大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤白藜芦醇与HSP70蛋白表达的关系

目的探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤白藜芦醇与热休克蛋白(HSP)70的关系和作用。方法随机设立假手术组、对照组和白藜芦醇预处理组3个组,后两组采用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞模型(MCAO)缺血2 h再灌注,且设立6 h和24 h两个再灌注时间点。白藜芦醇预处理组按40 mg/kg经腹腔注射。分别在术后不同时间点进行神经功能学评分,采用免疫组化和免疫印迹法测定HSP70蛋白表达。结果对照组和白藜芦醇预处理组与假手术组比较神经功能评分显著增高,白藜芦醇预处理组又明显低于对照组(P0.05);免疫组化和免疫印迹结果一致,对照组和白藜芦醇预处理组与假手术组比较HSP70蛋白表达显著增高,白藜芦醇预处理组HSP70蛋白表达又明显高于对照组(P0.05)。结论大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤白藜芦醇的神经保护作用可以通过热休克蛋白HSP70蛋白的表达增多来产生。     

猪脑死亡模型建立及建立过程中血压、心率变化

目的采用改进的缓慢间断颅内加压法建立猪脑死亡模型，观察建立过程中血压、心率变化。方法长白猪12头，随机分为对照组（C组）和脑死亡组（B组），每组6头。C组维持麻醉24h，仅行开颅术并颅内放置Foley气囊导管，不建立脑死亡模型；B组应用改进的缓慢间断颅内加压法建立脑死亡模型，通过呼吸、循环支持维持猪脑死亡状态24h。监测2组动物在实验过程中平均动脉压（mean artery pressure，MAP）、心率（heart rate，HR）变化。结果B组6头猪均成功建立脑死亡模型。经Foley气囊导管缓慢间断颅内加压后，B组动物血压、心率缓慢下降后骤然升高，呼吸频率减慢、呼吸幅度加深，平均峰值动脉压和平均峰值心率与颅内加压前MAP、HR比较，差异有统计学意义；脑死亡后6、12和24h，B组猪MAP和HR与C组比较，差异有统计学意义。结论应用改进的缓慢间断颅内加压法可成功制作猪脑死亡模型，经有效的呼吸和循环支持，能稳定地维持猪脑死亡状态24h，为进一步研究脑死亡状态下猪肝脏形态和功能变化提供了坚实基础。     

脑缺血再灌注损伤模型大鼠参附注射液干预后热休克蛋白70的表达

背景：参附注射液可通过改善微循环,增加组织血氧含量发挥对缺血再灌注损伤的保护作用。 目的：观察参附注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤后热休克蛋白70表达的影响。 方法：将SD大鼠随机分为3组：假手术组、大脑中动脉闭塞缺血再灌注损伤模型组、参附注射液组。 结果与结论：应用参附注射液1 d后,改善了缺血再灌注大鼠脑部神经细胞的排列,减轻了胞体肿胀,核固缩等现象,应用3 d后改善更为明显,胞体结构已较清晰,核固缩、溶解程度显著减轻,胞体肿胀现象明显改善。参附注射液组治疗后1,3 d热休克蛋白70表达明显高于假手术组与模型组。提示参附注射液对脑缺血再灌注具有显著的保护作用,其作用可能是通过促进热休克蛋白70的表达来实现的。     

兔脑死亡状态对肾脏损伤的影响机制

背景：近几年来有文献报道脑死亡供体器官损伤以及移植之后移植物质量下降,与机体非特异性炎症反应有关。 目的：建立兔脑死亡模型,观察脑死亡后不同时间点肾脏形态学及功能学方面的变化情况,并揭示其可能的作用机制,为临床合理利用脑死亡供体进行肾脏移植提供实验依据。 方法：采用兔缓慢颅内加压法建立脑死亡模型。30只大鼠随机数字表法分为3组,正常组(n=5)：仅作持续麻醉维持,不予处理;对照组(n=5)：麻醉后进行开关腹手术并钻孔开颅;实验组(n=20)：麻醉后建立脑死亡模型。在确定脑死亡后,分别观察2,4,6 ,8 h后肾脏各指标变化。 结果与结论：随着脑死亡时间的延长,血清中尿素氮、肌酐的浓度不断增加,白细胞介素1β,6,8、肿瘤坏死因子α的水平也不断升高;苏木精-伊红染色和原位末端凋亡法结果显示,随着脑死亡时间的延长,肾脏损伤程度有所增加、肾脏组织中PKCα mRNA、蛋白质的表达趋势亦如此。说明脑死亡状态可以导致肾脏形态学及功能学方面的改变,且随着时间的延长而逐渐加重,该现象可能与PKCα的激活、炎症递质的释放有关。     

恒河猴肝移植后急性排斥反应中热休克蛋白70的早期诊断价值

背景：热休克蛋白是生物体在不利环境因素刺激下应激合成的一种特殊蛋白质,热休克蛋白70参与移植免疫反应并发挥重要作用。 目的：探讨热休克蛋白70在恒河猴肝移植后急性排斥反应中的早期诊断价值。 方法：选用健康恒河猴采用改良二袖套+肝动脉重建的方法进行同种异体原位肝移植16例,移植后受体分为急性排斥组和对照组,每组8只,急性排斥组围手术期不行免疫抑制治疗,对照组围手术期使用免疫抑制治疗,分别在移植后6,12,24,72 h 4个时间点取移植后肝脏组织进行苏木精-伊红染色以判断排斥反应程度,western blotting检测肝组织中热休克蛋白70表达水平,免疫组化检测肝组织热休克蛋白70表达情况。 结论与结论：肝移植后72 h时段内急性排斥组肝脏急性排斥反应的组织学表现重于对照组,Baff分级水平高于对照组(P < 0.05),从移植后开始至移植后72 h两组移植肝经免疫组化和western blotting检测热休克蛋白70表达水平均有所升高,但急性排斥组要明显高于对照组(P < 0.05)。提示,未使用免疫抑制治疗的情况下,恒河猴肝移植后早期急性排斥反应在移植后72 h内即可明显观察到,热休克蛋白70在移植肝组织中表达水平也随着急性排斥反应的发生进展呈现明显上升趋势,对肝移植后早期急性排斥具有较高的预测和诊断价值。     

热休克预处理对大鼠缺血再灌注心肌保护作用机制的探讨

目的:观察心肌缺血再灌注时P-选择素（Ps）表达情况；探讨热休克蛋白(HSP)对缺血再灌注心肌Ps及细胞凋亡表达的影响。 方法:成年雌性Wistar（n=40）大鼠随机分为3组。热休克组全麻后高热处理造成热休克动物模型，对照组及假手术组仅予全麻处理。24 h后热休克组及对照组结扎左冠状动脉前降支(LAD)1 h，再灌注2 h造成心肌缺血再灌注动物模型。假手术组只于LAD处穿线而不结扎。术毕测心梗范围、HSP70、Bax、Bcl-2、Ps、凋亡细胞及血清CK-MB。 结果:热休克组HSP70表达高于对照组及假手术组(P<0.05)，后两组无明显差别(P>0.05)；热休克组心梗范围小于对照组(P<0.05)，CK-MB值低于对照组(P<0.01)，凋亡细胞、Bax及Ps表达低于对照组(P<0.05)，两组Bcl-2表达无显著差别(P>0.05)；假手术组无Ps表达。 结论:HSP70可抑制缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡，抑制Bax表达致Bax/Bcl-2比值下降为其机制之一；Ps参与心肌缺血再灌注损伤；HSP70可能有抑制心肌Ps表达的作用，这或许是热休克预处理对大鼠缺血再灌注心肌的另一保护机制。     

热休克蛋白干预脑缺血缺氧模型大鼠神经功能及脑组织中血红素加氧酶1蛋白的表达

背景：脑缺血缺氧可引发一系列复杂的级联反应,因其发病机制复杂,至今无理想的治疗药物。目的：探究热休克蛋白对脑缺血缺氧大鼠血红素氧化酶1蛋白表达及神经功能的影响。方法：将30只大鼠随机分为假手术组、脑缺血缺氧模型组、热休克蛋白70组,每组10只。后两组制备脑缺血缺氧大鼠模型;假手术组大鼠不进行结扎;热休克蛋白70组在造模基础上给予尾部注射0.5 m L重组腺病毒v Ad-HSP70悬液,1次/d,给药3 d。给药结束后比较3组大鼠的神经功能、氧化指标、大鼠脑组织的含水量及梗死面积;苏木精-伊红染色观察3组大鼠脑组织形态;Western blot检测大鼠脑组织中血红素氧化酶1蛋白的表达。结果与结论：(1)与假手术组相比,脑缺血缺氧模型组大鼠的神经功能评分显著降低,热休克蛋白70组大鼠的神经功能评分显著升高(P <0.05);(2)脑缺血缺氧模型组大鼠的脑积水量和梗死面积明显大于假手术组(P <0.05);并且脑缺血缺氧模型组大鼠的脑组织发生显著变化,细胞分布散乱,且数量缺失明显增多,坏死细胞较多;(3)与脑缺血缺氧模型组相比,热休克蛋白70组大鼠的脑积水量和梗死面积显著减小,且...     

脑死亡对巴马小型猪心脏结构与功能的影响及其机制的实验研究

目的： 探讨脑死亡状态对巴马小型猪心脏结构与功能的影响及蛋白激酶C (PKC)在其发生机制中的作用。方法: 巴马小型猪10只，随机分为脑死亡组与对照组，每组5只。应用改进的缓慢间断颅内加压法建立脑死亡模型，对照组仅开颅麻醉维持。于脑死亡后6、12和24 h检测血清中肌钙蛋白Ｔ(cTnT)、IL-1β、IL-6及TNF-α水平，24 h开胸取心肌组织，HE染色观察心脏组织结构变化，电镜观察心脏超微结构变化，免疫组化染色观察PKC-α蛋白表达，RT-PCR法检测PKC-α mRNA表达。结果: （1）心肌组织学变化：脑死亡后24 h可见心肌结构改变，光镜下见心内膜下片状出血，心肌溶解，断裂；电镜下见线粒体水肿，肌纤维模糊融合，嵴部分消失，膜部分融合。（2）血清cTnT变化：脑死亡组血清cTnT自脑死亡后6 h开始升高，并随时间延长而逐渐升高；各时点两组相比脑死亡组明显高于对照组（P<0.05）。（3）炎症介质变化：脑死亡组IL-1β、IL-6、TNF-α水平自6 h开始升高，并随时间延长而逐渐升高；各时点两组相比脑死亡组明显高于对照组（P<0.05）。（4）心肌细胞中PKC-α mRNA及其蛋白水平的变化：脑死亡组PKC-α mRNA及其蛋白表达水平均明显高于对照组（P<0.05）。结论: 脑死亡导致巴马小型猪心脏结构与功能的损伤，炎症介质水平升高；脑死亡时心脏PKC-α 表达水平升高。PKC-α的活化可能参与了脑死亡状态下心脏的损伤过程。     

巴马小型猪脑死亡状态下血清炎症介质的改变及在肝脏损伤中的作用

目的：探讨巴马小型猪在脑死亡状态下血清炎症介质的变化及对肝脏损伤的作用。方法:巴马小型猪10只，随机分脑死亡组与对照组，每组5只。用颅内加压法建立脑死亡模型，对照组仅开颅麻醉维持，分别于3、6、12、18和24h取血清测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）及IL-1β、IL-6和TNF-α水平。结果:（1）炎症介质变化：脑死亡组动物血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平均自脑死亡后3h开始升高，并随时间的延长而继续升高；脑死亡后3、6、12、18和24 h脑死亡组明显高于对照组（P<0.05）。（2）肝脏酶学变化：血清ALT、AST水平自脑死亡后12 h开始升高，并随时间的延长而继续升高；脑死亡后12、18和24 h脑死亡组明显高于对照组（P<0.05）。结论：巴马小型猪脑死亡状态下血清炎症介质升高，并随时间的延长而继续升高。脑死亡状态下肝脏功能的损伤可能与这些炎症介质的水平升高有关。     

无心跳供体肺移植中部分液体通气对肺保护的病理学评估

背景：如何在热缺血期给予无心跳供体肺提供保护进而降低移植后原发性移植物失功能是所有研究者和临床医生面前的首要问题。 目的：从病理学角度评价部分液体通气在无心跳供体肺移植中对供体肺的保护作用。 方法：将36只清洁级SD大鼠随机均分为3组,应用自制16G深静脉留置针作气管插管,行气管切开并连接至呼吸机行机械通气。经颈静脉注入KACL溶液猝死大鼠,用多导生理检测仪连续记录血压,在血压变为0 mm Hg时,认为造模成功,模型建立后氧气组大鼠继续给予机械通气2 h;盐水组和氟化碳组先给予盐水和氟化碳5 min的纯氧通气,后从气管插管中注入相当于功能残气量的高氧盐水和高氧氟化碳(10 mL/kg),并给予机械通气2 h。 结果与结论：大体观察盐水组肺脏肿胀,肺组织表面片状出血,肺呈暗红色,气道内有血性水肿液;氧气组见肺脏肿胀较轻,肺表面有少量出血点;氟化碳组肺组织炎症细胞浸润和组织水肿明显减轻。光镜下盐水组和氧气组呈弥漫性肺泡和间质充血、水肿,支气管壁及毛细血管周围有大量的炎性细胞浸润和肺泡过度膨胀,肺泡壁断裂;氟化碳组肺组织细胞结构较为完整,无明显破坏。结果可见部分液体通气可以对无心跳供肺起到很好的保护作用。     

不同通气方式对髋关节置换高血压患者应激反应的影响

背景：髋关节置换患者全麻时,气管插管可造成咽喉和气管感受器的物理刺激,会引起患者的应激反应增强,尤其是高血压患者。Supreme喉罩能够减轻围术期患者心血管应激反应,降低气道并发症。 目的：观察Supreme喉罩和气管插管对高血压患者髋关节置换应激反应的影响。 方法：取2010年1月至2014年9月于江苏省沭阳仁慈医院行人工髋关节置换的患者45例,采用随机数字表法将患者均分为两组,喉罩组23例,气管插管组22例。两组患者均采用相同的麻醉诱导和维持方法,置换过程中连续监测患者的收缩压、舒张压、心率及血氧饱和度,分别记录两组麻醉诱导前(T0)、插管(喉罩)后即刻(T1)、5 min(T2)、15 min(T3)时收缩压、舒张压、血氧饱和度、心率及血糖、血浆肾上腺素、去甲肾上腺素、血清皮质醇、血管紧张素Ⅱ及心钠素水平。 结果与结论：喉罩组患者收缩压与舒张压在T1-T3时间点较T0时明显降低(P < 0.05);心率、血氧饱和度在T0-T3各时间点比较平稳,差异无显著性意义(P > 0.05)。气管插管组患者收缩压、舒张压在T1时较T0时显著升高,收缩压在T2、T3时较T0明显降低,舒张压在T3时较T0显著降低(P < 0.05),心率、血氧饱和度在T1时间点显著升高(P < 0.05)。与T组比较,喉罩组患者收缩压与舒张压在T1-T3时间点显著降低(P < 0.05),心率在T1、T2较T组明显减慢(P < 0.05),血氧饱和度在T1显著高于T组(P < 0.05)。与T0时比较,T1-T3时气管插管组血糖、血浆肾上腺素、去甲肾上腺素浓度和皮质醇含量明显升高,且显著高于喉罩组(P < 0.05)。T1-T3时气管插管组血管紧张素Ⅱ水平较T0时显著增高,且均高于喉罩组。T1-T3时两组心钠素含量明显升高,气管插管组显著高于喉罩组(P < 0.05)。可见喉罩对于这些与应激相关的生化指标的影响较小,这也是其对患者血流动力学影响较小的生理基础。提示与气管插管比较,喉罩可明显减轻高血压患者全麻状态下髋关节置换时的应激反应。中国组织工程研究杂志出版内容重点：人工关节;骨植入物;脊柱;骨折;内固定;数字化骨科;组织工程     

虎杖甙下调兔肺缺血再灌注损伤时TLR4的表达

目的： 研究家兔肺缺血再灌注损伤时Toll样受体4(TLR4)信号转导通路变化及虎杖甙(PD)对其影响。方法：复制在体肺缺血再灌注损伤模型。健康日本大耳白免30只, 随机分为对照(C)组、缺血再灌注(IR)组、PD组。鲎试剂试管法检测血浆内毒素(ET); 免疫组化法检测肺组织TLR4、核因子-κB p65(NF-κB p65)和热休克蛋白70(HSP70)的蛋白表达；原位杂交法检测肺组织细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA表达；电镜观察肺超微结构变化。结果：IR组、PD组与C组相比血浆ET无显著差异(均P>0.05)。IR组肺组织TLR4、NF-κB p65、HSP70蛋白及ICAM-1mRNA表达较C组显著升高(均P<0.01)；PD组上述改变较IR组明显下降，但仍高于C组(均P<0.01); 电镜见PD组肺超微结构损伤明显轻于IR组。结论：肺缺血再灌注损伤过程中HSP70合成增加，作为内源性配体之一上调TLR4，可能通过激活NF-κB，进而诱导ICAM-1的转录和分泌。PD可以下调该信号转导途径，减轻肺缺血再灌注损伤。     

Elevated levels of inducible heat shock 70 proteins in human brain

Differential expression of heat shock genes can modulate protein folding and stress-related cell death. There have been no comparisons of their levels of expression in animals and humans. Levels of expression of heat shock 70 genes in human brain were compared to levels in non-stressed and heat-stressed brain of rat. Levels of hsp70 proteins in human brain were 43-fold higher than in non-stressed rat brain and 14-fold higher than highest induced levels in brains of heat-shocked rats. Levels of constitutively synthesized hsc70 proteins were approximately 1.5-fold higher in human than in rat. Higher levels of hsp70 proteins in human brain may serve to protect brain cells against stress-related death or dysfunction throughout the lifespan.     

乌司他丁对中度烧冲复合伤大鼠肺损伤保护作用的研究

目的研究乌司他丁对中度烧冲复合伤大鼠肺组织保护作用及其可能机制。 方法120只雄性SD大鼠按随机数字表法分为4组：假伤＋0.9%氯化钠溶液组(简称SS组,n＝20)、假伤＋乌司他丁组(简称SU组,n＝20)、烧冲复合伤＋0.9%氯化钠溶液组(简称BBS组,n＝40)和烧冲复合伤＋乌司他丁组(简称BBU组,n＝40)。BBS组和BBU组均制成25%TBSA深Ⅱ度烧伤＋中度冲击伤的中度烧冲复合伤模型,SS组与SU组大鼠麻醉后,除不致伤外其他干预方法同烧冲复合伤模型制作。伤后即刻,大鼠尾静脉分别对应给予注射0.9%氯化钠溶液和乌司他丁4万U/kg。各组大鼠分别于伤后6、24 h以腹主动脉抽血法处死(BBS、BBU组每时刻点各随机选取20只)后取肺组织观察病理学变化并进行肺损伤评分,采用ELISA法检测肺组织热休克蛋白70(HSP70)的含量,Western Blot试验测定肺组织中乙酰化组蛋白H3赖氨酸9(Ac-H3K9)相对表达量,干湿重法测定肺组织含水率。 结果伤后6 h,BBS组、BBU组大鼠肺损伤评分分别为(5.82±0.37)、(4.20±0.32)分,肺组织保护性蛋白HSP70含量分别为(205.0±2.3)、(220.0±2.4) pg/mL,Ac-H3K9的相对表达量分别为0.68±0.13、1.45±0.12,肺组织含水率分别为(85.30±2.13)%、(82.70±1.57)%;伤后24 h,BBS组、BBU组大鼠肺损伤评分分别为(8.25±0.42)、(6.11±0.31)分,HSP70含量分别为(221.0±2.4)、(226.0±2.7)pg/mL,Ac-H3K9的相对表达量分别为1.59±0.17、1.78±0.15,肺组织含水率分别为(82.80±1.57)%、(80.20±0.32)%。伤后6、24 h,BBS组与BBU组肺损伤评分比较差异均有统计学意义(t＝6.132、6.791,P＝0.026、0.016),肺组织含水率比较差异均有统计学意义(t＝6.123、5.894,P＝0.034、0.019),伤后6 h,两组HSP70、Ac-H3K9表达水平比较差异均有统计学意义(t＝ 2.795、3.165,P＝0.031、0.028),伤后24 h,两组HSP70、Ac-H3K9表达水平比较差异均无统计学意义(t＝ 2.143、3.154,P值均大于0.05)。伤后6、24 h,同一观测时间点BBS组与BBU组肺损伤评分、HSP70、Ac-H3K9表达水平、肺组织含水率分别与SS组、SU组比较,差异均有统计学意义(P值均小于0.05)。 结论乌司他丁能减轻大鼠烧冲复合伤早期肺组织水肿和病理损害,其机制可能与乌司他丁能增加肺组织保护性蛋白的表达、提高大鼠对损伤的耐受力有关。     

热休克反应对缺血-再灌心肌保护作用的机制探讨

目的：探讨热休克反应对大鼠缺血-再灌心肌保护作用的可能机制。方法：SD大鼠,随机分为对照组及热休克组,动物经热休克处理恢复2或24h后复制缺血再灌模型并进行各项检测。结果：①热休克处理后心肌组织内SOD活性显著高于对照组,MDA含量则显著低于对照组。②热休克组心肌组织内乳酸及ATP含量均显著高于对照组,糖原含量则显著低于对照组。③热休克反应能诱导HSP70i的转录。结论：热休克反应对缺血-再灌心肌的保护作用与心肌能量代谢的改善、抗氧化能力的增强以及HSP70i的转录合成增强有关。     

大鼠角膜碱烧伤后热休克蛋白70的表达

背景：角膜碱烧伤后损伤修复受许多因素的影响,热休克蛋白可促进变性、损伤蛋白质的迅速恢复或清除。 目的：观察大鼠角膜碱烧伤后热休克蛋白70的表达及其与角膜损伤修复的关系。 方法：检查大鼠眼无炎症及其他病变后,奥布卡因滴眼液点眼2次,棉签吸除结膜囊液体,将统一规格直径5 mm的滤纸片浸泡于1 mol/L NaOH溶液中10 s,然后置于大鼠角膜中央30 s制作大鼠角膜碱烧伤模型。分别于碱烧伤后6 h,1,3,7,14,21 d取材。 结果与结论：RT-PCR、免疫组织化学染色、Western blot结果均显示热休克蛋白70 mRNA和蛋白在角膜碱烧伤后1 d即开始升高,7 d时达高峰,14 d后开始下降。苏木精-伊红染色及电镜观察显示角膜损伤在烧伤后6 h即较明显,烧伤后7 d逐渐恢复。提示大鼠角膜碱烧伤后热休克蛋白70的表达与碱烧伤后角膜损伤修复过程一致,参与了大鼠角膜碱烧伤后细胞的自我保护及修复过程。     

高渗盐水处理对失血性休克兔红细胞免疫黏附功能及抗细菌感染的影响

目的 :探讨高渗盐水处理 ,对失血性休克兔红细胞免疫黏附功能和对大肠杆菌攻击抵抗力的影响。方法 :将 6 0只兔分为6组 ,每组 10只 ,第 1组为假休克组 :仅在局麻下插管加肝素 ;第 2、3组经颈动脉放血导致兔休克。 30min后 ,第 1、2组兔分别给予生理盐水及含 1× 10 9/kg大肠杆菌的平衡盐液 ;第 2组兔给予 75g/L盐水及含 1× 10 9/kg大肠杆菌的平衡盐液 ,然后观察 3组动物的存活率。另取兔 30只 ,分组和失血性休克模型的制作同上 ,但处理所用的平衡盐液中不含大肠杆菌。以C3b受体花环及IC花环形成实验 ,检测休克后 5h兔红细胞的免疫黏附功能。结果 :高渗盐水处理组兔红细胞C3b受体花环的形成率显著高于生理盐水治疗组 (P <0 .0 1) ;而IC花环形成率则显著低于生理盐水处理组 (P <0 .0 1)。另外 ,高渗盐水处理能显著提高失血性休克兔对大肠杆菌攻击的抵抗力。结论 :高渗盐水处理能显著增强失血性休克兔的红细胞免疫黏附功能和对大肠杆菌攻击的抵抗力