天然、重组水蛭素对随意皮瓣淤血模型血管内皮细胞生长因子的影响

背景：随意皮瓣移植后易发生皮瓣静脉淤血,甚至坏死,临床与动物实验证明水蛭素能够提高淤血皮瓣的成活率。 目的：观察水蛭素对大鼠随意皮瓣淤血模型成活保护作用。 方法：Wistar大鼠30只背部设计随意皮瓣10 cm×3 cm制成淤血模型,随机分为天然水蛭素组、重组水蛭素组和对照组,分别于皮下注射5 U天然水蛭素、5 U重组水蛭素和生理盐水。术后测定血管内皮细胞生长因子含量及血管内皮细胞生长因子mRNA表达量,计算皮瓣成活率。 结果与结论：天然水蛭素组与重组水蛭素组皮瓣成活率比对照组高(P< 0.05)。天然水蛭素组与重组水蛭素组比对照组新生毛细血管血管内皮细胞生长因子表达多(P < 0.05),且天然水蛭素组最多。提示天然、重组水蛭素均能够促进随意皮瓣血管内皮细胞生长因子表达,有利于新生血管的生成,能够提高随意皮瓣的成活率,且天然水蛭素效果优于重组水蛭素。     

天然与重组水蛭素对大鼠随意皮瓣淤血模型超氧化物歧化酶、丙二醛、内皮素变化的影响

背景：一般认为天然水蛭素能够提高淤血皮瓣的成活率与其抗血栓、抗凝血酶有关,但其抗炎、抗氧化作用的具体机制尚不清晰。重组水蛭素效果与天然水蛭素的差异也未有深入研究。 目的：探索天然、重组水蛭素对大鼠随意皮瓣淤血模型存活保护机制。 方法：Wistar大鼠30只,背部设计随意皮瓣10 cm×3 cm制成淤血模型。皮瓣随机分为天然水蛭素组、重组水蛭素组和对照组,均于术后即刻、第3,5天注射在距皮瓣末端1.5 cm和3.0 cm处分别注射5 U天然水蛭素、5 U重组水蛭素和相同剂量生理盐水。观察术后第7天的皮瓣成活率、皮瓣组织细胞形态学改变以及超氧化物歧化酶、丙二醛、内皮素水平。 结果与结论：与对照组相比,天然、重组水蛭素组皮瓣成活率高,皮瓣超氧化物歧化酶水平明显增多,内皮素、丙二醛水平减少。且天然水蛭素效果优于重组水蛭素。说明水蛭素能够提高随意皮瓣的成活率、超氧化物歧化酶的含量;减低皮瓣的坏死率、丙二醛、内皮素的含量。     

天然水蛭素水凝胶可改善随意皮瓣的存活

背景：随意皮瓣移植后易发生瘀血,甚至缺血坏死,临床与动物实验已经证明水蛭素能够提高皮瓣的存活率。目的：探讨天然水蛭素凝胶对大鼠随意皮瓣存活的影响。方法：制备天然水蛭素凝胶,用改良的Franz扩散池进行经皮渗透实验,使用Markwardt法进行水蛭素活性的检测。选用Wistar大鼠,在其背部设计随意皮瓣,面积为9 cm×3 cm;皮瓣随机分3组,分别涂抹生理盐水、天然水蛭素凝胶、空白凝胶基质。术后进行大体、组织病理学形态观察,第7天计算皮瓣存活率。结果与结论：体外实验：Markwardt法检测到天然水蛭素凝胶组的活性成分能透过皮肤,而空白凝胶组未检测到任何活性成分。体内实验：术后7 d,天然水蛭素凝胶组皮瓣坏死长度明显长于生理盐水组、空白凝胶基质组,差异有显著性意义(P < 0.05)。术后 3 d,天然水蛭素凝胶组真皮内毛细血管及微静脉红细胞瘀滞现象较生理盐水组、空白凝胶基质组明显减轻;术后7 d,天然水蛭素凝胶组皮下胶原及肉芽组织增生明显优于生理盐水组、空白凝胶基质组;术后7 d,天然水蛭素凝胶组皮瓣存活率高于生理盐水组、空白凝胶基质组,差异有显著性意义(P < 0.05)。结果表明天然水蛭素可渗透进入完整皮肤组织,局部应用天然水蛭素水凝胶同样对皮瓣移植后瘀血有改善作用,有利于新生血管的生成。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程全文链接：     

肾上腺髓质素真核表达载体对皮瓣缺血再灌注损伤的影响

背景：肾上腺髓质素可在心、脑、肾、肝等器官的缺血再灌注过程中起保护作用。 目的：观察肾上腺髓质素真核表达载体对大鼠腹部皮瓣缺血再灌注损伤的影响及其作用机制。 方法：构建大鼠肾上腺髓质素真核表达载体,将SD大鼠随机分假手术组、模型组、维拉帕米组、重组质粒组。重组质粒组腹部皮内注射肾上腺髓质素真核表达载体,其余各组注射等量生理盐水,各组注射4次后建立缺血再灌注模型,维拉帕米组于皮瓣内注射维拉帕米。 结果与结论：与模型组相比,重组质粒组皮瓣组织中丙二醛、血管内皮素1的含量分别降低了38.50%(P  < 0.01),54.73%  (P  < 0.01),超氧化物歧化酶的含量增加了50.67%(P < 0.05)。皮瓣组织学检查结果显示重组质粒组皮瓣炎性细胞浸润与水肿程度也较模型组明显减轻。结果证实肾上腺髓质素真核表达载体对大鼠皮瓣缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制与减轻脂质过氧化及减少炎症细胞浸润有关。     

低分子肝素钙与低剂量尿激酶联合治疗急性脑梗死的疗效观察

目的观察低分子肝素钙与低剂量尿激酶联合治疗急性脑梗死的临床疗效。方法将63例急性脑梗死患者随机分为治疗组(33例)和对照组(30例)。治疗组给予尿激酶20～50万U溶于生理盐水150～250ml静脉点滴,低分子肝素钙5000U腹壁皮下注射,每日一次,连用6d(尿激酶首剂用50万U者,每日递减10万U至20万U,共用6d)。同时使用自由基清除剂、钙离子拮抗剂、微循环改善剂及脑细胞保护剂治疗3周。对照组除未用尿激酶和低分子肝素钙治疗外,其他同治疗组。并于治疗前后各进行一次临床神经功能缺损程度评分。治疗过程中检测TT、PT、APTT、纤维蛋白原和血小板计数。结果治疗组痊愈率、总有效率明显高于对照组(P<0.05)。治疗组神经功能缺损评分较治疗前显著降低(P<0.05),且较对照组明显。结论低分子肝素钙与低剂量尿激酶联合治疗急性脑梗死疗效较好。     

灯盏花素注射液干预大鼠随意超长皮瓣成活

背景:灯盏花素能影响微血管舒张、减少缺血再灌注的损伤、降低血液黏滞性、对抗氧自由基损伤等,可能在皮瓣移植后治疗中起重要作用。目的:探讨灯盏花素对大鼠超长比例皮瓣成活的影响和可能的机制.方法:30只SD大鼠随机分为灯盏花素组、丹参组和对照组。在大鼠背部设计制备一蒂在尾端的8cm×2cm的超长全厚随意皮瓣,原位回植。灯盏花素组和丹参组在术后立即及之后每日分别腹腔内注射灯盏花素注射液4.5mL/(kg·d)及丹参注射液1.8mL/(kg·d),对照组给予1mL生理盐水。术后7d,观察皮瓣存活情况,对皮瓣远、中及近段进行组织学观察;取大鼠皮瓣中轴距蒂部3cm处组织,检测超氧化物歧化酶、丙二醛和一氧化氮水平。结果与结论:术后7d,灯盏花素组和丹参组皮瓣存活率高于对照组(P0.05),其中灯盏花素组皮瓣存活率较高。灯盏花素组和丹参组近、中及远段组织水肿、坏死及炎症细胞浸润较对照组轻,其血管、成纤维细胞增生均明显优于对照组。灯盏花素组和丹参组超氧化物歧化酶及一氧化氮含量高于对照组(P0.05),其中灯盏花素组最高;而灯盏花素组和丹参组丙二醛含量低于对照组,灯盏花素组最低。说明腹腔注射灯盏花素注射液对大鼠随意超长皮瓣成活有明显促进作用,作用机制可能与扩张血管、改善循环、清除自由基及降低脂质过氧化反应有关,其作用优于丹参注射液。     

前列地尔改善大鼠缺血皮瓣微循环

目的:观察前列地尔注射液改善缺血皮瓣微循环的作用。方法:40只SD大鼠先行背部2×7cm皮瓣手术后平分为两组,分别尾静脉注射前列地尔注射液(0.8ml/kg,实验组)和等量生理盐水(对照组)。每日一次,持续7天。采用激光多普勒技术分别于术前、术后即刻(0min)、60min、1天、4天、7天测量各组大鼠皮瓣血流灌注量;并在术后第7天测量两组皮瓣成活面积;同时取两组大鼠皮瓣病理切片行HE染色观察皮瓣组织学和微血管口径变化,CD34染色计数微血管数量。结果:两组皮瓣近、中、远段区域在术前、术后0min、60min血流灌注量差异均无统计学意义(P0.05)。术后第1天,实验组远段血流量高于对照组(P0.05)。术后第4天和第7天实验组血流量近、中、远段亦明显高于对照组(P0.05,P0.01);且不同区段血流量与蒂部距离呈显著负相关(r_(60min)=-0.58,P0.01;r_(1天)=-0.69,P0.01;r_(4天)=-0.52,P0.01;r_(7天)=-0.83,P0.01)。与药物作用时间呈显著正相关(r_近=0.71,P0.01;r_中=0.58,P0.01;r_远=0.54,P0.01)。实验组皮瓣成活面积大于对照组(12.12±0.89cm~2 vs 9.53±0.55cm~2,P0.01)。HE染色显示实验组近、中区段皮瓣组织炎症改善和微血管扩张均较对照组明显。CD34染色显示实验组各区段微血管密度均高于对照组(P0.05)。结论:前列地尔注射液可有效改善缺血皮瓣微循环。     

碱性成纤维细胞生长因子共聚物缓释微球与兔跨区轴型皮瓣的成活

背景：研究表明使用生长因子直接或间接刺激新生血管形成可以促进皮瓣远端缺血部分的成活。 目的：观察碱性成纤维细胞生长因子-聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物缓释微球对家兔侧腹制作跨区轴型皮瓣成活的影响。 方法：取24只健康家兔制作侧腹壁跨区轴型皮瓣,随机分组：实验组术前5 d皮内注入碱性成纤维细胞生长因子-聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物微球,对照组术前5 d皮内注入碱性成纤维细胞生长因子+空微球悬浊液,空白对照组术前5 d皮内注入生理盐水。5 d后掀起皮瓣原位缝合。 结果与结论：①皮瓣成活率：实验组显著高于对照组和空白对照组(P < 0.01),②皮瓣组织学变化：实验组新生血管增生明显,以毛细血管为主。③CD34+免疫组织化学结果：实验组新生血管大量形成,平均血管数目高于对照组和空白对照组(P < 0.05)。表明术前5 d局部注射碱性成纤维细胞生长因子-聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物缓释球可促进皮瓣新生血管形成,增加皮瓣血运,促进皮瓣成活。     

丹参对缺血再灌注损伤皮瓣成活率的影响

背景：丹参被认为有防治皮瓣缺血再灌注损伤的作用,但其具体机制尚不明确。 目的：观察丹参注射液对皮瓣缺血再灌注损伤的保护作用,并探讨其机制。 方法：48只Wistar大鼠随机分为3组(n=16)：对照组：不进行灌注干预;缺血再灌注组：术前3 d至术后5 d,每日腹腔注射生理盐水2 mL/kg;丹参组：将生理盐水换为等量的丹参注射液。在大鼠以腹壁浅血管为蒂的岛状皮瓣缺血再灌注模型上,分别测定皮瓣组织中丙二醛、髓过氧化物酶、细胞间黏附分子1、核因子κB含量,并对切片进行图像分析,观察皮瓣成活率。 结果与结论：缺血再灌注组、丹参组于再灌注后2,8,24 h,对照组于术后10,16,32 h,丙二醛、髓过氧化物酶值以及核因子κB和细胞间黏附分子1的表达均呈现出：缺血再灌注组>丹参组>对照组(P < 0.01)。皮瓣成活率为：缺血再灌注组<丹参组<对照组(P < 0.01)。结果提示,丹参可能通过抑制核因子κB激活环形炎症反应通路及自身即具有的抗氧化、提高机体总体抗氧化的能力,减轻皮瓣缺血再灌注损伤,促进皮瓣成活。     

低分子肝素抗新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡

目的：探讨低分子肝素对体外培养的新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡的作用机制。方法： 应用“neurobasal 加 B27 supplement”体外培养大鼠大脑皮层神经细胞，并在缺氧条件下使用Hoechst 33342荧光染色法、免疫细胞化学染色法观察低分子肝素对原代神经细胞的抗凋亡作用。结果： 在250-500 U/L的浓度范围內，低分子肝素能降低缺氧诱导的神经细胞凋亡率（P<0.05），并且较BDNF（50 μg/L）抗凋亡阳性对照组的凋亡率更低（P<0.05）。低分子肝素（500 U/L）增加缺氧的神经细胞Bcl-2蛋白的表达（P<0.05），减少Bax蛋白的表达（P<0.01），提高Bcl-2/Bax比值（P<0.01）。低分子肝素500 U/L组的Bcl-2/Bax比值比正常对照组、BDNF抗凋亡阳性对照组和凋亡阳性组都高（P<0.05）。结论： 低分子肝素通过上调缺氧神经细胞Bcl-2表达和下调Bax表达，提高Bcl-2/Bax比值减少缺氧的神经细胞凋亡。     

高压氧预处理超长皮瓣组织血管内皮生长因子、转化生长因子β的表达

BACKGROUND: Hyperbaric oxygen (HBO) therapy can alleviate the skin flap congestion by improving the angiogenesis and increasing the oxygen content of blood in skin flaps. Although the HBO therapy ability to increase flap survival has been well described, the research on the application of HBO pretreatment in skin flap transplantation does not arouse adequate concern. OBJECTIVE: To investigate the effect of HBO pretreatment on early-stage flap congestion in the rat model of over-length dorsal random skin flaps. METHODS: Thirty-six SD rats were randomly divided into control group (n=12), HBO pretreatment group (n=12) and HBO treatment group (n=12). Rats in the HBO pretreatment group received 4 days of HBO therapy prior to transplantation, once a day. Rats in the HBO treatment group received 4 days of HBO therapy after transplantation. Rats in the control group were raised in the normal conditions after flap transplantation. At postoperative days 3 and 5, rats were sacrificed and the samples were collected. The inflammation of flap tissues was detected using hematoxylin-eosin staining. The expression of vascular endothelial growth factor and transforming growth factor-β was analyzed by immunohistochemistry staining. The flap survival rate was calculated at postoperative day 5. RESULTS AND CONCLUSION: The flap survival area of the HBO pretreatment group and HBO treatment group was larger than that of the control group (P < 0.05). At postoperative days 3 and 5, the expression levels of vascular endothelial growth factor and transforming growth factor-β in the flap tissue were higher in the HBO pretreatment group and HBO treatment group than the control group (P < 0.05). However, there was no significant difference in the flap survival area and the expression of vascular endothelial growth factor and transforming growth factor-β between HBO pretreatment and HBO treatment groups  (P > 0.05). HBO pretreatment can increase the expression of vascular endothelial growth factor and transforming growth factor-β and promotes angiogenesis in random pattern flaps, thereby improving skin flap survival.      

改良双干静脉动脉化皮瓣的实验研究

目的　观察双干静脉动脉化皮瓣与改良双干动脉化静脉皮瓣存活过程,对比成活率及探讨其成活机制。 方法　将 20只新西兰大白兔40侧后肢制成包含2根纵行的浅静脉2.5cm×3.5cm皮瓣,将其随机分成对照组和实验组各20侧。对照组：将皮瓣直接移植同侧耳背2.0cm×3.0cm创面,制作双干动脉化静脉皮瓣模型。实验组：在对照组基础上将皮瓣进行改良。观察皮瓣的成活过程,并进行比较。 结果　实验组皮瓣存活70%（14个）,部分存活20% （4个）,坏死10%（2个）。对照组皮瓣存活20%（4个）,部分存活25%（5个）,坏死55%（11个）。两组差异有统计学意义(P＜0.05)。 结论　双干静脉动脉化皮瓣经改良后有利于皮瓣内血液进入微循环,改善动脉血灌注量与静脉回流量平衡,提高皮瓣的成活率。     

穿支皮瓣Choke区动、静脉血流阻力对皮瓣存活的影响

目的　通过在同一组皮瓣中对choke血管的动、静脉阻力进行比较研究,探究血流跨过choke血管的动、静脉阻力大小关系及其对皮瓣存活的影响。 方法　将34只SD大鼠随机分成两组,A组保留右侧肋间后动脉+左侧肋间后静脉,B组保留右侧肋间后动脉+右侧髂腰静脉。测量保留的动、静脉之间的距离。术后7天,统计皮瓣存活率以及血管造影观察皮瓣区微血管形态;choke区取材,H&E染色,计算平均微血管密度;尾静脉采血,检测乳酸含量。 结果　A组保留的动、静脉之间的距离比B组短[(2.5±0.3) cm vs (3.7±0.2) cm,t=14.608,P<0.05）]。术后7 d,A组皮瓣存活率为100%,B组1号血管体区存活率为（67.0±13.1）%,4号血管体区的为100%,整块皮瓣存活率为（88.0±6.8）%;A组比B组血管增生明显[（24.0±3.9）vs (17.6±4.3),t=2.727,P=0.021];A组与B组乳酸均接近术前水平,差异无统计学意义[（8.0±0.8）mmol/L vs (8.4±0.4) mmol/L vs (7.5±0.6) mmol/L,P>0.05]。 结论　①血流跨过choke血管的静脉阻力大于动脉阻力;②缩短跨choke区的动、静脉血流单向距离有利于减小跨choke区所受的静脉阻力,提高皮瓣的存活率。     

骨髓基质干细胞促进大鼠随机皮瓣存活的实验研究

目的 观察rMSCs体内促进大鼠随机皮瓣存活的作用并初步探讨其可能的机制。方法体外分离培养rMSCs。将SD大鼠随机分成rMSCs组和对照组，于其背部形成超长随意皮瓣。以4’，6二脒基-2-苯吲哚（DAPI）标记rMSCs，注射于皮下。观察皮瓣的存活情况并计算皮瓣坏死率。取皮瓣远端标本，行病理观察，免疫组化检测VEGF表达情况。结果rMSCs体外分离培养扩增5代。术后七天，在移植组皮下能检测到DAPI标记的细胞，移植组大鼠皮瓣坏死率明显小于对照组（P＜0．05），移植组的皮下血管数及VEGF的表达密度和面积明显高于对照组（P〈0．05）。结论在大鼠背部，局部移植rMSCs，能存活并增加皮瓣局部VEGF的表达，促进血管形成，减轻皮瓣的坏死。     

复制缺陷型腺病毒载体介导人血管内皮细胞生长因子cDNA促进静脉分叶皮瓣的成活

背景：静脉分叶皮瓣可修复多个手指皮肤软组织缺损,但静脉皮瓣普遍存在成活率不稳定,限制了其在临床上的应用。 目的：观察以复制缺陷型腺病毒介导血管内皮细胞生长因子165基因(cDNA)局部应用对兔静脉分叶皮瓣成活的影响。 方法：用新西兰大白兔制作侧腹壁双蒂轴型静脉分叶皮瓣,分别皮下注射介导血管内皮细胞生长因子165基因(Ad-VEGF)的复制缺陷型腺病毒、携带β半乳糖苷酶基因的腺病毒(Ad-Gal)和生理盐水。术后7 d对3组兔进行皮瓣存活率、免疫组织化学、新生血管计数和常规组织切片的检测。 结果与结论：术后7 d,Ad-VEGF165组皮瓣成活率和平均血管数目显著高于Ad-Gal组和生理盐水组(P < 0.01),皮瓣中血管内皮细胞及毛囊旁细胞中有大量VEGF蛋白阳性表达细胞,皮瓣中出现肉芽组织增生,新生血管大量形成。结果证实,以复制缺陷型腺病毒为载体介导的人VEGF cDNA能促进新生血管的形成并提高静脉分叶皮瓣的成活率。     

碱性成纤维细胞生长因子促进大鼠随意皮瓣成活的实验研究

目的 :研究碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对促进大比例超长随意皮瓣成活的作用。方法 :采用大鼠背部随意皮瓣动物模型 ,自身对照 ,于术后第一天实验组一次性局部应用bFGF 40 0IU。应用BPM2 镭射多普勒血流仪数字温度计对随意皮瓣的成活进行动态监测 ,并结合墨汁灌注制作透明标本进行形态学观察。结果 :实验组皮瓣成活率明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ;血流值从术后第二天实验组皮瓣末端显著高于对照组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,皮温的变化规律与血流值相同。光镜观察透明标本 ,发现实验组皮瓣血管的再生明显多于对照组。结论 :bFGF能促进皮瓣血管的再通与增生 ,加速血液循环的重建 ,提高随意皮瓣的成活长度 ,并可达到早期断蒂的目的。