实验性脑梗塞中小胶质细胞、NO、H2O2的动态观察

本研究采用线栓法制备了大鼠的实验性脑梗塞模型,通过Lectin染色观察小胶质细胞的变化,通过微透析获得缺血基底区的细胞外液,测定了NO、H_2O_2变化。结果表明,脑缺血30min,再灌注早期0.5h神经元变性坏死较轻,随着再灌注时间的延长,神经元坏死程度逐渐扩大。再灌注0.5h基底区的小胶质细胞活化,NO及H_2O_2水平增高(P＜0.05)。随着再灌注时间的延长至6h,小胶质细胞的变化不大,而NO及H_2O_2水平降低。     

EGCG对H2O2诱导BV2细胞氧化损伤保护作用机制的研究

目的探讨EGCG对H2O2诱导BV2细胞氧化损伤的保护作用机制。方法以200μmol/L H2O2制备BV2细胞氧化应激损伤模型,用CCK-8法检测不同浓度EGCG(0、1、5、10、20、40、80μmol/L)的保护作用,Ho-echst33258染色法检测细胞的凋亡,Western bloting法检测caspase-9蛋白的表达。结果 10及20μmol/L的EGCG组保护效果较明显;EGCG保护组的凋亡细胞显著少于无保护组;20μmol/L EGCG保护组的caspase-9蛋白表达较无保护组明显下调(P=0.03<0.05)。结论 10及20μmol/L浓度的EGCG对H2O2诱导的BV2细胞损伤模型有保护作用,其机制可能是通过减少caspase-9蛋白的表达,进而部分阻断caspase-9所介导的caspases级联反应,减少BV2细胞的凋亡。     

丹红注射液对自然衰老大鼠心脏、大脑组织CAT及H2O2的影响

丹红注射液是采用丹参、红花配制成的中药制剂,主要成分有丹参酚酸、丹参酮等,具有活血化瘀和通脉舒络的作用,对心血管、脑血管、呼吸等系统均具有一定作用[1]。衰老是一种普遍存在于生物界的自然生理现象,是随着年龄的增长机体内的器官功能逐渐减弱或消失的过程[2]。作者利用     

花生四烯酰多巴胺对H2O2诱导SH-SY5Y细胞氧化应激损伤的保护作用

目的 探讨花生四烯酰多巴胺(N-arachidonoyl dopamine,NADA)对H₂O₂诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞氧化损伤的保护作用。方法 H₂O₂处理SH-SY5Y细胞制作细胞氧化损伤模型,通过CCK8法检测细胞活力,明确不同水平的NADA对细胞存活的影响,分析NADA对SH-SY5Y细胞的保护作用; 利用生化方法检测丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)的水平; 运用DCFH-DA荧光探针检测细胞内氧自由基(ROS)水平; Hoechst33342/PI双染法检测NADA对细胞氧化损伤的保护作用; 蛋白免疫印迹实验检测抗凋亡蛋白bcl-2的表达水平。结果 H₂O₂处理SH-SY5Y细胞可导致细胞活力降低,增加MDA水平和LDH活力,促进ROS的产生,降低抗凋亡蛋白bcl-2的表达,加剧细胞凋亡。NADA可剂量依赖性提高H₂O₂诱导的SH-SY5Y细胞的存活率、降低MDA水平和LDH活力以及ROS的产生,促进抗凋亡蛋白bcl-2的表达,降低细胞凋亡。结论 NADA对H₂O₂诱导的细胞氧化损伤模型具有保护作用,其机制可能是通过抑制胞内氧化应激,促进抗凋亡蛋白bcl-2的表达,从而减少神经细胞凋亡。     

NIM811对Na2S2O4引起小鼠HT22细胞缺氧/复氧损伤的保护作用的研究

目的探讨环孢菌素衍生物NIM811对连二亚硫酸钠(Na₂S₂O₄)引起的小鼠海马神经元细胞(HT22)的缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制。方法以小鼠HT22培养细胞制备缺氧/复氧细胞模型,实验分组为正常对照组、Na₂S₂O₄组、Na₂S₂O₄+NIM811组、NIM811组。CCK-8检测细胞生存率、流式细胞术检测细胞凋亡、JC-1试剂检测线粒体膜电位、用钙离子指示剂Rhod-2 AM观察线粒体内钙离子水平、DCFH-DA法检测细胞活性氧(ROS)水平。结果与Na₂S₂O₄组比较,给予NIM811处理后:(1)细胞活性增高38%(P<0.01);(2)细胞凋亡减少27%(P<0.01);(3)线粒体膜电位上升(P<0.01);(4)线粒体内钙离子水平下降(P<0.01);(5)活性氧(ROS)水平降低(P<0.01)。结论NIM811对Na₂S₂O₄引起小鼠海马神经元细胞缺氧/复氧损伤有保护作用,其机制可能为NIM811维持线粒体动态平衡和抑制细胞凋亡有关,NIM811对未来临床治疗缺血性脑卒中具有潜力。     

实验性脑缺血皮层神经细胞,星形胶质细胞超微结构观察

通过结扎大脑脑底动脉血管,观察了缺血后不同时间的皮层神经细胞、星形胶质细胞的变化。线粒体在缺血后最先出现损伤改变,不同时间缺血的神经细胞改变并不一致,而同一时间缺血的神经细胞改变也并不完全相同。     

实验性自身免疫性脑脊髓炎的小胶质细胞和星形胶质细胞反应

目的确定小胶质细胞和星形胶质细胞在实验性自身免疫性脑脊髓炎（ＥＡＥ）发病及病变发展中的作用。方法用牛脊髓髓鞘碱性蛋白（ＭＢＰ）免疫豚鼠发生ＥＡＥ,用免疫组化法观察ＥＡＥ不同病期小胶质细胞和星形胶质细胞对炎性脱髓鞘病灶的反应。结果发生ＥＡＥ的前３天,小胶质细胞即开始激活,在临床症状出现时其数量及激活程度达高峰,并持续至高峰期。恢复期数量逐渐减少,激活程度逐渐减弱。星形胶质细胞在症状高峰期开始激活并围绕在浸润细胞和病变血管周围,似有隔离小胶质细胞与病灶接触的作用,至恢复期激活明显。结论小胶质细胞激活在ＥＡＥ的发病及进展中起重要作用,而星形胶质细胞主要与疾病的恢复有关。     

钾离子通道KCNQ2、KCNQ3与良性家族性新生儿惊厥

钾离子通道与中枢神经元的电活动密切相关,其结构和功能异常将改变神经元兴奋性,引起癫痫发作,其中,KC-NQ2、KCNQ3通道异常即导致良性家族性新生儿惊厥(BFNS)。深入探讨BFNS的KCNQ2、KCNQ3通道突变分子致病机制,将有助于引导BFNS今后的基因治疗研究,并为遗传咨询提供理论基础。     

实验性自身免疫性脑脊炎的小胶质细胞和星形胶质细胞反应

目的 确定小胶质细胞和星形胶质细胞在实验性自身免疫性脑脊髓炎（ＥＡＥ）发病及病变发展中的作用。方法 用牛脊髓髓鞘碱性蛋白（ＭＢＰ）免疫豚鼠发生ＥＡＥ,用免疫组化法观察ＥＡＥ不同病期小胶质细胞和星形胶质细胞对炎性脱髓鞘病灶的反应。结果 发生ＥＡＥ的前３天,小胶质细胞即开始激活,在临床症状出现时其数量及激活程度达高峰,并持续至高峰期。恢复期数量逐渐减少,激活程度逐渐减弱。星形胶质细胞在症状高峰期开始激     

实验性自身免疫性脑脊髓炎神经元、胶质细胞及其细胞缝隙连接的超微结构改变

目的 探讨实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)豚鼠发病前、后脑内神经元、胶质细胞及其细胞间缝隙连接的超微结构变化.方法 采用髓鞘碱性蛋白经豚鼠足底注射制作EAE动物模型.将大鼠随机分为试验组(n=18)和对照组(n=6),采用抗Cx43和Cx32免疫电镜双标记的免疫组化方法观察EAE豚鼠脑白质内神经元、胶质细胞及其细胞之间连接部位超微结构改变.结果 胶质细胞之间和/或神经元之间形成大量的缝隙连接和半通道,同时除存在髓鞘破坏外神经元亦受到损伤.结论 (1)在EAE发展过程中,不仅存在髓鞘改变而且还存在轴索和突触的改变;(2)缝隙连接的增多提示EAE发生后星形胶质细胞与神经元间信息交流可能加强,缝隙连接很可能在神经元和髓鞘损伤中起关键作用.     

实验性大鼠脑出血血肿周围组织胶质细胞纤维酸性蛋白的动态表达

目的:动态观察胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)在脑出血动物模型脑组织中的表达及其意义。方法应用脑立体定向技术,建立大鼠脑出血模型,假手术作为对照组。分别测定脑组织含水量,观察血肿周围GFAP的表达规律。结果:大鼠脑出血后脑水肿于48h达到高峰,与对照组比较有统计学意义(P<0.05)。脑出血后脑内GFAP阳性细胞数6h表达最强,在72h时表达最少,7d的阳性细胞数量比72h增加(P<0.05),但数量少于6h(P<0.05)。相应时间点出血组阳性细胞数与对照组比较,有明显统计学意义,(P<0.05)。结论:脑出血后脑内GFAP的表达与脑水肿相关,提示星形胶质细胞在脑出血的病理变化过程中有重要作用。星形胶质细胞在损伤的修复作用具有二重性,即可以抑制也可以促进损伤修复。     

多巴胺D2、D3受体基因多态性与汉族人精神分裂症相关研究

目的探索多巴胺D2受体(Dopamine D2receptor,DRD2)基因第8外显子Taq I A位点多态和多巴胺D3受体(Dopamine D3receptor,DRD3)基因第5内含子Msp I位点多态与汉族人群精神分裂症是否关联及其在不同性别是否存有差异。方法使用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(Polymerase chain reaction-re-striction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)及DNA测序技术,对317例精神分裂症患者及310名对照DRD2Taq I A基因多态性和DRD3Msp I位点基因多态性进行检测。结果患者组与对照组间DRD2 Taq I A位点等位基因分布差异显著(P<0.01)、两两基因型对比(A1/A2与A1/A1相比:P<0.05;A2/A2与A1/A1相比:P<0.01)及两基因型联合对比(A1/A2+A2/A2与A1/A1:P<0.01)组间差异也显著。性别分层研究DRD2Taq I A位点女性组间差异显著(P<0.01),男性组间差异无意义(P>0.05)。DRD3Msp I位点的基因型频率、等位基因分布及性别分层分析等所有数据均显示患者组与对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。风险因子趋势检验结果DRD2Taq I A位点等位基因A2:P<0.01;DRD3Msp I位点等位基因2:P>0.05。结论所得数据支持DRD2Taq I A位点等位基因A2可能为精神分裂发生的风险因子,特别对女性而言。数据分析不支持DRD3Msp I位点基因与精神分裂发生有关。此结果需更进一步研究证实。     

癫痫大鼠模型中小胶质细胞激活的脑区特点

目的 探讨小胶质细胞在癫痫中的激活特点及其在癫痫中的作用。方法 将12只Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠随机分为对照组和癫痫组,每组各6只; 癫痫组采用氯化锂-匹鲁卡品腹腔注射的方法造模,对照组给予等量生理盐水; 癫痫发作4 d后取大鼠脑组织,采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)和免疫组化的方法研究各组电离钙结合适配器分子-1(Ionized calcium binding adaptor molecule 1,Iba1)+小胶质细胞的表达情况。结果 与对照组大鼠模型相比,癫痫组大鼠丘脑皮层环路Iba1的表达增加,小胶质细胞的激活程度增加,且小胶质细胞特异性地在梨状皮质、丘脑室旁核、丘脑外侧背核,腹外侧部分以及腹内侧丘脑核增生。结论 癫痫发作后小胶质细胞的激活和增生存在着明显的脑区选择性,抑制丘脑皮层环路小胶质细胞的激活有望成为癫痫治疗的靶点。     

Theoretical investigations of the Jahn–Teller distortions for V and Cr in α-Al2O3

The spin Hamiltonian parameters (zero-field splittings D, g factors g_// and g_⊥, the hyperfine structure constants and the spin–lattice coupling coefficients |G_–|, |G₁₅|, |G₅₁| and |G₄₄|) for V³⁺ and Cr⁴⁺ in α-Al₂O₃ are theoretically investigated from the perturbation formulas of these parameters for a 3d² ion under trigonally distorted octahedra. In these formulas, the contributions from the dynamical Jahn–Teller effect, the configuration interactions and the ligand orbital and spin–orbit coupling interactions are quantitatively taken into account in a uniform way based on the ligand field model. The impurity-ligand bond angles related to the C₃ axis are found to experience the variations of about 1.5–1.9° due to the dynamical Jahn–Teller nature, yielding more regular octahedra around the 3d² impurities. In addition, the size mismatching substitution of the smaller host Al³⁺ by the larger impurities may also bring forward some contributions to the local angular distortions. All the calculated spin Hamiltonian parameters based on the above angular variations show reasonable agreement with the experimental data for both centers. The improvements are achieved in this work by adopting the uniform model and formulas and much fewer adjustable parameters as compared with the previous treatments.     

脑梗死患者血清NO-2/NO-3和cGMP 变化的研究

Serum NO^-₂/NO^-₃ and cGMP in 52 cerebral ischemia patients were measured with copper-coated cadmium reduction method and radioimmunoassay.The results showed that serum NO^-₂/NO^-₃ in patients at acute period group was significantly higher than that at recovery period group and normal subjects group (P<0.01).Meanwhile,serum cGMP at acute period group was also higher than that at recovery period group and normal subjects group (P<0.01).These results indicated that NO involves in the progress of cerebral ischemia .Using NO inhibitor to decreases the over production of NO in cerebral ischemia may become a specific treatment for cerebral ischemia.     

实验性脑梗塞动物模型制备脑缺血早期病理变化的观察

本文详细报告了利用犬制备实验性脑梗塞动物模型的方法和结果。并在制备模型的基础上对脑缺血早期病理变化进行了观察。在脑动脉闭塞后1—3天是脑组织损伤最明显时期。     

衰老中小胶质细胞对认知功能减退调控的研究进展

随着人口老龄化问题的日益严峻,痴呆症发病率显著增加,并带来沉重的经济和社会负担。因此,寻找衰老中认知功能减退的具体机制至关重要。近年来,小胶质细胞在衰老中认知功能减退的重要作用已经成为研究热点。小胶质细胞是CNS中固有的免疫细胞,参与免疫监视、突触修剪、损伤修复以及动态平衡的维持。随着年龄的增长,小胶质细胞会经历细胞形态、基因表达和功能的变化。本文将就衰老过程中小胶质细胞的变化及其在衰老中认知功能减退的作用进行综述,以期为预防或减缓此类认知功能障碍的发生、发展提供崭新的思路。