三种贵金属烤瓷合金与高糖对小鼠成纤维细胞L-929增殖的影响

背景：糖尿病患者这一特殊群体口腔环境较为特殊,关于口腔修复材料在这类患者应用的安全性研究较少见报道。 目的：检测3种贵金属烤瓷合金与高糖对体外培养的小鼠成纤维细胞L-929增殖的影响。 方法：将89%金合金、74%金合金、银钯合金3种烤瓷材料浸泡在不同糖浓度(11.1,22.2,33.3 mmol/L)的培养液中浸提,将所得的浸提液与小鼠成纤维细胞L-929共培养。同期设立空白对照。 结果与结论：L-929在不同贵金属烤瓷合金和不同糖浓度的细胞培养液中的增殖活性不同,24,72 h两因素交互作用的P值均小于0.05。与阴性对照组相比,22.2 mmol/L糖浓度下89%金合金促进细胞的增殖(P=0.004),银钯合金则抑制细胞的增殖(P < 0.001),74%金合金在不同糖浓度的培养液中与阴性对照组相比其细胞的增殖活性差异无显著性意义。结果表明,上述3种材料中74%金合金在不同糖浓度下对细胞增殖的影响最小。 关键词：贵金属烤瓷合金;高糖;金合金;银钯合金;小鼠成纤维细胞;增殖 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.12.019     

不同种类金属烤瓷底冠与基牙龈沟液的变化

背景：目前关于非贵金属烤瓷和贵金属烤瓷对牙龈、牙周组织健康影响的研究较多,纯钛与非贵金属、贵金属之间进行比较的研究较少。 目的：观察不同种类烤瓷金属材料修复后基牙龈沟液中龈沟液分泌量以及肿瘤坏死因子α和白细胞介素6水平的变化。 方法：选择后牙区(前磨牙和磨牙)患者60例,共80颗受试牙,按烤瓷金属内冠材料不同分为3组,钴铬合金组28颗、纯钛烤瓷组32颗、金铂合金烤瓷组30颗。在修复1,3个月后检测龈沟液的分泌量以及肿瘤坏死因子α和白细胞介素6水平。 结果与结论：修复后1,3个月钴铬合金组龈沟液分泌量以及肿瘤坏死因子α和白细胞介素6水平明显高于修复前(P < 0.05)。修复后1,3个月纯钛组的龈沟液分泌量,肿瘤坏死因子α水平高于修复前(P < 0.05),而白细胞介素6水平与修复前比较差异无显著性意义(P > 0.05)。修复后1,3个月金铂合金组的各项指标与修复前比较差异无显著性意义(P > 0.05)。钴铬合金组龈沟液分泌量、肿瘤坏死因子α和白细胞介素6水平高于纯钛组、金铂合金组(P < 0.05)。纯钛组龈沟液分泌量、肿瘤坏死因子α水平高于金铂合金组(P < 0.05)。     

不同牙科烤瓷合金材料诱导小鼠成纤维细胞DNA损伤的研究

研究不同牙科烤瓷合金材料诱导小鼠成纤维细胞(L929细胞)DNA的损伤情况,评价各种合金材料的遗传毒性.选择镍铬合金、钛合金、钴铬合金和金合金4种牙科烤瓷合金材料,制备4种合金材料的浸提液,用浸提液培养L929细胞.采用单细胞凝胶电泳(彗星试验)方法检测细胞DNA的损伤情况,镍铬合金和钛合金对细胞DNA损伤等级主要为重度损伤,钴铬合金组和金合金组的DNA损伤等级分别为中度损伤和轻度损伤.4种合金组彗星细胞的尾长、尾矩和Olive尾矩数值之间的差异具有统计学意义(P<0.05). 不同牙烤瓷合金材料诱导L929细胞DNA损伤的情况表现不同.金合金的遗传毒性性能优于镍铬合金、钛合金和钴铬合金,是具有良好生物学性能的牙科烤瓷合金材料.     

贵金属、镍铬合金烤瓷修复体与中国人牙周组织健康关系的系统评价

背景：国内许多学者认为贵金属烤瓷修复体较镍铬合金更有利于保持牙周组织的长期健康,但国内外尚无相关的系统评价。 目的：评价贵金属与镍铬合金烤瓷修复体对中国人牙周组织健康的影响。 方法：计算机检索中国生物医学文献数据库(1978-01/2011-03)以及中国期刊全文数据库(1979-01/2011-03)文章,同时手工检索10种中文口腔医学杂志有关金属烤瓷冠、桥修复的临床研究,按照纳入和排除标准选择随机对照试验,由两名研究者独立提取数据,并进行偏倚风险评价与Meta分析。 结果与结论：共纳入6篇文献,均存在中等程度偏倚风险。结果显示,贵金属烤瓷修复体能够降低79%由镍铬合金者引起的修复后基牙牙龈炎发生风险(P < 0.05),可减少94%由镍铬合金引起的修复后基牙牙龈染色发生风险(P < 0.05)。另外,贵金属烤瓷修复体修复后边缘密合度显著高于镍铬合金者(P < 0.05)。目前证据显示,使用贵金属烤瓷修复体能够减少国内人群修复后牙龈炎及牙龈染色的发生风险,然而还需要进行高质量的临床研究以增加该结论的可靠性。     

四种烤瓷冠基底金属浸提液干预人牙龈成纤维细胞尿纤溶酶原激活剂和Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂的表达

背景：修复材料的生物相容性是决定临床修复效果的重要因素之一。 目的：通过比较4种金属浸提液对人牙龈成纤维细胞尿纤溶酶原激活剂和Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂表达的差异探索其生物相容性。 方法：选用活体牙龈,原代培养人牙龈成纤维细胞,采用镍铬、钴铬、纯钛及金钯合金4种金属浸提液进行干预,以未进行干预的细胞作为对照。 结果与结论：ELISA检测结果显示镍铬和钴铬合金浸提液干预后细胞尿纤溶酶原激活剂表达增加;免疫荧光实验结合电镜观察发现镍铬和钴铬合金浸提液干预的细胞胞质荧光染色深,分布均匀,遍布整个细胞,提示细胞Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂表达增加。而纯钛和金钯合金浸提液对细胞尿纤溶酶原激活剂和Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂的表达无影响。说明纯钛和金钯合金的生物相容性优于镍铬和钴铬合金。      

钴铬合金及银钯合金烤瓷冠对牙周组织的影响

背景：金属烤瓷全冠是修复牙体缺损的最常用方法,牙周问题是导致修复失败的最常见原因。 目的：评价钴铬合金和银钯合金作为烤瓷冠内冠材料对牙周组织的影响。 方法：选择采用钴铬合金和银钯合金烤瓷冠修复患者75例,189颗患牙,其中106颗采用钯合金烤瓷冠修复体,83颗应用钴铬合金修复体。于修复前后临床对比患牙龈沟出血指数、龈沟液量、龈沟液中与炎症相关的细胞因子白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α浓度,以及龈沟液中牙龈卟啉单胞菌、伴放线嗜血杆菌、福赛斯坦纳菌等3种细菌检出率的变化。 结果与结论：①与修复前比较,钴铬合金烤瓷冠修复12个月后,患牙龈沟出血指数和龈沟液量、龈沟液中细胞因子白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α水平及龈沟液中牙龈卟啉单胞菌、福赛斯坦纳菌检出率升高(P < 0.05或P﹤0.01),伴放线嗜血杆菌检出率无明显变化(P > 0.05)。②与修复前比较,银钯合金烤瓷冠修复12个月后,龈沟出血指数和龈沟液量升高(P < 0.05),龈沟液中细胞因子白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α水平及3种细菌检出率无明显变化(P > 0.05)。表明两种材料的烤瓷冠对患牙牙周组织均有影响,其中银钯合金影响较小,钴铬合金影响较大。     

骨性关节炎关节液中白细胞介素6和基质金属蛋白酶3的表达

 背景：已有实验证实膝骨关节炎的发病与炎症细胞因子有密切的关系。目的：研究骨性关节炎患者关节液中白细胞介素6和基质金属蛋白酶3水平及其相关性,以及两者与骨性关节炎严重程度之间的相关性。方法：收集关节穿刺治疗的骨性关节炎患者关节液标本78份,应用ELISA法检测标本中白细胞介素6和基质金属蛋白酶3质量浓度,并对患者骨性关节炎严重程度进行HSS评分,采用Pearson相关分析探讨白细胞介素6、基质金属蛋白酶3和美国纽约特种外科医院(HSS)评分两两之间的相关性。结果与结论：骨性关节炎患者膝关节液中白细胞介素6为(13.1±5.7) μg/L,基质金属蛋白酶3为(989.3±429.5) μg/L, HSS为(56.4±12. 0)分。Pearson相关分析显示白细胞介素6、基质金属蛋白酶3的表达水平呈显著性正相关关系(r=0.70,P < 0.001);白细胞介素6和基质金属蛋白酶3均与关节美国纽约特种外科医院(HSS)评分均呈负相关关系(r=-0.70,r=-0.75,P < 0.001)。结果显性关节液中白细胞介素6和基质金属蛋白酶3水平之间,以及两者与骨性关节炎严重程度之间均呈正相关,提示测定骨性关节炎患者关节液中白细胞介素6和基质金属蛋白酶3水平对早期诊断和治疗具有重要意义。  中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

金铂合金烤瓷冠对牙周组织的影响

背景：金属烤瓷冠的修复材料种类很多,每种材料的性能及对牙周组织细胞毒性影响均不相同。 目的：观察金铂合金烤瓷冠修复后对牙周组织的影响。 方法：选择2009-06/2010-01采用金铂合金烤瓷冠进行上颌切牙修复患者21例(26颗牙),以患牙对侧的同名健康牙为对照牙。烤瓷冠戴入6~8个月后复诊。 结果与结论：修复体边缘的深度及密合度均符合临床要求,修复后患牙的菌斑指数和龈沟液内血管内皮生长因子、肿瘤坏死因子α水平与对照牙比较,差异无显著性意义(P > 0.05),但患牙探诊深度、龈沟内出血指数及龈沟液量明显高于对照牙,差异有显著性意义(P < 0.05)。说明金铂合金烤瓷冠对患牙牙周组织有一定的不良影响。     

疮灵液载入胶原促进慢性创面的愈合

背景：前期研究表明,疮灵液具有较好的抗炎作用,可抑制血小板聚集及血栓形成,促进伤口愈合。目的：观察将疮灵液载入胶原后对慢性创面愈合的影响。方法：在40只大鼠背部制作慢性创面模型,造模后3 d随机均分为4组,对照组以载0.2 mL生理盐水纱布外敷创面,疮灵液组以载0.2 mL疮灵液纱布外敷创面,胶原组以胶原海绵覆盖创面,疮灵液载入胶原组以载0.2 mL疮灵液胶原覆盖创面。造模时及造模后第3,7,15天测定创面面积,创面分泌物中白细胞总数、白细胞介素6与肿瘤坏死因子α水平,创面肉芽中羟脯氨酸、基质金属蛋白酶1,2,9的水平。结果与结论：疮灵液载入胶原组、疮灵液组造模后第3,7,15天肿瘤坏死因子α、基质金属蛋白酶1,2,9水平均低于对照组、胶原组(P < 0.01,P < 0.05),造模后第3,7,15天白细胞总数显著低于对照组、胶原组(P < 0.01,P < 0.05),前两组间各指标比较差异无显著性意义;疮灵液载入胶原组造模后第3,7,15天羟脯氨酸水平高于其余3组(P < 0.05);疮灵液载入胶原组造模后15 d创面面积显著低于其余3组(P < 0.01);造模后15 d,4组间白细胞介素6水平比较差异无显著性意义。表明疮灵液载入胶原能显著抑制慢性创面炎症细胞增殖与浸润,抑制创面炎症因子与基质金属蛋白酶分泌,促进慢性创面愈合。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

烤瓷合金对机体细胞毒性的实验研究

目的:探讨3种口腔科常用烤瓷合金的细胞毒性。方法:分别采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)和单细胞凝胶电泳(彗星试验)法检测3种烤瓷合金材料对小鼠成纤维细胞L929相对增殖率(RGR)的影响以及DNA的损伤情况。结果:金合金组的RGR为87.7±11.3,与钴铬合金组、对照组比较差异无统计学意义,其余各组间RGR比较差异均有统计学意义(P0.05);镍铬合金对DNA的损伤主要为严重损伤,而钴铬合金和金合金分别为中度和轻度损伤。结论:金合金材料和钴铬合金材料对RGR的影响显著小于镍铬合金,同时金合金材料所造成的DNA损伤最轻,因此,金合金材料是具有良好生物学性能的口腔科烤瓷合金材料。     

原代成纤维细胞和纤维肉瘤细胞自分泌转化生长因子β1浓度检测及对转化生长因子β1增殖的调节

背景：体外实验常采用外源性转化生长因子β1刺激来观察细胞增殖变化,易忽略细胞本身自分泌转化生长因子β1的影响。 目的：检测原代成纤维细胞和纤维肉瘤细胞(L929)自分泌转化生长因子β1的浓度和细胞增殖的变化。 方法：Elisa试剂盒检测原代成纤维细胞和纤维肉瘤细胞各时相点细胞内和培养上清中生长转化因子β1水平。 结果与结论：纤维肉瘤细胞内转化生长因子β1浓度随培养时间延长而升高,原代成纤维细胞内转化生长因子β1浓度随培养时间延长而降低;两种细胞培养上清转化生长因子β1浓度均随时间而上升,但纤维肉瘤细胞显著高于原代成纤维细胞  (P < 0.01),峰值时达到原代成纤维细胞的20倍;两种细胞增殖曲线在72 h内均随时间而显著增高(P < 0.01),同一时间点比较,纤维肉瘤细胞明显高于原代成纤维细胞。提示自分泌转化生长因子β1具有促进细胞增殖的作用,不同的自分泌水平可能是影响原代成纤维细胞这种正常细胞和纤维肉瘤细胞肿瘤细胞对于外源转化生长因子β1反应不同的重要原因。     

高糖状态下小鼠肾小球足细胞凋亡和组成型光形态建成1蛋白的表达

背景：组成型光形态建成1蛋白与细胞凋亡有关。 目的：观察高糖对体外培养的小鼠肾小球足细胞凋亡和组成型光形态建成1蛋白表达的影响。 方法：将不同浓度葡萄糖溶液分别加入体外培养的条件永生性小鼠肾小球足细胞株培养液中,培养不同时间后检测肾小球足细胞凋亡指数和死亡指数,以筛选最佳剂量效应葡萄糖浓度。用30 mmol/L葡萄糖溶液干预小鼠肾小球足细胞(高糖组),并设立对照组和采用30 mmol/L甘露醇干预的甘露醇组。 结果与结论：在一定浓度范围内,葡萄糖呈时间和剂量依赖性诱导肾小球足细胞凋亡和死亡(P < 0.05),随着葡萄糖浓度的进一步加大,肾小球足细胞死亡指数明显升高,而凋亡指数变化不大。与对照组比较,高糖组凋亡指数显著增加(P < 0.05),其COP1 mRNA及蛋白表达水平均明显下降(P < 0.05)。 结果证实,高糖可诱导肾小球足细胞的凋亡,其机制可能与其下调COP1的表达有关。     

自制钴铬烤瓷合金的金瓷结合性能

背景：在非贵金属烤瓷合金中,钴铬烤瓷合金在生物相容性、耐腐蚀性以及金属稳定性方面都优于镍铬烤瓷合金和含钛烤瓷合金,被广泛的应用于临床。 目的：通过与德国BEGO钴铬合金对比,评价自制钴铬烤瓷合金的金瓷结合性能。 方法：制作25 mm×3 mm×0.5 mm规格的德国BEGO钴铬合金与自制钴铬烤瓷合金两种合金的金属试条,分别熔附8 mm× 3 mm×1 mm的VITA MK 95瓷粉,采用三点弯曲的方法测试金瓷结合力,利用扫描电镜观察金属氧化界面。 结果与结论：加力后国产和德国BEGO钴铬合金样本随着力量的增加瓷层开裂同时完全脱落,表面成灰黑色氧化膜,无明显瓷残余;自制钴铬烤瓷合金与德国BEGO钴铬合金的金瓷结合力差异无显著性意义[(41.26±2.68), (41.35±2.59) MPa,   P > 0.05]。说明自制钴铬烤瓷合金的金瓷结合强度高于ISO所要求的基本值25 MPa,且与德国BEGO钴铬合金相比无差异,可满足临床要求。     

葡萄糖浓度与大鼠胰腺导管干细胞的诱导分化

背景：葡萄糖是胰腺导管干细胞分化的重要因素之一,与分化后胰岛素分泌细胞数量及分泌能力相关。 目的：对比不同浓度葡萄糖诱导下,胰腺导管干细胞分化后细胞的胰岛素分泌能力。 方法：使用胶原酶Ⅴ及Ficoll-400分离及纯化Wistar大鼠胰腺上皮细胞,获取胰腺导管干细胞,将干细胞分为10组,体外培养、增殖及分化形成胰岛素分泌细胞。各组在含有不同浓度葡萄糖的培养基中进行分化。采用免疫荧光染色法鉴定胰腺导管干细胞,光化学发光法检测分化出的胰岛素分泌细胞的胰岛素分泌量。 结果与结论：葡萄糖浓度为20.6,25.6,  30.6 mmol/L组细胞的刺激指数高于其他组(P < 0.05),但这3组两两比较差异无显著性意义(P > 0.05)。葡萄糖浓度为15.6,20.6,25.6 mmol/L组细胞胰岛素分泌量高于其他组(P < 0.05),但这3组两两比较差异无显著性意义(P > 0.05)。提示胰腺导管干细胞分化为胰岛素分泌细胞实验中,当分化时培养液所含葡萄糖浓度为20.6~25.6 mmol/L时,所得细胞胰岛素分泌能力最强。     

体外高浓度葡萄糖培养及黄芪干预人外周血内皮祖细胞的数量和增殖与分化

背景：内皮祖细胞数量及功能受损是糖尿病血管并发症发生发展的重要环节,黄芪对多种原因引起内皮功能障碍具有保护作用,可以有效保护血管内皮功能。 目的：观察高浓度葡萄糖及黄芪干预对人外周血内皮祖细胞数量、增殖及分化影响。 方法：不同浓度葡萄糖孵育内皮祖细胞24 h以及30 mmol/L葡萄糖孵育内皮祖细胞不同时间;内皮祖细胞经20 g/L黄芪预处理24 h后,再加入30 mmol/L葡萄糖培养24 h。 结果与结论：高葡萄糖以浓度及时间依赖方式减少内皮祖细胞的数量,降低内皮祖细胞的增殖及向内皮细胞系分化能力(P  < 0.05或0.01),给予黄芪预处理后,内皮祖细胞数量明显增加,增殖及向内皮细胞系分化能力明显增强(P < 0.05或0.01)。提示高葡萄糖以浓度及时间依赖方式减少外周血内皮祖细胞数量,降低内皮祖细胞的增殖及向内皮细胞系分化能力,黄芪可以改善高葡萄糖对内皮祖细胞的损伤作用。     

L-carnosine对NIT-1胰岛细胞的影响及机制

目的: 研究肌肽(L-carnosine)对高糖培养的NIT-1细胞胰岛素分泌、增殖和凋亡的影响及机制。方法:(1)正常和高糖培养细胞72 h,放射免疫法测定葡萄糖刺激的胰岛素分泌,然后分别换不同浓度葡萄糖和L-carnosine培养,测定胰岛素分泌;(2)细胞分为C组(11.1 mmol/L glucose)、H组 (33.3 mmol/L glucose)、H+A组(33.3 mmol/L glucose +1 mmol/L L-carnosine)和H+B(33.3 mmol/L glucose+ 20 mmol/L L-carnosine)组培养72 h,BrdU检测细胞增殖,流式细胞术检测凋亡,RT-PCR测定bcl-2和caspase-3 mRNA的表达,荧光法检测caspase-3活性。结果:(1)高糖组细胞胰岛素分泌减少; 20 mmol/L L-carnosine显著增加正常和高糖组胰岛素分泌(P<0.01),且呈正相关(P<0.01);(2)高糖组细胞增殖和凋亡均增加(均P<0.01),但总体数目减少;1 mmol/L L-carnosine使增殖增加,凋亡减少(P<0.01);(3) 高糖组caspase-3 mRNA表达明显增加,bcl-2 mRNA明显减少(P<0.05);1 mmol/L L-carnosine使前者明显减少(P<0.05),后者明显增加(P<0.01);不同浓度L-carnosine均明显降低caspase-3活性。结论: 高浓度L-carnosine可单独刺激细胞分泌胰岛素,低浓度的L-carnosine可增加NIT-1细胞增殖并减少高浓度葡萄糖所导致的凋亡。Caspase-3和Bcl-2可能参与了L-carnosine保护NIT-1细胞的过程。     

人外周血内皮祖细胞增殖、凋亡及丙二醛、抗氧化因子合成与波动性高糖的影响

背景：研究表明波动性高血糖较持续性高血糖对血管内皮功能的损害可能更严重。 目的：观察波动性高糖对人外周血内皮祖细胞增殖、凋亡及丙二醛、抗氧化因子合成的影响。 方法：密度梯度离心法获取人外周血单个核细胞。取经培养鉴定后的内皮祖细胞,细胞同化后分别给予5.5 mmol/L,20 mmol/L,5.5/20 mmol/L葡萄糖(5.5,20 mmol/L的葡萄糖培养液每8 h更换1次)及20 mmol/L甘露醇。干预72 h后,MTT法检测内皮祖细胞的增殖情况;流式细胞仪检测细胞凋亡率;比色法测定培养液中丙二醛水平及超氧化物歧化酶活力。 结果与结论：20 mmol/L和5.5/20 mmol/L葡萄糖作用72 h,内皮祖细胞增殖减少、凋亡率增高(P < 0.01）,培养液中丙二醛水平增高、超氧化物歧化酶活力降低(P < 0.01),均以5.5/20 mmol/L葡萄糖作用最明显(P  < 0.01)。说明波动性高糖较恒定性高糖更易抑制内皮祖细胞增殖并促进其凋亡,其机制可能与波动性高糖环境下氧化应激水平增高有关。     

辛伐他汀抑制高糖诱导人脐静脉内皮细胞的凋亡

背景：他汀类药物对血管内皮细胞的凋亡是否有影响目前尚不明确。 目的：探讨辛伐他汀对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响。 方法：用DMEM细胞培养液培养人脐静脉内皮细胞,将细胞分成空白对照组、高糖组和高糖+辛伐他汀组,用四甲基偶氮唑蓝比色法测定人脐静脉内皮细胞的存活率,流式细胞仪和Western blot分别检测细胞早期凋亡率及P53蛋白表达。 结果与结论：高糖组及高糖+辛伐他汀组细胞增殖率较空白对照组明显降低(P < 0.01),而高糖组细胞增殖率较高糖+辛伐他汀组亦降低(P < 0.01);高糖组P53蛋白表达量及凋亡率较空白对照组及高糖+辛伐他汀组明显增加(P < 0.01),高糖+辛伐他汀组P53蛋白表达及凋亡率亦明显高于空白对照组(P< 0.01)。表明高糖可通过促进促凋亡蛋白P53的表达进而促进人脐静脉内皮细胞的凋亡,而辛伐他汀可抑制此作用。