氢氧化钙对牙髓碱性磷酸酶活性的作用

氢氧化钙可促进牙髓、牙本质修复,但作用机制不清楚。本文观察了氢氧化钙、氯化钙和氢氧化钡对提取的人牙髓组织ALP的体外水解作用和对牙髓细胞ALP活性的作用,结果显示,氢氧化钙可激活ALP的体外水解和牙髓细胞ALP活性,氯化钙对两种反应均表现抑制作用,氢氧化钡激活ALP的体外水解作用,但抑制牙髓细胞ALP活性。     

大鼠牙本质基质蛋白1对人牙髓细胞增殖和ALP活性的影响

目的 :探讨大鼠牙本质基质蛋白 1(DMP1)对体外培养的人牙髓细胞增殖和ALP活性的影响。方法 :利用MTT法研究牙髓细胞的细胞增殖情况 ,碱性磷酸酶检测试剂盒检测牙髓细胞内ALP活性。结果 :DMP1在细胞培养 3d和 5d时 ,5 μg/mL组可促进人牙髓细胞增殖 (P <0 .0 5 )。细胞培养 3d时 ,仅5 μg/mL组可促进人牙髓细胞ALP活性 (P <0 .0 5 ) ;培养 5d时 1μg/mL和 5 μg/mL均可促进人牙髓细胞ALP活性 (P <0 .0 5 ) ;培养 7d时促进作用进一步加强 (P <0 .0 5 )。结论 :DMP1在一定浓度下可促进牙髓细胞的增殖 ;DMP1对牙髓细胞ALP活性的促进作用呈浓度依赖性 ,高浓度DMP1可以促进人牙髓细胞ALP活性 ,随着时间的延长 ,促进ALP活性的作用也增强。     

三氧化矿物凝聚体对人乳牙牙髓细胞增殖和分化影响的实验研究

目的 对比三氧化矿物凝聚体(mineral trioxide aggregate,MTA)和氢氧化钙对人乳牙牙髓细胞增殖和分化的影响,为MTA应用于乳牙活髓保存治疗提供实验依据.方法 培养原代人乳牙牙髓细胞,采用噻唑蓝比色法检测乳牙牙髓细胞生长增殖的变化;von Kossa染色观察牙髓细胞钙结节形成情况,并计数分析;使用实时荧光定量聚合酶链反应法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)基因的表达.结果 氢氧化钙组牙髓细胞增殖率显著低于对照组和MTA组(F=1792.301,P<0.01),最大增殖率为89.7%;MTA组牙髓细胞增殖率显著高于氢氧化钙组和对照组(F=1835.065,P<0.01),最大增殖率为118.4%.氢氧化钙组和MTA组牙髓细胞von Kossa染色均呈阳性,两组间钙结节计数分析差异无统计学意义(P>0.05).三组间ALP基因表达量差异有统计学意义(F=349.651,P<0.01),氢氧化钙组显著低于对照组和MTA组,MTA组显著高于氢氧化钙组和对照组;三组间DSPP基因表达量差异也有统计学意义(F=1653.001,P<0.01),氢氧化钙组显著低于对照组和MTA组,MTA组显著高于氢氧化钙组和对照组.结论 从促进乳牙牙髓细胞的增殖和分化来看,MTA比氢氧化钙更适合作为乳牙的盖髓剂.     

三氧化矿物凝聚体对乳、恒牙牙髓细胞增殖和分化影响的比较

目的 对比三氧化矿物凝聚体（MTA）和氢氧化钙对人乳、恒牙牙髓细胞增殖和分化的影响。方法 采用甲基噻唑基四唑（MTT）法检测牙髓细胞生长增殖变化;实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测碱性磷酸酶（ALP）、牙本质涎磷蛋白（DSPP）、骨保护因子（OPG）、核因子κB受体活化因子配体（RANKL）基因的表达。结果 氢氧化钙组乳、恒牙牙髓细胞增殖均显著低于对照组（P<0.01）,MTA组乳、恒牙牙髓细胞增殖均高于对照组（P<0.01）。实时荧光定量PCR检测结果显示,乳牙氢氧化钙组ALP、DSPP和OPG的表达显著低于对照组（P<0.01）,MTA组上述因子的表达显著高于对照组（P<0.01）;氢氧化钙组RANKL的表达显著高于对照组（P< 0.01）,MTA组RANKL的表达与对照组差异无统计学意义（P>0.05）。恒牙牙髓细胞氢氧化钙组ALP和DSPP的表达与对照组相比无显著差异（P>0.05）,MTA组ALP和DSPP的表达显著增加（P<0.01）;氢氧化钙组和MTA组OPG、RANKL的表达与对照组无显著差异（P>0.05）。结论 MTA比氢氧化钙更适合做乳牙和恒牙的盖髓剂,其优势在乳牙可能更为明显。     

应用流式细胞技术分析Ca(OH)_2及HA对牙髓细胞周期的影响

目的　采用流式细胞技术分析盖髓剂氢氧化钙 [Ca(OH2 ) ]及羟基磷灰石 (HA)对牙髓细胞周期的影响。方法　将香猪恒牙牙髓机械暴露后 ,行氢氧化钙和羟基磷灰石盖髓术 ,分别于术后 2 ,4,8,12周拔牙 ,采取牙髓 ,胶原酶消化后流式细胞仪检测。将组方图存入磁盘进行计算机分析处理 ,得到G0 /G1,G2 ,S及M期细胞百分比。结果　氢氧化钙和羟基磷灰石均能使牙髓细胞的G0 /G1期细胞减少 ,S期细胞积累。结论　提示氢氧化钙及羟基磷灰石可能有促进G0 /G1期细胞进入S期 ,增加DNA合成的作用。     

氢氧化钙糊剂清洁根管壁的扫描电镜研究

目的 :观察氢氧化钙糊剂对根管壁的清洁作用。方法 :取离体人牙的根 1/ 3,劈开后分别浸入 5 2 .5g/L次氯酸钠液中 5、15s和氢氧化钙水糊剂中 1、3、7d ,超声清洗后扫描电镜观察。结果 :次氯酸钠 5s和氢氧化钙 1d组牙髓未完全溶解 ,氢氧化钙 3d时尚有少量牙髓组织、前期牙本质未溶解。氢氧化钙 7d和次氯酸钠处理 15s时 ,牙髓彻底溶解 ,根管壁平整 ,牙本质小管口完全暴露。结论 :氢氧化钙具有较好的根管壁清洁作用     

大鼠肝/骨/肾型碱性磷酸酶部分cDNA的定序克隆

碱性磷酸酶(ALP)是较为肯定的参与钙化的酶类。牙髓组织合有ALP,性质与肝/骨/肾型(L/B/K)ALP相似。采用基因工程技术,研究细胞中ALP基因表达情况,有助于从分子水平上了解药物的作用机理。由于从细胞全基因组文库中获得ALP基因的工程量大,耗时耗力,因此,我们以体外合成的大鼠L/B/KALPcDNA的高保守性的ALP活性区的2段核酸序列为引物,采用反转录PCR和定序克隆获得大鼠L/B/KALP部分cDNA的分子克隆。     

碱性成纤维细胞生长因子对体外培养人牙髓细胞迁移和碱性磷酸酶活性的影响

目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对体外培养人牙髓细胞迁移和碱性磷酸酶(ALP)活性的影响。方法:以组织块培养法体外获得人牙髓细胞,采用Transwell培养法和ALP活性检测法,观察10 ng/mL bFGF对体外培养人牙髓细胞迁移和分化能力的影响。结果:bFGF可显著诱导体外培养牙髓细胞迁移,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),并能抑制细胞ALP活性(P<0.05),随着培养时间延长,该抑制作用更加显著(P<0.05)。结论:bFGF能促进牙髓细胞迁移,抑制ALP活性,在牙本质牙髓复合体修复中可能发挥重要作用。     

内毒素刺激单核细胞培养上清对人牙髓细胞碱性磷酸酶活性的影响

目的:观察经内毒素脂多糖(LPS)刺激的单核细胞培养上清对人牙髓细胞碱性磷酸酶(ALP)活性的影响,探讨单核细胞介导下LPS和CD14在人牙髓细胞分化中的作用.方法:采用经具核梭杆菌LPS刺激的单核细胞培养上清作用于体外培养的人牙髓细胞,通过OD值测定,观察单核细胞培养上清对人牙髓成纤维细胞碱性磷酸酶(ALP)活性的影响.结果:LPS直接刺激人牙髓细胞,牙髓细胞ALP活性明显上升,但LPS刺激的单核细胞培养上清对人牙髓细胞ALP活性有明显的抑制作用.抗CD14抗体在有血清的条件下作用于单核细胞,可以阻断单核细胞介导下LPS对牙髓细胞ALP活性的抑制.结论:单核细胞介导的LPS对牙髓细胞ALP活性有抑制作用,其机制可能依赖CD14.     

可见光固化氢氧化钙直接盖髓的临床观察

可见光固化氢氧化钙直接盖髓的临床观察广东省口腔医院（５１０２６０）张雄南海市人民医院黄庆荣氢氧化钙在口腔科被用于盖髓、保髓以来，大量的研究结果证明［１、２］：氢氧化钙具有一定的抗菌性，并可促进牙髓组织修复和牙本质桥的形成。长期以来，国内临床上用于盖髓...     

纤维蛋白粘接剂盖髓的动物实验研究

目的：观察纤维蛋白粘接剂（ＦＳ）对人工暴露的牙髓组织愈合的影响。方法：采用ＦＳ行狗牙直接盖髓术,常规制备牙－颌骨联合切片,光学显微镜观察牙髓创面的愈合及牙本质的修复。结果：ＦＳ盖髓后牙髓无出血,炎性反应轻。氢氧化钙盖髓后牙髓出血多,炎性反应较重。ＦＳ组术后４２ｄ出现骨样牙本质桥修复,氢氧化钙组术后２８ｄ出现骨样牙本质桥修复,术后６３ｄ,ＦＳ组６例中４例有牙本质桥形成,氢氧化钙组６例均有牙本质桥形成。结论：ＦＳ虽无牙本质诱导活性但因其良好的保护及促进牙髓组织创面愈合能力仍不失为一种较为理想的盖髓剂。     

儿童恒牙露髓处牙髓修复的组织形态学特征

目的：观察牙髓修复各时期的组织形态学特征，再次验证儿童恒牙牙髓的修复潜力。方法：采用因正畸需要拔除的２４个儿童恒牙，牙髓暴露后用氢氧化钙制剂直接盖髓，术后进行组织学评价。结果：当用氢氧化钙覆盖牙髓暴露面时出现表层组织坏死和轻度炎症，而后出现防御反应和修复，形成牙本质桥。其硬组织屏障由三层结构组成；表层无定形碎片，中间纤维性牙本质，下层骨样和管样牙本质，牙本质桥下的牙髓无炎症。结论：形成牙本质桥是牙髓暴露后用氢氧化钙制剂盖髓后牙髓修复的特征。     

IGF-1通过PI3K/AKT信号通路促进牙髓细胞增殖及碱性磷酸酶活性的研究

目的:研究IGF-1对牙髓细胞增殖和碱性磷酸酶(ALP)活性及PI3K/AKT信号通路的影响。方法:采用酶消化法分离培养原代人牙髓细胞。Western blot检测牙髓组织中IGF-1蛋白表达,不同浓度的IGF-1处理牙髓细胞7d,CCK8法检测细胞增殖。用IGF-1(100 μg/L)及LY294002(10 μmol/L)分别单独或同时处理牙髓细胞,培养7 d后MTT实验检测细胞增殖;在培养第3、5、7、14天时检测细胞ALP 活性;在培养第7天时用Western blot检测AKT和p-AKT蛋白表达情况。结果:IGF-1在牙髓炎组织中低表达, IGF-1在20~100 μg/L浓度范围内从作用第3天开始能够显著促进牙髓细胞增殖(P<0.05或P<0.01),且具有剂量和时间依赖效应。LY294002能够抑制牙髓细胞的增殖和碱性磷酸酶活性,具有时间依赖性。IGF-1能促进p-AKT蛋白表达,而 LY294002能减低IGF-1对p-AKT蛋白表达的促进作用。结论:IGF-1可以促进牙髓细胞增殖和碱性磷酸酶活性,且具有浓度和时间依赖性,作用机制可能与PI3K/AKT信号通路相关。[关键词] 牙髓细胞 细胞增殖 碱性磷酸酶     

不同氢氧化钙制剂对牙髓卟啉单胞菌的杀菌效果

目的:比较Endocal、Calxyl、国产氢氧化钙糊剂、Vitapex 4种氢氧化钙制剂对牙髓根尖周主要致病菌牙髓卟啉单胞菌(Porphyromonas endodontalis,P.e)活性的影响。方法:(1)通过动态比浊法比较在直接接触条件下不同氢氧化钙制剂不同作用时间对牙髓卟啉单胞菌的抑制作用。(2)选取新鲜拔除的人单根管牙85颗,经根管预备、高压消毒灭菌后,置入P.e菌悬液,建立牙髓卟啉单胞菌感染模型。将模型采用抽签法随机分为5组,即Endocal组、Calxyl组、国产氢氧化钙糊剂组、Vitapex组、无菌去离子水对照组。分别于封药前和封药7d后,用无菌纸捻在根管中取样,细菌培养计数菌落,并完成细菌24h回复实验。采用SPSS11.0软件包对数据进行统计学处理。结果:Endocal、Calxyl、国产氢氧化钙糊剂、Vitapex均能有效减少牙髓卟啉单胞菌的数量(P<0.05),细菌清除率均达95%以上。动态比浊法检测结果显示,Endocal、国产氢氧化钙糊剂抑菌作用优于其他组,有显著性差异(P<0.05);细菌培养法结果显示,Endocal组细菌清除率显著大于Vitapex组(P<0.05)。结论:Endocal、Calxyl、国产氢氧化钙糊剂、Vitapex 4种药物对牙髓卟啉单胞菌均有较好的抑制作用,其中,Endocal的抗菌作用优于Vitapex。     

应用流式细胞技术分析Ca（OH）2及HA对牙髓细胞周期的影响

目的：采用流式细胞技术分析盖髓剂氢氧化钙[Ca(OH2)]及羟基磷灰石（HA）对牙髓细胞周期的影响。方法：将香猪恒牙牙髓机械暴露后,行氢氧化钙和羟基磷灰石盖髓术,分别于术后2,4,8,12周拔牙,采取牙须,胶原酶消化后流式细胞仪检测。将组方图存入磁盘进行计算机分析处理,得到G0／G1,G2,S及M细胞百分比。结果氢氧化钙和羟基磷灰石均能使牙髓细胞的G0／G1期细胞减少,S期细胞积累,结论：提示氢氧化钙及羟基磷灰石可能有促进G0／G1期细胞进入S期,增加DNA合成的作用。     

磷酸八钙作为盖髓剂的研究[英]／Sena M…／／Oral Surg Oral Pathol Oral Radiol Endod．

若在制备洞形时意外穿髓，需要直接盖髓以保存牙髓活力。本研究采用磷酸八钙(OCP)水门汀为盖髓剂，与目前最常用的盖髓剂氢氧化钙(CH)比较，评价OCP与牙髓组织的生物相容性和促进牙本质桥形成的能力。     

光固化氢氧化钙在年轻恒牙直接盖髓术中的疗效观察

直接盖髓术是用药物覆盖暴露的牙髓以促进牙髓愈合和修复的治疗。多用于龋病治疗时意外穿髓和外伤导致意外露髓。由于年轻恒牙的牙根尚未完全发育,根尖孔尚未形成,如果此时进行根管治疗效果不佳。如能通过直接盖髓术促进牙髓组织修复,牙根继续发育,根尖形成,将有利于保留患牙。笔者用光固化氢氧化钙作为盖髓剂对年轻牙外伤性露髓、意外穿髓、临床无明显症状的龋源性露髓牙进行了直接盖术,获得满意的效果。     

狗牙牙髓对硝酸钾和氢氧化钙及其复合制剂的反应

本实验以硝酸钾和氢氧化钙及其复合制剂做为狗牙牙髓的直接盖髓剂，观察其组织学反应，本组结果表明氢氧化钙组治疗效果优于硝酸钾组。     

狗牙髓碱性磷酸酶理化性质的鉴定

动物及人体组织中的碱性磷酸酶(alkaline phosphatase ALP)可分为3型,即肝/骨/肾型、肠型和胎盘型,其性质也分别得到鉴定。与骨组织解剖结构相似的牙髓组织含有丰富的ALP,但其性质及作用尚不清楚。根据其酶解作用推测它可能参与钙化的进行。已知牙髓组织具有创伤后自我修     

三氧化矿物凝聚体对成人牙髓干细胞增殖和分化的影响

目的:研究不同浓度的三氧化矿物凝聚体(mineral trioxide aggregate,MTA)对成人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)增殖和分化的影响。方法:体外培养hDPSCs,分别以不同浓度MTA浸提液作用于hDPSCs。采用四甲基偶氮噻唑蓝(methyl thiazoly tetrazolium,MTT)法测定MTA对hDPSCs增殖的影响;Von Kossa染色法检测hDPSCs钙化结节的形成;通过酶标仪法检测hDPSCs碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)的活性;运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphopro-tein,DSPP)基因的表达。采用单因素方差分析对数据进行统计学分析。结果:2 mg/mL MTA能促进hDPSCs增殖,其ALP活性也明显高于其他各组,并可见Von Kossa染色呈阳性,有钙化结节形成,且能明显促进牙髓干细胞表达DSPP;而20 mg/mL MTA则抑制hDPSCs的增殖,ALP活性明显低于其他各组,Von Kossa染色阴性;而0.2 mg/mL MTA组及氢氧化钙组未能表现出明显的增殖分化活性。结论:2 mg/mL MTA能促进hDPSCs的增殖,并能诱导hDPSCs向成牙本质细胞方向分化。20 mg/mL MTA抑制hDPSCs的增殖,并且抑制hDPSCs向成牙本质细胞方向分化。