17β-雌二醇对子宫内膜癌细胞磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号传导通路的激活作用

目的　探讨 17β 雌二醇 (E2 )对子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞磷脂酰肌醇 3激酶 /蛋白激酶B(PI 3K/PKB)信号传导通路的激活作用以及PI 3K抑制剂对其的影响。方法　应用免疫印迹杂交技术 ,检测一定浓度 (1× 10 -6mol/L) 17β E2 作用于Ishikawa细胞不同时间 (分别为 0、5、15、30、6 0、12 0min)后和不同浓度 (分别为 0、1× 10 -10 、1× 10 -8、1× 10 -6、1× 10 -4mol/L) 17β E2 作用Ishikawa细胞一定时间 (30min)后PKB的活化情况 [以磷酸化PKB和总PKB比值 (p PKB/PKB)表示 ],以及用同法检测PI 3K抑制剂LY2 94 0 0 2对 17β E2 活化PKB的影响。结果　 1× 10 -6mol/L 17β E2 作用于Ishikawa细胞 15min时 ,PKB的活化水平 (0 5 33± 0 0 2 9)已明显高于对照 (0 36 1± 0 0 2 9,P <0 0 5 ) ,30min时最明显 (0 6 6 6± 0 0 2 1,P <0 0 0 1) ,而且持续至少达 12 0min时 ;随着 17β E2 浓度 (分别为 1× 10 -10 、1×10 -8、1× 10 -6、1× 10 -4mol/L)的增加 ,PKB的活化水平逐渐增高 ,与对照比较 ,差异有显著性 (除 1×10 -10 mol/L外 ,P值分别为 >0 0 5、<0 0 5、<0 0 5、<0 0 0 1)。随着LY2 94 0 0 2作用浓度 (分别为 0 1、10、5 0、10 0 μmol/L)的增加 ,17β E2 作用Ishikawa细胞后P     

磷脂酰肌醇3激酶／蛋白激酶B信号通路与宫颈癌

人乳头状瘤病毒（HPV）是宫颈癌最主要的危险因素，但不是独立致癌因子。人乳头状瘤病毒（HPV）感染后可能引起信号转导途径异常而促使宫颈癌发生。磷脂酰肌醇3激酶／蛋白激酶B（PI3K／PKB）信号通路转导促增殖与抗凋亡信号，通过多方面的作用机制参与肿瘤发生发展。该通路各组分表达水平及活性的异常改变也见于宫颈癌，可能和HPV致瘤机理及宫颈癌发生机制有关。PI3K抑制剂在体内外都可阻断PI3K／PKB通路，抑制增殖诱导凋亡，与传统抗肿瘤方案联合有增效作用。     

磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路与宫颈癌

人乳头状瘤病毒(HPV)是宫颈癌最主要的危险因素,但不是独立致癌因子.人乳头状瘤病毒(HPV)感染后可能引起信号转导途径异常而促使宫颈癌发生.磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/PKB)信号通路转导促增殖与抗凋亡信号,通过多方面的作用机制参与肿瘤发生发展.该通路各组分表达水平及活性的异常改变也见于宫颈癌,可能和HPV致瘤机理及宫颈癌发生机制有关.PI3K抑制剂在体内外都可阻断PI3K/PKB通路,抑制增殖诱导凋亡,与传统抗肿瘤方案联合有增效作用.     

磷脂酰肌醇3激酶／蛋白激酶B信号传导与卵巢癌

研究发现磷脂酰肌醇3激酶／蛋白激酶B信号传导通路异常活化在卵巢癌的发生、发展、凋亡、血管生成、转移及耐药等方面起着重要的作用，机制包括调节细胞周期促进细胞增殖，作用于凋亡相关因子抑制肿瘤细胞凋亡并导致化学耐药发生，影响血管生长因子及基质金属蛋白酶生成促进肿瘤侵袭转移等。已证明以该通路为靶点的抑制剂如LY294002、雷帕霉素等，抑制卵巢癌细胞增殖并增强其对化疗药物敏感性，在卵巢癌治疗中具有广阔的应用前景。     

磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路与肿瘤化疗

化疗在肿瘤治疗中占据着不可替代的重要地位,如何预防或克服耐药已成为临床研究的热点和难点问题。随着对信号转导与肿瘤关系的深入研究,从信号转导角度探索肿瘤耐药机制,认识到针对信号转导异常环节进行干预是探索逆转耐药的新思路等,对提高肿瘤化疗敏感性有重要意义。以肿瘤分子生物学为基础,综述磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路在肿瘤化疗中可能的调节作用,有利于寻求新的治疗模式和提高治疗增益比。     

磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号传导与卵巢癌

研究发现磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号传导通路异常活化在卵巢癌的发生、发展、凋亡、血管生成、转移及耐药等方面起着重要的作用,机制包括调节细胞周期促进细胞增殖,作用于凋亡相关因子抑制肿瘤细胞凋亡并导致化学耐药发生,影响血管生长因子及基质金属蛋白酶生成促进肿瘤侵袭转移等.已证明以该通路为靶点的抑制剂如LY294002、雷帕霉素等,抑制卵巢癌细胞增殖并增强其对化疗药物敏感性,在卵巢癌治疗中具有广阔的应用前景.     

磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路与肿瘤化疗

化疗在肿瘤治疗中占据着不可替代的重要地位,如何预防或克服耐药已成为临床研究的热点和难点问题.随着对信号转导与肿瘤关系的深入研究,从信号转导角度探索肿瘤耐药机制,认识到针对信号转导异常环节进行干预是探索逆转耐药的新思路等,对提高肿瘤化疗敏感性有重要意义.以肿瘤分子生物学为基础,综述磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路在肿瘤化疗中可能的调节作用,有利于寻求新的治疗模式和提高治疗增益比.     

磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号传导通路与妇科恶性肿瘤关系的研究进展

信号传导通路在肿瘤发生过程中的异常改变及其导致细胞生长失控的机制是近几年来研究的热点。磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinase，PI-3K)／蛋白激酶B(protein kinase B，PKB)信号传导通路的异常改变，常出现在人类的一些恶性肿瘤组织中，且与肿瘤的进展密切相关。本就PKB的结构特征、PKB的活化以及PI-3K／PKB信号传导通路与妇科恶性肿瘤的关系作一综述。     

磷脂酰肌醇3激酶通路在胰岛素调节子宫内膜癌细胞增殖凋亡中的作用

目的 探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)信号通路在胰岛素调节子宫内膜癌细胞生长中的作用.方法 2006年5月至2006年10月于中国医学科学院血液病学研究所临床药物室完成试验,即将子宫内膜癌Ishikawa3-H-12细胞进行无血清饥饿培养,分成不同处理组,即空白对照组、胰岛素刺激组(Ins组)、PI3K抑制剂--LY294002预处理后再以胰岛素刺激组(LY Ins组).以四甲基偶氮唑蓝(MTT)试验和流式细胞仪观察细胞增殖和凋亡情况.不同处理组分别培养24h、48h和72h,观察各组570nm波长吸光度(OD570nm).结果 Ins组细胞OD570nm值高于空白对照组(P＜0.01);LY Ins组细胞OD570nm低于Ins组(P＜0.01),LY294002拮抗了胰岛素对内膜癌细胞的增殖促进作用.流式细胞仪检测凋亡发现Ins组细胞凋亡率低于空白对照组[(2.02±0.39)%对(14.45±2.70)%,P＜0.01];LY Ins组细胞凋亡率高于Ins组[(18.73±2.11)%对(2.02±0.39)%,P＜0.01].结论 PI3K信号通路在胰岛素引起的促内膜癌细胞增殖、抑制凋亡中起重要作用,胰岛素对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡的调节作用是PI3K依赖性的.     

稳定转染PTEN基因后对卵巢上皮性癌细胞磷酸酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号传导通路的影响

目的 研究外源性PTEN基因稳定转染卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞后,对卵巢癌细胞磷酸酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号传导通路的影响.方法 构建表达野生型PTEN基因的重组载体pcDNA3.1A-PTEN质粒,并转染卵巢癌细胞株HO-8910细胞(重组载体组),以转染空载体pcDNA3.1A质粒(空载体组)作为阴性对照,以未转染质粒(空白组)作为空白对照.采用逆转录(RT)PCR技术检测3组细胞中PTEN、Akt1、Akt2、PI3K mRNA的表达水平,蛋白印迹法检测3组细胞中PTEN蛋白的表达强度,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测3组细胞的生长情况[以吸光度(A)值表示,A值越大表示生长速度越快].结果 表达野生型PTEN基因的重组载体pcDNA3.1A-PTEN质粒,经测序证实构建成功.重组载体组细胞中PTEN mRNA的表达水平为(17372±23)copy/ml,高于空载体、空白组[分别为(39±1)、(78±4)copy/ml],差异均有统计学意义(P＜0.05);重组载体组细胞中PTEN蛋白的表达强度也明显高于空载体、空白组.重组载体组细胞中Akt1、Akt2、PI3KmRNA的表达水平分别为(28±2)、(7±1)、(61±2)copy/ml,低于空载体[分别为(115±5)、(18±2)、(84±2)copy/ml]、空白组[分别为(77±4)、(17±2)、(1349±7)copy/m1],差异均有统计学意义(P＜0.05).培养第5天,重组载体组细胞生长速度(A值)为90 158±47,低于空载体、空白组(分别为148 251±65、250 115±62),差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 转染表达野生型PTEN基因的重组载体能有效提高卵巢癌HO-8910细胞中PTEN mRNA和蛋白的表达,抑制细胞生长,并通过显著降低Akt1、Akt2、PI3K mRNA的表达水平,明显抑制PI3K/Akt信号传导通路.     

抑制PI3K/Akt信号通路拮抗胰岛素诱导的子宫内膜癌细胞增殖

目的:研究抑制磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/Akt信号通路对胰岛素诱导的子宫内膜癌细胞增殖的拮抗作用。方法:将无血清饥饿的子宫内膜癌Ishikawa3-H-12细胞分为空白对照组、10-6mol/L胰岛素单独刺激组以及不同剂量PI3K抑制剂-LY294002预处理后再用胰岛素刺激组。Western blot检测各组Akt磷酸化(p-Akt)水平,MTT试验观察细胞增殖情况。结果:胰岛素可引起内膜癌细胞Akt活化,刺激15min后p-Akt/Akt比值显著高于空白对照组(68.68%vs 26.21%,P<0.001)。LY294002以浓度依赖方式抑制胰岛素引起的Akt磷酸化。MTT试验显示,在药物处理24h,48h和72h 3个时间点,不同组别570nm吸光度值(OD570nm)均有显著差异(F=156.329,700.973,812.224,均P<0.001)。胰岛素组OD570nm值均高于同时间点的空白对照组(均P<0.001),胰岛素促内膜癌细胞增殖作用于48h时最为显著。LY294002可抑制胰岛素的增殖促进作用,此抑制作用具有浓度依赖性。不同剂量LY294002抑制作用的时间依赖性不同,48h时小剂量(0.1、1、10μmol/L)的抑制作用最为显著,72h时胰岛素重新呈现一定的促增殖作用;而50μmol/L LY294002可以持久抑制胰岛素的促增殖作用。结论:PI3K抑制剂LY294002可以通过抑制Akt磷酸化阻断胰岛素信号传导,拮抗后者促子宫内膜癌细胞增殖的作用。     

细胞信号转导信使磷脂酰肌醇3-激酶和卵巢癌的关系

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)是一种与细胞信号转导有关的脂类第二信使.在人类肿瘤中,已发现PI3K级联信号途径的各成员具有基因结构,蛋白质表达和激酶活性等的异常改变.PI3K在卵巢癌中有异常表达,为肿瘤早期诊断、开发新的抗肿瘤药物和寻找新的基因治疗靶点提供了新的思路.     

肝脏组织磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路参与降低胎儿生长受限大鼠的胰岛素敏感性

目的 探讨肝脏组织磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinosital 3-kinase/protein kinase B,PI3-K/AKT)信号通路在胎儿生长受限(fetal growth restriction,FGR)大鼠胰岛素敏感性降低中的作用. 方法 母鼠受孕后第1天始随机分为对照组和低蛋白组,各10只.低蛋白组孕鼠采用低蛋白饮食法(粗蛋白含量为8.00％)建立FGR仔鼠模型.测定对照组和低蛋白组FGR仔鼠生后3、7、14、30、60及90 d(每组每个时间点取雄性仔鼠8只)空腹血浆葡萄糖和血清胰岛素,计算胰岛素抵抗指数及胰岛素敏感指数.实时荧光定量聚合酶链反应技术检测雄性仔鼠生后7、14、30、60及90 d肝脏组织胰岛素受体底物1、2和葡萄糖转运蛋白4 mRNA表达水平,采用Western印迹技术测定胰岛素受体底物1、PI3-K(p110β亚基)、AKT、磷酸化AKT蛋白表达水平.采用简单相关及多重线性回归分析肝脏组织中PI3-K/AKT信号通路关键分子表达改变与胰岛素敏感性变化间的关系. 结果 (1)低蛋白组新生仔鼠平均出生体重为(4.92±0.36)g,低于对照组的(6.43±0.59)g,差异有统计学意义(t=14.73,P＜0.05).低蛋白组仔鼠中FGR发生率为88.2％(97/110),其中雄性仔鼠FGR发生率为94.1％ (48/51).(2)生后60 d时FGR仔鼠空腹血浆葡萄糖开始高于对照组,直至90 d.FGR仔鼠空腹血清胰岛素和胰岛素抵抗指数30 d时显著高于对照组,持续至90 d.FGR仔鼠胰岛素敏感指数自30 d始即显著低于对照组,直至90 d,差异均有统计学意义(P均＜0.05).(3)与对照组相比,FGR仔鼠7d时胰岛素受体底物1、2 mRNA表达均显著降低(0.45±0.02与0.68±0.03,t=16.633,P＜0.05;0.34±0.10与0.70±0.19,t=4.864,P＜0.05),并持续至生后90 d(0.48±0.03与0.59±0.05,t=5.237,P＜0.05;0.49±0.20与0.70±0.11,t=2.253,P＜0.05);胰岛素受体底物1、PI3-K及磷酸化AKT蛋白表达自14d时出现降低(0.22±0.05与0.52±0.11,t=7.024,P＜0.05;0.46±0.03与0.97±0.08,t=17.508,P＜0.05;0.62±0.10与0.89±0.08,t=6.100,P＜0.05),持续至生后90 d(1.11±0.08与1.32±0.14,t=3.714,P＜0.05;0.63±0.07与1.00±0.19,t=5.206,P＜0.05;0.28±0.03与0.45±0.10,t=4.880,P＜0.05).(4)FGR仔鼠磷酸化AKT蛋白表达量与胰岛素敏感指数呈正相关(r=0.704,P＜0.05);磷酸化AKT蛋白表达量分别与空腹血浆葡萄糖、空腹血清胰岛素和胰岛素抵抗指数变化呈负相关(r分别为-0.609、-0.561和-0.577,P均＜0.05). 结论 FGR仔鼠肝脏组织中PI3-K/AKT信号通路中某些关键分子表达发生变化,可能参与了胰岛素抵抗的发生.     

基质细胞衍生因子1α对子宫内膜癌细胞信号传导通路的激活作用

目的探讨基质细胞衍生因子1α（SDF-1α）对子宫内膜癌细胞系HEC-1A和Ishikawa磷脂酰肌醇3激酶，蛋白激酶B(PI-3K／Akt)及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号传导通路的激活作用。方法应用蛋白免疫印迹杂交技术，检测SDF-1α作用于HEC-1A和Ishikawa细胞后Akt及ERK的活化情况。结果20ng/ml SDF-1α作用于HEC-1A细胞15min时，ERK1/2活化最明显，且持续至少达2h，随着SDF-1α浓度的增加，ERK1/2活化逐渐增强；SDF-1α作用HEC-1A细胞后Akt的活化水平无明显改变。20ng/ml SDF-1α作用于Ishikawa细胞15min时，Akt活化最明显，且持续至少达2h，随着SDF-1α浓度的增加，Akt活化逐渐增强；SDF-1α作用Ishikawa细胞后ERK1/2的活化水平无明显改变。结论SDF-1α作用于雌激素受体阴性的HEC-1A细胞和雌激素受体阳性Ishikawa细胞，激活的信号传导通路不同。     

子宫内膜癌组织中磷酸化蛋白激酶B及Bim蛋白表达的研究

3-羧基磷脂酰肌醇激酶(PI3K)／蛋白激酶B(PKB)信号转导途径是调控细胞凋亡的重要途径，PKB是PI3K的下游因子，PKB磷酸化激活后，可通过对多种凋亡相关因子的调节来抑制细胞凋亡。Bim为bcl-2蛋白家族中仅含有BH3区域的成员之一。有研究表明，活化的PKB可通过作用BH3区域，进而抑制bcl-2家族相关蛋白的促凋亡活性。     

子痫前期PI3K/Akt通路相关非编码RNA的研究进展

子痫前期（pre-eclampsia）是妊娠期常见并发症之一,是导致孕产妇和围生儿死亡的重要原因。子痫前期的发生与胎盘滋养细胞功能障碍密切相关。胎盘滋养细胞侵袭不全和子宫螺旋动脉重铸异常是子痫前期发生的主要病理机制。磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol-3 kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)通路对胎盘滋养细胞的增殖、存活、凋亡、迁移和侵袭等过程具有重要调节作用。非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)中的微小RNA、长链非编码RNA和环状RNA具有重要的多水平基因调控功能,在PI3K/Akt通路中发挥重要调节作用,影响胎盘滋养细胞的功能,与子痫前期的发生、发展相关。综述近年子痫前期PI3K/Akt通路相关ncRNA的研究进展,为探索和发现子痫前期发病机制中的关键分子提供参考。     

细胞信号转导信使磷脂酰肌醇3—激酶和卵巢癌的关系

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)是一种与细胞信号转导有关的脂类第二信使。在人类肿瘤中，已发现PI3K级联信号途径的各成员具有基因结构，蛋白质表达和激酶活性等的异常改变。PI3K在卵巢癌中有异常表达，为肿瘤早期诊断、开发新的抗肿瘤药物和寻找新的基因治疗靶点提供了新的思路。     

NF-κB信号通路与子宫内膜癌关系的研究进展

NF-κB信号通路是一个复杂的网络,该通路的异常激活可导致肿瘤相关基因的异常表达,在肿瘤的发生、发展中起着抑制细胞凋亡、促进细胞增殖、促进肿瘤转移的重要作用。目前研究表明,该信号通路与子宫内膜癌细胞凋亡、增殖、侵袭、转移、血管生成及治疗有关。本文就NF-κB信号通路与子宫内膜癌关系的研究进展做一综述。     

PI3K/PKB信号传导通路与子宫内膜癌研究进展

磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB)信号通路是许多生长因子、细胞因子等的下游信号传导通路,通过抑制细胞凋亡,促进细胞生长、增殖、迁移、侵袭和肿瘤血管生成而与肿瘤发生发展密切相关.许多与子宫内膜癌相关的因素通过PI3K/PKB通路参与肿瘤发生发展,这为子宫内膜癌病因学研究及寻找新的治疗靶点提供了新思路.     

PI3K/PKB信号传导通路与子宫内膜癌研究进展

磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB)信号通路是许多生长因子、细胞因子等的下游信号传导通路,通过抑制细胞凋亡,促进细胞生长、增殖、迁移、侵袭和肿瘤血管生成而与肿瘤发生发展密切相关。许多与子宫内膜癌相关的因素通过PI3K/PKB通路参与肿瘤发生发展,这为子宫内膜癌病因学研究及寻找新的治疗靶点提供了新思路。