利用LC-MS和二维色谱相关光谱技术识别HPLC色谱图中杂质峰

采用二维色谱相关光谱技术,实现质控HPLC方法与LC-MS色谱系统色谱峰的相互识别。本文采用HPLC-DAD(中国药典2010版方法)得到头孢唑肟和头孢地尼混合降解杂质的色谱图,建立降解杂质标准色谱光谱数据;采用LC-MS的方法结合MassWorks软件的应用鉴别出头孢唑肟和头孢地尼的主要降解产物;通过计算光谱相关性对杂质色谱峰进行归属。色谱二维光谱相关法在不同色谱系统下能够准确定性,在没有杂质对照品的情况下,可为质控HPLC方法中的杂质峰的归属提供新的途径和新的思路。     

HPLC-DAD光谱相关法识别利福平有关物质

建立准确识别HPLC色谱图中利福平有关物质峰的DAD光谱相关方法。采用HPLC-DAD建立已知杂质标准色谱光谱数据；将样品的色谱光谱数据与标准色谱光谱数据进行相关计算，构建光谱相关图，对杂质进行识别。用LC-MS对结果进行了验证。DAD光谱相关法在不同色谱条件下能准确识别已知杂质峰，相似系数阈值定为0.99，识别的最低检出量为30 ng。结果显示该法可有效地对HPLC分析中的色谱峰进行识别，耐用性好，对峰分离度要求低，多组分同时快速定位。     

2D-LC-HR-MS/MS法对头孢唑林钠中未知杂质的鉴定

摘要：目的 建立二维液相色谱-高分辨串联质谱(2D-LC-HR-MS/MS)法鉴定头孢唑林钠原料药中2个未知杂质的方法。方 法 采用二维液相-高分辨串联质谱法,一维色谱条件进行样品采集,确认一维色谱体系中目标峰的出峰位置,并进行分离, 二维液相脱盐后切进高分辨串联质谱进行分析,根据结果推断杂质结构及生成机理。结果 该方法有效解决了头孢唑林钠流动 相中含不挥发性盐的色谱体系不适用于色谱-质谱快速鉴定杂质的难题,并对2个未知杂质进行有效鉴定。结论 该方法可以简 单、快速地对头孢唑林钠中未知杂质进行定性     

比阿培南及杂质质控HPLC分析方法的建立(英文)

建立了适用于比阿培南及其杂质质量控制的HPLC分析方法。采用Dikma Diamonsil C₁₈（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈-0.1%三乙胺溶液（1:99,v/v）,二极管阵列检测器检测波长为220 nm。比阿培南的线性范围为（0.05-10.0）mg/mL（r²=0.999）;杂质的最低检出限（LOD）和最低定量限（LOQ）分别为4.8 ng（S/N=3）和18.5 ng（S/N=10）;测定比阿培南最大杂质和总杂质的日内精密度（RSD）分别为1.84%和3.37%（n=3）,日间精密度（RSD）分别为4.84%和7.58%（n=9）;供试品溶液在4℃放置6 h稳定。利用HPLC-DAD数据,采用二维色谱光谱相关分析技术,在没有杂质对照品的情况下,实现了质控分析HPLC-UV色谱图中的色谱峰与LC-MS色谱图中的色谱峰的相互识别。质控色谱图中相对保留时间为0.528,0.743,1.062和2.817的4个色谱峰结构被确认,分别为比阿培南的水解产物和二聚体。该方法为鉴别常规HPLC-UV色谱图中的色谱峰提供了新思路。     

葛根与粉葛饮片的色谱指纹图谱研究

目的建立葛根与粉葛质量比较的色谱方法,并用于二者的质量分析与评价,为其质量控制提供新依据,为其药效物质基础的分析奠定基础。方法采用薄层色谱(TLC)法对7个葛根样品和17个粉葛样品进行比较,并采用高效液相色谱(HPLC)法进行指纹图谱测定,运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A)软件进行分析。采用对照品对比和HPLC-MS技术对其部分色谱峰进行定性鉴别。结果建立的TLC和HPLC指纹图谱能区别葛根和粉葛。HPLC指纹图谱粉葛饮片共有峰14个,野葛根饮片共有峰19个,初步指认了葛根与粉葛HPLC指纹图谱中13和7个成分。结论该文为葛根与粉葛质量控制和临床应用提供可靠依据。     

抗生素杂质的检测方法研究进展

本文对抗生素杂质的各检测方法的研究进展进行了综述。常用的杂质检测法有高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)及凝胶渗透色谱法(GPC);GPC主要用于高分子聚合物的检测,而GC法用于挥发性杂质的检测。此外,还有毛细管电泳法(CE)、气相色谱一质谱联用技术(GC-MS)、核磁共振(NMR)光谱法及高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测分析法等。本文重点阐述HPLC法结合色谱二维光谱相关法在杂质定位识别方面的应用和CE法及LC-MS法在抗生素杂质分析方面的应用情况,最后对各方法在杂质检测领域的发展前景进行展望。     

联用色谱用于冬虫夏草的化学成分测定

目的：对冬虫夏草虫体和子座部分的甾醇和核苷类化合物进行多组分定性定量分析,并比较核苷类化合物的提取方法。方法：用HPLC-DAD联用色谱检测,借助HELP法解析,基于组分的色谱保留时间和光谱曲线进行定性,然后用总体积积分法定量。结果：HPLC-DAD联用色谱检测和HELP法解析相结合,可验证色谱峰的纯度,分辨重叠峰,得到各组分的纯色谱和光谱曲线。该法的样品回收率为99.97%～100.81%,虫体和子座部分的化学成分存在差异,用水提取核苷类化合物的效果较好。结论：综合利用色谱和光谱两方面信息,可提高组分定性定量结果的准确度。     

正交投影鉴别决明子色谱指纹图谱峰纯度

应用正交投影法对色谱指纹图谱的峰进行鉴别。用对照组分光谱与目标色谱峰前后的零浓度区光谱构建正交投影阵,对目标色谱峰的光谱进行投影,以投影前后光谱的夹角余弦作为判据来鉴别目标色谱峰的峰纯度。对决明子药材色谱指纹图谱的峰纯度鉴别,识别出大黄素、大黄素甲醚及大黄酚三个纯色谱峰。正交投影鉴别色谱指纹图谱峰的纯度方法结果可靠,背景的干扰可消除。     

硝酸甘油片有关物质的研究

目的:利用液相色谱法、化学反应法、紫外光谱法及离子色谱法对硝酸甘油片中显著色谱峰进行分析,并确定该目标峰的组分及检测方法,帮助生产企业解决硝酸甘油片质量标准中有关物质杂质峰的判定和扣除问题。方法:结合《中国药典》2015年版硝酸甘油片有关物质检查法与JP 17版硝酸甘油片硝酸根离子限量检查法,对未知色谱峰定性,并通过离子色谱法进行定性及定量分析。结果:样品色谱图中2.4 min处色谱峰为硝酸根离子与辅料的重叠峰,且以硝酸根离子为主。结论:本研究采用多种方法验证了未知色谱峰的主要成分为硝酸根离子,为《中国药典》2015年版中硝酸甘油片质量标准的修订提供了参考。     

硝酸甘油片有关物质的研究

目的：利用液相色谱法、化学反应法、紫外光谱法及离子色谱法对硝酸甘油片中显著色谱峰进行分析,并确定该目标峰的组分及检测方法,帮助生产企业解决硝酸甘油片质量标准中有关物质杂质峰的判定和扣除问题。方法：结合《中国药典》2015年版硝酸甘油片有关物质检查法与JP17版硝酸甘油片硝酸根离子限量检查法,对未知色谱峰定性,并通过离子色谱法进行定性及定量分析。结果：样品色谱图中2.4min处色谱峰为硝酸根离子与辅料的重叠峰,且以硝酸根离子为主。结论：本研究采用多种方法验证了未知色谱峰的主要成分为硝酸根离子,为《中国药典》2015年版中硝酸甘油片质量标准的修订提供了参考。     

多中心切割2D-HPLC-QTOF法对表柔比星脂质体制剂中未知杂质的分离与结构推断

目的 建立多中心切割(MHC)二维高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(2D-HPLC-QTOF)法分离和推断表柔比星脂质 体制剂中未知杂质的方法。方法 一维液相色谱采用Symmetry-C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm)为色谱柱,以乙腈和甲醇(6:1)为流 动相A,以加入十二烷基硫酸钠的磷酸缓冲液为流动相B,流动相A与流动相B体积比为57:43进行等度洗脱;二维高效液相色谱 采用Agilent Eclipse-C18 (50 mm×2.1 mm,1.8 μm)为色谱柱,以0.1%的甲酸水和乙腈为流动相,采用梯度洗脱。将一维液相色谱 条件下分离的杂质峰进行多中心切割储存在定量环中,并转移至二维进行分离,以四极杆飞行时间质谱(QTOF)进行结构推断。 结果 该方法可以使表柔比星与杂质峰较好地分离,并且可以得到高质量杂质峰进行结构推断。在表柔比星脂质体制剂中对6 个未知杂质进行有效的推断。结论 建立的多中心切割二维高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法可高效准确的分离并推断表柔 比星脂质体制剂中的未知杂质,特别是微量和难以分离的杂质,对表柔比星制剂的质量控制提供了新方法。     

Planar chromatography: current status and future perspectives in pharmaceutical analysis (short review)--II. Special techniques and future perspectives in planar chromatography.

The state of the art of various special analytical planar chromatographic methods is summarized especially for forced-flow planar chromatography (FFPC), overpressured-layer chromatography (OPLC) and rotation planar chromatography (RPC) as well as for the automated multiple development (AMD) technique. The connection between analytical planar and column liquid chromatographic methods and the identification of separated compounds with chromatographic and spectroscopic data are summarized. Some aspects of future perspectives, such as parallel connected multi-layer FFPC and long distance OPLC (LD-OPLC) are given. A combination of OPLC with the AMD method is predicted as the method of the future. Strategies using FFPC techniques are suggested in the form of a flow chart.     

气相色谱法用于西红花的真伪鉴别研究

目的利用气相色谱法鉴别西红花真品与掺假品、伪品。方法采用气相色谱（GC）法测定了11个不同产地的21个西红花样品。采用HP-5毛细管色谱柱（30.0 m×0.32 mm×0.25 m）,程序升温,氢火焰离子化检测器（FID）。结果气相色谱图特征显著,西红花真品和伪品的色谱图明显不同;真品和掺假品色谱图也有明显的区别,特征性成分的保留时间一致,只是含量有较大差别。结论本研究可为西红花真伪鉴别及质量控制提供一定的参考依据。     

连防感冒颗粒中防风薄层鉴别方法改进

目的寻找连防感冒颗粒中防风TLC鉴别更清晰，更可行的薄层色谱条件。方法在中国药典2005年版一部防风鉴别项下所用方法的基础上，改用硅胶G薄层板，展开后喷以10％硫酸乙醇溶液显色，365nm下检视。结果改进后的方法所得到的色谱图像较清晰，易于观察。结论该方法可以作为防风的薄层色谱鉴别方法。     

Effective on-line purification for cationic compounds in rat bile using a column-switching LC technique

An on-line purification method for cationic compounds and their metabolites in rat bile was investigated using a column-switching technique. 8-Hydroxyquinoline and its glucuronide were used as test compounds. Bile samples were injected directly into the system and successful on-line extraction with high purification efficiency for analytes was achieved using two-dimensional extraction LC; that is, reversed-phase chromatography followed by cation-exchange chromatography. After removal of the endogenous component by extraction LC, chromatographic separation of the target analyte was performed on an analytical ODS column, followed by identification using UV detection. The quantitative ability of the method was evaluated on the basis of injection repeatability, linearity and accuracy. This novel method was also applied to LC/MS analysis in order to characterise the pharmacokinetics of propranolol in rats, and the metabolites were successfully identified.     

2D-HPLC-QTOF法对比阿培南开环物鉴定

摘要：目的 建立在线二维液相色谱-四极杆飞行时间质谱(2D-HPLC-QTOF)法鉴定比阿培南开环物的质谱方法。方法 采 用在线二维液相色谱-四极杆飞行时间质谱法,一维液相进行分离,二维液相进行脱盐后直接进行质谱分析,根据推测结构进行 化学合成该杂质,然后进行核磁结构确认。结果 该方法有效地解决了比阿培南流动相中含不挥发性盐的色谱系统不适用于液 相色谱-质谱快速鉴定杂质的难题并确认该未知杂质为比阿培南开环物。结论 该方法可以快速、简便、灵敏、准确地用质谱来 定性测定比阿培南中的开环物。     

自身正交投影鉴别温郁金挥发油色谱指纹图谱峰纯度

目的通过自身正交投影法对色谱指纹图谱的峰纯度进行鉴别。方法用目标组分光谱构建正交投影阵，对目标色谱峰的光谱进行投影，以投影前后光谱的夹角余弦作为依据来鉴别目标色谱峰纯度。结果通过鉴别温郁金挥发油色谱指纹图谱的峰纯度，识别出吉马酮等2个纯色谱峰。结论自身正交投影用于色谱指纹图谱峰纯度的鉴别，方法可行，结果可靠。     

参芪舒心胶囊的薄层色谱研究

目的建立参芪舒心胶囊的薄层色谱鉴别方法。方法采用薄层色谱法对处方中人参、黄芪、延胡索、丹参进行定性鉴别。结果在薄层色谱图中可检出人参、黄芪、延胡索、丹参的特征斑点,且斑点清晰,阴性对照无干扰。结论所建立的方法专属性强,重现性好,可用于参芪舒心胶囊的质量控制。