人早孕母胎界面SOCS1、SOCS2、SOCS3表达

目的：研究正常早孕绒毛及蜕膜组织细胞因子信号转导负调控因子（Suppressors of cytoldne signaling，SOCS）基因和蛋白水平表达，以揭示SOCS在母胎界面生理性调节作用。方法：半定量RT-PCR检测早孕绒毛组织、蜕膜组织及原代培养早孕滋养细胞、蜕膜基质细胞SOCS1、SOCS2、SOCS3 mRNA水平；Western blot检测早孕绒毛组织及蜕膜组织SOCS1、SOCS2、SOCS3蛋白表达；免疫组化定位SOCS1、SOCS2、SOCS3在早孕绒毛组织、蜕膜组织表达；ELISA检测滋养细胞、蜕膜基质细胞分泌IL-10、IFN-γ。结果：正常母胎界面见SOCS1、SOCS2、SOCS3基因表达，其中SOCS3绒毛／蜕膜阳性率73．7％／71．1％；SOCS2绒毛／蜕膜阳性率50．0％／39．5％，SOCS1最少，绒毛／蜕膜阳性率34．2％／31．6％；SOCS1、SOCS2、SOCS3蛋白表达与转录水平基本一致；正常母胎界面SOCS1、SOCS2、SOCS3表达主要定位于绒毛滋养细胞和蜕膜间质；体外无血清培养滋养细胞和蜕膜基质细胞SOCS2、SOCS3低表达，SOCS1未见表达，其分泌的IL-10随时间而增高（P〈0．05）。结论：正常早孕母胎界面表达SOCS1、SOCS2、SOCS3，无刺激条件下滋养细胞和蜕膜基质细胞低表达SOCS2、SOCS3，SOCS在正常妊娠Th平衡中具有重要意义。     

稽留流产患者绒毛和蜕膜组织中Survivin及Fas蛋白表达意义的研究

目的分析正常早孕妇女和稽留流产患者绒毛及蜕膜组织中survivin和Fas蛋白的表达及意义。方法用免疫组化法检测正常早孕妇女和稽留流产患者绒毛和蜕膜组织中survivin和Fas蛋白的表达。结果 Survivin表达早孕组绒毛显著高于稽留流产组绒毛(P0.05),但早孕组蜕膜与稽留流产组相比无显著性差异(P0.05),早孕绒毛组织Survivin的最大阳性强度显著高于蜕膜组织(P0.05)。Fas蛋白表达稽留流产组蜕膜显著高于绒毛及早孕蜕膜(P0.05)。结论Survivin和Fas蛋白在稽留流产过程中可能发挥重要作用。     

复发性自然流产患者绒毛滋养细胞FasL的表达

目的探讨复发性自然流产患者(RSA)绒毛滋养细胞FasL的表达与正常者有无差异。方法应用免疫组化和RT-PCR法,检测RSA患者和正常早孕妇女的绒毛滋养细胞FasL在蛋白水平和mRNA水平的表达,并进行图象分析和比较。结果免疫组化结果显示,绒毛合体滋养细胞和细胞滋养细胞的胞浆和胞膜上均有FasL表达,FasL在2组的定位无差异,但正常组绒毛滋养细胞FasL表达(PU=18.03±4.69)强于RSA组(PU=13.59±3.73),P<0.050。RT-PCR结果表明RSA组绒毛组织FasL在mRNA水平的表达为0.18±0.05,低于正常组0.27±0.06,差异有显著性意义(P<0.01)。结论不明原因RSA患者的绒毛滋养细胞FasL表达弱于正常者,滋养细胞FasL的表达减少可能在复发性自然流产中起重要作用。     

稽留流产患者绒毛凋亡情况和IGF-Ⅱ表达情况分析

目的通过观察绒毛组织凋亡发生和胰岛素样生长因子-2(IGF-Ⅱ)表达情况,来探讨稽留流产发生的可能原因。方法分别选择30例无明显诱因导致的稽留流产患者和正常早孕要求人工流产的患者作为研究对象,采用DNA缺口原位末端标记技术(TUNEL法)检测绒毛滋养细胞的凋亡情况;采用SABC法检测绒毛组织中IGF-Ⅱ的表达情况。结果稽留流产组滋养细胞凋亡指数明显高于对照组,前者IGF-Ⅱ的表达明显高于后者。结论滋养细胞过度凋亡及IGF-Ⅱ缺乏可能是导致稽留流产的重要原因。     

稽留流产与相关基因蛋白表达的关系研究

目的比较正常早孕组和稽留流产组两类妊娠女性的胎盘绒毛、蜕膜组织中Bcl-2、Bax基因蛋白表达情况,分析Bcl-2、Bax基因蛋白表达情况及其二者比值与胎盘绒毛、蜕膜组织中细胞凋亡的作用关系,为探索预防稽留流产发生相关的有效干预措施参考。方法搜集整理近年在北京航天总医院就诊的正常早孕和稽留流产女性93例,利用免疫组化学染色方法检测胎膜绒毛、蜕膜组织中Bcl-2、Bax基因蛋白表达情况,并定量分析其统计量、秩和检验以及相关性三类统计结果。结果无论是绒毛还是蜕膜组织,稽留流产组的Bax基因蛋白表达情况都要高于正常早孕组(0.21±0.37和0.1±0,0.5±0.79和0.14±0.18);绒毛组织两组的Bcl-2基因蛋白表达情况相近(2.95±0.31和2.94±0.42),但是稽留流产Bcl-2和Bax的比值要低于正常早孕组(26.92±8.55和29.41±4.2);蜕膜组织,稽留流产组的Bcl-2基因蛋白表达情况以及Bcl-2和Bax的比值均高于正常早孕组(2.48±0.9和1.47±1.02,18.66±13.09和14±10.22)。结论孕妇稽留流产原因与细胞凋亡相关基因高表达有关。     

米非司酮对早孕绒毛滋养层细胞Bcl-2和caspase-3表达的影响

探讨米非司酮对人早孕绒毛滋养细胞中Bcl—2和caspase-3表达的影响及其在滋养细胞凋亡中的作用。方法：将105例自愿要求终止妊娠的早孕妇女随机分成两组，即米非司酮流产组(55例)及人工流产组(50例)。采用免疫组化染色方法检测早孕妇女的绒毛组织中Bcl—2和caspase-3的表达。结果：米非司酮组与人流组绒毛滋养细胞中Bcl—2的表达率分别为54．6％和88．0％；caspase-3的表达率分别为89．1％和42．0％。米非司酮组与人流组相比较绒毛滋养层细胞Bcl—2呈低表达(P＜0．01)，caspase-3呈高表达(P＜0．01)。结论：Bcl—2和caspase-3在米非司酮诱导的早孕绒毛滋养层细胞凋亡的信号传导中起关键作用。     

FADD、Caspase-3与稽留流产的关系探讨

目的探讨FADD及Caspase-3在稽留流产绒毛滋养细胞中的表达及其关系。方法随机选取早孕稽留流产组35例（实验组）和正常早孕绒毛组30例的绒毛（对照组）检测两组绒毛滋养层细胞FADD和Caspase-3表达。结果FADD和Caspase-3在两组滋养层细胞中均有阳性表达,表达部位均以合体滋养层细胞为主。FADD和Caspase-3在稽留流产组绒毛滋养细胞中表达明显强于对照组,差异有显著性意义（P〈0.01）。结论Fas凋亡途径可能是滋养层细胞凋亡的主要凋亡途径,FADD、Caspase-3是滋养层细胞凋亡中重要的促凋亡因子,滋养层细胞凋亡的增加可能参与了稽留流产的发生。     

人胸腺基质淋巴细胞生成素(hTSLP)在早孕绒毛组织的表达及意义

目的:探讨人早孕母胎界面表达TSLP及其受体(TSLPR)的特征.方法:使用RT-PCR、Western blot、免疫组织化学法分析正常绒毛组织TSLP/TSLPR的表达;RT-PCR、免疫细胞化学法分析原代培养的滋养细胞TSLP/TSLPR的表达;ELISA检测原代培养的人滋养细胞上清TSLP分泌水平.结果:从转录水平至蛋白水平,绒毛细胞滋养细胞与合体滋养细胞均表达TSLP及TSLPR.结论:TSLP表达于正常早孕绒毛组织,可能与早孕期调节性T细胞的扩增及功能变化相关.     

HIV-1协同受体CXCR4、CCR5及相关趋化因子SDF-1在胎盘的表达

目的：研究HIV-1协同受体CXCR4、CCR5及CXCR4的特异性配体SDF-1在人胎盘组织的表达，探索HIV-1子宫内垂直传播的分子机制。方法：半定量RT-PCR检测早、中、晚孕期胎盘及早孕滋养细胞CXCR4、CCR5 mRNA水平；免疫组化和免疫细胞化学检测早孕胎盘及原代培养滋养细胞CXCR4、CCR5蛋白表达；原位杂交及免疫组化分析SDF-1在早孕胎盘的表达；ELISA测定滋养细胞SDF-1的动态分泌水平。结果：各孕期胎盘表达CXCR4及CCR5 mRNA；CXCR4蛋白定位于滋养细胞，而CCR5蛋白定位于绒毛基质中。滋养细胞可转录并翻译SDF-1，且能分泌可溶性SDF-1。结论：滋养细胞同时表达CXCR4及SDF-1，SDF-1可能通过降调CXCR4而拮抗X4-HIV-1感染胎儿细胞；R5-HIV-1或许能通过滋养层裂隙感染CCR5^#基质细胞和/或Hotbauer细胞，从而发生子宫内垂直传播。     

CD147在不明原因自然流产患者绒毛组织的表达

目的:分析CD147在不明原因自然流产患者绒毛组织中的表达水平,并探讨其生物学功能。方法:收集人早孕期正常和不明原因自然流产妇女的绒毛组织,采用免疫组织化学、RT-PCR和Western blotting法检测CD147的表达,比较CD147在正常早孕与不明原因自然流产妇女绒毛组织的表达差异。体外分离纯化获得正常人早孕期滋养细胞,采用免疫细胞化学验证CD147在滋养细胞的表达,引入抗CD147中和性抗体处理人滋养细胞,采用Brd U增殖实验和Transwell侵袭实验分析滋养细胞增殖和侵袭能力的变化。结果:正常早孕期绒毛组织和滋养细胞高表达CD147,不明原因自然流产绒毛组织CD147的mRNA和蛋白表达水平均低于正常早孕期绒毛组织。抗CD147中和性抗体处理原代人滋养细胞后,滋养细胞的增殖能力未发生明显变化,侵袭能力下降。结论:人绒毛组织CD147的异常低表达可能与不明原因早期妊娠失败相关,CD147通过调控滋养细胞的侵袭能力参与正常妊娠的维持。     

解聚素和金属蛋白酶19在早孕绒毛中的表达及其与自然流产的相关性研究

目的通过对解聚素和金属蛋白酶19（ADAM19）在早孕自然流产和正常早孕绒毛中表达的研究,探讨其在妊娠过程中的作用及其与流产的关系。方法早期妊娠和难免流产的绒毛组织各30例,应用免疫组织化学链霉素抗生物素-过氧化物酶法,检测ADAM19的表达。结果在正常妊娠的绒毛中,ADAM19主要表达在细胞膜上,在细胞滋养细胞、细胞滋养层细胞柱中均有较强的表达,表达强度均强于合体滋养细胞;在流产组绒毛中,ADAM19在细胞滋养细胞、细胞滋养层细胞柱中的表达均明显低于正常绒毛组,二者比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论ADAM19在妊娠早期滋养细胞的侵入中有重要的作用,早期流产的发生与绒毛中ADAM19水平下降有关。     

细胞周期调节蛋白在早期自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的表达及其与自然流产发生的相关性研究

目的：探讨细胞周期调节蛋白在早期自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的表达情况并研究其与自然流产发生的相关性。方法：选取符合研究要求的人工流产女性与自然流产女性各35例，分为人工流产组与自然流产组。利用Western blotting与免疫组织化学法分别检测两组患者绒毛与蜕膜组织中细胞周期调节蛋白的表达情况。结果：人工流产组绒毛与蜕膜组织的细胞周期调节蛋白的表达量为75%~85%，自然流产组的表达量为45%~55%。人工流产组与自然流产组比较有统计学意义(P<0.05)。结论：早期自然流产可能与细胞周期调节蛋白在绒毛与蜕膜组织中的含量相关。     

人类雌激素受体ɑ基因多态性与稽留流产关系的研究

目的研究探讨雌激素受体ɑ(estrogen receptor alpha,ERɑ)基因多态性与稽留流产的关系。方法选取稽留流产患者73例,选取正常妊娠要求流产者95例作为对照组。采集个体妊娠绒毛组织,用分子生物学方法,分析内切酶PvuII、XbaI限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP),观察ERɑ基因多态性在实验组与对照组中的基因型分布及等位基因频率。通过统计学分析探讨ERɑ基因多态性分布与稽留流产的关系。结果 ERɑ基因PvuII酶切多态性分布在实验组与对照组组间差异有统计学意义(P0·05),ERɑ基因XbaI酶切多态性基因型分布在实验组中不符合Hardy-Weinberg平衡。结论 ERɑ基因PvuII酶切多态性与稽留流产有关系。P等位基因可能是其危险因素。     

稽留流产绒毛组织中Fas／FasL表达及其意义

目的探讨稽留流产的发生与Fas／FasL表达的相关性。方法采用RT—PCR法检测稽留流产患者与健康早孕人流者绒毛组织中FasL的mRNA表达水平。结果稽留流产组FasL mRNA表达水平为（0．714-0．11）,健康早孕人流组FasL mRNA的表达水平为（1．38±0．41）,P〈0．05。结论FasL表达的降低可能是导致稽留流产的原因之一。     

正常妊娠反复自然流产绒毛及蜕膜组织中细胞因子信号转导负调控因子的表达：改变Th1/Th2平衡调节可影响妊娠结局

背景：细胞因子信号转导负调控因子(suppressors of cytokine signaling, SOCS)参与多种细胞因子信号通路的调节,SOCS1-3对妊娠的调节作用较为突出。 目的：通过检测反复自然流产患者和正常妊娠绒毛及蜕膜组织中SOCS3蛋白表达,了解反复自然流产患者SOCS3蛋白的表达。 方法：Westen blotting 方法检测反复自然流产患者和正常妊娠绒毛组织及蜕膜组织SOCS3的表达。 结果与结论：与正常妊娠组相比,反复自然流产组SOCS3在绒毛组织中表达减少(P < 0.05),在蜕膜组织中表达减少(P < 0.01)。推测SOCS3蛋白可能影响妊娠结局,反复自然流产组SOCS3表达降低,可能导致Th2反应降低,从而导致流产发生。      

反复自然流产患者母胎界面SOCS3蛋白、TNF-α及IL-10的表达

目的:研究反复自然流产患者蜕膜组织中细胞因子信号转导抑制因子SOCS3,细胞因子TNF-α及IL-10的表达,并与正常妊娠作对照。方法:Western blot检测SOCS3的表达,免疫组织化学法检测细胞因子TNF-α及IL-10的表达。结果:反复自然流产组蜕膜组织中SOCS3的表达明显降低(P<0.01),差异有统计学意义,IL-10表达降低(P<0.01),TNF-α表达增高(P<0.05),差异有统计学意义。结论:与正常妊娠相比,反复自然流产组蜕膜组织中SOCS3蛋白及IL-10表达降低,TNF-α表达增高,差异有统计学意义,说明反复自然流产患者母胎界面Th1/Th2失衡,SOCS3蛋白可能通过与细胞因子的相互调控作用影响Th1/Th2平衡导致流产发生。     

半乳糖凝集素-3在复发性流产子宫蜕膜及绒毛组织中的表达

目的检测复发性流产患者子宫蜕膜及绒毛半乳糖凝集素-3（galectin-3）表达，为进一步探讨不明原因复发性流产提供理论依据。方法对41D例不明原因复发性流产患者及32例正常妊娠行人工流产患者，采用RT—PCR、免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶链接法（sp法）检测其子宫蜕膜及绒毛半乳糖凝集素-3的表达。结果复发性流产者子宫蜕膜及绒毛半乳糖凝集素-3的表达明显低于正常妊娠组。结论半乳糖凝集素-3与妊娠早期绒毛及子宫蜕膜发育相关，其表达降低可能是导致复发性流产的原因之一。     

广州地区97例自然流产绒毛细胞培养及核型分析

目的探讨流产绒毛染色体分析在诊断自然流产病因和妊娠指导中的作用。方法对97例自然流产患者取无菌绒毛进行细胞培养和染色体制备及核型分析。结果97例流产绒毛中培养成功94例(96.9%)。62例染色体异常(66.0%),异常核型以数目异常为主,并以三体征最常见。自然流产1次、2次和3次或以上病例的核型异常比例分别为76%、53.1%和60%。结论胚胎染色体异常是导致早期自然流产的重要原因,流产绒毛染色体检查有利于查明本次流产的原因,并对下次妊娠有较好的指导意义。     

116例绒毛细胞培养法制备染色体与核型分析

目的探讨培养法制备绒毛染色体在产前诊断与分析自然流产病因中的价值。方法对21例经腹穿刺绒毛标本与95例自然流产绒毛标本以培养法制备染色体核型并分析。结果腹穿绒毛培养成功率95.2%,检出5例异常;自然流产绒毛培养成功率92.6%,异常核型检出率48.9%,以常染色体三体与X单体多见。结论绒毛细胞培养法技术稳定、结果可靠,可用于胎儿染色体病的产前诊断与自然流产病因分析。     

绒毛细胞长期培养法在产前诊断及早孕和早中孕期自然流产病因检测中的应用

目的探讨绒毛细胞长期培养法在产前诊断及早孕和早中孕期自然流产病因检测中的应用价值及两者有无差异。方法采用绒毛细胞长期培养法分别对147例B超引导下经腹绒毛取材的产前诊断病例及384例自然流产患者的流产绒毛进行染色体培养制作、核型分析以及结果对照比较。结果产前诊断绒毛培养成功率为96.60%,明显高于自然流产绒毛的培养成功率（87.24%）;两者的平均培养天数无明显差异（11.5天vs12.3天）;流产绒毛染色体异常率（63.88%）明显高于产前诊断绒毛（9.15%）。结论绒毛细胞长期培养法是一种有效的检测绒毛染色体的方法 ,同时适用于产前诊断绒毛和流产绒毛;绒毛标本的无菌性、新鲜程度对绒毛细胞培养成功率有着重要影响。