铜绿假单胞菌的耐药现状及外膜通道蛋白OprD_2的研究

目的了解铜绿假单胞菌临床分布情况、耐药现状以及外膜通道蛋白OprD2的缺失与亚胺培南耐药的相关性。方法收集2011-2013年深圳市第二人民医院临床分离到的949株铜绿假单胞菌,采用K-B纸片扩散法进行12种抗生素药敏试验,通过设计引物,运用聚合酶链反应(PCR)方法扩增oprD2基因。结果共949株铜绿假单胞菌,分离率前两位的科室是神经外科和ICU病房,分别占25.40%和22.76%;铜绿假单胞菌对12种抗生素的药敏试验中,最敏感的是阿米卡星(85.88%),其次是氨曲南(85.25%),耐药率最高的是头孢他啶(37.09%),对亚胺培南耐药的有312株,即亚胺培南耐药铜绿假单胞菌(IRPA)的分离率为32.88%(312/949);2012年6-12月筛选的81株IRPA中,有42株oprD2基因缺失,缺失率为51.85%。结论临床分离铜绿假单胞菌耐药性严重,外膜通道蛋白OprD2缺失可能是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要原因之一。     

一种快速粗提铜绿假单胞菌外膜蛋白的方法

目的：为了寻找一种快速、简单、方便的铜绿假单胞菌外膜蛋白的的取方法。方法：用三种方法提取外膜蛋白。并对其电泳图谱进行比较。结果：三种方法提取的外膜蛋白成分基本相同。结论：改进的方法是一种快速、简单、方便的铜绿假单胞菌外膜蛋白的提取方法。     

铜绿假单胞菌耐药分析

【目的】分析本院铜绿假单胞菌的耐药情况，为医院合理使用抗菌药提供可靠的实验依据。【方法】收集本院2001年3月-2004年2月间各种临床标本分离的铜绿假单胞菌214株，应用API细菌鉴定系统进行鉴定，并用K-B法进行药敏实验。【结果】铜绿假单胞菌对亚胺培南、哌啦西林／三唑巴坦、哌啦西林、头孢唑林、头孢呋辛、头孢他啶、头孢哌酮、头孢吡肟、庆大霉素、阿米卡星、环丙沙星的耐药率分别为1．0％、18．5％、20．3％、92．1％、90．6％、12．7％、15．1％、8．2％、32．3％、9．4％、8．9％。【结论】临床应根据药敏实验合理使用抗生素，以减少耐药菌株的产生。     

亚胺培南对头孢他啶有诱导作用的铜绿假单胞菌耐药机制研究

目的研究本地区亚胺培南可诱导头孢他啶耐药的铜绿假单胞菌（Pa）发生率及金属酶基因、外膜通道蛋白OprD2基因存在情况及外排泵抑制剂与亚胺培南和头孢他啶敏感性之间的关系。方法收集临床分离的Pa325株,D试验筛选出116株亚胺培南可诱导头孢他啶耐药的Pa,纸片扩散法检测亚胺培南等14种抗菌药物的敏感性,采用PCR法检测IMP、VIM、SPM、GIM基因和外膜通道蛋白OprD2基因,琼脂稀释法测定该菌加入外排泵抑制剂羟基氰氯苯腙（CCCP）前后对亚胺培南和头孢他啶的MIC值。结果收集的325株Pa中,有35.7%（116/325）亚胺培南可诱导头孢他啶耐药,加入CCCP前后对亚胺培南和头孢他啶的敏感性无明显变化;116株Pa中,80.2%（93/116）是亚胺培南耐药而头孢他啶敏感,未检出IMP、VIM、SPM、GIM基因,87.1%（81/93）外膜通道蛋白OprD2基因缺失。结论铜绿假单胞菌中亚胺培南可诱导头孢他啶耐药,与其他耐药机制无关。外膜通道蛋白OprD2基因缺失是本地区Pa对亚胺培南耐药的重要机制。     

某三甲医院铜绿假单胞菌分布及耐药性分析

目的 了解某三甲医院2013~2015年临床分离的铜绿假单胞菌分布情况,及其对常用抗菌药物敏感性的动态变化,为临床控制感染和指导临床抗感染治疗及合理用药提供实验室依据。方法 采用回顾性调查分析方法,对铜陵市人民医院临床微生物室2013~2015年临床科室送检各类标本分离出的铜绿假单胞菌,应用WHONTE 5.6软件对其临床科室分布和药敏试验数据进行统计分析。结果 铜绿假单胞菌的检出率呈逐年增加;标本主要来源于痰液,平均占70.49%,其次为创面伤口分泌物,平均占12.85%;主要分布在重症监护室和呼吸内科,分别为15.86%和15.63%;3年间对阿米卡星的敏感性均保持在>90%,对头孢他啶和头孢吡肟敏感率逐年增高,至2015年,敏感率均>80%,对头孢噻肟、头孢曲松及磺胺甲恶唑/甲氧苄啶保持耐药,耐药率均>70%,对替卡西林/克拉维酸耐药率呈逐年下降,对亚胺培南和美罗培南的耐药率维持在30%左右。结论 铜绿假单胞菌引起的感染增多,以肺部感染为主,检出率呈现逐年增加趋势,且耐药性日趋严重,应加强耐药性监测。     

2005-2008年铜绿假单胞菌耐药情况变迁分析

目的分析2005~2008年临床分离的铜绿假单胞菌耐药性的变迁,为铜绿假单胞菌感染的临床治疗提供依据。方法采用纸片法测定临床分离到共1119株铜绿假单胞菌对12种抗菌药物的敏感性。结果铜绿假单胞菌对大多数抗生素的耐药性均呈现上升趋势,目前首选药物仍然是碳青霉烯类,其对亚胺培南的敏感性为71.3%（2008年）。4年中,铜绿假单胞菌感染发生率在干部科、ICU呈上升趋势。结论铜绿假单胞菌是医院内感染的重要致病菌,对铜绿假单胞菌引起的感染应尽早进行病原学检查,选择合适的抗菌药物。     

铜绿假单胞菌产酶与耐药相关性的初步研究

目的 探讨铜绿假单胞菌产AmpC酶、金属酶与其耐药的相关性。方法 从湘雅医院各临床科室送检的标本中分离出82株铜绿假单胞菌，采用纸片扩散法检测AmpC酶，纸片协同法检测金属酶，并选用7种广谱抗生素进行药敏实验。结果 82株铜绿假单胞菌中，AmpC酶和金属酶阳性率分别为32.9％和8．5％。AmpC酶阳性菌株对头孢他啶（CAZ），头孢他啶／棒酸（CDO2），头孢塞肟（CTX），头孢塞肟／棒酸（CDO3），氧氟沙星（OFX），阿米卡星（AK）表现高度耐药，对亚安培南（IPM），头孢比肟（FEP），氨曲南（ATM）敏感；金属酶阳性菌株仅对阿米卡星（AK）敏感，对其余抗生素表现高度耐药。结论 湘雅医院临床标本分离的铜绿假单胞菌产AmpC酶和金属酶阳性率高，两种酶与铜绿假单胞菌多重耐药性相关。铜绿假单胞菌产酶的检测有助于控制院内感染和指导临床用药。     

126株铜绿假单胞菌耐药分析

目的：了解铜绿假单胞菌感染在我院临床标本中的分布及耐药特点。方法：将分离培养的细菌用法国生物梅里埃公司的20E鉴定卡进行鉴定并记录其感染部位。结果：分离出铜绿假单胞菌126株,其中痰液标本中铜绿假单胞菌检出率最高。美洛培南、亚胺培南、环丙沙星以及β-内酰胺酶抑制剂复合物对铜绿假单胞菌有良好的效果,敏感性都在60%以上。结论：铜绿假单胞菌感染以上呼吸道为主,可引起多部位感染,它对多种抗生素具有较高的耐药性,因此应加强药物检测,指导临床用药。     

铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药机制的研究

目的：研究铜绿假单胞菌（PA）对亚胺培南的耐药机制，为临床合理选择抗生素提供确切的依据。方法：用2-巯基丙酸和头孢他啶双纸片协同法，检测临床分离的48株耐亚胺培南PA金属β-内酰胺酶（MBL）产生率，并提取各菌株的外膜蛋白，进行SDS-PAGE电泳分析，比较各耐药菌株外膜蛋白与标准菌株的差异。结果：48株耐亚胺培南PA中8株产MBL；在外膜蛋白SDS-PAGE图上发现32株缺少外膜蛋白OprD2，其中8株还伴随其他外膜蛋白的改变。结论：PA对亚胺培南耐药的主要原因是外膜蛋白OprD2缺失或含量减少以及MBL的产生，或由两者共同作用所致。     

铜绿假单胞菌耐药分析

目的分析铜绿假单胞菌耐药性与耐药趋势。方法分离培养，选择生长良好的革兰氏阴性杆菌，做氧化酶试验，传统生化编码鉴定及MIC的药物敏感性试验。结果三年间分离出112株铜绿假单胞菌，其对12种抗菌药物活性良好的是亚胺培南、头胞哌酮／舒巴坦、环雨沙星，耐药率分别为15．2％、23．2％和25．9％，耐药率较高的是头孢曲松（54．4％）、哌拉西林（46．4％）和氨曲南（56．0％）。结论我院检测结果显示，铜绿假单胞菌对碳氢酶烯类、β-内酰胺酶抑制剂复合物有良好的敏感性。     

2011年我院铜绿假单胞菌耐药分析

目的 探讨铜绿假单胞菌(PA)的感染现状及对抗菌药物的耐药性,以利于临床合理用药.方法 对2011年1月1日～2011年12月20日分离的122株PA的分布状况和药敏试验结果进行回顾性分析.结果 122株铜绿假单胞菌中,耐药性最低的是亚胺培南(12.3%),阿米卡星(24.1%); 耐药性最高的是复方新诺明(85.2%),其次是哌拉西林(60.4%).结论 亚胺培南是治疗铜绿假单胞菌引起感染的可靠药物之一,随着耐亚胺培南菌株的增加,应了解铜绿假单胞菌的耐药机制,加强耐药监测,以便为临床提供可靠的依据,指导临床合理用药.     

36株铜绿假单胞菌耐药状况分析

目的了解铜绿假单胞菌药物敏感性状况,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法对送检标本进行微生物病原学培养分离铜绿假单胞菌药敏结果进行统计分析。结果培养分离出36株铜绿假单胞菌,在11种药敏检测中,耐药药物从高到低依次为：头孢西丁100%（36/36）,头孢曲松63.89%（23/36）、头孢塞肟61.11%（22/36）、氨曲南61.11%（22/36）、庆大霉素58.33%（21/36）、亚胺培南55.56%（20/36）、头孢吡肟33.33%（12/36）、哌拉西林/他唑巴坦25.00%（9/36）。100%敏感药物为有三种：阿米卡星、环丙沙星、罗米沙星。结论临床合理使用抗菌药物是减少病原微生物抗药性的有效措施。     

重症监护室耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌相关耐药基因的研究

目的研究重症监护室耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌的耐药机制。方法采用K—B法对44株耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌进行药敏试验,采用PCR方法检测碳青霉烯酶金属酶（MBL）IMP、VIM、GIM、SPM和IMI耐药基因和外膜通道蛋白OprD2基因。结果对多黏菌素未出现耐药,对阿米卡星、哌拉西林／他唑巴坦、庆大霉素、头孢哌酮／舒巴坦、头孢他啶和头孢吡肟耐药率分别为13．6％、50．0％、31．8％、25．0％、40．9％和50．0％,对左旋氧氟沙星和头孢噻肟的耐药率都接近90％,亚胺培南、美洛培南、氨苄西林、头孢唑啉、头孢西丁的耐药率均为100％。检出OprD2基因缺失21株（47．7％）,IMP阳性6株（13．6％）,VIM阳性3株（6．8％）,未检出GIM、SPM和IMI耐药基因。结论耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌多重耐药情况严重。主要是由于外膜孔蛋白OprD2基因缺失和产金属酶IMP、VIM耐药基因引起。     

2005~2008年铜绿假单胞菌耐药情况变迁分析

目的分析2005~2008年临床分离的铜绿假单胞菌耐药性的变迁,为铜绿假单胞菌感染的临床治疗提供依据。方法采用纸片法测定临床分离到共1119株铜绿假单胞菌对12种抗菌药物的敏感性。结果铜绿假单胞菌对大多数抗生素的耐药性均呈现上升趋势,目前首选药物仍然是碳青霉烯类,其对亚胺培南的敏感性为71.3%（2008年）。4年中,铜绿假单胞菌感染发生率在干部科、ICU呈上升趋势。结论铜绿假单胞菌是医院内感染的重要致病菌,对铜绿假单胞菌引起的感染应尽早进行病原学检查,选择合适的抗菌药物。     

168株铜绿假单胞菌感染的耐药分析

目的:了解临床各种标本分离的铜绿假单胞菌(PA)对抗菌药物的耐药情况,为临床正常选用抗菌药物和有效控制铜绿假单胞菌感染提供实验室依据。方法:采用微生物系统进行细菌鉴定。结果:铜绿假单胞菌对多种抗菌药物具有高度耐药性,复方新诺明的耐药率已高达96.8%、头孢呋辛钠96%、头胞曲松95%、头孢噻肟72%。结论:必须根据药敏结果合理选用抗菌物。     

铜绿假单胞菌的耐药性及多重耐药机制

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruglnosa,PA)是一种常见的医院内获得性感染条件致病菌,广泛分布于自然界和健康人体的皮肤,呼吸道和消化道等部位,在医院感染病原菌中检出率最高.     

整合子与金属酶介导的铜绿假单胞菌耐药性研究进展

整合子与金属酶的出现使铜绿假单胞菌的耐药机制更趋复杂，给临床抗感染治疗带来极大威胁。笔者就整合子的分类、基本结构、基因盒的捕获和在耐药基因传播中的作用，以及获得性金属酶的出现和其在铜绿假单胞菌多重耐药机制中的作用作一综述。     

产金属酶铜绿假单胞菌感染的监测和处理

铜绿假单胞菌广泛存在于医院环境中，尤其在危重病房，是引起医院内获得性肺炎感染的主要病原菌。过去亚胺培南作为对付革兰阴性菌的最强有力的抗生素，对铜绿假单胞菌也有极高的抗菌活性。随着碳青酶烯类抗生素的广泛应用，铜绿假单胞菌的耐药菌株逐渐增多，有的医院耐药率已达40％左右。     

铜绿假单胞菌的耐药特征及oprD2基因的检测

目的了解铜绿假单胞菌临床分离菌株的耐药特征及外膜通道蛋白oprD2基因的缺失情况。方法琼脂稀释法检测最低抑菌浓度（MIC）,聚合酶链反应（PCR）检测oprD2基因。结果铜绿假单胞菌检出率最高的是ICU病房和呼吸科病房,分别占50.8%和23.1%;65株铜绿假单胞菌对13种抗生素耐药率最低的是头孢哌酮/舒巴坦（30.8%）,其次是亚胺培南（38.5%）、美罗培南（40.0%）和阿米卡星（46.2%）;在25株耐亚胺培南铜绿假单胞菌（IRPA）中,有19株oprD2基因缺失,缺失率为76.0%。结论铜绿假单胞菌耐药性严重;外膜通道蛋白oprD2缺失可能是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的重要原因之一。