狼疮方对体外扩增小鼠CD4^＋CD（25）^＋调节性T细胞的影响

目的：狼疮方对体外扩增小鼠CD4＋CD25＋调节性T细胞数量的影响。方法：免疫磁珠法分离狼疮方治疗组与未治疗组小鼠CD4＋CD2＋5T细胞;通过流式细胞仪检测CD4＋CD25＋T细胞Foxp3表达情况;用抗CD3和抗CD28包被的微珠来进行刺激,体外扩增小鼠的CD4＋CD25＋调节性T细胞;用CFSE法检测CD4＋CD25＋调节性T细胞体外抑制CD4＋CD2-5T细胞的增殖情况。结果：经抗CD3和抗CD28包被的微珠刺激后,在TGF-β1和IL-2存在的环境中CD4＋CD25＋T细胞数量明显升高,扩增后的CD4＋CD25＋T细胞高表达Foxp3。与此同时,经狼疮方处理后的小鼠CD4＋CD25＋T细胞扩增后数量增加133.3±18.9倍,未经狼疮方处理的对照细胞数量增加104.7±10.8倍,两者比较有显著性差异（P〈0.05）。狼疮方治疗组与未治疗组中分离的CD4＋CD2＋5T细胞和扩增的CD4＋CD25＋T细胞对CD4＋CD2-5T细胞的增殖皆有明显抑制作用,荧光强度分别为32.1±4.8,33.1±4.9,30.1±3.8,32.9±4.2。结论：狼疮方有助于提高小鼠CD4＋CD25＋调节性T细胞的扩增效率,扩增的CD4＋CD25＋调节性T细胞表达Foxp3,具有体外免疫抑制功能。     

2型糖尿病及大血管病变患者 CD4＋CD28-T细胞、CD4＋CD25＋T细胞亚群的变化及意义

目的：观察外周血CD4＋CD28-T细胞、CD4＋CD25＋T细胞亚群在2型糖尿病患者及大血管病变患者的变化,探讨其在2型糖尿病及大血管病变发病中的作用。方法：应用免疫荧光标记技术和流式细胞仪,检测36例初诊2型糖尿病（单纯DM组）患者和28例糖尿病并大血管病变患者、20例健康对照者的外周血T细胞亚群变化。结果：DM并大血管病变组、单纯DM 组 CD4＋CD28-T 细胞明显高于健康对照组,差异均有统计学意义（P〈0.05）;而 CD4＋CD25＋T 细胞明显低于健康对照组（P〈0.05）;DM并大血管病变组CD4＋CD28-T细胞高于单纯DM组（P〈0.05）,CD4＋CD25＋T细胞低于单纯DM组。结论：机体细胞免疫异常在2型糖尿病及大血管病变的发生、发展中发挥着一定的作用。     

类风湿关节炎患者外周血CD4＋CD25＋CD127-Treg的检测及临床意义

目的探讨CD4＋CD25＋CD127-调节T细胞（Treg）在类风湿关节炎中的诊断价值及临床意义。方法选取42例类风湿关节炎（RA）患者和20正常健康者分为两组,采用流式细胞仪检测两组调节T细胞的表达频率,检测两组实验室指标,观察两组实验室指标与调节T细胞的关系。结果与正常对照组相比,RA组白细胞（WBC）、免疫球蛋白A（IgA）、抗链球菌溶血素O（ASO）、类风湿因子（RF）、糖酸蛋白（α1．AGP）、C反应蛋白（CRP）、血沉（ESR）显著升高（P〈0．05或P〈0．01）;血红蛋白（Hb）、CD4＋T细胞、CD25＋T细胞、CD4＋CD25＋T细胞、CD4＋CD25＋CD127-T细胞的表达频率降低（P〈0．05）。Spearman相关分析显示,CD14＋T细胞与Hb呈正相关,CD25＋T细胞与}玷、IgM、ESR呈正相关,CD4＋CD25＋CDl27．T细胞与IgM呈正相关（P〈0．01或P〈0．05）;CD4＋T细胞与RBC、PLT、IgA、IgM、RF、α1．AGP、ESR呈负相关,CD25＋T细胞与RBC、IgA呈负相关,CD4＋CD25＋T细胞与补体C4呈负相关,CD4＋CD25＋CD127-T细胞与ASO呈负相关俨〈0．051。结论CD4＋CD25＋CD127-Treg在RA患者的外周血中显著降低,并且与疾病的活动性高度相关,说明调节T细胞可能参与了RA的发病,早期检测可能为RA的诊断及治疗提供依据。     

芍药甘草汤对MRL／Lpr小鼠CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞的影响

目的：观察芍药甘草汤对MRL／Lpr狼疮小鼠及其脾细胞CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞（Treg）的影响。方法：10周龄系统性红斑狼疮（SLE）模型——转基因MRL／Lpr小鼠与C57BL／6正常小鼠各40例同步对照,探讨经科学煎煮,不同浓度芍药甘草汤（高、中、低浓度分别为：0．6、0．3、0．15g／ml／d）对小鼠狼疮症状、生存率以及脾细胞CD25^＋CD4^＋Foxp3^＋Treg的影响。结果：高浓度芍药甘草汤可以明显减缓疾病的发生、减轻SLE症状、延长病鼠生存期;治疗后较治疗前有效提高CD25^＋／CD4^＋（％）（11．80±4-0．98VS17．18±0．62）、Foxp3^＋／CD4^＋（％）（3．32±0．70VS5．50±0．73）（P〈0．05）的比例。结论：芍药甘草汤对小鼠无急性毒害;高浓度制剂能明显延长病鼠生存期;提高CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg比例可能是药物发挥免疫调节作用的作用机制之一。该方剂能安全有效用于治疗系统性红斑狼疮小鼠活动期。     

健脾护齿方对伴放线放线杆菌超声提取物作用下CD4^＋CD25^＋调节性T细胞免疫抑制功能的影响

目的：探讨健脾护齿方对伴放线放线杆菌（actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa）超声提取物作用下CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（regulatory Tcells,Tregs）免疫抑制功能的影响。方法：免疫磁珠法分离正常BALB/c小鼠脾脏CD4^＋CD25^＋Tregs并进行体外培养,将300μg/mlAα超声提取物和不同剂量健脾护齿方药液加入培养液中,72h后收集细胞及上清液,Real-Time PCR法测定培养细胞Foxp3 mRNA的表达,ELISA法分别测定细胞上清液中IL-10,TGF-β水平。结果：Aa超声提取物能够显著上调CD4^＋CD25^＋Tregs Foxp3 mRNA的表达,增强其免疫抑制作用,但不影响CD4^＋CD25^＋Tregs分泌IL-10和TGF-β;健脾护齿方抑制Aa超声提取物上调CD4^＋CD25^＋Tregs Foxp3mRNA表达的作用,并且Foxp3 mRNA表达的抑制作用与健脾护齿方剂量之间呈剂量—效应关系。结论：健脾护齿方有抑制Aa超声提取物上调CD4^＋CD25^＋Tregs免疫抑制功能的作用,这种抑制效应可能与Foxp3基因表达的下调有关,并且不具有抑制性细胞因子依赖性。     

类风湿关节炎患者外周血CD4＋CD25＋CD127-Treg的检测及临床意义

目的探讨CD4＋CD25＋CD127-调节T细胞（Treg）在类风湿关节炎中的诊断价值及临床意义。方法选取42例类风湿关节炎（RA）患者和20正常健康者分为两组,采用流式细胞仪检测两组调节T细胞的表达频率,检测两组实验室指标,观察两组实验室指标与调节T细胞的关系。结果与正常对照组相比,RA组白细胞（WBC）、免疫球蛋白A（IgA）、抗链球菌溶血素O（ASO）、类风湿因子（RF）、糖酸蛋白（α1-AGP）、C反应蛋白（CRP）、血沉（ESR）显著升高（P〈0．05或P〈0．01）;血红蛋白（Hb）、CD4＋T细胞、CD25＋T细胞、CD4＋CD25＋T细胞、CD4＋CD25＋CD127-T细胞的表达频率降低（P〈0．05）。Spearman相关分析显示,CD4＋T细胞与Hb呈正相关,CD25＋T细胞与Hb、IgM、ESR呈正相关,CD4＋CD25＋CD127-T细胞与IgM呈正相关（P〈0．01或P〈0．05）;CD4＋T细胞与RBC、PLT、IgA、IgM、RF、α1-AGP、ESR呈负相关,CD25＋T细胞与RBC、IgA呈负相关,CD4＋CD25＋T细胞与补体C4呈负相关,CD4＋CD25＋CD127-T细胞与ASO呈负相关（P〈0．05）。结论CD4＋CD25＋CD127-Treg在RA患者的外周血中显著降低,并且与疾病的活动性高度相关,说明调节T细胞可能参与了RA的发病,早期检测可能为RA的诊断及治疗提供依据。     

抗痨合剂对初治肺结核患者CD4~＋ CD25~＋调节性T细胞及Foxp3的影响

目的：研究抗痨合剂对初治肺结核患者CD4＋CD25＋调节性T细胞及Foxp3的影响。方法：将64例初治肺结核患者随机分中药组和对照组,中药组采用2HRZE/4HR＋口服抗痨合剂方案抗结核治疗,对照组采用2HRZE/4HR＋口服中药安慰剂方案抗结核治疗,6个月后观察临床疗效,并采用流式细胞术检测各组患者外周血CD4＋CD25＋Treg细胞的含量,实时荧光定量PCR检测各组患者外周血Foxp3 mRNA的表达。结果：抗痨合剂可显著改善初治肺结核患者咳嗽、咳痰、潮热盗汗、恶心、乏力等临床症状。抗痨合剂可显著减少初治肺结核患者外周血中CD4＋CD25＋Treg细胞数量,并下调Foxp3 mRNA表达,与对照组比较有统计学意义（P〈0.05）。结论：抗痨合剂的作用机制可能是通过减少CD4＋CD25＋Treg细胞数量、下调Foxp3 mRNA表达,调节机体免疫功能,发挥临床疗效。     

滋阴清热方对MRL/lpr狼疮鼠皮质醇及糖皮质激素受体mRNA表达的影响

目的观察MRL/lpr狼疮鼠皮质醇及糖皮质激素受体(GR)mRNA表达的变化及滋阴清热方对其水平的影响,探讨中药减轻激素不良反应的机理。方法 40只MRL/lpr狼疮模型鼠随机分为4组,即模型组、中药组、西药组、中西药组。分别给予生理盐水、滋阴清热方、强的松悬液、滋阴清热复方+强的松悬液灌胃,均每日1次,每次0.5mL,连续用药10周。另选用昆明小鼠10只作为正常对照组。应用放射免疫法测定MRL/lpr狼疮鼠糖皮质醇水平,反转录酶-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测GR mRNA,观察各组皮质醇、GR mRNA表达的变化。结果模型组血清皮质醇水平与正常组比较,P0.05,而GRα mRNA表达明显低于正常组(P0.05)。西药组GRα mRNA、GRβmRNA下调水平高于中药组和中西药组(P0.01或P0.05)。结论滋阴清热方可上调MRL/lpr狼疮鼠GR mRNA表达水平,从而增强糖皮质激素的临床疗效,减少激素不良反应。     

不同体质MRL/lpr狼疮鼠RORγt、Foxp3 mRNA及蛋白质的表达

目的:观察不同体质MRL/lpr雌性狼疮鼠RORγt、Foxp3 mRNA及蛋白质的表达情况,证实狼疮鼠体质差异的物质基础。方法:将3月龄狼疮鼠按体质分为常体、热体、寒体,饲养1月后,采用RT-PCT、Western Blot方法检测不同组别狼疮鼠血清ds-DNA,肾脏RORγt、Foxp3 mRNA及蛋白质的表达。结果:不同体质MRL/lpr雌性狼疮鼠间RORγt mRNA的表达无明显差异,RORγt蛋白质的表达、Foxp3 mRNA及蛋白质的表达存在明显差异。MRL/lpr热体组小鼠RORγt、Foxp3 mRNA及蛋白水平均偏低。结论:MRL/lpr狼疮鼠体质差异与RORγt、Foxp3基因及蛋白质的表达有关。     

CD4＋CD25＋调节性T（Treg）细胞在小儿急性白血病发病中的作用探讨

目的：探讨分析CD4＋CD25＋调节性Y（Treg）细胞在sbJL急性白血病fAL）发病中的作用。方法：回顾性分析我院儿科2008年6月-2010年10月确诊并收治的急性白血病患者，其中初诊患儿20例为A组，经治疗完全缓解患儿20例为B组以及20例身体健康的志愿者20例作为c组，使用流式细胞术检测外周血中CD4＋CD25＋7细胞数量和所占比例。结果：在CD4＋T细胞的表达率上c组明显低于A、B组的值，差异具有统计学意义（P〈0．05）。在CD4＋CD25＋T细胞表达率上，A组显著高于B组和c组，差异具有统计学意义（P〈0．05），而B组与c组之间数值差异则无统计学意义。结论：CD4＋CD25＋调节性T（Treg）细胞的数量会在小儿急性白血病发病时增加治疗后下降，可以根据次特点指导临床上制定治疗方案。     

两种中药复方对MRL/lpr小鼠中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞增殖能力影响的实验研究

目的：比较两种中药复方对MRL/lpr小鼠CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg细胞）增殖能力的影响。方法：分别以两种中药方剂对SD大鼠灌胃7日,采集大鼠血清;采用磁珠分离法分选出MRL/lpr小鼠脾脏中Treg细胞,分别于普通SD大鼠血清及两种中药方剂SD大鼠血清中进行培养,观察Treg细胞增殖情况。结果：中药方剂组1组大鼠血清培养的Treg细胞数量显著高于中药方剂组2组及对照组,中药方剂组2组与对照组间无统计学差异。结论：中药方剂1组能显著提高MRL/lpr小鼠中Treg细胞的增殖能力,从而达到对SLE的治疗效果。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞研究进展

一种起源于胸腺的新型免疫调节细胞,即CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Tr）,逐渐引起人们重视。该细胞具有两大特征,即免疫无能性和免疫抑制性,其表达为IL-2Rα链（CD25）。该细胞在移植耐受诱导、自身免疫疾病的治疗以及肿瘤免疫治疗等方面具有潜在的应用价值。     

艾迪注射液对晚期老年非小细胞肺癌外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的影响

目的：探讨晚期老年非小细胞肺癌患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的数量变化,并探讨艾迪注射液对于其CD4＋CD25＋调节性T细胞的影响。方法：采用流式细胞术检测肺癌患者艾迪治疗前后外周血中CD4＋CD25＋调节性T细胞的数量,并与非艾迪治疗组肺癌患者相比较,同时设非肿瘤患者为空白对照。结果：肺癌患者外周血中CD4＋CD25＋调节性T细胞的数量明显高于非肿瘤患者（P〈0.01）,艾迪注射液治疗后肺癌患者外周血中CD4＋CD25＋调节性T细胞的数量可明显下降（P〈0.01）。结论：艾迪注射液能降低老年非小细胞肺癌患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的数量,可能对改善其细胞免疫状态有较好的作用。     

滋阴清热小复方对MRL／lpr狼疮鼠影响的实验研究

目的：观察滋阴清热小复方对MRL／lpr狼疮鼠的影响。方法：将40只MRL／lpr狼疮模型鼠随机分为4组,即模型对照组、滋阴狼疮方治疗组、强的松治疗组、滋阴清热复方＋强的松治疗组,每组10只,分别给予生理盐水、中药滋阴清热复方、强的松悬液、滋阴清热复方＋强的松悬液灌胃治疗10周。正常组：选用昆明种小鼠10只,生理盐水灌胃。均每日1次,每次0．5ml,连续用药饲养10周后,取血及肾脏标本。结果：与对照组相比,各治疗组动物死亡率、24h尿蛋白含量、血清抗-dsDNA水平、肾脏病理均有不同程度改善,以中西医结合治疗组最为明显。结论：中药滋阴清热复方及西药强的松对狼疮鼠模型均有良好的治疗作用,尤以中西医结合治疗效果最好。     

益气补肾颗粒治疗对微小残留白血病患者CD4~+CD8~(high) T淋巴细胞和自然杀伤细胞的影响

目的探讨益气补肾颗粒治疗后CD4+CD8highT淋巴细胞的变化及其对微小残留白血病(mini-mal residual leukemia,MRL)预后的意义。方法用多参数流式细胞技术比较分析36例MRL患者应用益气补肾颗粒治疗前后CD4+CD8 highT淋巴细胞亚群和自然杀伤细胞(NK细胞)改变。结果 (1)MRL患者3年持续完全缓解率、生存率分别为75.0%、80.5%,5年持续完全缓解率、生存率分别为63.9%、72.2%。(2)与治疗前比较,治疗后的MRL的CD4+CD8highT淋巴细胞百分率(%)和绝对值显著上升(P0.01);(3)与治疗前比较,治疗后MRL的NK细胞百分率(%)和绝对值均显著上升(P0.05,P0.01)。结论益气补肾颗粒可能通过调节机体自身免疫功能,提高CD4+CD8highT和NK细胞的绝对数量,杀伤或抑制体内残存白血病细胞,延长MRL患者的无病生存期。     

补肾固精方合大剂量黄芪注射液对脾肾阳虚型狼疮肾炎免疫状态的影响

目的观察补肾固精方结合大剂量黄芪注射液对脾肾阳虚型狼疮肾炎免疫状态的影响。方法将30例脾肾阳虚型狼疮肾炎患者随机分为治疗组和对照组各15例,两组均采用强的松加环磷酰胺（CTX）冲击治疗,治疗组同时予补肾固精方和黄芪注射液;治疗3个月后观察两组24h尿蛋白定量、SLE疾病活动指数（SLEDAI）、T细胞亚群、调节性T细胞（CD4＋CD25＋Treg细胞）、IL-17变化情况和治疗中感染事件发生情况。结果治疗组可明显降低脾肾阳虚型狼疮肾炎患者24h尿蛋白定量、SLEDAI和感染事件发生率,下调CD8＋水平,且疗效优于对照组（P〈0.05）;同时能提高CD4＋CD25＋Treg细胞比率,降低IL-17水平,但与对照组比较无统计学差异（P〉0.05）。结论补肾固精方结合大剂量黄芪注射液可明显改善脾肾阳虚型狼疮肾炎病情,并可在一定程度上纠正免疫功能紊乱。     

内异消癥汤对子宫内膜异位症大鼠CD4^＋及CD8^＋ T细胞表达的影响

目的探讨内异消癥汤对子宫内膜异位症模型大鼠CD4^＋、CD8^＋T细胞表达的影响。方法将47只大鼠随机分为对照组,模型组和内异消癥汤高、低剂量组,除对照组外均采用大鼠子宫组织自体移植手术制作子宫内膜异位症模型,灌胃给药4周后用免疫组化方法检测大鼠子宫内膜异位移植物局部CD4^＋、CD8^＋T细胞表达。结果与模型组相比,低剂量组CD4^＋表达显著降低（P〈0.05）,高、低剂量组CD8^＋的表达强度降低更显著（P〈0.01）;高、低剂量组的CD4^＋/CD8^＋比值较模型组增高,低剂量组比值增高尤为明显;高、低剂量组之间CD4^＋、CD8^＋表达比较无显著差异（P〉0.05）。结论内异消癥汤能改善大鼠子宫内膜异位移植物局部组织免疫学变化,降低CD4^＋及CD8^＋表达,并有提高CD4^＋/CD8^＋比值的趋势,可能通过此途径达到治疗效果。     

狼疮方对体外扩增小鼠CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞的影响

目的:狼疮方对体外扩增小鼠CD4+CD25+调节性T细胞数量的影响。方法:免疫磁珠法分离狼疮方治疗组与未治疗组小鼠CD4+CD2+5T细胞;通过流式细胞仪检测CD4+CD25+T细胞Foxp3表达情况;用抗CD3和抗CD28包被的微珠来进行刺激,体外扩增小鼠的CD4+CD25+调节性T细胞;用CFSE法检测CD4+CD25+调节性T细胞体外抑制CD4+CD2-5T细胞的增殖情况。结果:经抗CD3和抗CD28包被的微珠刺激后,在TGF-β1和IL-2存在的环境中CD4+CD25+T细胞数量明显升高,扩增后的CD4+CD25+T细胞高表达Foxp3。与此同时,经狼疮方处理后的小鼠CD4+CD25+T细胞扩增后数量增加133.3±18.9倍,未经狼疮方处理的对照细胞数量增加104.7±10.8倍,两者比较有显著性差异(P0.05)。狼疮方治疗组与未治疗组中分离的CD4+CD2+5T细胞和扩增的CD4+CD25+T细胞对CD4+CD2-5T细胞的增殖皆有明显抑制作用,荧光强度分别为32.1±4.8,33.1±4.9,30.1±3.8,32.9±4.2。结论:狼疮方有助于提高小鼠CD4+CD25+调节性T细胞的扩增效率,扩增的CD4+CD25+调节性T细胞表达Foxp3,具有体外免疫抑制功能。     

苏木、苏木+黄芪对荷瘤小鼠CD4~+ CD25~+调节性T细胞及相关调控分子的干预作用

目的:观察苏木、苏木+黄芪对荷瘤小鼠脾CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)表达及相关调控分子的干预作用。方法:复制C57BL/6小鼠Lewis肺癌动物模型,动态观察苏木、苏木+黄芪抑瘤率、肺转移抑制率,流式细胞术检测小鼠脾CD4+CD25+Treg表达,免疫磁珠分选小鼠脾CD4+CD25+细胞,RT-PCR检测小鼠脾CD4+CD25+细胞和瘤组织Foxp3、CTLA-4mRNA表达。结果:苏木组6d、苏木+黄芪组10d瘤重低于荷瘤对照组(P0.05);苏木+黄芪组20d肺转移抑制率为77.75%;15d苏木+黄芪组小鼠脾CD4+CD25+细胞表达低于荷瘤对照组(P0.05);苏木+黄芪组荷瘤小鼠瘤组织CTLA-4、Foxp3mRNA表达及脾CD4+CD25+分选后细胞Foxp3 mRNA表达低于荷瘤对照组(P0.05)。结论:益气活血中药组方苏木+黄芪可调节荷瘤小鼠脾Treg及相关调控分子表达,并且在淋巴组织和肿瘤微环境中都表现出作用。     

滋阴清热方对MRL／1pr狼疮鼠皮质醇及糖皮质激素受体mRNA表达的影响

目的 观察MRL／1pr狼疮鼠皮质醇及糖皮质激素爱体（GR）mRNA表达的变化及滋阴清热方对其水平的影响,探讨中药减轻激素不良反应的机理。方法40只MRL／1pr狼疮模型鼠随机分为4组,即模型组、中药组、西药组、中西药组。分别给予生理盐水、滋阴清热方、强的松悬液、滋阴清热复方＋强的松悬液灌胃,均每日1次,每次0．5mL,连续用药10周。另选用昆明小鼠10只作为正常对照组。应用放射免疫法测定MRL／1pr狼疮鼠糖皮质醇水平,反转录酶一聚合酶链反应法（RT—PCR）检测GRmRNA,观察各组皮质醇、GRmRNA表达的变化。结果模型组血清皮质醇水平与正常组比较,P〉0．05,而GRocmRNA表达明显低于正常组（P〈0．05）。西药组GRαmRNA、GRBmRNA下调水平高于中药组和中西药组（P〈0．01或P〈0．05）。结论滋阴清热方可上调MRL／1pr狼疮鼠GRmRNA表达水平,从而增强糖皮质激素的临床疗效,减少激素不良反应。