糖尿病高糖高脂对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的作用研究

目的探讨糖尿病高糖高脂状态对四氯化碳(CCl_4)诱导的化学性肝纤维化进展的影响。方法采用高脂饲料及链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型,四氯化碳诱导肝纤维化模型,高脂饲料、STZ及CCl_4诱导糖尿病合并肝纤维化模型,动态监测各组大鼠体重、血糖及相关血清学指标;HE染色观察各组大鼠的肝脏病理学变化;Western blot、q-PCR检测各组大鼠肝组织中α-SMA和Collagen Ⅰ的表达。结果与对照组大鼠相比,糖尿病组和糖尿病合并肝纤维化组大鼠体重明显下降,血糖血脂均升高,肝纤维化组无明显差异;HE染色及血清AST/ALT检测表明,与对照组大鼠肝组织相比,糖尿病大鼠、肝纤维化大鼠及糖尿病合并肝纤维化大鼠肝组织均有不同程度的肝损伤,以糖尿病合并肝纤维化组大鼠最为严重;3组大鼠肝组织α-SMA和Collagen Ⅰ表达较对照组也不同程度增加,以糖尿病合并肝纤维化组大鼠最为明显,与单纯糖尿病组和肝纤维化组比较,差异有显著性。结论糖尿病可诱发肝损伤,加剧CCl_4诱导的大鼠肝纤维化病变。     

苦杏仁苷对肾纤维化大鼠的保护作用及其机制

目的 探讨蒙古扁桃苦杏仁苷对肾纤维化大鼠的作用及其机制。方法 SD雄性大鼠60只,按体质量随机分为6组：假手术组、模型对照组、贝那普利组和苦杏仁苷小、中、大剂量组,每组10只。除假手术组外其余各组大鼠均采用左侧输尿管梗阻方法造模。连续灌胃给药21 d后处死,记录大鼠24 h尿量、计算大鼠肾脏脏器系数;测定大鼠血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、白蛋白(ALB)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量及组织中SOD、MDA、羟脯胺酸(HYP)含量;荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测组织内转化生成因子β₁(TGF-β₁)、Smad3、Smad7 mRNA的表达;采用苏木精-伊红(HE)和马松(Masson)染色观察左侧肾脏组织病理变化。结果 与假手术组比较,模型对照组大鼠尿量显著减少(P<0.01),血清和组织SOD活力显著降低(P<0.01),肾脏脏器系数、BUN、Scr、ALB水平及血清和组织MDA含量、组织HYP含量显著升高(P<0.01);TGF-β₁、Smad3 mRNA表达量显著升...     

贝那普利对肝纤维化大鼠TGF-β1和α-SMA影响的研究

目的研究贝那普利对大鼠肝纤维化程度及对肝纤维化大鼠TGF～β1和α-SMA表达的影响。方法建立40％CCL诱导的大鼠肝纤维化模型,42只大鼠分为对照组（n=10）、模型组（n=16）、观察组（n=16）。对3组大鼠肝组织进行HE染色、网状纤维染色、免疫组织化学染色,观察肝组织病理变化、纤维增生及TGF—β1和α-SMA的表达情况。结果模型组的肝纤维化程度、TGF—β1阳性表达、α-SMA阳性表达计分明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）;观察组的肝纤维化程度、TGF—β1阳性表达、α-SMA阳性表达计分明显低于模型组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论贝那普利可有效降低肝组织TGF—β1和α—SMA的表达,从而抑制大鼠肝纤维化的进程。     

夏枯草总三萜调控ERK、TGF-β1/Smad通路对肝纤维化大鼠的保护作用研究

目的研究夏枯草总三萜(TTP)对四氯化碳(CCl4)致肝纤维化大鼠的保护作用及其分子机制。方法 SD大鼠随机分为正常组、模型组、TTP(25、50、100 mg·kg-1)组和阳性对照组(秋水仙碱0.1 mg·kg-1),除正常组外,其余各组分别于大鼠背部皮下注射CCl40.1 ml·(100 g)-1,每周2次,连续12周,自造模第5周起开始给药,各给药组分别给予相应的药物,正常组、模型组给予等体积的溶媒,每天1次。实验结束后,比色法测定血清中丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)含量;放免法测定透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)含量;同时取固定部位肝组织,苏木精伊红染色(HE)、Masson染色观察肝纤维化程度;制备100 g·L-1肝匀浆,进行丙二醛(MDA)、超(过)氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、羟脯氨酸(Hyp)含量测定;RT-PCR法检测α-SMA、Procollagen I、Smad2、Smad3和Smad7 mRNA表达;Western blot法检测pERK蛋白表达。结果与模型组相比,TTP(25、50、100 mg·kg-1)给药组不仅能降低肝纤维化大鼠ALT、AST、HA、CⅣ、PCⅢ、Hyp水平,改善肝脏病变程度,降低MDA水平,增强SOD以及GSH-Px活性,还可抑制肝组织中α-SMA、Procollagen I、Smad2、Smad3及p-ERK表达,升高Smad7表达。结论夏枯草总三萜对CCl4诱导的肝纤维化大鼠具有较好的保护作用,其机制可能与下调p-ERK表达,调控TGF-β1/Smad信号通路有关。     

裂果薯总皂苷抗大鼠肝纤维化作用及其机制

目的研究裂果薯总皂苷(SFSP)对四氯化碳(CCl_4)诱导的肝纤维化大鼠的作用及其机制。方法将♂SD大鼠随机分为5组:正常对照组、模型组、秋水仙碱组(Col)、SFSP低剂量组(SFSP-L)、SFSP高剂量组(SFSP-H)。连续给药4周后,检测各组大鼠ALT、AST和羟脯氨酸的含量;ELISA法检测肝纤维化标志物;HE染色观察肝组织病理学改变;Masson染色观察肝纤维化程度;透射电镜观察肝超微结构变化;qPCR法检测α-SMA、TGF-β1、Smad4、Smad7 mRNA的表达情况。结果肝纤维化模型组AST、ALT及CⅣ、PCⅢ、LN、HA、Hyp反映肝损伤和纤维化进程的指标,均明显升高(P<0.05),而SFSP-H组和Col组明显降低上述指标含量,HE、Masson染色结果与之一致;SFSP明显抑制TGF-β1、Smad4、α-SMA mRNA的表达(P<0.01),升高Smad7的表达(P<0.01)。结论 SFSP通过抑制TGF-β1/Smad信号通路,明显抑制大鼠肝纤维化程度。     

水飞蓟素对肝纤维化小鼠的保护作用及机制探讨

目的探讨水飞蓟素抗CCl4和酒精所致肝纤维化的作用和机制。方法50只♂昆明小鼠随机分为5组,模型组小鼠皮下注射CCl4并饮用酒精制造肝纤维化模型,治疗组以低、中、高3种不同浓度(50、100、200mg.kg-1)的水飞蓟素灌胃进行干预,正常组小鼠皮下注射等量植物油并用生理盐水灌胃。通过检测血清AST、ALT水平、肝脏病理组织学变化、肝脏组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ型胶原(collagen-Ⅰ)mRNA表达水平观察水飞蓟素的疗效。结果成功建立肝纤维化模型,模型组小鼠血清AST、ALT,肝脏组织TGF-β1、α-SMA及collagen-ⅠmR-NA表达水平增高,水飞蓟素可降低血清AST、ALT水平,降低肝组织TGF-β1、α-SMA及collagen-ⅠmRNA的表达,减轻肝纤维化程度,中剂量(100mg.kg-1)疗效最好。结论水飞蓟素对酒精和CCl4所致的肝脏损伤有明显保护作用,其机制可能与降低TGF-β1mRNA的表达、抑制肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)活化有关。     

黄水枝醇提物对CCl4致小鼠肝纤维化的改善作用及其机制初探

目的:考察黄水枝醇提物(TPME)对四氯化碳(CCl4)致小鼠肝纤维化的改善作用,并初步探讨其可能的作用机制.方法:将60只雄性昆明种小鼠按体质量随机分为正常组、模型组、阳性对照组(秋水仙碱0.1 mg/kg)和TPME低、中、高剂量组(250、500、1000 mg/kg),每组10只.除正常组外,其余各组小鼠均腹腔...     

小剂量饮酒对四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化的影响

目的研究小剂量饮酒对四氯化碳（CCl4）诱导的小鼠肝纤维化的影响。方法40只雄性昆明小鼠随机分为4组,空白对照组小鼠自由饮水,予植物油皮下注射;四氯化碳模型组小鼠自由饮水,予以CCl4皮下注射;酒精模型组小鼠予酒精代水饮,并皮下注射植物油;酒精＋四氯化碳组小鼠予以酒精代水饮,并皮下注射CCl4。通过检测小鼠血清ALT、AST水平,肝脏的病理组织学改变及肝组织转化生长因子-β1（TGF-β1）mRNA和I型胶原（collagenI）mRNA的表达水平以观察小剂量饮酒对CCl4诱导的小鼠肝纤维化的影响。结果酒精＋四氯化碳组小鼠与其他3组小鼠相比,血清ALT、AST水平,肝细胞坏死程度和肝纤维化程度以及TGF-β1、collagenImRNA的表达水平均为最高。结论小剂量饮酒加重了CCL诱导的小鼠肝纤维化和肝功能损伤程度。     

鬼箭羽醇提物对四氯化碳诱导小鼠肝纤维化模型的作用

目的探讨鬼箭羽醇提物对四氯化碳(CCl_4)致小鼠肝纤维化的作用与机制。方法 80只C57BL/6♂小鼠随机分成8组:正常组、CCl_4组、鬼箭羽醇提物早期治疗组(EAE)和后期治疗组(EAL),治疗组再分别分为低、中、高剂量组(EAE-L/M/H,EAL-L/M/H),每组10只。腹腔注射CCl_4制备肝纤维化模型,共30 d,EAE和EAL分别于前15 d和后15 d灌胃不同剂量EA。处死后,HE和Masson染色观察肝组织与胶原纤维变化,ELISA检测血清(ALT)、(AST)、(TNF-α)变化,免疫组化和Western blot检测α-SMA、CollagenⅠ的表达。结果与正常组相比,EA各组的肝指数、ALT、AST、TNF-α及α-SMA、CollagenⅠ的表达呈剂量依赖性的低于模型组(P<0.05或P<0.01);EAE和EAL各组肝组织形态与胶原纤维变化也明显呈剂量依赖性优于模型组;且EAE组在HE染色、Masson染色及α-SMA、CollagenⅠ的表达方面,效果明显优于EAL组(P<0.05)。结论 EA呈剂量依赖性阻止CCl_4所诱导的小鼠肝纤维化,且早期治疗效果明显,其机制可能与抑制TNF-α的生成,进而影响α-SMA、CollagenⅠ的表达有关。     

软肝抗纤方对肝纤维化实验大鼠TGF-β/Smad信号转导通路的影响

目的为进一步阐明TGF-β/Smad信号通路的结构、功能及其与肝纤维化的关系提供理论依据。方法以四氯化碳和二甲基亚硝胺致的两种肝纤维化大鼠模型为基础,用软肝抗纤方治疗肝纤维化,研究模型组和给药组与信号转导系统有关的信号转导分子(TGF-β1、Smad3、Smad7和SARA等)在肝纤维化的变化特点和功能作用。结果中药预防组与中药治疗组较之两组模型组,在肝脏羟脯氨酸含量,TGF-β1、Smad3、Smad7和SARA蛋白的表达,TGF-β1、Smad3、Smad7 mRNA含量等指标上具有显著差异,中药预防组与中药治疗组较之空白对照组无显著差异。结论软肝抗纤方在动物模型对肝纤维化具有一定作用,可做进一步的临床研究。     

薯蓣皂苷降低四氯化碳致大鼠肝纤维化作用及其机制的研究

探索薯蓣皂苷对四氯化碳(CCl₄)诱导的大鼠肝纤维化的保护作用,并探讨其机制。将体重180～220 g的32只雄性SD大鼠随机分为4组(每组n=8),包括对照组、薯蓣皂苷组、CCl₄组,以及用薯蓣皂苷治疗的CCl₄组。采用腹腔注射20%CCl₄(2.5 mL/kg体重)的橄榄油产生大鼠肝脏纤维化损伤。H&E、Masson和IHC染色观察肝脏组织学变化,胶原沉积情况,以及α-SMA的表达,并通过实时PCR将数据定量化;试剂盒法检测大鼠的AST和ALT水平;ELISA法检测大鼠血清中炎性因子的水平;免疫印迹法检测薯蓣皂苷对肝纤维化大鼠Wnt1,β-catenin、c-Myc和cyclin D1的蛋白表达的影响。结果显示,薯蓣皂苷处理可显著下调CCl₄诱导的大鼠肝纤维化模型中肝纤维化标记物[包括α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和胶原蛋白Ⅰ]的蛋白表达,同时降低天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)的升高,降低促炎因子并提升抑炎因子的表达。此外,薯蓣皂苷降低肝纤维化大...     

紫杉醇在纤维化疾病中应用的研究进展

纤维化是指机体受到各种因素刺激,多种纤维化相关信号通路被激活并共同介导,引起胶原蛋白、纤维连接蛋白、蛋白多糖、弹力蛋白等沉积导致靶器官和组织结构异常的过程。TGF-β₁/Smads是公认的在纤维化过程中起关键调控作用的信号通路。研究发现紫杉醇能通过抑制TGF-β₁/Smads信号通路而发挥抗纤维化作用。主要对紫杉醇在多种纤维化疾病中应用的研究进展进行综述。     

阿魏酸钠对UUO大鼠肾脏保护作用的实验研究

目的探讨阿魏酸钠对UUO大鼠肾脏保护作用及其可能的机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组、UUO模型组、阿魏酸钠治疗组,每组20只。术后14 d处死动物并取梗阻侧肾脏,比较病理改变;采用免疫组化法检测3组大鼠肾小管上皮细胞TGF-β1、p-p38、α-SMA的表达。处死大鼠同时心脏取血,检测3组血清肌酐、尿素氮及光抑素C水平。结果与假手术组比较,模型组TGF-β1、p-p38、α-SMA的表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,治疗组血清肌酐、尿素氮及光抑素C水平明显降低(P<0.05);而肾小管上皮细胞TGF-β1、p-p38、α-SMA的表达显著降低(P<0.05)。结论阿魏酸钠可能通过下调肾小管上皮细胞TGF-β1、p-p38及α-SMA的表达,起到延缓肾间质纤维化进程及保护肾功能的作用。     

人参须对四氯化碳致小鼠肝纤维化的保护作用

目的：观察人参须对四氯化碳致小鼠肝纤维化的影响。方法：运用皮下多次注射四氯化碳(CCl4)致小鼠慢性肝损伤模型，观察人参须对小鼠肝组织病理变化、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT／GPT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST／GOT)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)和白蛋白／球蛋白(A／G)的比值以及内脏器官重量的影响。结果：人参须能够显著降低由CCl4引起的肝、脾重量增加及血清ALT、TP的升高，明显减轻CCl4引起的肝坏死病变，与秋水仙碱无差别。结论：人参须对四氯化碳致小鼠肝纤维化有保护作用。     

SOCS3对四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化进展和逆转的影响及机制研究

目的观察细胞因子信号传导抑制蛋白-3(suppressor of cytokine signaling3,SOCS3)对肝纤维化进展和逆转过程的影响。方法皮下注射四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)建立C57BL/6小鼠肝纤维化模型,纤维化模型成功后正常饮食喂养1个月为纤维化逆转模型,以同体重、同性别的正常小鼠为对照组。分别在1、2、3、4、5、6、7、8周后处死小鼠,取肝组织,HE染色观察肝组织损伤情况,Masson染色观察胶原变化,免疫组织化学法观察Ⅰ型胶原(collagenⅠ,Colla-1)、α平滑肌肌动蛋白(αsmooth muscle actin,α-SMA)、转化生长因子β1(transforming growth factor beta1,TGF-β1)和SOCS3蛋白表达。体外用TGF-β1刺激HSC-T6细胞株形成纤维化体外模型,MDI培养基逆转纤维化过程,SOCS3过表达质粒作用于逆转过程,Western blot方法检测SOCS3、Colla-1、α-SMA、TGF-β1表达情况。结果 SOCS3和TGF-β1在小鼠纤维化模型中随着纤维化加重而表达增加,逆转过程中减少,过表达逆转过程,纤维化指标降低,有利于逆转的进行,TGF-β1表达也相应降低。结论SOCS3可能通过调控TGF-β1的表达参与肝脏纤维化的形成和逆转过程。     

鬼针草总黄酮对肝纤维化大鼠肝星状细胞TGF-β1信号传导通路的影响

目的研究外源性转移生长因子-β1(transforming growth factor betal,TGF-β1)对肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)的激活作用,观察鬼针草总黄酮(total flavonoids of Bidens Bipinnata L,TFB)对HSC中smad2/7和Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达的影响,以探讨TFB抗肝纤维化的作用及分子机制。方法采用Collagenase Ⅳ胶原酶原位肝灌注法分离HSC,MTT法观察TFB对TGF-β1刺激下HSC增殖的作用,ELISA法检测HSC自分泌TGF-β1和产生Ⅰ型胶原的影响;RT-PCR法观察分析TFB对TGF-β1刺激下HSC中smad2/7和Ⅰ型胶原基因表达的影响;Westernblot法观察TFB对TGF-β1刺激下HSC中smad2蛋白表达的影响。结果TGF-β1明显促进HSC增殖、自分泌TGF-β1和产生胶原,促进HSCsmad2、Ⅰ型胶原mRNA及smad2蛋白的表达,明显抑制smad7mRNA表达(P<0.05),TFB作用后,TGF-β1刺激的HSC中smads2mRNA、蛋白和Ⅰ型胶原mRNA表达受到抑制,smad7mRNA表达明显上调。结论TFB抗肝纤维化作用可能与其阻断HSCTGF-β1通路进而阻断HSC的活化、增殖有关。     

TGFβ1/smad7信号通路在大鼠肝纤维化发生中的活化及意义

目的探讨肝纤维化组织中TGFβ1/smad7信号传导通路的活化及意义。方法将Wistar大鼠随机分为对照组、模型组(腹腔注射10%的CCl4),8周后检测血清ALT、HA和TGFβ1水平,HE染色观察肝组织炎性反应及纤维化程度,Western blot与RT-PCR法检测肝组织TGFβ1、Smad3、Smad7、蛋白和m RNA水平。结果模型组血清ALT、HA和TGFβ1水平明显高于对照组;肝组织TGFβ1、Smad3和Smad7蛋白表达量分别是3.87±0.87,2.64±0.95,1.21±0.54,TGFβ1、Smad3高于对照组(1.08±0.61,0.82±0.05);Smad7低于对照组(2.84±1.16),蛋白和m RNA表达较对照组(6.32±1.18)显著降低(P<0.01)。结论 TGFβ1/smad信号传导通路过度活化与血清中ALT、HA和TGFβ1水平升高可能与肝纤维化的发生和发展密切相关。     

银杏叶提取物对肝纤维化模型大鼠的影响及抗肝纤维化机制的研究

目的 探讨银杏叶提取物(GBE)对肝纤维化模型大鼠的影响及抗肝纤维化机制.方法 SD大鼠60只随机分为正常组(n=12)和模型组(n=48),模型组大鼠又分为4个亚组:模型对照组、GBE低、中、高剂量组(n=12),GBE低、中、高剂量组每天分别灌胃给予GBE 50mg/kg、100mg/kg及200mg/kg,正常组和模型组给予等体积的0.9%氯化钠溶液,连续2个月(1次/d).给药结束后腹主动脉取血,分离血清,试剂盒检测肝功能指标(ALT、AST、MDA、SOD、白蛋白、球蛋白及白/球),放免法检测肝纤维化指标(HA、PC-Ⅲ、C-Ⅳ及LN),大鼠脱颈椎处死后立即取右叶部分肝组织,液氮速冻后于-80℃保存,RT-PCR检测肝组织TGF-β1、TIMP1、Ⅰ型胶原mRNA的表达水平.结果 与模型对照组比较,GBE中、高剂量组AST、ALT、球蛋白及肝纤维化各项指标显著降低,TGF-β1、TIMP1、Ⅰ型胶原mR-NA表达水平显著降低(P<0.05),白蛋白水平、白/球值显著升高(P<0.05),MDA水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 GBE能显著改善肝纤维化大鼠的肝功能指标,肝纤维化指标,其机制可能是通过降低TGF-β1、TIMP1、Ⅰ型胶原mRNA表达水平来实现的.     

杠板归总黄酮抗大鼠肝纤维化作用的机制研究

目的在明确杠板归总黄酮(TFP)抗二甲基亚硝胺(DMN)诱导的大鼠肝纤维化(HF)药效基础上,探索TFP抗HF的作用机制。方法将90只SD大鼠随机均分为正常组、模型组、秋水仙碱(0.1 mg·kg~(-1))组和TFP(200、100、50mg·kg~(-1))组。除正常组外,其余各组大鼠均腹腔注射体积分数为0.5%的DMN溶液(2 m L·kg~(-1)),隔天1次,连续8周。从造模d 1起,各给药组分别给予相应剂量的药物进行干预,正常组和模型组给予等体积的溶媒,每天1次。8周后实验结束,取血和肝组织。取相同位置的肝组织,苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病变程度;比色法检测血清ALT、AST、SOD和MDA含量或活性;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清HA、LN、PCⅢ和Ⅳ-C含量;ELISA法检测肝组织TNF-α、IL~(-1)β和IL-6的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝组织α-SMA、TGF-β1、JAK2、STAT3、pJAK2和p-STAT3蛋白表达。结果与模型组比较,TFP(200、100、50 mg·kg~(-1))能明显改善肝组织病变,降低ALT、AST、HA、LN、PCⅢ和Ⅳ-C表达,降低MDA水平,增加SOD活性,同时减少TNF-α、IL-1β和IL-6释放,抑制α-SMA、TGF-β1、p-JAK2和p-STAT3表达。结论 TFP能够抗DMN诱导的大鼠HF,其机制可能与抗氧化作用,抑制TGF-β1表达,调控JAK2/STAT3信号通路,并抑制炎症反应有关。