骨髓间充质干细胞移植急性一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠星形胶质细胞及髓鞘的变化

背景：国内有关一氧化碳中毒迟发性脑病治疗的报道,多采用药物治疗和高压氧治疗,但存在治疗疗程长,见效慢,花费较高等问题。 目的：首次观察骨髓间充质干细胞移植治疗一氧化碳中毒迟发性脑病前后星形胶质细胞及神经髓鞘的变化。 方法：以随机抽签方法将SD大鼠分为3组：对照组、假手术组及干细胞移植组。采用腹腔注入一氧化碳方法制作一氧化碳中毒迟发性脑病模型,干细胞移植组在注射后第0,3,6,12,24,72小时及1周时将同种异体骨髓间充质干细胞经左侧颈动脉植入到大鼠脑内;假手术组扎闭颈外动脉,用PBS代替细胞悬液;对照组不进行细胞移植。移植后1,2,3,4周采用免疫组织化学的方法检测胶质纤维酸性蛋白和固绿-FCF染色法观察髓鞘着色情况。 结果与结论：造模后6,12,24 h干细胞移植组大鼠脑内胶质纤维酸性蛋白表达明显高于对照组及假手术组(P < 0.05),干细胞移植组移植后1~4周大鼠脑内胶质纤维酸性蛋白表达差异无显著性意义(P > 0.05)。造模后6,12,24 h干细胞移植组大鼠脑内髓鞘平均吸光度明显高于对照组及假手术组(P< 0.05),且细胞移植后第2周明显高于第1,3,4周(P < 0.05)。 提示经左侧颈动脉在一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠体内移植骨髓间充质干细胞可以增加星形胶质细胞反应性,促进髓鞘再生,移植的最佳时机为发病后6~24 h,细胞移植后的积极作用在一两周最明显。     

一氧化碳中毒引发迟发性脑病机制的研究进展

机体在短时间内吸入了高浓度的一氧化碳毒性气体即可导致急性一氧化碳中毒,它是冬季较为常见的中毒性疾病之一,尤其在我国的北方地区发病率较高.此病在临床上的致残致死率极高,是急诊科常见的急危重症.患者多在经历一定时间的“假愈期”后发生一氧化碳中毒迟发性脑病,并且无法完全治愈,从而给社会和家庭造成严重的经济负担.但直到现在,一氧化碳中毒迟发性脑病的具体发病机制仍未完全阐明,并存在着多种学说.在此对一氧化碳中毒迟发性脑病发病机制的研究进行探讨,以期为其临床治疗提供新的思路及理论基础.     

高压氧治疗一氧化碳中毒后迟发性脑病30例临床疗效观察

目的 观察高压氧治疗一氧化碳中毒后迟发性脑病的临床疗效.方法对30例一氧化碳中毒后迟发性脑病患者进行高压氧治疗,作治疗前、后临床疗效分析.结果高压氧治疗后患者临床症状改善的总有效率为 86.6%.结论高压氧对一氧化碳中毒后迟发性脑病有显著疗效.     

急性一氧化碳中毒后迟发性脑病患者EEG观察

目的:了解一氧化碳(CO)中毒后迟发性脑病(DEACMP)患者从急性CO中毒到DEAC- MP发病期、临床治愈期整个病程中的脑电图(EEG)改变及其在临床上的意义。方法:对60例DEAC- MP患者分别在急性CO中毒期、假愈期、DEACMP期及临床治愈期动态进行EEG检查,并与EEG检查时患者症状轻重进行对比。结果:急性CO中毒期EEG 68%为轻度异常,21%为中度异常;假愈期EEG 86%为界线及正常;DEACMP期EEG均异常,且54例(90%)为中、重度异常,并与患者临床症状轻重程度一致;临床治愈期EEG 82%已正常。结论:EEG动态观察对了解DEACMP病程中各期的脑功能变化及疗效判断有较大的指导价值。     

活化蛋白-1 在急性一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠海马的表达变化

目的:观察急性一氧化碳中毒后不同时间点大鼠海马AP-1 的表达变化。方法:腹腔注射一氧化碳的方法制备一氧化碳中毒迟发性脑病模型,HE 染色观察大鼠海马区病理变化,免疫组化及Western blot 法检测AP-1 的表达水平,TUNEL 染色计数海马CA1 区凋亡神经元。结果:HE 染色,空气组(AC 组)、空白组(BC 组)各时间点海马区细胞形态正常;一氧化碳组(CO 组)海马区细胞肿胀、细胞数目减少,排列紊乱,细胞间隙扩大,细胞核碎裂、深染、固缩。免疫组化:CO 组各时间点AP-1 表达量均高于AC 组及BC 组,3 d 达峰值,组内第3 天与其余各时间点比较差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot:AP-1 表达在时间分布趋势上与免疫组化结果一致。TUNEL 染色:CO 组各时间点凋亡指数均较AC 组、BC 组多,于毒染后7 d 达高峰差异有统计学意义(P<0.05)。结论:大鼠海马区AP-1 表达增高,可能进一步导致细胞凋亡和炎症免疫反应,成为DEACMP 发病的重要机制之一。     

骨髓间充质干细胞治疗大鼠急性心肌梗死

目的:比较经不同途径移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗大鼠急性心肌梗死(AMI)的疗效,探求更为适合的移植途径。方法:采集大鼠BMSCs,并进行培养及鉴定。以5-氮胞苷(5-aza)10μmol/L,诱导BMSCs为心肌样细胞并鉴定。建立大鼠急性心肌梗死模型并鉴定。对照组不予处理,静脉移植组和心外膜移植组分别经尾静脉和心外膜移植心肌样细胞悬液200μl(心肌样细胞5×10~6),联合移植组同时经尾静脉和心外膜分别移植心肌样细胞悬液各200μl。4周后观察SD大鼠心肌组织形态及蛋白表达情况。结果:静脉移植组、心外膜移植组、联合移植组的心肌梗死区域均可见有DAPI标记阳性的移植细胞,其中联合移植组较静脉移植组、心外膜移植组数量明显增多;H-E染色可见后三组较对照组梗死区域心肌细胞排列整齐,细胞核较完整,联合移植组梗死改善程度明显;后三组较对照组血管紧张素转换酶2(ACE2)表达水平升高,联合移植组较静脉移植组、心外膜移植组升高水平更显著。结论:经静脉、心外膜和两者联合移植诱导后的BMSCs均能促进梗死部位的组织修复,抑制心室重构,其中联合移植途径治疗效果更明显。     

急性一氧化碳中毒后迟发性脑病的脑电图分析

目的:研究急性一氧化碳中毒后迟发性脑病(DEACMP)的脑电图变化。方法:对300例DEACMP患者不同时期的脑电图进行分析。结果:脑电图主要表现为额区广泛性慢波,脑电图的改变随着DEACMP的损伤程度和转归发生一致变化。结论:多次脑电图的检查对DEACMP的病情判断和预后评估及临床治疗有确定的价值。     

骨髓间充质干细胞移植治疗肝硬化的研究进展

肝硬化是临床中常见的慢性进行性肝病,目前治疗晚期肝硬化最有效的方法是肝脏移植,但肝源缺乏、费用昂贵、移植排斥反应及长期应用免疫抑制剂引起并发症等成为限制其广泛应用的主要原因.干细胞移植有利于受损肝组织修复,能够代偿部分肝功能,已成为治疗肝病的一种新方法.就骨髓间充质干细胞移植治疗肝硬化的基础、临床研究进展、存在的问题以及发展前景作一综述,旨在为其进一步研究提供理论依据.     

骨髓间充质干细胞移植治疗骨质疏松的研究进展

骨质疏松症被定义为一种系统性骨骼疾病,其特征是骨量低、骨组织微结构恶化、骨脆性和骨折易感性增加。 目前有2亿多人患有骨质疏松症,但由于人口老龄化和人均寿命延长,受影响的人数仍在急剧增加,这是一个重大的公共卫生问题。目前,治疗骨质疏松症的药物开发已经取得了重大进展,但药物治疗并不能逆转骨丢失,且会给患者带来一系列毒副作用。大量研究表明,骨髓间充质干细胞的归巢作用、成骨分化和细胞因子作用在骨质疏松发病过程中发挥重要作用。 移植骨髓间充质干细胞作为一种新方法,不仅能避开药物治疗的副作用而且能从根本上治疗骨质疏松,具有巨大的潜能和应用价值,但许多问题也有待解决。     

一氧化碳中毒后迟发性脑病患者的智能与脑电图分析

目的：观察一氧化碳中毒后迟发性脑病(DEACMP)患者的智力与EEG恢复的关系及其在临床上的指导意义。方法：对66例DEACMP患者定期进行长谷川痴呆量表、常识记忆注意测验、日常生活能力量表和中国修订韦氏成人智力量表、EEG等检测。结果：急性期DEACMP患者的智力与EEG的异常表现一致，均为100％异常，而恢复期EEG较智力恢复明显快。结论：智能及EEG检测对临床诊治DEACMP有较大的指导价值，恢复期智力检测对判断患者恢复情况意义更大，长期坚持治疗及锻炼均能不同程度地恢复患者的智能。     

一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠模型复制方法

目的：复制一氧化碳（CO）中毒迟发性脑病大鼠模型。方法：50只Wistar大鼠随机分为1000 ppm组、1500 ppm组、1650 ppm组、1800 ppm组和对照组共5组，每组10只。每组中毒箱分别通入浓度为1000 ppm、1500 ppm、1650 ppm、1800 ppm的CO混合气体，对照组通入空气。连续通气12h。利用迷宫试验评估动物的智力状态。迟发性脑病大鼠诊断标准为中毒3d后、28d内出现昏迷或迷宫实验正确入臂次数少于3次者。采用TUNEL法和透射电镜等双重方法检测大脑皮质、海马区细胞凋亡情况。结果：1500 ppm组、1650 ppm组均有4只大鼠出现迟发性脑病表现，1000 ppm组和对照组大鼠未出现迟发性脑病表现，1800 ppm组通气5 h有3只大鼠死亡。两种方法检测凋亡细胞数，1000 ppm组均少于5.00%，对照组均少于1.60%，1500 ppm组均多于5%-65%，1650 ppm组均多于10%-80%。结论：建立大鼠CO中毒迟发性脑病模型以CO浓度1500-1650 ppm、吸入时间12 h比较适宜。     

大鼠急性一氧化碳中毒迟发性脑病模型中干预剂叔丁基对苯二酚对Nrf2 及HO-1 表达的影响

目的:初步探讨大鼠急性一氧化碳中毒迟发性脑病(DEACMP)模型中干预剂叔丁基对苯二酚(tBHQ)前后脑组织海马区核因子E2 相关因子2(Nrf2)及其下游靶基因血红素加氧酶1(HO-1)的变化,从而进一步研究DEACMP 的发病机制,同时为其靶向治疗的研究提供一定的实验基础。方法:将240 只大鼠按随机数字表法分为一氧化碳中毒组(CO 组)、空气对照组(AC 组)、一氧化碳+3%乙醇组(EC 组)、一氧化碳+tBHQ 组(TC 组),再将各组大鼠按染毒后1、3、7、14、21、28 d 随机分为6 个亚组,随后用Morris 水迷宫试验观察大鼠行为学表现,免疫组织化学及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠干预剂tBHQ 前后Nrf2 及HO-1 的表达变化,TUNEL 染色检测细胞凋亡情况。结果:CO 组、EC 组、TC 组大鼠海马区Nrf2 及HO-1表达均表现为染毒后第1 天升高,3 d 达高峰,随后逐渐下降的趋势,各时间点与AC 组比较差异均有统计学意义,TC 组与CO组比较Nrf2 及HO-1 表达增高,各亚组比较差异均有统计学意义。CO 组、EC 组、TC 组大鼠与AC 组比较凋亡细胞随时间明显增多,且均表现为增高-高峰(7 ~14 d)-降低的趋势,TC 组与CO 组比较凋亡细胞(7 ~ 14 d)减少,差异有统计学意义。结论:DEACMP 的发生发展中Nrf2/ ARE/ HO-1 通路起着重要作用,tBHQ 特异性激活Nrf2 通路达到早期保护作用,有望减少或减轻DEACMP。     

骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠扩张型心肌病

1泸州医学院附属医院急诊科,四川省泸州市 646000;2哈尔滨医科大学附属第二医院心内科,黑龙江省哈尔滨市  150000 背景：扩张型心肌病所致的心肌纤维化是心力衰竭的病理基础,目前药物治疗、介入治疗和外科手术均不能替代坏死心肌和彻底改善心脏功能。 目的：观察异体骨髓间充质干细胞移植对大鼠扩张型心肌病心脏功能的作用和心肌纤维化的影响。 方法：40只Wistar大鼠随机数字表法分为细胞移植组(n=15)、对照组(n=15)和空白组(n=10),前2组建立大鼠扩张型心肌病模型。造模成功4周后细胞移植组注射骨髓间充质干细胞悬液150 μL(含3×106个细胞),对照组和空白组注射等量培养液。 结果与结论：与空白组相比,细胞移植组和对照组移植前左室收缩末期内径增加,射血分数和缩短分数明显下降(P < 0.01);移植后4周,细胞移植组超声心动图检查和移植前相比,左室收缩末期内径下降、射血分数和缩短分数明显升高(P < 0.01)。细胞移植组心脏胶原的表达低于对照组(P < 0.05)。与对照组相比,其他2组基质金属蛋白酶2及基质金属蛋白酶9表达明显下降(P < 0.05)。提示骨髓间充质干细胞移植后可改善心肌纤维化及扩张型心肌病鼠的心脏功能。      

急性一氧化碳中毒后迟发性脑病的诱发电位、CT和脑电图研究

目的：研究急性一氧化碳中毒后迟发性脑病（ＤＥＡＣＭＰ）患者的诱发电位（ＥＰ）、ＣＴ和脑电图（ＥＥＧ）。方法：对４６例ＤＥＡＣＭＰ患者进行ＥＰ、ＣＴ和ＥＥＧ检查。结果：异常率体感诱发电位（ＳＥＰ）８３％、视觉诱发电位（ＶＥＰ）６３％，脑干听觉诱发电位（ＢＡＥＰ）３０％，ＣＴ７１％，ＥＥＧ１００％。ＳＥＰ中的Ｐ４０、Ｎ５０、Ｐ６０和Ｎ７５峰潜伏期（ＰＬ）比正常对照组显著延长。ＶＥＰ的Ｐ１００ＰＬ较对照组明显延长。ＢＡＥＰ的Ⅰ、Ⅲ和Ⅴ波ＰＬ及Ⅰ—Ⅲ、Ⅲ—Ⅴ和Ⅰ—Ⅴ峰间期（ＩＰＬ）与对照组比较无显著性差异。结论：ＥＰ、ＣＴ和ＥＥＧ结合临床观察，对ＤＥＡＣＭＰ的定位诊断、病情判断与预后评估均有意义。