内毒素预处理对大鼠急性肺损伤的影响

目的　探讨肺泡巨噬细胞核因子κB( NFκB)活性变化在内毒素所致大鼠急性肺损伤中的作用。方法　 Wistar大鼠 36只 ,12只腹腔连续 3d注射脂多糖 ( L PS) 0 .5、0 .5和 1.0 mg/ kg,第 4 d腹腔注射脂多糖 ( L PS) 6 mg/ kg( L PS预处理组 ) ;12只腹腔注射内毒素 6 m g/ kg(肺损伤组 ) ;12只为正常对照组 ,腹腔注射生理盐水。注射完毕后 4 h处死大鼠 ,取肺测定肺组织湿 /干质量比 ( W/ D) ;以 99Tc标记的血清白蛋白测定肺通透指数 ;从肺灌洗液中提取肺泡巨噬细胞核蛋白 ,用凝胶电泳迁移率 ( EMSA)方法检测 NFκB活性。各组肺进行病理组织学观察。结果　 L PS预处理组肺 W/ D及通透性显著低于肺损伤组 ,而 Pa O2 和碱剩余高于肺损伤组 ;且肺损伤组及 L PS预处理组的 NFκB活性皆显著升高 ( P均 <0 .0 5 ) ,L PS预处理组高于肺损伤组。结论　内毒素预处理可减轻内毒素造成的肺损伤 ,此现象可能与肺泡巨噬细胞 NFκB活性变化有关     

生长激素对急性肺损伤的影响

目的探讨应激反应阶段生长激素（GH）对脂多糖（LPS）诱导急性肺损伤（ALI）的影响及其机制。方法112只雄性SD大鼠随机均分为ALI组和GH组，按致伤与否及致伤后的观察时间又随机均分为0、0．5、1、2、4、6和24h7个亚组。分别测定大鼠肺泡隔面积密度（PASAD），肺泡隔中性粒细胞数，肺局部肿瘤坏死因子（TNF）和白细胞介素-6（IL-6）水平，肺组织核转录因子-κB（NF-κB）阳性细胞数和肺匀浆液中NF-κB抑制蛋白（I-κBα）含量。结果致伤后ALI组大鼠PASAD进行性增大，肺泡隔中性粒细胞数进行性增多，两者均于6h达峰值，24h基本恢复正常；GH组大鼠PASAD较ALI组同时间点进一步增大，中性粒细胞数增多更明显。ALI组致伤后0．5h肺局部TNF水平开始迅速升高，1h达峰值，其后维持在较高水平，6h后逐渐恢复；致伤后1h IL-6水平开始明显升高，4h达峰值，6h后逐渐恢复；GH组大鼠IL-6水平升高更明显。ALI组致伤后0．5h肺组织中NF-κB阳性细胞数明显增多，4h达峰值，6h开始恢复；GH组大鼠肺组织NF-κB阳性细胞数明显多于ALI组同时间点。伤后0．5h I-κBn含量开始明显下降，4h达最低值，6h后开始回升；GH组大鼠肺组织I-κBa含量下降更明显。相关性分析显示，PASAD、肺组织TNF和IL-6水平及肺泡隔中性粒细胞浸润程度与NF-κB的表达、活化程度呈正相关。结论NF-κB表达、活化在LPS诱导ALI的发病过程中有重要作用。应激反应阶段应用GH可加剧LPS诱导的ALI。其机制与促进肺局部NF-κB表达与活化而加剧肺局部炎症反应有关。     

核因子-κB在小鼠急性肺损伤中的作用

目的　探讨核因子 (NF) κB在内毒素 (LPS)诱导的急性肺损伤小鼠发病中的作用。方法　腹腔内注射LPS诱导小鼠急性肺损伤模型。LPS注射后 0、 1、 3、 6、 12测定肺湿重 /干重比值 (W/D) ,迁移率改变电泳法检测肺组织NF κB活性 ,同时酶联免疫吸附法测定肺组织匀浆中肿瘤坏死因子 (TNF) α、白介素 (IL) 10浓度 ,RT PCR检测mRNA表达。结果　LPS注射后 ,W/D比值明显增高 ,6h升高最明显 (4 82± 0 10 ) ,显著高于LPS注射前 (3 6 7± 1 0 4 ,P <0 0 5 )。LPS注射后肺组织核蛋白NF κB活性明显增强 ,6h达到峰值 (40 5 7± 6 2 4 ) ,显著高于LPS注射前 (44 8± 30 9,P <0 0 5 )。肺组织匀浆TNF α和IL 10浓度分别在LPS注射后 6h和 12h升高最明显 ,分别为 (197 1± 5 2 4 )pg/ml和 (6 4 9± 39 7)pg/ml,显著高于LPS注射前 [分别为 (6 1 2± 10 7)pg/ml和 (71 6± 15 9)pg/ml]。与LPS注射前比较 ,LPS注射后 3～ 12h ,肺组织匀浆TNF α和IL 10mRNA表达显著增高。肺组织病理显示肺泡出血、水肿、大量炎症细胞浸润 ,电镜下见Ⅰ型肺泡上皮细胞断裂 ,Ⅱ型肺泡上皮细胞变性。结论　LPS导致肺组织NF κB的活化 ,介导炎症介质大量表达 ,参与急性肺损伤发生     

大鼠ANP肺损伤中核因子-kB活化对一氧化氮的影响

目的 研究核因子 -κB(NF-κB)活化对大鼠急性坏死性胰腺炎 (ANP)肺损伤中一氧化氮 (NO)的作用。 方法 逆行性胰胆管注射5 %牛磺胆酸钠ANP模型 ,随机分成3组(每组10只) ,对照组 ,ANP组 ,NF-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷 (PDTC)组。观察模型建立后12h,血清淀粉酶、动脉血氧分压(PaO2)、NO的变化 ,胰腺、肺组织病理变化 ;诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及NF-κBp65mRNA在肺组织的表达。结果 PDTC组与ANP组比较 ,血清淀粉酶明显下降 ,由 (8231.20±848.70)U/L降至 (4205.20±1611.49)U/L;NO明显下降 ,由 (178.24±12.00)umol/L降至 (71.00±7.03)umol/L ;胰腺、肺组织损伤减轻 ,iNOS及NF -κBp65mRNA表达下降。结论 抑制NF -κB活化可降低ANP大鼠NO的产生 ,减轻ANP大鼠胰腺炎肺损伤程度     

核转录因子-κB信号通路在内毒素致急性肺损伤中的作用

急性肺损伤 (acutelunginjury ,ALI)是由各种致病因素(如创伤、休克、感染、中毒等 )导致的急性进行性呼吸衰竭 ,严重的ALI被定义为急性呼吸窘迫综合征 (ARDS)。在细胞水平上它表现为单核 /巨噬细胞、中性粒细胞 (PMN)等炎性细胞的浸润 ;在分子水平上则表现为众多炎症细胞因子、黏附分子的过度表达 ,伴有多种炎症介质的产生。内毒素损害是导致ALI发病的最常见形式之一 ,对其致病机制的研究现已逐渐深入到分子及信号转导水平。内毒素可通过激活多条信号转导通路最终将胞外信号转变为核内信号 ,其中 ,核转录因子 -κB(nuclearfactorofk…     

急性肺损伤发病机制和治疗现状

急性肺损伤发病机制非常复杂,趋向性认为是炎症细胞内免疫信号转导紊乱在其病理机制中发挥重要作用,其治疗目前尚无特效手段;现代基因技术靶向调控NF-κB 信号通路或许能为ALI的临床治疗开辟新途径.     

核因子-κB与急性肺损伤／急性呼吸窘迫综合征

急性肺损伤／急性呼吸窘迫综合征（ALI/ARDS）为多种疾病所引起，表现为急性呼吸困难、低氧血症和双侧肺部浸润性病变。发病机制错综复杂，其病理生理基础是多种炎症细胞及炎症介质参与的炎症反应，多种效应细胞和炎症介质是参与ALI／ARDS两个主要因素，对ALI／ARDS的发病机制起关键作用。核因子-κB是一种具有基因转录调节作用的核蛋白，调控多种炎性细胞因子的表达，它在ALI／ARDS中的作用日益引起人们的关注。本文对近年NF-κB与ALI／ARDS发病关系的研究进展作一综述。     

法舒地尔对脂多糖诱导的急性肺损伤大鼠肺组织中核因子-κB激活的影响

目的观察法舒地尔对脂多糖诱导的急性肺损伤大鼠肺组织中核因子-κB激活的影响。方法 45只雄性SD大鼠随机分为生理盐水对照组、脂多糖组与法舒地尔干预组各15只,脂多糖组和干预组采用股静脉注射脂多糖(5mg/kg)建立急性肺损伤模型,干预组在脂多糖注射前30min腹腔注射法舒地尔(10mg/kg),造模后3,6,12h观察肺组织形态学改变,免疫组织化学法检测肺组织核因子-κB水平,Western blot法检测肺组织核因子-κB及核因子-κB抑制蛋白的表达情况。结果脂多糖组肺组织病理形态学改变明显,干预组明显减轻;脂多糖组肺组织核因子-κB阳性信号较对照组明显增强(P<0.05),分布于中性粒细胞、巨噬细胞、支气管黏膜上皮细胞和肺泡上皮细胞内,干预组核因子-κB阳性信号较脂多糖组明显减少(P<0.05);Western blot显示脂多糖组各时间点肺组织核因子-κB表达水平较对照组明显增加,干预组较脂多糖组降低(P<0.05),脂多糖组核因子-κB抑制蛋白α表达水平较对照组明显下降,干预组较脂多糖组升高(P<0.05)。结论法舒地尔可抑制脂多糖诱导的急性肺损伤大鼠肺组织核因子-κB的激活,减轻其肺损伤程度。     

核因子-κB在急性坏死性胰腺炎大鼠肺损伤中的作用

目的 探讨核因子-κB（NF-κB）在急性坏死性胰腺炎大鼠肺损伤发病中的作用。方法制作大鼠急性坏死性胰腺炎（ANP）模型,随机分为正常对照组、急性坏死性胰腺炎组。应用原位杂交法检测肺组织NF-κB p65mRNA的表达。结果 ANP组肺组织病理改变明显;NF-κB p65mRNA在ANP时除肺泡的细胞质内有表达外,出现细胞核内表达,随时间的延长表达逐渐增加。结论 NF-κB活化是急性坏死性胰腺炎早期细胞内重要事件,NF-κB与ANP的肺损伤密切相关。     

大鼠ANP肺损伤中核因子-κB活化对一氧化氮的影响

目的研究核因子-κB( NF-κ B)活化对大鼠急性坏死性胰腺炎( ANP)肺损伤中一氧化氮( NO)的作用.方法逆行性胰胆管注射 5%牛磺胆酸钠 ANP模型,随机分成 3组 (每组 10只 ),对照组, ANP组, NF-κ B抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷( PDTC)组.观察模型建立后 12h,血清淀粉酶、动脉血氧分压 (PaO2)、 NO的变化,胰腺、肺组织病理变化;诱导型一氧化氮合酶 (iNOS) 及 NF-κ B p65 mRNA在肺组织的表达.结果 PDTC组与 ANP组比较,血清淀粉酶明显下降,由( 8231.20± 848.70) U/L降至( 4205.20± 1611.49) U/L; NO明显下降,由( 178.24± 12.00) umol/L降至( 71.00± 7.03) umol/L;胰腺、肺组织损伤减轻, iNOS 及 NF-κ B p65 mRNA表达下降.结论抑制 NF-κ B活化可降低 ANP大鼠 NO的产生,减轻 ANP大鼠胰腺炎肺损伤程度.     

低分子肝素对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用

目的 探讨低分子肝素对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)的影响以及对由大鼠盲肠结扎穿孔(CLP)所致的急性肺损伤的保护作用.方法 144只SPF级雄性SD大鼠(体质量200～220 g)被随机分为假手术组(48只)、盲肠结扎穿孔术(CLP)后常规治疗组(48只)及常规加低分子肝素治疗组(48只),分别施以假手术(A组)或CLP(B组和C组).术后各组立即腹腔注射生理盐水(NS)2 mL及头孢曲松(30 mg/kg)、c组加用低分子肝素10 u(50 U/kg).以术后3、6、12、18、24、48 h为观察点,观察各组大鼠术后活动、进食、竖毛、腹泻、眼球凹陷、呼吸等情况;活杀并行脓毒症大鼠评分及观察死亡率、肺湿干质量比(W/D)及病理学变化.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术测肺组织HMGB-1 mRNA的表达;采用Western blot法检测肺组织HMGB-1蛋白的表达.结果注射低分子肝素(达肝素钠)(50 U/kg)的脓毒症大鼠死亡率及肺部高迁移率族蛋白-1的蛋白表达及其mRNA的表达与对照组比较均明显降低(P<0.05),低分子肝素干预组中脓毒症大鼠评分及肺湿干比、病理损害均减少.结论低分子肝素能够抑制CLP)引起的脓毒症过程中的晚期炎症介质释放,改善CLP模型(严重腹腔感染)引起的急性肺损伤过程中的肺干湿质量比、病理改变及死亡率.本实验推测这种作用是通过低分子肝素对炎症引起的肺损伤中凝血-炎症轴的影响而实现的.     

大黄素对脓毒症急性肺损伤大鼠水通道蛋白1表达的影响

目的探讨大黄素对脓毒症急性肺损伤大鼠水通道蛋白1(AQP-1)表达的影响。方法成年雄性SD大鼠120只,体质量200～230g。大鼠分为6组:空白对照组、假手术组、模型组、大黄素低剂量预处理组、大黄素中剂量预处理组、大黄素高剂量预处理组,每组各20只。采用盲肠结扎穿孔法复制脓毒症大鼠模型,假手术组探查取出盲肠后还纳腹腔。各组按取材时间不同又分为造模后3、6、12、24小时4个时相点,每个时相点5只大鼠。分别用实时荧光多聚酶链反应(PCR)和蛋白免疫电泳(western-blot)法检测肺组织水通道蛋白1信使RNA(AQP-1mRNA)和蛋白的表达。结果各组3小时AQP-1表达差异无统计学意义,造模后6小时AQP-1逐渐降低,12小时达最低。大黄素中、高剂量预处理组12小时AQP-1均显著高于同剂量其他时间点(P0.01),且两组之间差异无统计学意义(P0.05)。结论脓毒症可造成大鼠AQP-1表达明显降低,早期预防性使用中高剂量大黄素可明显提高AQP-1的表达,从而有效减轻脓毒症大鼠肺水肿的程度。     

脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织细胞凋亡的研究

目的观察脓毒症急性肺损伤（ALI）大鼠肺组织的细胞凋亡情况。方法24只SPF级SD大鼠采用盲肠结扎穿孔术（CLP）复制脓毒症模型,分别于CLP后0、12、36和72h颈椎脱臼法处死大鼠,取肺组织。行肺组织HE染色,观察病理变化,以透射电镜、TUNEL法检测细胞凋亡。结果HE染色可见,CLP后12、36、72h肺泡间隔增宽,间质充血水肿,肺泡腔变窄,炎症细胞渗出。TUNEL法检测发现,CLP后12、36、72h肺组织内细胞凋亡指数（Al）增加,其中36hAl值最高（P〈0．01）。透射电镜证实细胞凋亡的特征性改变。结论脓毒症大鼠肺组织的Al明显增加,细胞凋亡可能在脓毒症ALI发生、发展中起着重要作用。     

Mortality in sepsis versus non-sepsis induced acute lung injury

Introduction  

Sepsis-induced acute lung injury (ALI) has been reported to have a higher case fatality rate than other causes of ALI. However, differences in the severity of illness in septic vs. non-septic ALI patients might explain this finding.     

鞭毛蛋白与盲肠结扎穿孔脓毒症致大鼠肺损伤的对比观察

目的 观察鞭毛蛋白与盲肠结扎穿孔脓毒症致大鼠肺损伤的差异。方法 鞭毛蛋白经颈静脉注射以复制大鼠急性肺损伤(ALI)模型。ELISA法检测大鼠外周血血清中TNF-α含量,并观察动脉血气分析、肺组织湿干比值(W/D)和肺病理变化程度。结果 用鞭毛蛋白成功建立了大鼠肺损伤模型。鞭毛蛋白致肺损伤大鼠的动脉氧分压(PaO2)、TNF-α、W/D和肺病理变化程度较脓毒症致肺损伤大鼠有显著性差别。结论 鞭毛蛋白可用于急性肺损伤模型的建立。     

Role of tumor necrosis factor in sepsis and acute lung injury

TNF is a small protein secreted by activated monocytes and macrophages that mediates the in vivo effects of endotoxin. When injected into experimental animals, TNF reproduces the picture of septic or endotoxin shock. In addition, antibodies to TNF protect animals against the deleterious effects of IV injections of either LPS or live bacteria. Specifically, the available evidence suggests that TNF may be necessary for the organ injury and failure seen in sepsis. However, TNF probably is not the final common pathway to shock and tissue injury. Inhibition of cyclooxygenase is protective from the lethal effects of both LPS and TNF infusion, suggesting that prostanoids play an important, and perhaps more proximal role in the generation of tissue injury. In addition, TNF is produced and cleared from the blood-stream within a short period of time after an LPS stimulus, suggesting that TNF sets into motion a chain of events that may be self-perpetuating even in the absence of further TNF stimulus. In the near future, the treatment of sepsis may involve the administration of antibodies both to TNF and to LPS. Cyclooxygenase inhibitors should also begin to play a role in the therapy of sepsis. In the more distant future it is likely that we will be able to manipulate the state of activation of genes that code for TNF to exert some control over its production and secretion. It is perhaps within our grasp to finally reduce the morbidity and mortality of this lethal condition.     

环磷酰胺对急性百草枯中毒小鼠肺损伤的保护作用

目的 探讨环磷酰胺对百草枯中毒致小鼠急性肺损伤的保护作用.方法 120只小鼠,随机分为4组,分别为空白对照(NS)组、百草枯对照(PQ)组、环磷酰胺对照(CP)组及环磷酰胺干预(T)组,NS对照组给予生理盐水×3 d,PQ组先给予生理盐水×2 d,第3天给予百草枯20 mg/kg染毒,CP组给予环磷酰胺80 mg/kg×2 d,第3天给予生理盐水,T组给予环磷酰胺80 mg/kg×2 d,第3天给予百草枯20 mg/kg染毒.染毒后第1、3、5、7天观察小鼠肺组织的病理变化并测定小鼠肺组织中的髓过氧化物酶(myeloperoxida, MPO)含量及血清中的肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α, TNF-α)及白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)的含量并进行比较. 结果 PQ组染毒后血清IL-6含量第1天明显升高,后逐渐下降,多高于NS组,差异有统计学意义,血清TNF-α含量及肺组织MPO含量亦如此;经环磷酰胺预处理后的中毒小鼠,血清IL-6、肺组织MPO含量在第3、5天均明显低于PQ组,而第1、7天时差异无统计学意义,血清TNF-α含量第1、3天时显著低于PQ组,第5、7天差异无统计学意义.从肺组织病理来看,经环磷酰胺预处理的中毒小鼠肺组织的炎症细胞浸润较PQ组减少.结论 环磷酰对急性百草枯中毒所致肺损伤可能有一定的保护作用.     

A novel animal model of sepsis after acute lung injury in sheep

OBJECTIVE: Patients with acute lung injury after smoke inhalation often develop pneumonia subsequently complicated by sepsis. This often is a fatal complication. The aim of this study was to develop a standardized and reproducible model of hyperdynamic sepsis after smoke inhalation in sheep. DESIGN: Prospective, experimental study in sheep. SETTINGS: Experimental laboratory in a university hospital. SUBJECTS: Twenty-one female Merino ewes. INTERVENTION: Animals were anesthetized and surgically prepared for this chronic study. After a week of recovery, baseline data were collected. After tracheostomy was performed, sheep were connected to a volume-controlled ventilator. Acute lung injury was produced by insufflating the lungs with 48 breaths of cotton smoke. During halothane anesthesia, live bacteria suspended in a 30-mL saline solution containing 2-5 x 10(11) colony-forming units were instilled through a bronchoscope into the right lower and middle lung lobes (10 mL each) and left lower lung lobe (10 mL; n = 10). Eleven sheep were given smoke but not bacteria. After injury and the bacterial challenge, the animals were ventilated mechanically with 100% oxygen. The animals were monitored for 48 hrs. was detected in blood cultures after 14-48 hrs. MEASUREMENTS AND MAIN RESULTS: The sheep developed a hyperkinetic cardiovascular response concomitant with a decrease in Pao similar to severe sepsis in human patients who meet the criteria for acute respiratory distress syndrome (PaO2 /FIO2 <200). These changes were more severe than in animals exposed to smoke inhalation alone. Mean arterial pressures at 48 hrs in the smoke-alone and the smoke + sepsis group were 85.5 +/- 5.2 and 68.1 +/- 7.6 mm Hg, respectively (mean +/- se, p<.05). CONCLUSION: This animal model closely resembles hyperdynamic sepsis in humans and may be of great value for studies of sepsis with smoke inhalation.     

乌司他丁对脓毒症大鼠肺损伤的保护作用

目的探讨乌司他丁(UTI)对脓毒症性急性肺损伤(ALI)的保护作用。方法采用盲肠结扎穿孔(CLP)制作SD大鼠脓毒症ALI模型,随机分ALI组、糖皮质激素(GC)治疗(GC)和UTI治疗(UTI)组。成模后3 h、6 h、12 h开腹抽血行动脉血气分析,提取支气管肺泡灌洗液(BALF)检测总蛋白(TP)、总磷脂(TPL)、饱和磷脂酰胆碱(DSPC)含量,测定肺组织湿/干重(W/D)比值和肺组织匀浆中髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)含量,血浆中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-6(IL-6)含量,观察与比较各组肺组织病理改变。结果UTI组PaCO_2、PaO_2、HCO_3~-、BE与GC组差异无统计学意义(P＞0．05),但高于ALI组(P＜0．05);两组W/D均明显低于ALI组(P＜0．01),BALF中TP显著低于ALI组(P＜0．01),TPL和DSPC/TPL高于ALI组(P＜0．05、P＜0．01),但两组间差异无统计学意义(P＞0．05);两组肺组织匀浆中MPO、MDA含量均明显低于ALI组(P＜0．01),UTI组MPO含量还明显高于GC组(P＜0．05);两组血浆TNF-α、IL-6水平均低于ALI组(P＜0．01),UTI组IL-6高于GC组(P＜0．05);两组病理变化均较ALI组轻(P＜0．01)。结论UTI能改善缺氧、过度通气和酸中毒,减轻肺水肿和肺组织病理损伤,具有抗氧化和抑制炎性细胞因子释放作用,其抗炎作用与GC相似。     

丙酮酸乙酯对大鼠脓毒症肺损伤的保护作用

目的观察丙酮酸乙酯对脓毒症肺损伤大鼠肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白细胞介素-1β（IL—1β）和高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达的影响，探讨丙酮酸乙酯治疗脓毒症肺损伤的免疫调节机制。方法40只Wistar大鼠随机分为正常对照组、假手术组、脓毒症肺损伤组和丙酮酸乙酯（40mg／kg，每隔6h腹腔内注射一次）治疗组，每组10只。用ELISA法检测2h血清TNF—α、IL—1β表达。所有犬鼠24h后活杀，Western blotting法检测肺组织HMGB1的表达，观察PaO2、PaCO2和pH等血气变化以及肺组织的病理变化。结果脓毒症肺损伤组血清TNF—α、IL—1β和肺组织HMGB1表达显著增高，PaO2、pH降低，PaCO2升高，病理显示明显肺损伤（P均〈0．01）。丙酮酸乙酯治疗后血清TNF—α、IL—1β和肺组织HMGB1表达显著下调，PaO2、pH升高，PaCO2降低，病理显示肺损伤程度减轻（P均〈0．01）。结论丙酮酸乙酯能显著抑制TNF—α、IL—1β和HMGB1等早晚期炎症因子，改善低氧血症，对脓毒症肺损伤有明显保护作用。