视细胞移植术后 2周 ,移植视细胞存活 ,HRP标记的Wistar鼠纯视细胞层在RCS鼠视网膜内呈褐色 ,排列平覆。　结论　在RCS鼠视网膜内可以观察到移植的HRP标记的Wistar鼠纯视细胞     

辣根过氧化物酶逆行追踪风池穴的神经径路

目的：研究风池穴的神经径路。方法：针灸组大鼠对风池穴行透刺法后,将HRP从一侧风池穴注入对侧风池穴;对照组不行针灸,直接将HRP从一侧风池穴注入对侧风池穴。于不同时间点,对脑、脊髓及神经节行连续冰冻切片。结果：针灸后第1天,HRP阳性神经元出现于双侧第1～4颈神经节及其对应的颈髓前角、面神经核内侧部和副面神经核。随着存活时间的延长,阳性神经元密度减少,颜色变淡。对照组上述部位的HRP阳性神经元的面密度等较针灸组小。结论：风池穴可能通过面神经的耳后支、第2～3颈神经前支分别与面神经核群及副面神经核、颈髓和延髓前角神经元相联系而发挥其功能。     

辣根皮过氧化物酶同功酶的分离和鉴定

辣根过氧化物酶商品制剂中同功酶的种类和相对含量常因制备方法而异。近来关于过氧化物酶结构功能方面的研究均以单一的同功酶为材料。用以测试的过氧化物酶制剂可能因其中同功酶的种类和相对含量的差异而影响测试结果。     

内关穴与心脏相应性的形态学研究——辣根过氧化物酶(HRP)的研究

<正> 用HRP法探索内关穴与心脏之间的联系途径,认为可能是以下神经途径:内关穴区主要传入纤维是正中神经,传入纤维的胞体位于颈5～8脊神经节(似乎短于正中神经传入纤维的节段颈5～胸1);心脏的传入纤维是双侧性的,经两个途径传入中枢,传入纤维的胞体位于胸1～5脊神经节。脊神经节细胞的中央突入脊髓终止于脊髓相应节     

家兔膀胱传入神经的节段性分布——辣根过氧化物酶(HRP)法研究

HRP 轴突逆行传送的方法用于周围神经研究的历史还不到10年。1971～1973年 Kristen-sson 和 Olsson 等将之用于舌下神经的研究;1975年 Ellison 和 Clark 着眼于自主神经的周围部分对 HRP 摄取状态的研究,将1%的 HRP 溶液分别注入于海猽的前眼房、肾上腺髓质、胃和回肠壁、心壁及颈上节等处,追踪节前神经元的所在,并在迷走神经结状节和胸上段的脊神经节内发现了标记细胞,为用低浓度 HRP 溶液追踪内脏传入途径开创了先例。后来,用 HRP 法进行周围神经的研究逐渐增多,但总的看来,对传出神经研究的较多,而对传入神经的研究较少。内脏的传入冲动随自主神经系向中枢传送的现象,早在 Langley 时代即已被人们所认识。但长期以来由于形态学的方法学的限制,有些问题,例如:每个器官随交感或副交感的     

皮层内短轴突神经元的细胞内染色辣根过氧化物酶(HRP)微电泳法

为了对同一个神经元从电生理、神经组织学两个不同的侧面进行研究,以往学者曾用dye—procion yellow通过微电泳,使单个神经元染色。其结果除了胞体充满着染料外,被染了色的轴突最长也不超过2毫米,而且只在一根轴突上看到有一侧枝。可是,在用Golgi法处理的同样部位的神经组织,却可以看到从轴突上是发出许多侧枝的。因此用dye-pr(?)ion     

用辣根过氧化物酶(HRP)逆行追踪法,确定大白鼠传导咬肌运动感觉的神经元的位置

三叉神经中脑核的功能及其与周围的联系至今还是一个没有完全解决的问题。现在大家公认中脑核成自一级的感觉神经元,它们的周围突随伴三叉神经的感觉根出脑干,主要经三叉神经的下颌神经进入咀嚼肌群,传导咀嚼肌的运动感觉,所以它是本体感受性的。但是Pfaffamann和corbin等用钝性压迫同侧的牙和硬腭,在中脑根的尾侧半内亦激起了