扶正解毒化瘀方通过NLRP3炎性体减轻多重耐药铜绿假单胞菌慢性肺炎肺损伤的作用机制

目的：观察扶正解毒化瘀方通过干预NLRP3炎性体减轻多重耐药铜绿假单胞菌（MDRPA）慢性肺炎肺损伤的作用机制。方法：将大鼠随机分为正常组、模型组、中药组、西药组、中+西组,通过经口气管插管法建立MDRPA慢性肺炎大鼠模型。中药组予扶正解毒化瘀方灌胃,每次1.4 g/mL,2次/d;西药组予哌拉西林他唑巴坦钠腹腔注射,每8小时1次;中+西组为两药联用。观察各时点肺组织病理变化。通过qPCR和Western blot观察NLRP3炎性体相关指标的基因和蛋白表达。结果：与模型组比较,中药组NLRP3 mRNA和Caspase-1 mRNA水平在第14天和21天显著降低（P<0.05）,中药组、西药组和中+西组第14天时NLRP3、IL-1β蛋白表达水平均显著下降（P<0.05）。与模型组比较,中药组在第7、14天肺泡结构更完整,免疫细胞浸润更少,第21天时免疫细胞浸润和纤维细胞形成也更少。结论：扶正解毒化瘀方能明显减轻MDRPA慢性肺炎大鼠肺组织损伤,可能是通过调节NLRP3炎性体的表达而发挥作用。     

扶正解毒化瘀方对多重耐药铜绿假单胞菌MexAB-OprM外排泵表达影响的研究

目的:研究扶正解毒化瘀方对多重耐药铜绿假单胞菌MexAB-OprM外排泵表达的影响。方法:针对筛选出的MexAB-OprM阳性的铜绿假单胞菌菌株,通过微量稀释法,测定哌拉西林-他唑巴坦的最小抑菌浓度和扶正解毒化瘀方水提物的最小杀菌浓度,从而确定荧光定量PCR细菌样本时培养剂中哌拉西林-他唑巴坦和扶正解毒化瘀方水提物的浓度。绘制细菌生长曲线,确定细菌样本的培养时间。利用实时荧光定量PCR技术检测药物干预前后mex B、oprM、mexR的表达量。结果:扶正解毒化瘀方水提物能降低MexAB-OprM外排泵阳性MDRPA菌株的mex B、oprM表达量(P 0. 05),同时能增加mexR的表达量(P 0. 05)。结论:扶正解毒化瘀方对MDRPA所致肺炎的作用机制之一可能是通过抑制MexAB-OprM外排泵的表达实现的。     

基于LC-MS/MS和靶点网络探讨扶正透邪解毒化瘀方对多重耐药铜绿假单胞菌的干预机制

[目的] 从药物作用靶点层面探讨扶正透邪解毒化瘀方体外干预多重耐药铜绿假单胞菌的药效物质基础和直接/协同机制。[方法] 通过液相色谱-串联质谱联用（LC-MS/MS）、中药系统药理数据库和分析平台（TCMSP）筛选扶正透邪解毒化瘀方化学成分;通过Stitch数据库查找上述成分以及亚胺培南、头孢他啶、环丙沙星作用于铜绿假单胞菌的蛋白靶点;运用Cytoscape 3.9.1构建“中药—化学成分—作用靶点网络图”和“蛋白质-蛋白质互作网络”;筛选该方与抗菌药物共同作用靶点;借助DAVID数据库对靶点进行基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析。[结果] LC-MS/MS共鉴定出108个化学成分,TCMSP数据库共筛选出155个化学成分,去重后共得到162个化学成分,其中42个化学成分能够直接作用于铜绿假单胞菌240个靶蛋白;网络药理学筛选出17个核心成分,以黄酮类、甾醇类、萜类为主,其中β-谷甾醇、槲皮素、木犀草素度值较高;该方分别与亚胺培南、头孢他啶、环丙沙星有3/3/17个共同作用靶点,4种药物共同作用靶点2个,共同作用靶点主要作用于细菌能量和生化代谢、DNA复制、蛋白质功能、表面多糖形成等途径;GO和KEGG富集分析提示该方主要与调节细菌能量和生化代谢、调控DNA/蛋白质稳态、影响细菌胞质胞膜以及干预对细菌起保护作用的表面多糖和生物被膜合成等密切相关。[结论] 扶正透邪解毒化瘀方具有多成分、多靶点、多途径干预铜绿假单胞菌的特点,发挥主要干预作用的化学成分以黄酮类、甾醇类、萜类为主,直接/协同抗菌药物干预铜绿假单胞菌的机制与影响细菌遗传、代谢、生物被膜形成等相关。研究从药物作用靶点层面为从天然药物中开发抗菌药物提供了一定的思路和借鉴。     

扶正透邪解毒化瘀方对不同时间点老年肺炎大鼠炎症及免疫功能的影响

目的：探讨扶正透邪解毒化瘀方对多重耐药铜绿假单胞菌肺炎老年大鼠炎症反应与免疫功能的态影响。方法：将实验老年大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、西药对照组、中药组、中药提前给药组、中西医结合观察组,动态观察不同时间点各组老年大鼠炎症指标的变化及淋巴细胞增殖水平的变化。结果：中药提前给药组及中西医结合观察组疗效显著,中药组对感染早期的炎症水平改善明显;中西医结合观察组可使T淋巴细胞增殖能力趋于正常;中药提前给药组、中西医结合观察组能抑制感染后B淋巴细胞的增殖并使其趋于正常。结论：扶正透邪解毒化瘀方能够调节感染早期老年大鼠机体过度的免疫炎症反应,中西医结合治疗能够纠正多重耐药铜绿假单胞菌感染后紊乱的免疫状态,中药提前给药能够对多重耐药铜绿假单胞菌感染后的炎症反应及免疫紊乱起到一定的预防及治疗作用。     

铜绿假单胞菌肺炎38例临床分析

铜绿假单胞菌是常见的条件致病菌，也是医院获得性肺炎的主要病原菌之一。由于其耐药率高，给临床治疗带来困难。笔者对近2a在我院住院的38例铜绿假单胞菌肺炎患者进行回顾性分析，以进一步指导治疗。     

铜绿假单胞菌肺炎38例临床分析

铜绿假单胞菌是常见的条件致病菌,也是医院获得性肺炎的主要病原菌之一。由于其耐药率高,给临床治疗带来困难。笔者对近2 a在我院住院的38例铜绿假单胞菌肺炎患者进行回顾性分析,以进一步指导治疗。1临床资料1·1一般资料38例均为我院2005年1月—2006年12月住院患者,男25例,女13例,年龄30~95岁,平均60.21岁,其中>60岁22例(占58%)。所有患者诊断符合中华医学会呼吸病学分会制定的《社区获得性肺炎诊断和治疗指南》[1]及《医院获得性肺炎诊断和治疗指南》[2]的诊断标准。痰培养标准:连续2次以上为铜绿假单胞菌,且半定量结果均()以上。所有病例…     

芪归银对铜绿假单胞菌致肺炎大鼠免疫调节作用初探

目的:初步探索芪归银对耐药铜绿假单胞菌(PA)致肺炎大鼠的免疫影响,为全面揭示其疗效机制奠定基础。方法:在空白和模型对照基础上,设置芪归银实验组与阿莫西林西药干预对照组。采集各组肺组织,并腹主动脉采血分离血清。检测肺组织中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的蛋白表达,血清中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度,进一步深入检测肺组织中HMGB1及其受体晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、Toll-样受体4(TLR4)的基因表达。结果:模型组大鼠肺组织HMGB1蛋白及基因表达较对照组均明显升高,芪归银可一定程度降低其蛋白和基因表达;但阿莫西林对HMGB1和受体RAGE、TLR4的基因表达影响更为显著。模型组大鼠血清中IL-1β和TNF-α浓度较对照组均明显升高,芪归银可降低二者浓度,其中,对TNF-α浓度影响较阿莫西林更为显著。结论:肺炎发生时,芪归银对肌体核心免疫网络因子HMGB1及其受体RAGE、TLR4表达均有影响,对重要信号通路效应分子IL-1β和TNF-α也有影响,更深入的疗效机制有待进一步研究揭示。     

扶正透邪方体外干预多重耐药铜绿假单胞菌研究

目的探讨扶正透邪方提取物及其组分和含药血清对多重耐药铜绿假单胞菌的体外抑制作用。方法运用二倍稀释法检测扶正透邪方提取物、提取物纯化组分(粗多糖、精多糖、皂苷、酚酸+香豆素、黄酮+蒽醌)及给予大鼠1/2等效剂量、等效剂量、2倍等效剂量、8倍等效剂量提取物灌胃后所得含药血清的体外抑菌情况。结果扶正透邪方提取物、提取物纯化组分中的皂苷具有较好的体外杀菌作用,其余组分在此次实验所用浓度下没有抑菌作用;给予大鼠2倍等效剂量和8倍等效剂量扶正透邪方提取物灌胃后所得的含药血清具有较好的体外抑菌作用。结论扶正透邪方提取物及其部分组分和含药血清具有体外抑菌作用,并能影响多重耐药铜绿假单胞菌的耐药性,为其干预多重耐药铜绿假单胞菌的进一步研究提供了实验依据。     

扶正解毒化瘀方对脂多糖诱导大鼠肺巨噬细胞的调控作用

目的:观察扶正解毒化瘀方对脂多糖诱导的大鼠肺巨噬细胞中NLRP3炎性体通路及相关炎性反应递质的作用。方法:将大鼠NR8383细胞分为空白组、模型组、扶正解毒化瘀方组、哌拉西林他唑巴坦(TZP)组以及中药+TZP组。用制备扶正解毒化瘀方中药原液作用于脂多糖诱导的大鼠NR8383细胞,采用qPCR和Western blotting分别检测NLRP3炎性体通路的mRNA表达和蛋白水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测干预前后炎性反应递质的水平。结果:扶正解毒化瘀方组和TZP组均能明显降低NLRP3、Caspase-1和ASC的mRNA表达,2组NLRP3和ASC的蛋白水平明显下降,Caspase-1和IL-1β蛋白水平也有下降趋势。扶正解毒化瘀方组和TZP组均能明显降低IL-18和IL-1β炎性反应递质水平,联合用药有增效作用。结论:扶正解毒化瘀方对NLRP3炎性体作用明确,可能通过NLRP3炎性体通路延缓机体免疫炎性损伤。     

中医药治疗老年铜绿假单胞菌肺炎思路探讨

老年铜绿假单胞菌肺炎,痰热壅肺是其基本病机,正气亏虚贯穿疾病始终.临床辨病不尽相同,在感染症状明显时辨病为肺痈,多因反复感染,痰热壅肺,成痈化脓,致肺痈始作,以清热解毒化痰为主要治法;疾病的恢复期辨病为肺痿,多因久病正气亏虚,痰热郁肺,熏灼肺阴,肺痿乃成,根据气血亏虚程度,以养阴或扶阳为主要治法.临证中祛邪与扶正并举,同时注意应用扶阳药时力量不可过大,以免消灼阴液,加重病情.     

扶正透邪方对耐药铜绿假单胞菌肺部感染大鼠免疫稳态的影响及机制

目的 探讨扶正透邪方及其不同功效在不同时点对耐药铜绿假单胞菌肺部感染大鼠免疫稳态的影响及其机制。方法 将168只大鼠随机分为空白组（n=8）,模型组（n=40）,单纯透邪组（n=40）,早期扶正组（n=40）和延迟扶正组（n=40）,空白组予蒸馏水灌胃;模型组在感染后予蒸馏水灌胃;单纯透邪组在感染后予清热透邪药物免煎颗粒（3.5 g·kg^-1）灌胃;早期扶正组在感染后予扶正透邪全方免煎颗粒（10.75 g·kg^-1）灌胃;延迟扶正组在清热透邪药物免煎颗粒灌胃的基础上于感染后第3天加扶正药物免煎颗粒［（3.5+10.75） g·kg^-1］灌胃;3个治疗组灌胃每日2次,每次2 mL。除空白组外将每个组根据3 h,1 d,3 d,5 d,7 d时间点分为5个小组（n=8）。采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组大鼠肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,高迁移率族蛋白B1（HMGB1）,白细胞介素-10（IL-10）和肿瘤坏死因子-α诱导蛋白8样分子-2（TIPE2）的水平,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测HMGB1蛋白表达水平。结果 3 h时,与空白组和模型组比较,单纯透邪组、早期扶正组、延迟扶正组TNF-α含量均明显升高（P<0.05）。3 d时,与模型组比较,早期扶正组和延迟扶正组TNF-α含量明显降低（P<0.05）;与透邪组比较,早期扶正组和延迟扶正组TNF-α含量均明显降低（P<0.05）。1 d时,与模型组比较,单纯透邪组、延迟扶正组HMGB1含量均明显升高（P<0.05）。5 d时,与模型组比较,延迟扶正组HMGB1含量明显降低（P<0.05）。7 d时,与空白组比较,模型组HMGB1蛋白表达明显升高（P<0.05）;与模型组比较,早期扶正组HMGB1蛋白表达明显降低（P<0.05）。3 d时,与模型组比较,早期扶正组、延迟扶正组IL-10含量均明显升高（P<0.05）。5 d时,与单纯透邪组比较,早期扶正组IL-10含量明显升高（P<0.05）;7 d时,与单纯透邪组比较,早期扶正组、延迟扶正组IL-10含量均明显降低（P<0.05）。5 d时,与模型组比较,早期扶正组TIPE2含量明显降低（P<0.05）。7 d时,与模型组比较,单纯透邪组、延迟扶正组TIPE2含量均明显降低（P<0.05）。结论 扶正透邪全方或加用扶正药物在早期可促进炎症反应消除病原菌,晚期抑制炎症反应,避免炎症级联效应和肺组织损伤,说明扶正药物在感染后对维持机体免疫稳态具有重要作用。     

扶正透邪方联合抗生素体外干预多重耐药铜绿假单胞菌研究

目的探讨扶正透邪方含药血清联合抗生素对多重耐药铜绿假单胞菌的体外抑制作用。方法运用二倍稀释法检测单用抗生素、空白血清、含药血清及血清联合抗生素的体外抑菌情况。结果空白血清对多重耐药铜绿假单胞菌无体外抑菌作用,含药血清则具有明显的体外抑菌作用;抗生素联合含药血清较单纯抗生素和抗生素联合空白血清的抑菌情况有明显差异。结论扶正透邪方含药血清能够降低抗生素的最低抑菌浓度值、最低杀菌浓度值,含药血清与抗生素具有体外协同抑菌作用。     

铜绿假单胞菌医院感染的临床状况调查

 目的：调查铜绿假单胞菌感染的临床状况，探讨发生原因及防治措施。方法：对临床已分离的84例铜绿假单胞菌感染病例进行统计分析。结果：老年病人、危重病人、术后病人是铜绿假单胞菌的易感人群，感染部位主要是呼吸道，次之为伤口；感染持续时间在20 d以内的为71.43%；抗感染药物选用范围广；药敏报告推荐品种中50%是耐药率较高的，参照药敏用药率为42.01%。结论：调整药敏品种，提倡序贯疗法，加强对易感人群的监测。     

ICU病房铜绿假单胞菌院内感染的预防措施

目的：针对我院ICU病房铜绿假单胞菌感染,制定控制措施。方法：从检验科调取ICU病房2010年1月-2010年6月的所有化验单进行调查。结果：铜绿假单胞菌占第一位。结论：加强对ICU病房铜绿假单胞菌的监控,以减少院内感染的发生。     

黄连解毒汤联合头孢他啶治疗小鼠铜绿假单胞菌肺炎

目的通过实验证明黄连解毒汤能够协同头孢他啶治疗小鼠铜绿假单胞菌下呼吸道感染(PAP)并讨论其可能机制。方法黄连解毒汤联合头孢他啶(联合用药)与铜绿假单胞菌(PA)共培养,验证黄连解毒汤对铜绿假单胞菌杀灭作用。联合用药治疗PAP模型小鼠,测定血炎性因子、肺组织病理切片。结果与阳性对照药物相比,联合用药能够显著降低PA生物膜形成相关基因表达,提高杀灭效果。联合用药能够显著降低感染模型小鼠体内TNF-α、IFN-γ、IL-6/10/12p70等细胞因子含量,改善肺部炎细胞浸润,减少组织破坏。结论黄连解毒汤具有抑制铜绿假单胞菌生物膜形成和体内抗炎作用,与头孢他啶联合应用能够提高PA杀灭效果,抑制炎性反应,改善炎细胞浸润,减少组织破坏,显著提高PAP治疗效果。     

中医药干预多重耐药铜绿假单胞菌所致老年人肺炎的作用机制与治疗研究展望

抗菌药物的发明与临床应用大大促进了现代医学的发展,但也带来了细菌耐药等一系列问题。多重耐药菌的发生与流行导致目前抗感染治疗药物的选择压力增加,治疗难度加大,患者病死率升高。特别是多重耐药铜绿假单胞菌的抗感染治疗更为棘手。中医药的介入对抗感染领域里带来新的思路,在延缓、抑制并逆转细菌的耐药,调节耐药菌感染机体的免疫功能,提高抗菌药物的疗效等诸多方面,中医药具有独特的作用。     

健脾解毒化瘀方对肝衰竭大鼠肝脏的保护作用及对TLR4表达的影响

目的研究健脾解毒化瘀方对肝衰竭大鼠的保护作用及对Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法将大鼠随机分为正常组、模型组、对照组和实验组,除正常组外,其余组均采用D-半乳糖胺(D-gal)腹腔注射方法建立肝衰竭大鼠模型。于造模前4 d开始,正常组和模型组给予生理盐水灌胃,对照组和实验组分别给予谷氨酰胺溶液和健脾解毒化瘀方灌胃,直至造模后24 h,于造模1 d后处死大鼠,检测各组大鼠血清ALT、AST、内毒素水平,镜下观察肝组织病理学变化,取肝组织采用免疫组化法检测TLR4表达情况。结果模型组血清ALT、AST、内毒素水平均明显高于正常组(P均0.05),实验组及对照组各指标水平均明显低于模型组(P均0.05);实验组及对照组肝组织病理学分级好于模型组(P均0.05),病损评分及TLR4染色光密度值均明显低于模型组(P均0.05)。实验组与对照组间上述指标比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论健脾解毒化瘀方对肝衰竭大鼠肝功能有明显保护作用,其可能通过下调肝组织TLR4的表达而起到抗肝衰竭的作用。     

铜绿假单胞菌致病机理及中药抗感染的研究现状

归纳总结铜绿假单胞菌的致病机理和中药抗感染的研究现状,为抗铜绿假单胞菌的研究提供参考。通过查阅、整理近十年关于关铜绿假单胞菌的文献资料,从致病性的信号系统、致病机理、相关中药、所面临的问题以及未来的研究方向等方面进行总结和分析。结果显示铜绿假单胞菌通过释放毒性因子破坏宿主细胞的正常生理功能,甚至导致宿主细胞的死亡,同时信号系统是铜绿假单胞菌在机体内形成感染和难以清除极为重要的因素。中草药是天然药物中的精华,很多中药具有明显的抗细菌感染作用,且较少出现耐药性,可以为治疗铜绿假单胞菌感染提供新思路。     

铜绿假单胞菌临床感染特征及控制对策的研究进展

铜绿假单胞菌(PA)是一种重要的条件致病菌,具有重要的医学意义。该属细菌由一类革兰氏阴性、触媒阳性的杆菌组成,有动力,广泛存在于自然界,通常存在于水和土壤中。铜绿假单胞菌亦是医院内感染的重要病原菌之一,具有先天和后天获得的多重高度耐药性,一旦感染,临床治疗十分困难。随着抗菌药物在临床上的广泛应用,菌株耐药问题日益严重,定期观察致病