注射丹参多酚酸盐对ApoE基因敲除小鼠血清TNF-α和IL-6的影响

目的观察C57BL/6J ApoE基因敲除小鼠在丹参多酚酸盐(salvianolate,SAL)干预下血清肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)的变化,探讨SAL抗动脉粥样硬化的可能机制。方法给4周龄雄性C57BL/6J ApoE~(-/-)小鼠(共40只)和C57BL/6J野生型小鼠(10只)分别行高脂饮食处理,采用腹腔注射给药(1次/d,5次/w)方法,随机将其分为4组,模型组10只,腹腔注射生理盐水;丹参多酚酸盐低剂量(60 mg/kg)组10只、中剂量(120 mg/kg)组10只、高剂量(240m g/kg)组10只和C57BL/6J野生型小鼠,即正常对照组10只。24 w末时处死各组小鼠,留取血清,采用特异性放射免疫法测定各组小鼠血清TNF-α和IL-6浓度。结果 24 w末时,模型组小鼠TNF-α和IL-6血清浓度明显升高;丹参多酚酸盐干预各组TNF-α和IL-6血清浓度均明显低于模型组(P均<0.05);随SAL浓度增加,各干预组TNF-α和IL-6血清浓度逐渐降低(P均<0.05),但仍均高于正常对照组水平(P均<0.05)。结论 SAL干预后ApoE~(-/-)小鼠TNF-α和IL-6水平下降,说明其可能通过降低动脉粥样硬化炎症反应进程来发挥抗动脉硬化作用。     

ApoE基因缺陷小鼠CuZnSOD基因CpG岛甲基化的研究

目的检测apoE基因缺陷小鼠肝脏CuZnSOD基因CpG岛甲基化状态,探讨其与动脉粥样硬化发生发展的关系以及在动脉粥样硬化早期基因诊断中的意义。方法ApoE基因缺陷小鼠是用来建立动脉粥样硬化的成熟模型,本实验将18例7周龄apoE基因缺陷雄性小鼠及作为对照的18例7周龄正常的C57BL/6J雄性小鼠分别随机分成三组,在饲养至0周、7周、14周时取其肝脏,运用甲基化特异性PCR（methylation-specific PCR,MSP）法检测肝脏CuZnSOD基因CpG岛甲基化情况。结果不同时间段apoE基因缺陷小鼠与正常的C57BL/6J小鼠CuZnSOD基因CpG岛甲基化差异无统计学意义。结论apoE基因缺陷小鼠肝脏没有发生CuZnSOD基因启动子区CpG岛的异常甲基化,可能CuZnSOD基因启动子区CpG岛的异常甲基化没有参与动脉粥样硬化的发生发展。     

黄连素抗动脉粥样硬化的效果及作用机制研究

目的 研究黄连素对动脉粥样硬化小鼠抗动脉粥样硬化的效果及作用机制.方法 选取24只健康雄性SD小鼠,制作动脉粥样硬化模型,全部建模成功,随机分为模型组、辛伐他汀组、黄连素低剂量组、黄连素高剂量组,每组6只;正常组小鼠6只.正常组及模型组给予0.9％氯化钠溶液灌胃治疗,辛伐他汀组使用辛伐他汀10 mg·kg-1·d-1配...     

小鼠动脉粥样硬化斑块模型的快速制作及CD40在斑块中的表达

目的探讨颈动脉硅胶圈植入法制作小鼠动脉粥样硬化(AS)斑块模型及斑块中白细胞分化抗原40(CD40)表达。方法 36只雄性载脂蛋白E(ApoE)-/-小鼠随机分为模型组和对照组:模型组小鼠采用颈动脉硅胶圈植入法快速制作AS斑块模型;对照组不予干预。苏木精-伊红(HE)染色检测斑块,免疫组化法检测斑块中CD40表达。结果模型组HE染色右颈动脉可见明显AS斑块形成,术后6周可见坏死中心区域和纤维帽形成,并且CD40表达阳性。结论颈动脉硅胶圈植入法能快速制作小鼠AS斑块模型,斑块中CD40高表达。     

黄芩苷对高脂诱发小鼠动脉粥样硬化NF-κB及ACE2蛋白表达的影响

目的:观察黄芩苷对apoE-/-小鼠的主动脉壁细胞内核因子κB(NF-κB)及ACE2蛋白表达的影响,探讨黄芩苷干预动脉粥样硬化(AS)进程的可能作用机制。方法:6周龄apoE-/-小鼠30只随机分成模型组和黄芩苷高低剂量组,同时用野生型小鼠C57BL10只作为正常对照组。正常组给予普通饲料喂养,模型组和黄芩苷组给予高脂饲料喂养12周,建立小鼠AS模型,黄芩苷组给予300 mg.d-1及150 mg.d-1灌胃8周;20周后处死小鼠。实验结束后,检测血脂,免疫组化分析主动脉壁细胞内NF-κB、血管紧张素转换酶2(ACE2)表达水平。结果:黄芩苷组与模型组相比,apoE-/-小鼠主动脉壁细胞NF-κB灰度值明显升高、ACE2灰度值降低有统计学差异(P<0.05)。结论:黄芩苷可能通过抑制NF-κB转录表达,干预炎症反应进而增强ACE2蛋白表达,干预动脉粥样硬化的发生发展。     

阿利吉仑单用及联用阿托伐他汀对动脉粥样硬化小鼠炎症因子的影响

目的:考察阿利吉仑单用或与阿托伐他汀联用对动脉粥样硬化小鼠炎症因子的影响。方法:将12周龄apoE^-/-雄性小鼠给予高脂饮食,随机分为6组(n=8),包括模型对照组,肼屈嗪组、阿利吉仑低剂量组、阿利吉仑高剂量组、阿托伐他汀组、阿利吉仑与阿托伐他汀联合用药组,均治疗12周。采用酶联免疫吸附的方法(ELISA)测定血浆中白介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的水平;光学显微镜下测定动脉粥样硬化病变区与总主动脉面积。结果:与模型对照组相比,阿利吉仑单独用药对炎症因子MCP-1的影响无显著性差异。阿利吉仑单独或者联合阿托伐他汀用药能够显著降低炎症介质IL-6、CRP的血浆水平(P<0.05),且阿利吉仑高、低剂量组之间对CRP和IL-6水平的影响亦有差异;阿利吉仑联用阿托伐他汀与阿托伐他汀组对MCP-1、IL-6、CRP水平的影响均无显著性差异(P>0.05)。组织病理学结果显示:单用阿利吉仑或联合应用阿托伐他汀都有不同程度的降低动脉粥样硬化面积,与模型对照组相比均有显著性差异,且单用阿利吉仑组、阿托伐他汀组均与联合用药组有显著性差异(P<0.05)。结论:阿利吉仑对动脉粥样硬化小鼠体内炎症因子水平有一定影响,并显示出一定的剂量依赖性,同时与阿托伐他汀合用有一定的联合治疗作用。     

沙格列汀激活AMPK-PPARα途径促进巨噬细胞向M2型极化减轻动脉粥样硬化的作用研究

目的 探讨沙格列汀对巨噬细胞极化的影响,以及沙格列汀减轻动脉粥样硬化的可能机制.方法 ApoE-/-小鼠给予高脂饲料喂养,建立动脉粥样硬化模型,以C57BL/6小鼠作为对照组,喂养8周后,以15 mg/kg沙格列汀灌胃给药,1次/d,给药12周后,全自动生化仪分析小鼠血脂水平变化,HE染色观察主动脉组织形态学变化,油红...     

生长分化因子15调控巨噬细胞炎症影响动脉粥样硬化的机制研究

目的 研究生长分化因子15(GDF-15)对小鼠动脉粥样硬化及巨噬细胞炎症的影响。方法 构建ApoE^-/-动脉粥样硬化小鼠模型,苏木素-伊红(HE)染色和油红O染色观察冠状动脉病理学变化,Western blot方法检测冠状动脉中GDF-15、IL-6、IL-1β和CD36蛋白表达,免疫组化法检测巨噬细胞表达量。以ox-LDL诱导巨噬细胞RAW246.7,体外构建动脉粥样硬化巨噬细胞模型,同时设置转染pcDNA-GDF-15组,Western blot方法检测GDF-15、IL-6、IL-1β和CD36蛋白表达。结果 对照组小鼠冠状动脉的管腔内壁平整,内膜光滑,无脂质红染。动脉粥样硬化小鼠模型冠状动脉内壁粗糙不均匀,内膜明显增生,平滑肌纤维排列紊乱,有脂质沉淀,脂质沉淀被染成红色,细胞核为蓝色,间质为无色。动脉粥样硬化小鼠模型冠状动脉组织中GDF-15蛋白表达量降低,IL-6、IL-1β和CD36蛋白表达量升高,巨噬细胞的表达量明显增加。ox-LDL处理的巨噬细胞RAW246.7中GDF-15蛋白表达减少,IL-6、IL-1β和CD36蛋白表达增多。转染pcDNA...     

优降脂组方对ApoE基因敲除动脉粥样硬化模型小鼠的动脉粥样硬化相关细胞因子的影响

目的 探讨优降脂组方对ApoE基因敲除（ApoE-/-）动脉粥样硬化模型小鼠的动脉粥样硬化相关细胞因子的影响。方法 选择ApoE-/-小鼠45只,同时选择同遗传背景C57BL/6J小鼠雄性15只。造模成功后分为4组：模型组、正常对照组、优降脂组方实验组、阿托伐他汀对照组。实验结束后,测定4组小鼠血脂水平及动脉粥样硬化相关细胞因子水平。结果 模型组小鼠TC、TG、LDL-C均高于正常对照组,HDL-C低于正常对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。优降脂组方实验组和阿托伐他汀对照组TC、TG、LDL-C均低于模型组,HDL-C均高于模型组,差异有统计学意义（P<0.05）。模型组小鼠hs-CRP、TNF-α、MDA均高于正常对照组,NO低于正常对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。优降脂组方实验组和阿托伐他汀对照组hs-CRP、TNF-α、MDA均低于模型组,NO均高于模型组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 优降脂组方有助于降低血脂水平,对动脉粥样硬化发生和发展有一定抑制作用,为临床提供一定的实验理论依据。     

银杏内酯B对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

目的探讨银杏内酯B(ginkgolide B,GB)对ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化的影响。方法 12只8周龄C57BL/6J小鼠为正常组,24只8周龄♂ApoE-/-小鼠为阳性模型组以及药物组;药物组每天给予GB 0.6 mg灌胃。8周后处死小鼠,用病理学方法观察小鼠动脉斑块、脂质沉积以及巨噬细胞表达。用ELISA方法测定血浆RAN-TES含量。结果电镜结果显示模型组动脉斑块较大,血管内膜损伤明显,而GB组小鼠动脉内表面损伤明显减轻,斑块较小。HE染色显示了同样的结果,模型组斑块较大,GB组斑块较小。血浆RANTES测定正常组为123.81 ng.L-1,模型组为359.16 ng.L-1,GB组为193.36 ng.L-1,各组之间差异存在统计学意义(P<0.01)。结论 GB能有效地减轻ApoE-/-小鼠的动脉粥样硬化损伤,并降低血浆RANTES含量,其药理学机制可能与抑制血小板功能相关。     

丹参多酚酸盐对ApoE~(-/-)小鼠主动脉壁细胞清道夫受体A和CD36 mRNA表达的影响

目的观察中药丹参多酚酸盐对ApoE基因敲除小鼠主动脉壁血管细胞清道夫受体A和CD36mRNA表达的影响,探讨丹参多酚酸盐抗动脉粥样硬化进展的作用机制。方法 30只AopE基因敲除小鼠(4周龄,雄性)随机分成4组,即模型组(腹腔注射生理盐水,7只)、丹参多酚酸盐60 mg/kg组(7只)、丹参多酚酸盐120 mg/kg组(8只)、丹参多酚酸盐240 mg/kg组(8只),正常对照组(C57BL/6J野生型小鼠)6只。高脂饮食喂养于24周末时处死各组动物,取主动脉根部连续切片,常规苏木精-伊红染色,观察血管壁形态和脂质沉积情况,采用逆转录聚合酶链式反应对主动脉血管壁细胞清道夫受体A和CD36 mRNA表达进行定性和定量分析。结果 ApoE基因敲除鼠动脉粥样硬化斑块内均可见明显的SR-A和CD36mRNA表达,C57BL/6J小鼠正常血管内仅见少量表达;丹参多酚酸盐(240 mg/kg组)干预后,与模型组比较,ApoE基因敲除鼠动脉粥样硬化斑块内CD36 mRNA表达明显减少,差异有统计学意义(P<0.05),而SR-A mRNA的表达未见明显减少(P>0.05)。结论中药丹参多酚酸盐抗ApoE~(-/-)鼠主动脉粥样硬化可能与其下调CD36mRNA表达,减少巨噬细胞泡沫细胞的形成有关,而与SR-A无关。     

小分子GLP-1R激动剂对骨质疏松模型小鼠的改善作用

目的:探讨小分子胰高血糖素样肽1受体(GLP-1R)激动剂6,7-二氯-2-磺酰烷基-3-仲烷氨基喹喔啉(DMB)对骨质疏松模型小鼠的改善作用.方法:将C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照组(17β-雌二醇,10μg/kg)和DMB组(1 mg/kg),每组10只.假手术组小鼠行双侧剖腹术但不摘除卵巢...     

青蒿素对ApoE-/-基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

目的探讨青蒿素对ApoE-/-基因敲除小鼠动脉粥样硬化以及炎症因子的影响。方法将20只ApoE-/-基因敲除小鼠分为青蒿素组和PBS处理组,每组10只,经高脂喂养8周,与对照组小鼠(C57BL/6J标准饮食小鼠,10只)比较,通过血管大体油红O染色评价斑块面积;HE染色观察病变形态及血浆中炎症因子的变化。结果与对照组比较,PBS处理组及青蒿素组均可见动脉硬化斑块,炎症因子水平升高。青蒿素组的动脉硬化程度及炎症因子水平均明显低于PBS处理组。结论青蒿素可以改善ApoE-/-基因敲除小鼠动脉粥样硬化进展。     

虎杖苷通过降血脂抗ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的作用

目的 研究虎杖苷在ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化治疗中的作用及其可能的机制。方法 采用高脂饲料连续喂养12周ApoE-/-小鼠,建立动脉粥样硬化动物模型,将已经形成动脉粥样硬化ApoE-/-小鼠分为模型对照组,虎杖苷组,阳性药（辛伐他汀）对照组,每组8只,阳性药（辛伐他汀）以0.05 (g·kg-1·d-1)灌胃,虎杖苷含生药0.2 (g·kg-1·d-1)灌胃,空白正常对照组及模型对照组分别给予同体积的蒸馏水,连续ig 28 天后,取血和冠状动脉,采用H&E染色对冠状动脉的形态学改变进行观察;检测血清中高密度脂蛋白,氧化型的低密度脂蛋白,总胆固醇的含量。结果 病理切片H&E染色显示给药虎杖苷后,小鼠的血管组织形态较模型组有较明显的改善,和阳性药组结果类似,显示出虎杖苷对动脉粥样硬化具有较好的的治疗效果;与模型组比较,虎杖苷可以显著（p P < 0.05）的降低血清中氧化型低密度脂蛋白的水平。 结论 虎杖苷可降低血脂,减少脂质的沉积,改善动脉粥样硬化血管组织的形态,具备治疗动脉粥样硬化的潜力。     

基于~1H-NMR代谢组学及网络药理学方法研究罗勒黄酮类活性成分对ApoE~(-/-)模型小鼠的影响

目的利用~1H-NMR代谢组学方法探讨罗勒总黄酮对ApoE~(-/-)基因缺陷动脉硬化模型小鼠的影响,并通过网络药理学方法研究罗勒黄酮类活性成分在心血管疾病中的作用及其机制。方法 6周龄雄性ApoE~(-/-)小鼠随机分成5组:模型组、辛伐他汀组、罗勒总黄酮低剂量组、罗勒总黄酮中剂量组、罗勒总黄酮高剂量组,高脂饲料喂养;C57BL/6J雄性小鼠作为正常对照组,普通饲料喂养。灌胃14周后,小鼠血清进行~1H-NMR检测,采用PLS-DA和OPLS-DA方法对~1H-NMR图谱进行分析,确定各组小鼠血清主要差异性代谢物;HE染色观察胸主动脉病理改变。从不同开源数据库中收集罗勒黄酮类活性成分,预测和筛选出活性成分的作用靶点及其作用的信号通路,构建成分-靶点-疾病网络。结果与正常对照组相比较,模型组小鼠血清中脂类、VLDL、LDL、脯氨酸、β-羟丁酸、甲胺、肌醇、β-葡萄糖和α-葡萄糖的含量增多(P<0.05);亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、丙氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、赖氨酸、牛磺酸、乳酸、肉碱、胆碱、柠檬酸、丙酮酸和肌酸的水平有不同程度下降(P<0.05)。经网络药理学研究筛选得到9种罗勒黄酮类活性成分,通过成分-靶点-疾病网络的拓扑分析,发现有25个作用靶点与心脏病、高血压,心肌梗死和动脉粥样硬化等心血管疾病关联度较高。结论与模型组相比较,罗勒总黄酮低、中、高剂量组对上述血清代谢物具有一定程度逆转趋势,表明罗勒总黄酮可能通过调控ApoE~(-/-)动脉粥样硬化模型小鼠的脂、糖、氨基酸、胆固醇及能量代谢,从而对动脉硬化病病程发展起到一定抑制作用。罗勒中9种黄酮类活性成分主要通过DYRK1A, SLC5A11, SLC5A10, SLC5A9,ERBB2, MBNL3, MBNL2和AKR1E2等不同靶点,经CGMP-PKG信号通路、钙信号通路和甘油脂代谢等途径作用于心脏病、高血压,心肌梗死和动脉粥样硬化等心血管疾病。     

动脉粥样硬化高脂饲料对小鼠糖脂水平的作用研究

目的 研究动脉粥样硬化高脂饲料对小鼠体重、血糖血脂水平及动脉粥样硬化斑块形成的作用,并且明确禁食时间对血脂检测结果的影响.方法 对10周龄雄性ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠分别给予高脂饲料及普通饲料,4个月后观察动脉粥样硬化斑块情况;对10周龄雄性C57BL/6J小鼠分别给予普通饲料4周、普通饲料2周+高脂饲料...     

益气滋阴活血通络方对动脉粥样硬化斑块内新生血管的影响

目的 探讨益气滋阴活血通络方对动脉粥样硬化(AS)斑块内血管新生的影响。方法 首先构建动脉粥样硬化ApoE-/-小鼠模型，用高脂饲料喂养雄性ApoE-/-小鼠12周，在造模完成后，将模型小鼠随机分为空白组、高脂对照组、益气滋阴活血通络中药复方组、阿托伐他汀组，并分别予以蒸馏水、益气滋阴活血通络中药复方、阿托伐他汀干预12周，以检测小鼠动脉斑块内新生血管的密度。通过免疫组化检测中药复方对动脉粥样硬化模型动脉斑块内血管新生的影响。结果 与空白组、高脂对照组比较，在益气滋阴活血通络中药复方、阿托伐他汀组中、高剂量组斑块内新生血管密度系数都有明显降低(P<0.05)。免疫组化结果表明，中药复方组和阿托伐他汀组治疗后减少了斑块内新生血管的表达。结论 益气滋阴活血通络方具有稳定AS斑块的作用，益气滋阴活血通络方可以通过抑制血管新生，从而降低新生血管在斑块内的表达，起到稳定斑块的作用。     

MPTP诱导小鼠肝脏帕金森病样病理变化研究

目的 研究1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)诱导的帕金森病(Parkinson's disease,PD)小鼠模型中肝脏生理功能变化和病理改变.方法 将雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组和模型组,皮下注...     

桑椹花青素-3-葡萄糖苷对癫痫模型小鼠的保护作用及海马BDNF/TrkB通路的影响

目的:研究桑椹花青素-3-葡萄糖苷对癫痫模型小鼠的保护作用及海马脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶受体B(TrkB)通路的影响。方法:将120只C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、单药(桑椹花青素-3-葡萄糖苷)和激动剂联用组(桑椹花青素-3-葡萄糖苷+TrkB激动剂LM22B-10),每组30只。单药组和激动剂联用组小鼠每天灌胃600μg/kg桑椹花青素-3-葡萄糖苷1次、连续给药6周,激动剂联用组小鼠在给药第6周时每天侧脑室注入LM22B-10(5 mg/kg)1次;正常组和模型组小鼠灌胃等体积生理盐水。末次给药后,除正常组外,其余各组小鼠均采用氯化锂-匹罗卡品建立癫痫模型。造模成功后,各组分别取10只小鼠记录其癫痫自发性再发作的潜伏期、发作频率及持续时间,每天观察6 h,连续观察4周;并于造模第14、28、36天记录其脑电图,统计1 h内脑电波异常发生次数。于造模后第6天,各组分别取10只小鼠检测其血清钙离子水平,并取各组剩余10只小鼠检测其海马组织中BDNF m RNA及蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠癫痫自发性再发作的潜伏期、发作频率、持续时间及造模第1...     

白鲜皮水提物对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化晚期病变形成的影响

目的研究白鲜皮水提物(cortex dictamni aqueous extract,CDAE)对载脂蛋白E基因缺损小鼠主动脉弓粥样硬化晚期病变形成的影响及其机制。方法将40只ApoE-/-小鼠随机分成空白对照组和CDAE高、中、低3剂量组(CDAE3.2、1.6、0.8 g·kg-1),每组10只。从第12周龄开始给药至18周龄。实验结束时测定给药前后总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平。取各组小鼠主动脉弓,OCT包埋,每只小鼠制作80张病理切片(厚6μm),计算各组主动脉弓粥样硬化病变的面积。体外实验测定CDAE给药后平滑肌细胞的增殖和迁移能力。结果CDAE给药后可明显减少动脉粥样硬化斑块面积,CDAE中、高剂量组给药后ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化病变面积均小于对照组(P<0.05,P<0.01),各给药组血脂水平均有不同程度的下降。体外实验表明,CDAE可明显抑制大鼠血管平滑肌细胞的增殖和PDGF诱导的平滑肌细胞迁移。结论CDAE对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化晚期病变形成具有明显的抑制作用,其作用机制可能与降低血脂水平,抑制平滑肌细胞的增殖和迁移能力有关。