淫羊藿苷对缺血/再灌致神经元损伤的保护作用研究

目的 :观察淫羊藿苷对体外模拟缺血 /再灌致神经元损伤的保护作用 ,初步探讨其可能的作用机制。方法 :原代培养大鼠乳鼠大脑皮层神经元 ,分别在缺氧和缺糖 (6h) /再复氧和复糖培养后不同时间点 (0、3、1 2、2 4h)检测细胞活度、LDH活性、细胞凋亡率和细胞内游离钙离子浓度。结果 :淫羊藿苷 0 .2 5、0 .5和1mg·L 1明显减轻缺氧和缺糖 /复氧和复糖致神经细胞损伤 ,提高神经元MTT值 ,减少乳酸脱氢酶释放 ,减少凋亡和抑制细胞内游离钙离子浓度的升高。结论 :淫羊藿苷具有保护神经元抵抗模拟缺血性损伤的作用 ;其阻止细胞内钙离子超载可能是…     

不同缺血后处理方案对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的 试建立恰当的大鼠肾脏缺血再灌注损伤（IRI）的缺血后处理模型。方法 选8 ～ 12周健康60只SD雄性大鼠,体质量220 ～ 260 g。随机分为6组：对照组（S组）、缺血再灌注组（IR组）及IR缺血后处理A、B、C、D组,每组10只。S组：分离出双侧肾蒂,仅行右肾蒂结扎和左肾蒂游离;IR组：结扎右侧肾蒂,夹闭左侧肾蒂60 min后恢复灌注;缺血后处理A、B、C、D组在肾脏缺血60 min后分别进行6次（开放10 s ＋ 阻断10 s）、5次（开放20 s ＋ 阻断20 s）、3次（开放10 s ＋ 阻断10 s）、3次（开放2 min ＋ 阻断2 min）的循环,然后充分开放灌注。再灌注24 h后监测肾功能,对肾组织结构损伤程度评分。结果 与IR组相比,A、B、C、D组后处理的血尿素氮（BUN）、血肌酐（SCr）及肾小管损伤程度评分均降低（P 〈 0.05）,肾组织损伤明显减轻。处理组中,A、B两组的BUN、SCr及肾小管损伤程度评分相当（P 〉 0.05）,且缺血后处理效果优于C、D两组（P 〈 0.05）。结论： 采用缺血后处理A组方法和B组方法均可以成功制作出缺血后处理模型。     

苦参素降低大鼠肾脏缺血-再灌注损伤

目的观察苦参素的抗大鼠肾缺血再灌注损伤的作用并从抗氧化方面探讨其机制。方法用双肾肾蒂夹闭45 min建立IRI模型,将SD大鼠随机分为假手术组(sham);缺血再灌注组(I/R);苦参素治疗组(oxymatrine+I/R)。苦参素治疗组又分为高、中和低3个剂量组,在缺血再灌注前,连续7 d经腹腔注射。用自动生化仪测定血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平,观察苦参素对肾缺血再灌注的保护作用及确定最优剂量;以最优剂量干预用分光分析法测定肾组织丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果不同剂量组均能明显减轻肾脏IRI的病理形态学改变,改善肾功能。与I/R组相比,再灌注72 h后,MDA水平,血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平明显降低(P<0.05);苦参素治疗组的CAT、T-SOD、GSH-Px活性改善明显(P<0.05)。苦参素无体外抗氧化作用。结论苦参素对大鼠肾缺血再灌注损伤具有保护作用,作用机制可能与调控机体的抗氧化系统有关。     

淫羊藿甙对脑缺血再灌损伤小鼠的保护作用

目的：探讨淫羊覆甙对脑缺血再灌损伤小鼠的保护作用及其机制。方法：采用双侧颈总动脉夹闭合并取血降压再灌注的方法建立小鼠脑缺血再灌损伤模型，随机分为假手术组、模型组、淫羊藿甙防治组，检测各组行为学、总抗氧化能力、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、ATPase酶活性的变化。结果：(1)模型组小鼠学习记忆能力减退．淫羊藿甙(10、30、100mg／kg)灌胃可不同程度的提高小鼠学习记忆成绩。     

一氧化氮供体对缺血再灌注肾脏ICAM-1表达的影响

目的 观察缺血再灌注后加用NO供体对肾脏ICAM-1表达及白细胞浸润的影响。方法 分别采用ICAM-1和整合素β2多克隆抗体，免疫组化方法观察加有NO供体后大鼠肾脏缺血再灌注24hICAM-1表达的变化及肾功能改变。结果 缺血再灌注24h大鼠肾脏ICAM-1及β2阳性细胞表达显著增强，以外髓直小血管，皮质肾小管外毛细血管较为明显，再灌注同时灌注NO供体SIN-1可显著抑制缺血再灌注后ICAM-1的表达增强，减少局部炎细胞浸润，改善肾功能，结论 NO供体可减少肾组织ICAM-1的表达及炎细胞浸润，发挥对急性缺血性肾衰的治疗作用。     

ARNT基因失活小鼠的肾脏缺血再灌注损伤

背景：如何有效防治肾脏的缺血再灌注损伤,一直是肾移植领域的研究重点。但目前其机制仍然不是很清楚。 目的：探讨缺氧诱导因子系统对小鼠肾缺血再灌注损伤的影响及可能的作用机制。 方法：选取两种小鼠,一种为芳香族碳氢化合物核转移子(aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator,ARNT)基因敲除小鼠,一种为同窝对照组小鼠。每种小鼠分别进行假手术、缺血再灌注、缺血再灌注时注射重组人促红细胞生成素、缺血再灌注时注射等量生理盐水。建立小鼠肾脏缺血再灌注损伤模型,分别比较再灌注损伤后1 h血清促红细胞生成素含量、24 h血清肌酐值、肾组织PAS染色肾小管损伤评分和TUNEL法计算肾小管细胞凋亡数。 结果与结论：再灌注后1 h血清促红细胞生成素水平ARNT敲除组明显低于对照组(P < 0.01)。24 h血清肌酐水平ARNT敲除组明显高于对照组(P  < 0.01)。ARNT敲除组明显比对照组损伤程度重,肾小管评分明显高于对照组(P  < 0.01)。ARNT敲除组阳性凋亡细胞数明显多于ARNT+/+组(P < 0.01)。补充促红细胞生成素后,ARNT敲除组与对照组比较,差异无显著性意义(P  > 0.05)。结果表明,缺氧诱导因子系统对肾脏缺血再灌注损伤有重要的保护作用。可能是促红细胞生成素来介导其最大的保护效应。     

淫羊藿苷对过载损伤后成骨细胞凋亡和骨架的影响

目的研究淫羊藿苷对过载损伤后成骨细胞的凋亡和细胞骨架的影响。方法应用4点弯曲加载装置模拟过载损伤力学环境,建立过载损伤模型,依据力学加载前后是否加入药物干预,实验分为空白对照组、单纯给药组、单纯损伤组、预防给药组和损伤治疗组。应用细胞流式术进行细胞凋亡检测。应用特异性荧光染料分别标记微丝蛋白和细胞核,在激光共聚焦显微镜下观察细胞骨架的变化。结果与对照组比,过载损伤组的凋亡率最高,单纯给药组最低(P0.05);在过载处理组中,与单纯过载损伤组比,预防给药组的凋亡率最低(P0.05)。单纯过载损伤组的细胞皱缩变形,微丝排列紊乱,骨架排列疏松,轮廓模糊,骨架甚至出现破碎等现象。预防给药组细胞骨架形态变化不大,细胞核未见明显变化。结论淫羊藿苷可以在一定程度上抑制过载损伤后成骨细胞的凋亡,维持细胞骨架稳定。     

姜黄素预处理及缺血后处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用

背景：有研究发现姜黄素预处理、缺血后处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤具有保护作用。 目的：建立大鼠肾脏缺血再灌注损伤模型,观察姜黄素预处理、缺血后处理、姜黄素预处理联合缺血后处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用。 方法：60只SD雄性大鼠随机均分为5组,假手术组、肾脏缺血再灌注模型组、姜黄素组、缺血后处理组以及联合处理组。肾脏再灌注24 h后,取下腔静脉血测定肌酐和尿素氮。肾组织测定超氧化物岐化酶活性和丙二醛含量,并行苏木精-伊红染色观察各组肾组织病理学变化。 结果与结论：与假手术组比较,其余各组肌酐、尿素氮均升高(P < 0.05)。与缺血再灌注模型组比较,姜黄素组、缺血后处理组和联合处理组的肌酐、尿素氮值在再灌注24 h后均下降(P < 0.05)。与姜黄素组和缺血后处理组比较,联合处理组的肌酐更低(P < 0.05)。与假手术组比较,缺血再灌注模型组超氧化物歧化酶活性明显降低,丙二醛含量明显升高,差异有显著性意义(P < 0.05)。与缺血再灌注模型组比较,姜黄素组、缺血后处理组和联合处理组的超氧化物歧化酶活性升高,丙二醛含量降低,差异有显著性意义(P < 0.05)。与姜黄素组和缺血后处理组比较,联合处理组的超氧化物歧化酶活性升高,差异有显著性意义(P < 0.05)。与假手术组比较,缺血再灌注模型组肾小管损伤明显;与缺血再灌注模型组比较,姜黄素组、缺血后处理组和联合处理组肾小管损伤减轻明显,与姜黄素组和缺血后处理组比较,联合处理组损伤更轻。说明示姜黄素预处理和缺血后处理联合应用具有协同作用,可以更好的保护大鼠缺血再灌注损伤肾脏。     

淫羊藿苷对糖皮质激素诱导的骨微血管内皮细胞损伤的保护作用

目的体外建立糖皮质激素诱导骨微血管内皮细胞（Human bone microvascular endothelial cell,HBMEC）损害的模型,研究糖皮质激素对HBMEC的损害情况;探讨淫羊藿苷（Icariin,ICA）对糖皮质激素所致HBMEC损伤的保护作用。方法HBMEC分离与体外培养,建立体外糖皮质激素杀伤细胞模型,用MTF法观察ICA对激素损伤的HBMEC活性的影响,测定细胞生存率,并对细胞进行台盼蓝染色以观察ICA对激素诱导的HBMEC坏死的影响。结果糖皮质激素诱导HBMEC损害,台盼蓝染色显示细胞损害为坏死而非凋亡,并呈现一定的浓度依赖和时间依赖性;ICA能保护激素诱导的HB—MEC损害,使细胞生存率明显提高,ICA能显著抑制激素诱导的内皮细胞坏死。结论ICA具有保护激素诱导的HBMEC损伤的作用,这为早期干预治疗激素性骨坏死提供了实验药理依据。     

缺血再灌注损伤和细胞因子

缺血再灌注损伤（IRI）是一种重要的病理生理现象。研究发现细胞因子在IRI发病机制中扮演重要角色。从目前的研究看,以细胞因子为治疗靶标防治IRI导致的器官损害是有前景的。     

白藜芦醇通过Sirtuins 1通路促进自噬减轻大鼠脑缺血/再灌注损伤

目的观察白藜芦醇(Res)在大鼠局灶性脑缺血/再灌注(I/R)损伤中脑保护作用与自噬的关系。方法随机将大鼠分成假手术组(S组)、脑缺血/再灌注模型组(I/R组)、低和高剂量(15和40 mg/kg)Res处理组(R1和R2组),其中将R2组另设2个亚组:R2+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组和R2+Sirt1抑制剂Sirtinol组。线栓法构建大鼠I/R模型。缺血2 h,再灌注24 h后,用尼氏染色观察皮质区的组织学形态;用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑组织的梗死体积;用real-time QPCR和Western blot检测脑组织中Sirt1和LC3的mRNA和蛋白表达。结果与S组相比,I/R组大鼠可见明显的脑梗死灶,显微镜下见病理损伤改变,自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Sirt1表达均有上升。Res预处理后,能明显减轻I/R大鼠皮质区的病理损伤,减少脑梗死体积(P0.01),显著增加I/R大鼠脑组织中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Sirt1的表达(P0.01);而Sirt1抑制剂及3-MA能削弱Res的作用。结论 Res减轻大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的脑保护作用可能与Res通过提高Sirt1的表达进而促进自噬来完成的。     

右美托咪定通过影响CHOP凋亡通路减轻缺血/再灌注肺损伤

目的:探讨右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)能否通过CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)凋亡通路减轻小鼠缺血再灌注(I/R)性肺损伤。方法:选取雄性8~10周龄C57BL/6J小鼠40只,体重18~22 g,复制在体左肺I/R损伤模型。随机分为4组:假手术组(sham组),I/R模型组(I/R组),生理盐水对照组(I/R+NS组),右美托咪定干预组(I/R+DEX组)。DEX组在小鼠左肺缺血前30 min腹腔注射DEX 25μg/kg,I/R+NS组给予与DEX等体积的生理盐水。实验毕,留取左肺组织。测定肺组织干湿比(W/D)及总肺含水量(TLW),行肺组织损伤评估(IQA),光、电镜观察肺组织形态学及超微结构改变。原位末端标记(TUNEL)法检测组织细胞凋亡指数(AI)。Western blot和逆转录PCR(RT-PCR)分别检测CHOP、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)蛋白和mRNA表达量。结果:与sham组比,I/R组和I/R+NS组肺W/D、TLW、IQA、AI明显升高(P0.01),肺组织形态破坏显著,CHOP、GRP78蛋白和mRNA表达量增加(P0.01);I/R组与I/R+NS组相比,上述指标无显著差异。与I/R组比,I/R+DEX组肺组织W/D、TLW、IQA及AI明显下降(P0.05),组织损伤明显减轻,CHOP蛋白和mRNA表达量下降(P0.01)。结论:DEX可有效减轻小鼠缺血/再灌注性肺损伤,其机制可能与其抑制CHOP通路所致凋亡有关。     

重组人EPO通过减少自噬减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的研究重组人促红细胞生成素(rh EPO)在大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤中的保护作用及其与自噬的关系。方法将60只SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、缺血/再灌注组(I/R组)、rh EPO处理组(rh EPO组)、rh EPO+自噬激活剂雷帕霉素(Rap)处理组(rh EPO+Rap组)和雷帕霉素处理组(Rap组)。构建大鼠心肌I/R模型,术中监测血流动力学指标(LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax);于再灌注结束后检测血清肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)活性;采用伊文氏蓝-TTC法检测心肌梗死面积;采用Western blot法检测自噬相关基因LC3、Beclin1的蛋白表达。结果 I/R组心功能明显减弱,血清CK、LDH含量增高,可见明显心肌梗死,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1蛋白表达上升(P0.01)。rh EPO处理后,心功能明显改善,CK、LDH含量减少,心肌梗死面积缩小,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1蛋白表达下降(P0.01)。自噬激活剂雷帕霉素能削弱rh EPO的作用。结论 rh EPO减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用可能通过减少心肌自噬而完成。     

钙卫蛋白在肾脏缺血再灌注损伤大鼠中的表达及其作用

目的:探讨钙卫蛋白(CALP)在肾脏缺血再灌注损伤(IRI)大鼠中的表达及其在炎症反应中的作用。方法:50只雄性SD大鼠随机分为IRI组和假手术组(sham组),每组25只。各组分别于缺血再灌注后6 h、12h、24 h、48 h和72 h观察肾脏病理改变,检测大鼠血清尿素氮(BUN)和肌酐(SCr)水平,ELISA法检测大鼠血清CALP、肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6的含量,免疫组织化学法和Western blot法分别检测大鼠肾脏CALP、Toll样受体4(TLR4)和NF-κB p65蛋白表达水平。结果:IRI组大鼠肾脏呈现不同程度的肾小管上皮细胞和间质损伤,伴炎细胞浸润。血清BUN、SCr、CALP及促炎细胞因子TNF-α、IL-6的含量在各时点均显著高于sham组(P0.05)。CALP、TLR4和NF-κB p65主要表达于肾小管上皮细胞胞质中,在IRI组呈高表达,在各时点各因子的表达与sham组相比均显著增强(P0.05)。结论:肾脏IRI大鼠的血清CALP、TNF-α和IL-6水平升高,CALP、TLR4和NF-κB p65在肾组织中表达增强。CALP在大鼠肾脏IRI的炎症反应中可能起重要作用。     

莱菔硫烷减轻肾缺血再灌注大鼠肝损伤

目的：观察莱菔硫烷（ SFN）对肾缺血再灌注损伤（ RIRI）大鼠肝组织形态、功能、过氧化损伤及超氧化 物歧化酶（ SOD）表达变化的影响。方法：Wistar 大鼠随机分对照组、RIRI 组、SFN1 组和SFN2 组，RIRI 组大 鼠用夹闭左肾动脉45 min 的方法建立RIRI 模型，SFN1 组在夹闭左肾动脉后立即给予SFN，SFN2 组在RIRI 模型 恢复血液再灌注后给予SFN，对照组大鼠只分离左肾动脉并不夹闭。缺血再灌注24 h 后取血和肝，检测血清谷丙 转氨酶（ALT）活性；采用钼酸比色法、硫代巴比妥酸比色法及黄嘌呤氧化酶法测定肝组织H2O2、丙二醛（MDA） 含量及SOD 活性；H-E 染色观察肝组织形态结构改变；Real-time PCR 和免疫印迹法分别测定肝组织SOD mRNA 和蛋白表达水平。结果：与对照组相比，RIRI 组、SFN1 组和SFN2 组大鼠肝组织形态结构受损明显，SFN1 组和 SFN2 组受损程度轻于RIRI 组，SFN1 组又略轻于SFN2 组；RIRI 组、SFN1 组和SFN2 大鼠血清ALT 活性、肝组 织MDA和H2O2 含量升高明显；SFN1 组和SFN2 组的活性和含量均低于RIRI 组，SFN1 组又低于SFN2 组；RIRI 组、 SFN1 组和SFN2 大鼠肝组织SOD 活性明显低于对照组，SFN2 组、SFN1 组高于RIRI 组，SFN1 组又高于SFN2 组。 RIRI 组、SFN1 组、SFN2 组大鼠肝组织SOD mRNA和蛋白表达水平均高于对照组，SFN2 组和SFN1 组SOD的 表达水平又高于RIRI 组，但SFN2 组和SFN1 组差异无统计学意义。结论：大鼠RIRI 发生后，SFN 可能通过上调 SOD的表达增强机体对过氧化物的清除作用，降低了肝组织过氧化损伤程度；与再灌注后给予SFN 相比，缺血 后即刻给药更能有效降低肝组织氧化应激水平，改善肝的形态结构和功能改变。     

内皮素抗体在大鼠肾缺血/再灌注损伤中的作用

目的和方法：为探讨内皮素在肾缺血／再灌注损伤中的发病学意义，本实验在大鼠肾缺血／再灌注损伤模型上，观察了内皮素抗体对肾缺血／再灌注损伤的作用。结果：肾缺血／再灌注损伤大鼠，血清尿素氮（ＳＵＮ）、肌酐（ＳＣｒ）含量及血浆内皮素（ＰＥＴ）水平显著升高；脂质过氧化物丙二醛（ＭＤＡ）产生增多；肾小管上皮细胞明显损伤。应用内皮素单克隆抗体能显著降低ＰＥＴ水平和ＭＤＡ含量，减轻肾小管上皮细胞损伤，改善肾功能。结论：内皮素是参与肾缺血／再灌注损伤发病的重要因素之一，阻断ＥＴ的生物学作用是防治肾缺血／再灌注损伤的有效途径。     

α-硫辛酸对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响

目的： 探讨硫辛酸（LA）对大鼠肾缺血再灌注损伤(RIRI)的作用及其机制。方法: 采用夹闭双侧肾动、静脉45 min后松夹再灌的方法制作RIRI模型，测定血清肌酐（Scr）、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)及尿NAG酶(UNAG)浓度，放射免疫和免疫组化法对肾皮质内皮素-1（ET-1）的表达做定位和定量分析，肾组织病理学观察和流式细胞术检测肾损伤程度和肾皮质细胞凋亡率。结果： 缺血再灌注后，大鼠肾功能和肾小管上皮细胞明显受损，Scr、MDA和UNAG含量均明显高于sham组(P<0.01)，血清NO含量与sham组相比无明显差异；肾皮质ET-1含量明显高于sham组(P<0.01)，肾小管ET-1表达明显强于sham组，ET-1免疫反应阳性颗粒主要分布于近曲小管上皮细胞；肾皮质细胞凋亡率明显高于sham组(P<0.01)。尾静脉注射α-硫辛酸可明显降低RIRI大鼠Scr、MDA和UNAG水平，肾小管上皮细胞内ET-1免疫反应阳性颗粒明显少于IR组，肾皮质细胞凋亡率明显低于IR组(P<0.05)。结论： ET-1在大鼠RIRI的发生发展中起着十分重要的作用；LA可通过拮抗ET-1的生物学效应，减轻氧自由基损伤而对RIRI大鼠肾脏产生一定的保护作用。     

萝卜硫素减轻心脏移植模型大鼠缺血/再灌注损伤

目的 研究萝卜硫素在大鼠心脏移植缺血/再灌注损伤(I/RI)中的作用及PI3K/AKT/GSK-3β通路是否参与其中的作用.方法 构建大鼠同种异体活体心脏移植模型为对照组,尾静注射萝卜硫素为萝卜磁素处理组(2.5 mg/kg).比较大鼠的存活率、血清心肌酶、心肌细胞凋亡水平及心肌线粒体的肿胀程度;Western blo...     

Melatonin attenuates renal ischemia-reperfusion injury in nitric oxide synthase inhibited rats

Recent studies show that melatonin reduces the blood pressure (BP) and ischemia/reperfusion (I/R)-induced damage. This study was designed to investigate the effects of melatonin on the renal I/R injury in rats given the nitric oxide synthase (NOS) inhibitor, N(omega)-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME). After right nephrectomy, I/R was induced by occlusion of the left renal vessels for 60 min, followed by 24h reperfusion. The administration of melatonin significantly attenuated BP in NOS-inhibited hypertensive rats. Malondialdehyde (MDA) levels, a stable metabolite of the free-radical-mediated lipid peroxidation cascade, were found to be significantly higher in the I/R group (3.48+/-0.2mg/l serum) than in the control group (2.69+/-0.2mg/l serum). L-NAME (40 mgkg(-1) for 15 days)+I/R significantly increased the MDA levels compared to I/R alone. Melatonin administration to L-NAME rats significantly reduced the MDA values resulting from I/R. We also demonstrated that I/R, and especially L-NAME+I/R, lead to structural changes in the kidney and that melatonin attenuates these changes. These results suggest that melatonin reduces BP and I/R injury in NOS inhibited rats by L-NAME.