五味子乙素对HepG2细胞增殖、凋亡及内化阿霉素效应的影响

目的 分析不同浓度五味子乙素(Sch B)对肝癌细胞(HepG2)凋亡、增殖及内化阿霉素效应的影响.方法 体外培养HepG2细胞,分别加Sch B至不同浓度.采用流式细胞术分析Sch B作用24 h细胞的凋亡率;采用MTT还原实验检测该药物作用72 h增殖抑制率.阿霉素单独(20 μmol/L)或阿霉素与不同浓度的Sch B(0、25、50、75、100和150 μmol/L)共同处理4h,流式细胞术分析HepG2细胞内阿霉素分布.结果 SchB抑制HepG2增殖的IC50值为51.50μmol/L;但其浓度达100 μmol/L时,细胞发生凋亡,细胞凋亡率为(5.56±1.14)％.20 μmol/L阿霉素单独作用组荧光强度为58.30±3.93,而25 μmol/L Sch B同时作用组,荧光强度增加到88.22±4.85;随Seh B浓度增加细胞内荧光逐渐增强.结论 低浓度的Sch B已具有促进阿霉素内化的效应,但其抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的有效浓度则约为此浓度的2倍或4倍.     

钨磷酸盐联合表阿霉素抑制K562细胞增殖

目的：探讨低浓度的钨磷酸盐（K6[P2W18O62]·14H2O）对表阿霉素抑制K562细胞增殖的影响与机制。方法体外培养K562细胞,不同浓度钨磷酸盐和表阿霉素处理后,WST-1还原法检测细胞增殖、流式细胞术检测细胞内表阿霉素的相对含量和活性氧值。结果钨磷酸盐（15μmol/L）与阿霉素（2.5、5和10μmol/L）的联合指数分别为1.62和1.29。结论两者具有协同抗肿瘤效应;钨磷酸盐可促进阿霉素内化入细胞并降低细胞内活性氧水平;钨磷酸盐可能通过促进表阿霉素内化入细胞而发挥协同抗肿瘤的作用。     

乳腺癌耐药性与MAPK信号转导关系的研究

目的探讨乳腺癌细胞阿霉素耐药性与p38MAPK通路的关系。方法用流式细胞术检测SB203580(15μmol/L)干预后细胞的凋亡、细胞内阿霉素浓度的改变、细胞对阿霉素敏感性。结果经SB203580(15μmol/L)干预24h和48h后,流式细胞仪检测见MCF-7/Adr细胞发生显著凋亡,凋亡率分别为25.36±1.17%和38.21±1.25%,并呈一定时间依赖性(P<0.05);显著高于空白对照组及DMSO组MCF-7/Adr细胞的0.65±0.21%和0.81±0.16%(P<0.01);细胞内阿霉素浓度亦显著增加,平均荧光强度分别为32.45±2.36及41.66±3.12,均显著高于空白对照组及DMSO组的14.17±1.45及16.28±0.63(P<0.01);另外,SB203580干预48h使MCF-7/Adr细胞内阿霉素浓度增加的作用强于24h组,两者间差异有统计学意义(P<0.05)。结论提示p38MAPK通路与乳腺癌细胞阿霉素耐药密切相关。     

溶血卵磷脂对牛视网膜微血管内皮细胞凋亡及细胞内钙离子浓度的影响

目的: 探讨溶血卵磷脂(LPC)对牛视网膜微血管内皮细胞(BRECs)凋亡及细胞内钙离子浓度的影响.方法: 原代分离培养牛视网膜微血管内皮细胞,加入不同浓度的LPC,分别培养6 h、12 h、24 h,通过吖啶橙染色在荧光显微镜下观察细胞凋亡,流式细胞检测细胞凋亡率,F2000荧光光度计测细胞内钙离子浓度,并计算游离钙浓度.结果:(1)60 μmol/L LPC作用牛视网膜微血管内皮细胞24 h后, 细胞凋亡率明显高于LPC浓度为20 μmol/L及40 μmol/L时;(2) LPC浓度从20 μmol/L增加到60 μmol/L过程中,细胞内游离钙离子浓度明显增加,而且细胞内游离钙离子浓度的增加与LPC的作用时间有关,作用时间越长,钙离子浓度越高.结论: LPC能增加细胞内游离钙离子浓度,促使BRECs的凋亡,而且LPC的这种作用具有时间和剂量依赖性.因此,脂代谢紊乱可能是通过诱导BRECs的凋亡而发挥作用的.     

齐墩果酸诱导人乳腺癌细胞凋亡及与细胞内Ca2+水平关系的研究

目的研究齐墩果酸对人乳腺癌细胞(MCF-7)增殖抑制和诱导凋亡的作用,并探讨凋亡发生与细胞内Ca2 浓度([Ca2 ]i)变化的关系.方法25～125μmol/L浓度梯度的齐墩果酸处理MCF-7细胞24h,用MTT比色法测定细胞增殖能力.50μmol/L,75μmol/L和100μmol/L齐墩果酸处理细胞24h,用末端脱氧核苷转移酶介导dUTP末端标记法和Annexin Ⅴ流式细胞仪法检测凋亡细胞.75μmol/L齐墩果酸处理细胞24 h,用Fura-2荧光负载方法测定[Ca2 ]i的变化.结果从50μmol/L齐墩果酸浓度起对MCF-7细胞的增殖抑制率显著升高(P＜0.05和P＜0.01),呈剂量依赖性,半增殖抑制浓度(IC50)为88.36μmol/L.75μmol/L和100μmol/L齐墩果酸使细胞凋亡率显著升高(P＜0.01);齐墩果酸处理组的[Ca2 ]i也明显高于对照组(P＜0.01).结论齐墩果酸具有抑制MCF-7细胞增殖和诱导调亡的作用;其诱导凋亡可能依赖于细胞内Ca2 水平上调.     

黄连素抑制人喉癌 Hep-2细胞增殖及机制研究

目的：探讨黄连素对人喉癌 Hep-2细胞增殖的抑制作用及其可能机制。方法体外培养 Hep-2细胞,使用不同浓度黄连素诱导不同时间,应用 MTT 法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术测定细胞周期及凋亡;实时荧光定量 PCR 和蛋白质免疫印迹（Western blot）法分别检测细胞周期蛋白 D（CyclinD）、B 细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关 X 蛋白（Bax）基因和蛋白表达水平。结果与0μmol/ L 黄连素对照组比较,2.5、5.0、10.0、20.0μmol/ L 黄连素作用 Hep-2细胞24、48 h,可明显抑制细胞增殖,且呈浓度时间依赖性（P ＜0.05）;2.5、5.0、10.0μmol/ L 黄连素作用 Hep-2细胞48 h,细胞早期凋亡率明显升高,呈浓度依赖性（P ＜0.05）;G0/ G1期细胞增多（P ＜0.05）,诱导细胞阻滞于 G0/ G1期;10μmol/ L 黄连素作用 Hep-2细胞48 h,Bax 基因和蛋白表达水平明显升高（P ＜0.05）,CyclinD、Bcl-2基因和蛋白表达水平明显下降（P ＜0.05）。结论黄连素能抑制喉癌细胞增殖,引起 G0/ G1期阻滞,并诱导其凋亡,其作用机制可能与 Bax 基因表达上调及 CyclinD、Bcl-2基因表达下调有关。     

环孢素A对人胃癌BGC823细胞增殖与凋亡的影响

目的 研究环孢素A(CsA)对人胃癌BGC823细胞的生长增殖以及凋亡的影响.方法 MTT法检测不同浓度CsA处理24、48、72 h后对BGC823细胞增殖抑制率;流式细胞术(FCM)检测细胞周期、活性氧(ROS)含量及细胞线粒体膜电位(△Ψm)改变;Annexin-V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率.结果 CsA在5～20 μmol/L浓度范围内和24 ～ 72 h时间范围对BGC823细胞增殖有显著抑制作用,与药物剂量、作用时间呈现量效和时效的依赖性;FCM结果显示CsA浓度依耐性使细胞周期阻滞于G0/G1期,与对照组相比差异有统计学意义(F=33.45,P＜0.05,P＜0.01);细胞凋亡率随CsA作用浓度增加而增加;5～ 20μmol/L CsA浓度范围细胞内ROS含量显著增加(F =46.17,P＜0.01),细胞线粒体膜电位明显降低.结论 CsA对BGC823细胞有抑制增殖和诱导凋亡作用,其机制可能与阻滞细胞生长周期、细胞内ROS含量增加以及线粒体膜电位下降相关.     

1,6-二磷酸果糖对甲状腺癌细胞凋亡和活性氧水平的影响

目的:研究不同浓度1,6-二磷酸果糖(F1,6BP)对人甲状腺乳头状癌细胞增殖、凋亡及活性氧(ROS)水平的影响.方法:F1,6BP体外孵育W3人乳头状甲状腺癌细胞株,MTS比色法检测细胞增殖、流式细胞术检测细胞凋亡、Western Blot法检测活化型caspase3表达,2-7-二氯氢化荧光素乙二脂(DCFH-DA)染色法结合荧光酶标仪检测细胞ROS水平,比色法分析细胞内氧化型谷胱甘肽(GSSH)含量.结果:2.5～10 mmol/L F1,6BP可抑制W3细胞的增殖,诱导凋亡,呈浓度和时间依赖性变化.2.5～10 mmol/L F1,6BP干预W3细胞48 h后,细胞内ROS和GSSH含量逐渐升高,呈浓度依赖性变化.结论:F1,6BP能抑制人甲状腺乳头状癌W3细胞增殖,促使细胞凋亡,可能与细胞内ROS水平增加密切相关.     

芬维A胺对人肝癌细胞株HepG2增殖与细胞凋亡的影响

目的探讨分子靶向药物芬维A胺(Fenretinide)在体外对人肝癌细胞株Hep G2的细胞增殖与细胞周期的影响。方法体外培养人肝癌HepG2细胞,实验组在培养液中加入不同浓度的芬维A胺(2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L),对照组培养液中不加芬维A胺,分别孵育48 h后,采用MTT法检测芬维A胺对HepG2细胞增殖的影响,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡率。结果芬维A胺能明显抑制HepG2细胞增殖,呈时间和剂量依赖性;芬维A胺处理HepG2细胞72 h,可使G0~G1期细胞比例升高,G2~M、S期比例明显下降,凋亡率明显上升(P<0.05)。结论芬维A胺对体外人肝癌HepG2细胞具有明显的抑制作用,主要表现为抑制增殖和促进凋亡。     

阿糖胞苷诱导人MDS细胞株MUTZ-8细胞凋亡过程中活性氧水平的变化

目的探讨阿糖胞苷诱导人MDS细胞株MUTZ-8细胞凋亡的可能机制。方法将细胞分为以下5组:阴性对照组、0.1μmol/L Ara-c组、1μmol/L Ara-c组、10μmol/L Ara-c组、10μmol/L Ara-c+62.5μmol/L ALA组。用MTT法测定阿糖胞苷对各组细胞抑制率的影响,用Annexin V-FITC/PI双染法及Hoechst33258荧光染色观察阿糖胞苷对各组细胞凋亡的影响,并用流式细胞仪检测各组细胞线粒体膜电位的变化。运用二氢二氯荧光素(DCFH-DA)为细胞内活性氧探针,通过荧光显微镜及流式细胞仪检测各组细胞内活性氧水平的变化。结果 MTT结果提示,阿糖胞苷处理组细胞增殖抑制率高于阴性对照组,二者相比差异具有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪结果提示,不同浓度的阿糖胞苷作用MUTZ-8细胞后,凋亡率明显升高,线粒体膜电位明显下降,与阴性对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪及荧光显微镜检测均显示,阿糖胞苷作用后细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)明显上升。而加入抗氧化剂α-硫辛酸后细胞内ROS表达水平下降。结论阿糖胞苷明显抑制了人MDS细胞株MUTZ-8的生长并诱导其凋亡,可能与阿糖胞苷影响了细胞内ROS水平有关。