胶原诱导性关节炎大鼠滑膜双向凝胶电泳图谱建立及差异分析

目的类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一个多基因多因素参与的病理过程。实验中通过建立与RA发病机制相似的胶原诱导性关节炎(Collagen-induced arthritis,CIA)大鼠动物模型,运用蛋白质组技术对正常大鼠和CIA大鼠模型不同时间点滑膜组织的蛋白质点进行比较分析,为鉴定CIA大鼠滑膜病变相关蛋白质及研究RA发病机制奠定基础。方法用牛Ⅱ型胶原和完全福氏佐剂建立CIA大鼠模型,采用一步抽提法抽提滑膜蛋白质,运用固相pH梯度双向凝胶电泳分离各组大鼠滑膜组织的总蛋白质,用PDquest软件分析图谱,比较差异蛋白质,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flightmass spectrometry,MALDI-TOF-MS)得到相应肽质指纹图谱,用Mascot查询软件搜索数据库,鉴定部分差异蛋白质。结果成功建立了CIA大鼠模型,获得分辨率较高、重复性较好的大鼠滑膜组织双向电泳凝胶图谱。正常组与25、35和45天模型组大鼠滑膜组织凝胶图谱的平均蛋白质点数分别为1070±41、1049±22、1079±44和1088±39。在4个组均有表达差异的蛋白质点中随机取20个点进行肽质指纹图分析,鉴定了部分与细胞代谢、信号转导及结构相关的差异表达蛋白质。结论建立了分辨率较高且重复性较好的正常大鼠与CIA大鼠不同时间点滑膜组织的双向凝胶电泳图谱,鉴定了一些与CIA大鼠滑膜病变相关的差异表达蛋白质,为识别RA病变相关蛋白质及推断RA病变过程奠定基础。     

人膝骨性关节炎滑膜中表达的骨桥蛋白

背景：目前研究显示骨桥蛋白与骨性关节炎关节软骨退变密切相关,但骨桥蛋白与骨性关节炎滑膜病变是否相关,仍少见报道。 目的：研究骨桥蛋白在原发性骨性关节炎发生与发展过程中的作用。 方法：选取膝骨性关节炎患者关节滑膜标本与下肢外伤患者作对照,根据综合评分法进行分组,采用免疫组化方法检测关节滑膜中骨桥蛋白水平,比较不同程度骨性关节炎组膝关节滑膜中骨桥蛋白的差异,同时比较标本滑膜衬里层和衬里下层骨桥蛋白的水平。 结果与结论：骨性关节炎组织中骨桥蛋白阳性呈黄色、棕黄色、棕褐色表达,病变程度越重,颜色表达越深。骨性关节炎组滑膜中骨桥蛋白明显高于对照组,差异有显著性意义(P < 0.05),且随着骨性关节炎病情加重,骨桥蛋白的表达逐渐增多,呈正相关(ρ=0.663,P < 0.01)。但滑膜衬里层和衬里下层骨桥蛋白的水平差异无显著性意义(P > 0.05)。说明骨桥蛋白可能与骨性关节炎的发病有关。     

巨噬细胞移动抑制因子在类风湿性关节炎中的地位和作用

类风湿性关节炎是一种细胞因子参与介导的自身免疫性疾病;巨噬细胞移动抑制因子是一种具有广泛生物学活性的细胞因子,大量表达在类风湿性关节炎患者血清和滑膜组织中,促进巨噬细胞、滑膜细胞和内皮细胞的活化,促进类风湿性关节炎的炎症反应、滑膜组织增生和关节损伤。巨噬细胞移动抑制因子在类风湿性关节炎中的地位和作用十分重要。     

鼻咽癌组织与正常鼻咽上皮组织的差异磷酸化蛋白质组分析

目的：比较鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma, NPC)组织与正常鼻咽上皮组织磷酸化蛋白质组差异,筛选差异磷酸化蛋白质,为揭示NPC的发病机制提供依据。方法：采用双向凝胶电泳技术(2-DE)分离NPC组织与正常鼻咽上皮组织的总蛋白质,蛋白质转膜后与抗酪氨酸磷酸化抗体进行Western印迹分析,图像分析识别差异磷酸化蛋白质点,电喷雾-四极杆-串联质谱（ESI-Q-TOF MS/MS）鉴定差异的酪氨酸磷酸化蛋白质,采用NetPhos软件预测蛋白质的酪氨酸磷酸化位点,并采用生物信息学方法对差异磷酸化蛋白质的功能和亚细胞定位进行分析。采用Western印迹检测差异蛋白质（phosphatidylethanolamine- binding protein 1）在正常鼻咽黏膜组织和鼻咽癌组织的总蛋白质中的磷酸化水平。结果：建立了NPC组织与正常鼻咽上皮组织的酪氨酸磷酸化蛋白质表达谱,识别了25个差异酪氨酸磷酸化蛋白质,共鉴定了13个差异酪氨酸磷酸化蛋白质,其中7个蛋白质的酪氨酸磷酸化水平在NPC组织中增强,而6个蛋白质的酪氨酸磷酸化水平降低。NetPhos软件预测和生物信息学分析结果显示,13个差异蛋白质均存在酪氨酸磷酸化位点,其功能涉及物质代谢、细胞结构、细胞防御以及信号转导。与正常鼻咽黏膜组织相比较,差异蛋白phosphatidylethanolamine-binding protein 1在鼻咽癌组织中磷酸化表达水平下调。结论： 鉴定了13个可能与NPC发病相关的酪氨酸磷酸化蛋白质,为揭示NPC发病机制提供了科学论依据。     

以双向凝胶电泳为基础的食管癌组织蛋白质组学分析新策略

目的：探讨采用双向电泳为基础的蛋白质组学的研究手段在食管癌组织与食管癌旁组织差异分析中的应用。方法：双向凝胶电泳分离食管癌及其癌旁组织的蛋白质，图像分析软件ImageMaster4．01分析所获得的凝胶图谱并寻找差异点，用质谱仪鉴定差异点蛋白质。结果：提出了一套可行的癌组织差异分析策略，并发现在分子量50 000-60 000，等电点5—6的区域，食管癌组织和食管癌旁组织存在2个差异表达的蛋白，质谱鉴定为丙酮酸激酶M2/M1。结论：在合理的策略指导下，以双向凝胶电泳为基础的蛋白质组学技术是研究肿瘤的一种重要手段，我们得到的丙酮酸激酶M2/M1在食管癌与其癌旁组织中存在差异表达，可能对食管癌的诊断、治疗具有重要意义。     

应用蛋白质组学分析结直肠癌促泌素和糖调节蛋白78蛋白变化及其意义

目的分析结直肠癌、配对正常黏膜组织差异表达蛋白质,寻找与结直肠癌发生、发展相关的分子标记物。方法固相pH梯度双向凝胶电泳分离结直肠癌患者配对癌及正常黏膜组织的总蛋白,液相色谱串联质谱鉴定差异表达蛋白质点。半定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）、Western blot及免疫组织化学（EnVision法）方法检测促泌素（SCGN）及糖调节蛋白78（GRP78）两个差异表达蛋白质及组织定位,并检测54例神经内分泌肿瘤SCGN的表达。结果比较结直肠癌、配对正常黏膜组织蛋白质表达图谱,共获得5倍以上差异蛋白质点35个,癌组织中表达上调15个、下调20个。质谱分析鉴定14个蛋白质。RT-PCR及Western blot证实结直肠癌组织SCGN低表达,免疫组织化学染色发现正常结直肠黏膜神经内分泌细胞及98％（53／54）的神经内分泌肿瘤SCGN阳性。GRP78蛋白在结直肠癌组织中的表达明显高于正常黏膜组织,但在mRNA水平上癌组织和正常组织之间差异无统计学意义。结论双向凝胶电泳结合质谱分析是筛选肿瘤异常表达蛋白质的有效手段,所获得的35个差异表达候选蛋白质可能与结直肠癌的发生、发展有关。SCGN是一个候选神经内分泌标记物,GRP78蛋白表达增高可能涉及翻译后修饰。     

IL-17调控类风湿性关节炎滑膜细胞SENP6表达与Cyr61关系初探

探讨IL-17调控类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞SENP家族分子表达与Cyr61表达间的关系,取8例类风湿关节炎患者的成纤维样滑膜细胞进行原代培养与鉴定,并利用real-time PCR检测了经IL-17刺激后,滑膜细胞中SENP家族分子与Cyr61表达格局。结果显示:经IL-17刺激后,有四例滑膜细胞Cyr61的表达上调,同时SENP6的表达也上调,另外四例经IL-17刺激Cyr61未见上调的滑膜细胞,其SENP6的表达却未见上调。初步分析表明IL-17调控类风湿性关节炎滑膜细胞SENP6表达与Cyr61表达存在正相关性,提示SENP6可能在IL-17刺激类风湿性关节炎滑膜细胞Cyr61的表达中起着调控作用。     

慢性肾小球肾炎肾阴虚证血浆蛋白质双向凝胶电泳分析

目的初步观察慢性肾小球肾炎肾阴虚证患者血浆蛋白质组的变化与表达差异,为进一步探讨肾阴虚证的发生机制奠定基础。方法采用双向凝胶电泳（2-DE）技术分离慢性肾小球肾炎肾阴虚证患者、肾阳虚证患者和正常人的血浆总蛋白,银染显色;PDQest软件对凝胶图像进行定性定量差异表达分析;从中选取差异表达蛋白质斑点,通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）分析,获取肽质量指纹图谱（PMF）;通过Mscot-Wizard软件进行数据库搜索,鉴定蛋白质。结果与正常人和慢性肾小球肾炎肾阳虚证患者相比,在慢性肾小球肾炎肾阴虚证患者血浆蛋白质双向凝胶电泳图谱中绝对高表达的蛋白质斑点有80个,绝对低表达的蛋白质斑点有42个;定性差异表达分析发现,在慢性肾小球肾炎肾阴虚证患者血浆蛋白质双向凝胶电泳图谱中特异出现的蛋白质斑点有2个,缺失的蛋白质斑点有13个。结论同病异证患者血浆中存在差异表达蛋白质,利用蛋白质组学技术有望对中医证候的发生机制进行阐释。     

系统性红斑狼疮患者血清蛋白质组学研究

目的 运用蛋白质组学的方法,分析正常人及SLE患者血清蛋白质的差异表达,寻找与SLE疾病发病机制相关的蛋白质.方法 分别收集健康人及SLE患者血清各9例,同组血清等量混合,用试剂盒除去血清中的白蛋白和免疫球蛋白,再经除盐浓缩后,将血清样品采用固相pH梯度（IPG）双向凝胶电泳（2-DE）分离正常人及SLE患者血清的总蛋白质.凝胶经考马斯亮蓝染色显色后,利用Analysis2d软件对获得的蛋白图谱进行分析,寻找差异表达的蛋白质,利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）进行鉴定,分析差异蛋白点.结果 对照组凝胶共检出蛋白点648个,患者组检出639个.对照组凝胶蛋白点匹配率84.5％,患者组凝胶蛋白点匹配率82.5％.通过比较分析,差异表达蛋白质点数为92个,有52个蛋白点在SLE患者组表达上调,40个表达下调,有14个点的表达水平在组间差异有统计学意义,质谱鉴定共鉴定5个蛋白质.通过文献研究显示,我们鉴定的部分蛋白在SLE的发病机制中起潜在的作用.结论 在SLE患者血清中存在着差异血清蛋白质,这些蛋白质可能是SLE发病的内在因素,并且在SLE的疾病发展过程中发挥重要作用,可能作为新的血清标志物和潜在的自身抗原.     

TAK1基因在类风湿性关节炎滑膜组织的表达与活化研究

目的研究转化生长因子β激活激酶(TAK1,MEKK7)基因在类风湿性关节炎滑膜组织的表达与活性变化,探讨其与类风湿性关节炎的关系。方法本实验采用病例对照研究分别利用RT-PCR和Western-blot方法检测类风湿性关节炎(RA)、骨性关节炎(OA)及非关节炎病人膝关节滑膜中TAK1基因mRNA和蛋白质的表达,并利用磷酸化抗体比较其活性差异,以验证TAK1与类风湿性关节炎发病的相关性。结果 TAK1 mRNA和蛋白在RA病人膝关节滑膜的表达水平明显高于OA和行膝关节镜探查术未见异常的病人,其TAK1酶活性亦高于OA和行膝关节镜探查术未见异常的病人。结论 TAK1基因与类风湿性关节炎发病发生、发展有一定的相关性。     

HCV患者外周血单个核细胞蛋白质表达质谱分析

目的:应用比较蛋白质组学的方法分析丙型肝炎患者外周血单个核细胞蛋白质表达模式的变化及寻找丙型肝炎相关生物标记分子,进一步识别鉴定其差异表达蛋白质,分析其对丙型肝炎慢性化机制的意义.方法:应用固相化pH梯度双向凝胶电泳(2-DE)分离健康者(10)及HCV患者(28)PBMC的总蛋白质,凝胶银染显色后,PDQuest图像分析软件进行比较分析、识别差异表达的蛋白质,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)获得差异蛋白点的肽质指纹图谱,通过SWISS-PROT数据库鉴定蛋白质.结果:得到两张2-DE图谱,HCV患者及健康者PBMC凝胶的蛋白质点数分别为625及614;初步筛选出HCV患者与健康者存在明显差异的12个蛋白点,经质谱分析,初步鉴定了10种蛋白质.这些差异蛋白质包括病毒蛋白、蛋白质合成与分解、三大代谢相关酶类、细胞结构相关蛋白质以及信号转导相关蛋白质.结论:应用2-DE及MALDI-TOF-MS方法建立了HCV患者PBMC双向凝胶电泳图谱,分离并初步鉴定了10种与HCV感染相关的差异表达的蛋白质,为研究HCV慢性化相关机制提供新的线索.     

慢性间歇性缺氧大鼠肾脏组织蛋白质组的变化

目的:比较慢性间歇性缺氧大鼠与正常大鼠肾脏组织蛋白质双向电泳图谱,寻找和鉴定慢性间歇性缺氧大鼠肾脏组织中的差异蛋白表达谱。方法:以固相pH梯度等电聚焦为第一向和垂直SDS-PAGE为第二向,分别对正常对照大鼠和慢性间歇性缺氧大鼠的肾脏组织蛋白质样品进行二维分离,2-DE图谱经ImageMaster 2D Platinum V5.0软件分析,选取4个差异蛋白点用基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定。结果:通过对2-DE图谱蛋白斑点的匹配及对比分析,与慢性间歇性缺氧相关的差异表达蛋白斑点为112个;经质谱鉴定的4个差异表达的蛋白斑点,慢性间歇性缺氧组量下调的差异点1个,即线粒体ATP合成酶δ亚基;上调的差异点3个,分别为己糖激酶、儿茶酚-O-甲基转移酶、脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子-1。结论:大鼠肾脏组织慢性间歇性缺氧损伤相关的差异蛋白表达变化可能通过多种途经影响肾脏功能。     

不同临床类型原发鼻咽癌组织差异表达蛋白

 目的 寻找上行型、下行型和混合型不同临床类型鼻咽癌原发病瘤灶组织中的差异表达蛋白。方法 采用双向凝胶电泳对不同临床类型鼻咽癌患者的鼻咽癌组织和正常人鼻咽组织总蛋白进行分离,对比找出差异表达蛋白质斑点,结合基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱分析技术和数据库信息检索鉴定差异蛋白点。结果 与正常组比较,混合型鼻咽癌组出现31个差异蛋白质点,其中18个表达上调,13个表达下调;从混合型鼻咽癌组选择10个差异蛋白质斑点进行质谱鉴定,成功鉴定出5个,其中表达上调的有热休克固有蛋白、α1抗胰蛋白酶和巨噬细胞帽蛋白;表达下调的有S100A9蛋白和 蛋白4.1。与下行型鼻咽癌组比较,上行型鼻咽癌组出现31个差异表达蛋白点,其中15个表达上调、16个表达下调;从上行型组选择10个差异蛋白质斑点进行质谱鉴定,成功鉴定出6个,其中表达上调的有线粒体顺乌头酸酶、乙醇脱氢酶、Rab GDP解离抑制因子β;表达下调的有NM23-H1、核氯离子通道蛋白27和乙醛脱氢酶X。结论 不同临床类型鼻咽癌患者肿瘤转移相关蛋白、能量代谢蛋白、解毒蛋白与抗肿瘤转移蛋白表达水平存在差异,这些蛋白可作为临床分型标记物。     

蛋白质组学方法鉴定卵巢癌转移相关蛋白

目的探讨不同转移潜能卵巢癌细胞株蛋白表达谱差异。方法采用基于双向电泳（2-DE）-基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI—TOF—MS）蛋白质组学分析方法,对比分析具有相同来源、不同转移能力的卵巢癌细胞系HO8910和HOg910pm的总蛋白表达谱差异。结果2-DE分析发现两株细胞间有39个蛋白表达水平差异在2倍以上,MALDI—TOF—MS鉴定出其中18种蛋白,它们涉及细胞凋亡、细胞外基质、细胞骨架、生长因子、糖酵解、蛋白质代谢和免疫系统等领域。结论肿瘤转移涉及体内多种领域多种蛋白,这些领域的蛋白相互协调作用最终共同控制细胞的转移能力。     

老年大鼠心肌线粒体的比较蛋白质组学研究

目的:筛查心肌线粒体中与衰老相关的蛋白质。 方法：分离成年组（10周）和老年组（12月）雄性SD大鼠心肌线粒体，抽提心肌线粒体蛋白质行双向凝胶电泳，应用MALDI-TOF-MS和数据库搜索鉴定图像分析出的差异蛋白点，同时进行了心肌组织ATP含量的检测。 结果:图像分析示84个心肌线粒体蛋白表达发生改变，质谱鉴定了15个差异点。老年组肌酸激酶、硫氧还原蛋白过氧化物酶2、Tu翻译延长因子、异柠檬酸脱氢酶4个蛋白表达上调，琥珀酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、乌头酸水合酶、NADH脱氢酶、ATP合酶H+转运装置、ATP合酶β链、热休克蛋白60、葡萄糖调节蛋白78、prohibitin、乙醛脱氢酶2、电压依赖型阴离子通道11个蛋白表达下调。老年组心肌组织ATP含量下降(P<0.01)。 结论:通过具有高度分辨率和高度重复性的双向凝胶电泳图谱鉴定了SD大鼠心肌线粒体中在老年组差异表达的蛋白质，这些差异蛋白为深入理解衰老的分子机制提供了有益的线索，差异蛋白的功能留待以后进一步研究。     

Regulation of GRB2 and FLICE2 expression by TNF-alpha in rheumatoid synovium

Chronic rheumatoid arthritis (RA) is characterized by the hyperplasia of synovial tissue, which results from dysregulation of proliferative and antiapoptotic signals transduced in the synovial cells by unknown mechanisms. To identify candidate factors involved in the regulation of synovial hyperplasia, the expression profile of 205 apoptosis-related genes was compared between tissues from patients with RA and osteoarthritis (OA) using a cDNA microarray. Upregulated genes in the RA synovium included TNFR2, FLICE2, and signaling molecules involved in a MAP kinase pathway (GRB2, MAPK p38). In contrast, genes encoding SARP1 and various cell cycle regulators were down-regulated in the RA synovium relative to OA. Importantly, the expression levels of GRB2 and FLICE2 genes were remarkably enhanced in RA synoviocytes but not in OA synoviocytes in response to tumor necrosis factor (TNF)-alpha treatment. Thus, these results suggest that over-expression of GRB2 and FLICE2 in RA synovium is caused by TNF-alpha inducibility differentially regulated in RA synoviocytes and provide potential pathogenic roles of these genes in the hyperplasia of the RA synovium.     

Proteomic analysis of synovial fluid as an analytical tool to detect candidate biomarkers for knee osteoarthritis

We conducted research to detect the proteomic profiles in synovial fluid (SF) from knee osteoarthritis (OA) patients to better understand the pathogenesis and aetiology of OA. Our long-term goal is to identify reliable candidate biomarkers for OA in SF. The SF proteins obtained from 10 knee OA patients and 10 non-OA patients (9 of whom were patients with a meniscus injury in the knee; 1 had a discoid meniscus in the knee, and all exhibited intact articular cartilage) were separated by two-dimensional electrophoresis (2-DE). The repeatability of the obtained protein spots regarding their intensity was tested via triplicate 2-DE of selected samples. The observed protein expression patterns were subjected to statistical analysis, and differentially expressed protein spots were identified via matrix-assisted laser desorption/ionisation-time of flight/time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF/TOF MS). Our analyses showed low intrasample variability and clear intersample variation. Among the protein spots observed on the gels, there were 29 significant differences, of which 22 corresponded to upregulation and 7 to downregulation in the OA group. One of the upregulated protein spots was confirmed to be haptoglobin by mass spectrometry, and the levels of haptoglobin in SF are positively correlated with the severity of OA (r = 0.89, P < 0.001). This study showed that 2-DE could be used under standard conditions to screen SF samples and identify a small subset of proteins in SF that are potential markers associated with OA. Spots of interest identified by mass spectrometry, such as haptoglobin, may be associated with OA severity.     

5-aza-2-dC处理鼻咽癌细胞前后的差异蛋白质组学研究

目的：比较5-杂氮-2′-脱氧胞苷（5-aza-2-dC）处理鼻咽癌细胞前后蛋白质组的差异,为筛选鼻咽癌的甲基化失活基因提供依据。方法：用去甲基化药物5-aza-2-dC处理鼻咽癌细胞系5-8F细胞,应用双向凝胶电泳（2-DE）技术分离5-aza-2-dC处理与未处理5-8F细胞的蛋白质,PDQuest图像分析软件识别药物处理与未处理5-8F细胞的差异表达蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）鉴定差异表达的蛋白质。Western 印迹法检测差异蛋白质nm23-H1在药物处理与未处理5-8F细胞中的表达水平。结果：建立了5-aza-2-dC处理与未处理5-8F细胞蛋白质的2-DE图谱,识别了49个差异表达的蛋白质点,鉴定了33个差异表达的蛋白质,其中15个蛋白质在5-aza-2-dC处理5-8F后表达上调。Western 印迹分析证实了nm23-H1在药物处理与未处理5-8F细胞中的差异表达水平。结论：15个5-aza-2-dC处理后表达上调蛋白质的编码基因可能是5-8F细胞的甲基化沉默基因。     

用双向凝胶电泳-飞行时间质谱技术分析HBV感染肝组织蛋白质组

目的 比较正常肝组织与HBV感染肝组织中蛋白质表达谱的改变,筛查在HBV致病过程中相关蛋白质分子表达的不同.方法 应用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳,对3例正常肝组织(A组),3例HBV感染肝组织(B组,均为组织HBsAg阳性,外周血HBsAg阳性、抗-Hbe阳性、抗-HBc阳性)的蛋白质组表达谱进行差异分析,应用基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱仪对差异蛋白质点进行了鉴定.结果 相同条件下对各组总蛋白样品分别进行3次双向电泳,各组检测到的蛋白点数如下:A组(1125±56)个,B组(1203±42)个.以各组中2-DE效果好、点数多的一块胶作为参考胶,分别进行2组间的匹配分析,筛选出两组之间差异大于或等于2倍的蛋白点40个.应用质谱鉴定出人线粒体醛脱氢酶H链、结合珠蛋白Hp2、抗过氧化物蛋白2等22种蛋白质.结论 HBV感染所致慢性炎症能使肝组织表现出明显的差异性蛋白表达谱.     

蛋白质组学技术分析5-aza-2dC处理白?∠赴鸋L-60前后的差异表达蛋白质

目的：研究甲基化转移酶抑制剂5-杂氮-2’-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycitydine, 5-aza-2dC)对人急性髓系白血病细胞HL-60细胞蛋白质表达谱的影响，探讨5-aza-2dC抗急性髓系白血病作用机制。方法：采用二维凝胶电泳（2-DE)技术分离5-aza-2-dC处理与未处理HL-60细胞的总蛋白质，PDquest 图像分析软件识别差异蛋白质点，基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异蛋白质点。 然后采用Western 印迹检测差异蛋白质半乳糖凝集素1（Galectin-1） 在药物处理与未处理HL-60细胞中的表达水平。结果： 建立了5-aza-2dC 处理与未处理HL-60 细胞蛋白质的2-DE 图谱，识别了35个差异表达的蛋白质点，鉴定了27个差异表达的蛋白质，其中包括Galectin-1在内的21个蛋白质在5-aza-2dC 处理后的HL-60 细胞中表达上调，6个蛋白质表达下调或缺失。Western 印迹结果证实Galectin-1在5-aza-2dC 处理HL-60细胞中表达上调。结论：21个表达上调蛋白质的编码基因可能是HL-60细胞的甲基化失活基因，它们可能与急性髓系白血病发病以及5-aza-2-dC抗人急性髓系白血病细胞作用有关