癌基因蛋白抗原肽与肿瘤特异性免疫治疗

近年来有关ＭＨＣ－ＴＣＲ与癌基因蛋白抗的肽的研究进展迅速，三者之间在空间结构上相互识别和有机结合，可以诱导以肿瘤特异性ＣＤ８ＣＴＬ增殖为主的细胞免疫应答，在Ｐ＾２１，Ｐ＾１２５，Ｐ＾５３Ｐ＾２１０ＢＣＲ－ＡＢＬ抗原肽的研究中已取得一定成果，有可能利用癌基因蛋白的肽，进行肿瘤特异性免疫治疗。     

MHCⅠ—肽四聚复合物：检测抗原特异性CTL的新技术

以ＭＨＣⅠ－肽四聚复合物标民ＣＴＬ的ＦＡＣＳ检测法,是新近建立及发展的检测ＣＴＬ的新技术。该技术以ＭＨＣⅠ类分子、β２ｍ、特异性抗原多肽和生物素－亲和素构建四聚复合物,模拟特异性靶细胞膜表面的ＭＨＣⅠ类分子－－肽复合物,识别并结合Ｔ细胞 的特异性ＣＴＬ,以流式细胞仪荧光检测和分拣ＣＴＬ。该技术不仅可定性检测ＣＴＬ,还可定量测定了Ｔ细胞群中特异性ＣＴＬ的百分率,将在病毒感染、肿瘤等疾病的细胞免疫学研     

癌基因蛋白—一类重要的肿瘤抗原

癌基因蛋白产物具备抗原的理化性质和异物性，在肿瘤细胞中可过度表达，在体内能激发机体的免疫系统产生相应的抗体和ＣＴＬ细胞，因而被认为是一类重要的肿瘤抗原，在此基础上利用癌基因蛋白作为肿瘤免疫治疗的靶目标，已取得可喜结果。     

癌基因蛋白──一类重要的肿瘤抗原

癌基因蛋白产物具备抗原的理化性质和异物性，在肿瘤细胞中可过度表达，在体内能激发机体的免疫系统产生相应的杭体和ＣＴＬ细胞，因而被认为是一类重要的肿瘤抗原，在此基础上利用癌基因蛋白作为肿瘤免疫治疗的靶目标，已取得可喜结果。     

MHC I类分子及与之结合的抗原肽

细胞内生性抗原需降解成抗原肽，由ＭＨＣ Ｉ类分子呈递给ＣＤ８＾＋细胞识别，从而诱导特异性细胞免疫应答。ＭＨＣ Ｉ类分子与抗原肽之间的结合表现出ＭＨＣ等位基因特异性，根据此特点可以预测抗原的Ｔ细胞识别表位，对于阐明自身免疫病和器官移植排斥反应的机理，指导人工合成肽疫苗用于病毒感染及肿瘤的免疫防治均具有重要意义。     

纳米微粒包装肿瘤抗原诱导CTL抗肿瘤免疫

用纳米微粒包装肿瘤抗原,并探讨其诱导产生CTL的免疫学特性和杀瘤活性。采用复乳溶剂蒸发法制备包含有恶性黑色素瘤抗原肽Mart-1-27-35纳米微粒;扫描电镜观察所制得纳米颗粒的形态。用NP-Mart-1-27-35诱导抗原特异性CTL并用ELISPOT法和LDH法检测其特性和杀瘤活性。结果:电镜观察所制得的纳米颗粒为圆形,平均直径为(208.52±12.43)nm。HPLC分析纳米-抗原肽的抗原载入量为6.72%±0.28%,平均包封率为91.23%±3.56%;ELISPOT检测表明纳米微粒包装的抗原肽能引起较强的免疫反应,产生分泌IFN-γ的细胞斑点数分别为(476.37±29.43)/2×104,显著高于单纯使用抗原肽时所产生的斑点数;LDH检测显示与单纯使用抗原肽相比,纳米-抗原肽诱导的CTL对Mart-1+细胞的杀伤能力显著提高。纳米微粒包装的抗原肽能够显著增强并延长DC对抗原的提呈作用;其诱导产生的CTL能以MHC I限制的方式特异识别和杀伤表达相应抗原的肿瘤细胞。     

弱酸洗脱提取的肿瘤抗原肽致敏的树突状细胞对CTL的体内外激活效应

弱酸洗脱提取小鼠红白血病细胞膜表面肿瘤抗原肽,用于致敏树突状细胞（ｄｅｎｄｒｉｔｉ ｃｅｌｌｓ,ＤＣ）观察其对细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）的体内外激活效应。方法以ＰＨ３．３的枸橼酸－磷酸盐缓冲液室温下处理ＦＢＬ－３小鼠红白血病细胞５ｍｉｎ,流式细胞术检测洗脱效率,弱酸洗脱的抗原肽经ＳｅｐＰａｋＣ１８柱提取纯化,用于致敏ＤＣ,检测其体外刺激ＣＴＬ细胞株增殖的能力及体内激发特异性抗肿瘤免疫应答的能力。     

肿瘤抗原肽研究新进展

肿瘤抗原肽的寻找已成为当前肿瘤研究领域的一大热点。它包括癌基因蛋白抗原肽、致癌病毒基因抗原肽、肿瘤特异性抗原肽和组织特异性分化抗原肽等。这些抗原肽在与MHC类分子结合后 ,提呈到细胞表面被相应T细胞受体识别 ,从而激活细胞毒性T淋巴细胞的活性 ,使机体产生特异性抗肿瘤免疫应答。因而它们在肿瘤免疫接种和免疫治疗等方面有着广阔的应用前景。     

MHCⅠ类分子及与之结合的抗原肽

细胞内生性抗原需降解成抗原肽，由ＭＨＣⅠ类分子呈递给ＣＤ８￣＋Ｔ细胞识别，从而诱导特异性细胞免疫应答。ＭＨＣⅠ类分子与抗原肽之间的结合表现出ＭＨＣ等位基因特异性，根据此特点可以预测抗原的Ｔ细胞识别表位，对于阐明自身免疫病和器官移植排斥反应的机理，指导人工合成肽疫苗用于病毒感染及肿瘤的免疫防治均具有重要意义。     

MHC-肽四聚体的研究进展

四聚体技术是一种可直接对抗原特异的T淋巴细胞进行标记的新方法.MHC-肽四聚体可被用于抗原特异的T细胞的表位分析,T细胞的直接分离与克隆,T细胞功能检测以及作为激活T细胞的刺激物和进行原位染色等方面的研究.     

MHCⅠ类分子呈递抗原的途径与肽疫苗研制的进展

主要组织相容性复合体（ＭＨＣ）Ⅰ类分子主要呈递内源合成抗原，供ＣＤ８＋细胞毒Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）识别，抗原呈递转运子（ＴＡＰ）与肽相互作用是特异性抗原肽转运和呈递的关键。外源性抗原通过树突状细胞和巨噬细胞等专职性抗原呈递细胞（ＡＰＣ）加工处理后也可被ＭＨＣⅠ类分子呈递。此替代途径不直接依赖于蛋白酶体或ＴＡＰ的转运作用，是人体内部免疫防御监视机制的理想补充。ＡＰＣ－ＭＨＣⅠ类分子ＣＴＬ应答的深入认识是肽疫苗研制的基础。     

sHLA-A*0201-抗原肽四聚体的构建与功能检测

目的：构建有功能的sHLA-A＊0201-抗原肽四聚体，建立一套HLA Ⅰ类分子／抗原肽的四聚体制备技术。方法：利用基因工程及体外折叠技术构建sHLA-A＊0201-LMP2A426-434复合物分子，并在BirA酶的作用下生物素化。与荧光标记的亲和素衍生物以分子数4：1结合而形成HLA-A＊0201-LMP2A426-434四聚体。获得的四聚体对长期混合淋巴细胞培养中增殖的抗原特异性CTL进行检测，同时用细胞毒实验验证。结果：荧光标记的亲和素与生物素化的HLA-A＊0201-抗原肽复合物分子正确结合，制备的四聚体能够与长期混合淋巴细胞培养出的特异性T细胞结合。结论：从结构与功能上证实成功地获得有功能的HLA-A＊0201-抗原肽复合物四聚体。为进一步研究T细胞识别机制与功能奠定了基础，也为过程复杂的HLA-抗原肽四聚体制备提供了可行的免疫学监控方法。     

MHCI—肽四聚复合物:检测抗原特异性CTL的新技术

以MHCI—肽四聚复合物标记CTL的FACS检测法 ,是新近建立及发展的检测CTL的新技术。该技术以MHCI类分子、β2 m、特异性抗原多肽和生物素 亲和素构建四聚复合物 ,模拟特异性靶细胞膜表面的MHCI类分子—肽复合物 ,识别并结合T细胞群中的特异性CTL ,以流式细胞仪荧光检测和分拣CTL。该技术不仅可定性检测CTL ,还可定量测定T细胞群中特异性CTL的百分率 ,将在病毒感染、肿瘤等疾病的细胞免疫学研究中起重要作用。     

同种T细胞前体频率与MHC-抗原肽种类呈正相关

目的用种类数目不同的肽段加载T2（表达空载HLA-A2分子）细胞与HLA-A2阴性个体的PBL混合培养，探讨同种反应性CIL前体的频率与同种抗原表位种类多少的关系。方法通过人工合成HLA-A2限制性单一病毒抗原肽、10种细胞正常成分的肽段以及冻融酸处理法制备细胞混合肽。加载T2细胞，经丝裂霉素灭活后作为刺激细胞，与PKH67预染HLA-A2阴性个体PBL进行混合淋巴细胞培养，PKH67荧光强度随细胞增殖而递减，通过流式细胞仪增殖软件（ModFit）分析同种T细胞前体频率。结果单独PBL增殖不明显；空载T2细胞刺激同种反应性CTL前体的频率为0．052819；加载单一表位肽的T2细胞刺激时，前体的频率为0．030429；10种HLA-A2自身限制性的混合抗原肽负载时，前体的频率为0．144942；混合多肽负载时，前体的频率为0．203649。结论本研究结果显示了同种T细胞前体的频率随着同种抗原表位种类的增多而增高，与同种抗原的密度不相关；支持了强烈的同种反应的主要原因是同种细胞表面表达极其繁多的T细胞识别表位（即pMHC）。     

体外构建的HSP70-肝癌抗原肽诱导抗原肽特异性免疫反应1

目的研究体外构建的HSP70-肝癌抗原肽复合物诱导针对肝癌的特异性免疫反应能力,为该复合物的临床应用奠定基础.方法在体外构建HSP70-肝癌抗原肽复合物,联合应用粒/巨细胞集落刺激因子(GM-CSF)及白介素-4(IL-4)直接从志愿者外周血中培养出DC;以HSP70、HSP70-肝癌抗原肽、抗原肽分别刺激DC,DC激活同源的T淋巴细胞产生细胞毒性T淋巴细胞(CTL),检测其杀伤T2细胞和肝癌细胞系的能力.结果HSP70-抗原肽、抗原肽均可诱导CD8+的抗原肽特异性CTL,而前者的诱导效果更强.结论体外构建的HSP70-抗原肽复合物具有免疫原性,HSP70可以增强抗原肽诱导特异性免疫反应的能力,HSP70-抗原肽复合物有可能作为肽疫苗用于临床肿瘤免疫治疗.     

应用基因重组病毒表达产物筛选FBL3小鼠白血病肿瘤特异性抗原…

肿瘤特异性抗原是肿瘤免疫研究中心课题，众多的研究表明Ｔ细胞在肿瘤免疫中起重要作用，因而寻长Ｔ细胞所识别的肿瘤特异性表位并以为瘤苗的靶抗原有重要的研究价值，以一系列重组Ｆ－ＭｕＬＶｇａｇ病毒载体，用已建立的ＦＢＬ３－ＣＴＬ克隆筛选，并通过Ｈ－２Ｉ类分子结合实验，精确地测得Ｆ－ＭｕＬＶｇａｇ中一个能被为ＦＢＬ３－ＣＴＬ克隆所识别的表位（ＣＣＬＣＬＴＶＦＬ，ｐ８５～９３），并以此ｐ８５～９３合成肽免疫动     

MHC-肽四聚体的研究进展

四聚体技术是一种可直接对抗原特异的T淋巴细胞进行标记的新方法。MHC-肽四聚体可被用于抗原特异的T细胞的表位分析,T细胞的直接分离与克隆,T细胞功能检测以及作为激活T细胞的刺激物和进行原位染色等方面的研究。     

树突状细胞与特异性肿瘤免疫治疗

树突状细胞（DC）是体内功能最强的抗原提呈细胞（APC）,也是抗原特异性免疫应答的始动者,由DC活的T细胞介导的免疫应答在机体抗肿瘤过程中起着主导作用。本主要对DC参与抗肿瘤的机制,DC与肿瘤免疫逃逸的关系及近年来DC在肿瘤生物治疗方面的研究进展作一综述,以DC为基础的肿瘤治疗主要有两种方式：（1）免疫治疗：肿瘤抗原体外冲击致敏DC后回输体内;（2）基因治疗：以目的基因转染DC后回输体内。     

EB病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞与肿瘤免疫治疗研究进展

EB病毒 (EBV)与多种人类肿瘤的密切关系已引起人们的高度重视 ,它在不同的肿瘤细胞上有不同的病毒基因表达谱。近来 ,EBV特异性CTL开始被用于EBV相关肿瘤的免疫治疗并已取得初步疗效 ,但仍存在诸多问题 ,如病毒抗原免疫原性很弱及肿瘤细胞本身分泌的某些细胞因子均减弱了EBV特异性CTL对肿瘤细胞的杀伤作用。本文就上述内容做一综述     

体外构建的HSP70—肝癌抗原肽诱导抗原肽特异性免疫反应

目的：研究体外构建的HSP70-肝癌抗原肽复合物诱导针对肝癌的特异性免疫反应能力,为该复合物的临床应用奠定基础。方法：在体外构建HSP70-肝癌抗原肽复合物,联合应用粒/巨细胞集落刺激因子（GM-CSF）及白介素-4-（IL-4）直接从志愿者外周血中培养出DC;以HSP70、HSP70-肝癌抗原肽、抗原肽分别刺激DC,DC激活同源的T淋巴细胞产生细胞毒性T淋巴细胞（CTL）,检测其杀伤72细胞和肝癌细胞系的能力。结果：HSP70-肝癌抗、抗原肽均可诱导CD8^ 的抗原肽特异性CTL,而前者的诱导效果更强。结论：体外构建的HSP70-抗原肽复合物具有免疫原性,HSP70可以增强抗原肽诱导特异性免疫反应的能力,HSP70-抗原肽复合物有可能作为肽疫苗用于临床肿瘤免疫治疗。