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1.
目的探讨顺铂(DDP)联合索拉非尼对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞的抑制作用及其可能的分子机制。方法单独及联合给药后采用MTT法测定多种TNBC细胞的增殖,采用Western blot观察MAPK通路关键蛋白的表达情况。结果 MTT法检测发现DDP单药和索拉非尼单药在体外对TNBC细胞株MDA-MB-231、MDA-MB-468、CAL-51增殖都有一定的抑制作用。其中MDA-MB-468和CAL-51细胞对DDP更为敏感。通过中效原理,证实DDP和索拉非尼联合应用时,在各个细胞株中均为协同效应。DDP联合索拉非尼对各细胞株协同抑制的分子机制主要是通过影响MAPK通路关键蛋白的表达实现的,Western blot检测显示各细胞株均表现为p-ERK蛋白表达水平不同程度的下降以及p-JNK蛋白表达水平不同程度的升高。结论 DDP联合索拉非尼在体外能协同抑制多种TNBC细胞株的增殖。 相似文献
2.
目的 探讨RNA干扰技术抑制蛋白激酶CK2ɑ表达后,喉癌细胞Hep-2对顺铂敏感性的变化. 方法 构建蛋白激酶CK2ɑ特异性siRNA表达质粒psiRNA-hH1neo-CK2ɑ和非特异性表达质粒psiRNA-hH1neo-cont,脂质体转染法转染Hep-2细胞.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot技术检测转染后Hep-2细胞蛋白激酶CK2ɑ mRNA和蛋白表达.设立正常对照组、顺铂(5μg/ml)组、psiRNA-hH1neo-CK2ɑ组和psiRNA-hH1neo-CK2ɑ+顺铂(5μg/ml)组,应用MTT法检测转染后Hep-2细胞对顺铂敏感性的变化. 结果 psiRNA-hH1neo-CK2ɑ特异性地抑制了Hep-2细胞中蛋白激酶CK2ɑmRNA和蛋白的表达(P<0.05).顺铂组(5μg/ml)及psiRNA-hH1neo-CK2ɑ组Hep-2细胞的增殖能力分别为正常对照组的(55.32±4.68)%和(49.68±5.33)%(P<0.05),但均高于二者联合组(26.12±5.51)%(P<0.05),转染psiRNA-hH1neo-CK2ɑ后,Hep-2细胞对顺铂敏感性增加了2.12倍. 结论 RNA干扰技术抑制蛋白激酶CK2ɑ表达能增加喉癌细胞Hep-2对顺铂的敏感性. 相似文献
3.
目的 研究凋亡抑制基因bcl 2硫代反义寡核苷酸 (S ODN)转染T2 4细胞后对顺铂药物敏感性影响。方法 将培养细胞分为 6组 :反义S ODN组 ,正义S ODN组 ,反义S ODN +顺铂组 ,正义S ODN +顺铂组 ,顺铂组和对照组。应用脂质体法介导bcl 2正义、反义S ODN转染T2 4细胞。通过免疫细胞化学方法观察细胞内BCL 2的蛋白表达 ,RT PCR方法检测细胞内bcl 2mR NA的相对表达量 ,MTT法测经顺铂 (cis platinum)处理的各组细胞的生成率 ,流式细胞仪 (FCM)检测细胞凋亡率。结果 bcl 2反义S ODN处理过的T2 4细胞中BCL 2蛋白和bcl 2mRNA表达明显下降。顺铂对反义S ODN组细胞的半抑制浓度 (IC50 )为 (2 .2 5± 0 .0 9) μg/ml显著低于正义S ODN组 (5 .83± 0 .15 ) μg/ml和对照组 (6 .11± 0 .2 1) μg/ml(P <0 .0 1)。顺铂处理反义S ODN组细胞的凋亡率显著高于其它组。结论 bcl 2反义S ODN能显著抑制T2 4细胞中BCL 2蛋白的表达并增强T2 4细胞对顺铂的药物敏感性 相似文献
4.
miR-18b增强乳腺癌MDA-MB-231细胞对顺铂化疗敏感性的作用及其机制 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨miR-18b在三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞对顺铂(DDP)化疗敏感性中的作用,阐明其可能的机制。方法:乳腺癌MDA-MB-231细胞根据转染条件分为MDA-MB-231组、MDA-MB-231+DDP组、MDA-MB-231-NC组、MDA-MB-231-NC+DDP组、MDA-MB-231 mimic组和MDA-MB-231 mimic+DDP组。采用生物信息学方法预测的miR-18b的靶基因;荧光素酶报告基因分析验证miR-18b与靶基因3'UTR的结合;应用qRT-PCR法检测各组MDA-MB-231细胞中miR-18b的表达水平;Western blotting法检测MDA-MB-231细胞中ATM蛋白表达水平;CCK-8法检测各组细胞的生长抑制率。结果:荧光素酶实验报告验证ATM为miR-18b的靶基因,并与ATM 3'UTR序列部分结合;与MDA-MB-231-NC组比较,MDA-MB-231 mimic组和MDA-MB-231 mimic+DDP组细胞中miR-18b的表达水平升高(P<0.05);Western blotting法检测,与MDA-MB-231组比较,MDA-MB-231+DDP组细胞中ATM蛋白表达水平升高(P<0.05);与MDA-MB-231-NC组比较,MDA-MB-231 mimic组细胞中ATM蛋白表达水平降低(P<0.05);与MDA-MB-231-NC+DDP组比较,MDA-MB-231 mimic+DDP组细胞中ATM蛋白表达水平降低(P<0.05);CCK-8法检测,与MDA-MB-231 NC组比较,经不同浓度DDP作用后,MDA-MB-231 mimic组细胞生长抑制率均升高。结论:miR-18b通过靶向调控ATM蛋白增强乳腺癌MDA-MB-231细胞对DDP的化疗敏感性。 相似文献
5.
目的探讨RNA干扰技术抑制蛋白激酶CK2α表达后,喉癌细胞Hep-2对顺铂敏感性的变化。方法构建蛋白激酶CK2α特异性siRNA表达质粒psiRNA—hH1neo—CK2α和非特异性表达质粒psiRNA—hH1neo—cont,脂质体转染法转染Hep-2细胞。采用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)、Western blot技术检测转染后Hep-2细胞蛋白激酶CK2α mRNA和蛋白表达。设立正常对照组、顺铂(5μg/ml)组、psiRNA—hH1neo—CK2α组和psiRNA—hH1neo—CK2α+顺铂(5μg/ml)组,应用MTT法检测转染后Hep-2细胞对顺铂敏感性的变化。结果psiRNA—hH1neo—CK2α特异性地抑制了Hep-2细胞中蛋白激酶CK2α mRNA和蛋白的表达(P〈0.05)。顺铂组(5μg/ml)及psiRNA—hH1neo—CK2α组Hep-2细胞的增殖能力分别为正常对照组的(55.32±4.68)%和(49.68±5.33)%(P〈0.05),但均高于二者联合组(26.12±5.51)%(P〈0.05),转染psiRNA—hH1neo—CK2α后,Hep-2细胞对顺铂敏感性增加了2.12倍。结论RNA干扰技术抑制蛋白激酶CK2α表达能增加喉癌细胞Hep-2对顺铂的敏感性。 相似文献
6.
目的探讨顺铂(PDD)、卡铂(CBP)治疗晚期乳腺癌临床应用效果及不良反应。方法80例晚期乳腺癌随机分成NC组(40例)接受NC方案(盖诺+卡铂),NP组(40例)接受NP方案(盖诺+顺铂)治疗。结果NC、NP组近期疗效(CR+PR)分别为42.50%、37.50%,两组差异无显著性(P>0.05)。NC组患者生存质量明显好于NP组(P<0.05),NP组的Ⅲ度以上恶心、呕吐发生率比NC组高,NC组的Ⅲ~Ⅳ度骨髓抑制比NP组严重(P<0.05),两组生存率相似。结论NP方案和NC方案治疗晚期乳腺癌效果相近,生存率相似。但NC方案胃肠道反应轻,生存质量好,值得临床进一步推广。 相似文献
7.
目的:研究敲除E3泛素连接酶RAD18基因后,人肺腺癌A549细胞株和顺铂耐药A549(A549/DDP)细胞株FA/BRCA途径DNA修复功能的变化及其对顺铂敏感性的改变。方法:合成针对RAD18基因的siRNA(RAD18-siRNA),通过脂质体将其分别转染人A549和A549/DDP细胞株。蛋白质印迹法检测经顺铂处理的两种细胞株转染siRNA前后RAD18蛋白表达及FANCD2单泛素化水平;CCK-8法测定经顺铂处理的两种细胞株转染siRNA前后细胞增殖率的变化;免疫荧光测定胞核内FANCD2核聚小体的形成;Annexin V/PI流式细胞术测定转染前后细胞凋亡率。结果:与转染RAD18-siRNA前相比,转染后经顺铂处理的A549和A549/DDP细胞株RAD18表达均明显降低;FANCD2蛋白单泛素化水平下调和核聚小体形成减少;同时细胞增殖率明显降低,细胞凋亡率则明显增加。结论:应用RNA干扰技术敲除RAD18基因可通过抑制A549和A549/DDP细胞株FA/BRCA途径的DNA损伤修复功能,增加这两种细胞株对顺铂的敏感性。 相似文献
8.
【摘要】目的 研究miR 221 5p对鼻咽癌细胞增殖、凋亡和顺铂敏感性的影响及潜在作用机制。方法 以人鼻咽上皮细胞NP69为对照组(NP69组),qRT PCR和Western blot检测鼻咽癌细胞系SUNE1、HNE1和CNE2中ALDH1A2 mRNA和miR 221 5p的表达,然后在SUNE1细胞中抑制miR 221 5p 表达和过表达ALDH1A2确定两者对细胞的影响。MTT法测定SUNE1细胞存活率和对顺铂的敏感性,流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测细胞中ALDH1A2、CyclinD1、Cleave caspase 3和MRP1蛋白表达,双荧光素酶报告系统验证miR 221 5p和ALDH1A2的调控关系。结果 与NP69组相比,在鼻咽癌细胞SUNE1、HNE1和CNE2中,miR 221 5p高表达,ALDH1A2低表达;低表达miR 221 5p和高表达ALDH1A2均可抑制鼻咽癌细胞SUNE1增殖,诱导凋亡,增强对顺铂的敏感性;miR 221 5p靶向负调控ALDH1A2的表达;低表达ALDH1A2可部分逆转miR 221 5p低表达对SUNE1细胞增殖、凋亡以及顺铂敏感性的影响。结论 下调miR 221 5p可靶向促进ALDH1A2表达增强鼻咽癌SUNE1 细胞的顺铂敏感性,抑制癌细胞增殖并诱导凋亡;miR 221 5p有望成为鼻咽癌顺铂的增敏靶点。 相似文献
9.
白藜芦醇对喉癌Hep-2细胞顺铂敏感性的增强作用及其机制 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨白藜芦醇提高喉癌Hep-2细胞株对顺铂(DDP)敏感性的作用,并阐明其作用机制。方法:Hep-2喉癌细胞随机分为空白对照组和DDP组(终浓度分别为3、6、12和24 μmol·L-1)培养6、12、24及48 h。CCK-8法检测各组细胞生存率;选出DDP的最佳作用浓度6 μmol·L-1和作用时间24 h。Hep-2喉癌细胞株经培养后随机分为对照组、DDP组、白藜芦醇组、sirtinol组、白藜芦醇+sirtinol组、白藜芦醇+DDP组、sirtinol+DDP组和白藜芦醇+sirtinol+DDP组。CCK-8法检测各组细胞生存率;采用免疫荧光法观察各组细胞中Sirt1蛋白的表达强度;Annexin Ⅴ-FITC Kit法检测各组细胞凋亡率。结果:CCK-8检测,与对照组比较,DDP组和白藜芦醇组细胞生存率明显下降(P<0.01);与DDP组比较,白藜芦醇+DDP组细胞生存率明显下降(P<0.01);与白藜芦醇+sirtinol+DDP组比较,白藜芦醇+DDP组细胞生存率明显下降(P<0.05)。细胞免疫荧光法检测,与DDP组比较,白藜芦醇+DDP组细胞中Sirt1 蛋白的平均免疫荧光强度明显升高(P<0.01);与白藜芦醇+sirtinol+DDP组比较,白藜芦醇+DDP组细胞中Sirt1 蛋白的平均免疫荧光强度明显升高(P<0.01)。Annexin Ⅴ-FITC Kit检测,与DDP组比较,白藜芦醇+DDP组细胞凋亡率均明显升高(P<0.01);与白藜芦醇+sirtinol+DDP组比较,白藜芦醇+DDP组细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。结论:白藜芦醇提高Hep-2喉癌细胞株对DDP的敏感性,其机制可能与提高喉癌细胞中Sirt1蛋白表达有关联。 相似文献
10.
目的利用小干扰RNA(siRNA)技术特异性下调survivin基因的表达,检测SGC7901胃癌细胞转染前后对顺铂敏感性的变化。方法实验分为空白对照组(control组)、单用顺铂组(CDDP组)、脂质体组(Lip组)、单用survivin siRNA组(siRNA组)、转染survivin siRNA(转染组)及转染survivin siRNA联合顺铂作用组(联合作用组)。人工合成survivin siRNA,通过Lip包裹将siRNA转染胃癌细胞SGC7901,荧光显微镜下观察转染情况。MTT法检测各组细胞的增殖抑制率,Western blot及免疫细胞化学法检测survivin蛋白的表达,Hoechst染色观察细胞凋亡的形态改变。结果Hoechst染色荧光显微镜下control组、Lip组及siRNA组细胞核呈正常的蓝色,而CDDP组、转染组及联合作用组细胞核染色增强、核质浓缩、核碎裂,呈凋亡改变;联合作用组细胞增殖抑制率(63.93±4.22)%明显高于其余各组(P〈0.05);转染组及联合作用组survivin蛋白表达明显低于其他各组(P〈0.05)。结论应用siRNA技术下调SGC7901胃癌细胞中survivin基因的表达,能够增加其对顺铂的药物敏感性。 相似文献
11.
目的:采用 shRNA 沉默 Piwil2基因的表达,探讨其对宫颈癌细胞株增殖和衰老特性的影响。方法通过脂质体 Lipofectamine2000转染技术和嘌呤霉素筛选,建立稳转Sh-piwil2宫颈癌细胞株,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和 Western blot 法验证沉默效果。采用细胞增殖实验、集落形成实验、细胞周期和细胞衰老等实验观察沉默 Piwil2表达对宫颈癌细胞生物学特性的影响。结果建立稳定转染 Sh-piwil2宫颈癌细胞株,与对照组相比,沉默Piwil2表达后细胞的增殖和集落形成能力均显著降低(P <0.05);细胞 G0/ G1期比例增加、S 期比例明显下降( P <0.05),同时沉默 Piwil2后细胞衰老数量明显增多( P <0.05)。结论沉默 Piwil2基因可发挥抗宫颈癌作用,推测Piwil2基因可作为宫颈癌临床治疗的一个潜在靶点。 相似文献
12.
目的 探讨姜黄素(curcumin)对乳腺癌细胞中顺铂(Cisplatin,CDDP)治疗敏感性的影响及其可能机制.方法 CCK-8检测、Hoechst染色观察CDDP、姜黄素单独及联合用药48 h对MCF7细胞增殖抑制和细胞凋亡的影响;Western blot分析MCF7细胞在CDDP(0、1.25、2.5、5、10、20 μg/mL)、姜黄素(0、1、5、20、30、50、100 μmol/L)单独及联合处理后FEN1(flap endonuclease 1)表达水平的变化;CCK-8检测沉默FEN1对MCF7细胞中CDDP敏感性的影响.结果 CDDP、姜黄素均可以剂量依赖方式抑制MCF7细胞增殖,其IC50分别为5、30 μmol/L;与单独2μg/mLCDDP处理组比较,2μg/mL CDDP联合20-μmol/L姜黄素、30 μmol/L姜黄素处理组对细胞增殖的抑制效应明显增强[分别为(84.1±0.8)%、(51.1±0.5)%、(29.4±0.3)%,P<0.05];与单独20μmol/L姜黄素处理组比较,20 μmol/L姜黄素联合2μg/mL CDDP、5μg/mL CDDP处理组对细胞增殖的抑制效应也明显增强[分别为(76.9±0.7)%、(42.4±0.3)%、(31.6±0.4)%,P<0.05];2μg/mL CDDP联合20 μmol/L姜黄素组的细胞凋亡明显增强(P<0.05);与Control siRNA组比较,FEN1 siRNA+CDDP组可显著增强CDDP抑制MCF7细胞增殖的敏感性[(25.4±0.3)%vs(18.7±0.2)%,P<0.05];CDDP增殖抑制无效浓度或低浓度时,FEN1蛋白的表达随CDDP的处理剂量依赖性上调,而姜黄素可剂量依赖性下调FEN1蛋白表达;与单独CDDP和姜黄素处理组比较,2μg/mL CDDP联合20 μmol/L姜黄素组可显著降低FEN1蛋白表达(P<0.05).结论 姜黄素可增强CDDP对乳腺癌细胞的敏感性,其机制与降低细胞FEN1的表达有关. 相似文献
13.
目的 探讨热疗联合顺铂对喉癌Hep-2细胞的影响,了解热疗与顺铂的治疗方法是否有交互作用。方法 将传代的Hep-2细胞分为对照组、热疗组、顺铂组及热疗联合顺铂组。对照组置于37℃培养箱,热疗组置于43℃培养箱,顺铂组置于37℃培养箱并加入顺铂,热疗联合顺铂组置于43℃培养箱并加入顺铂。采用MTT法、Wound-healing划痕实验和Transwell侵袭实验检测热疗联合顺铂对Hep-2细胞的增殖、迁移和侵袭力影响。结果 4组细胞在波长490?nm处光密度(OD)值分别为(1.24±0.13)、(0.99±0.11)、(0.75±0.07)及(0.31±0.07),析因分析显示,不同温度热疗在波长490?nm处的OD值有差异(P?<0.05),不同浓度顺铂在波长490?nm处的OD值有差异(P?<0.05),热疗与顺铂对在波长490?nm处的OD值存在交互作用(P?<0.05)。4组细胞未愈合区百分比分别为(31.83±1.62)%、(40.47±1.52)%、(53.13±2.61)%及(79.83±0.95)%,析因分析显示,不同温度热疗对未愈合区百分比有差异(P?<0.05),不同浓度顺铂未愈合区百分比有差异(P?<0.05),热疗与顺铂对未愈合区百分比的影响存在交互作用(P?<0.05)。4组细胞穿过Transwell小室膜的细胞数目分别为(27.8±1.64)、(21.8±1.48)、(11.2±1.48)及(1.8±0.84)个,析因分析显示,不同温度热疗的穿膜细胞数有差异(P?<0.05),不同浓度顺铂的穿膜细胞数有差异(P?<0.05),热疗与顺铂对穿膜细胞数的影响存在交互作用(P?<0.05)。结论 热疗能够增强喉癌Hep-2细胞对顺铂的敏感性,热疗与顺铂联合有协同抗肿瘤作用。 相似文献
14.
目的:探讨沙利度胺联合GP方案治疗晚期三阴性乳腺癌的临床疗效及不良反应.方法:对58例晚期三阴性乳腺癌随机分为沙利度胺联合GP方案组(联合组)和GP方案组(化疗组),比较2组的疗效、不良反应、肿瘤标志物及病人生存时间.结果:联合组有效率58.62%,高于化疗组的31.03%(P<0.05),中位生存时间37个月,长于化疗组的32个月(P<0.05);肿瘤标志物下降率65.51%,高于化疗组的37.93%(P<0.05);胃肠道反应率13.79%,低于化疗组的41.38%(P<0.05).2组骨髓抑制、便秘的发生率差异均无统计学意义(P>0.05),其余不良反应不明显.结论:沙利度胺联合GP方案治疗晚期三阴性乳腺癌疗效肯定,不良反应轻,值得临床进一步推广. 相似文献
15.
目的:观察雷公藤甲素对胃癌SGC7901/CDDP细胞顺铂敏感性的影响,并探讨其机制。方法:采用非毒性浓度雷公藤甲素作用于SGC7901/CDDP细胞,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测细胞增长率;荧光定量PCR检测microRNA-21表达;蛋白质印迹法检测Bcl-2蛋白表达;AnnexinV/PI双标法检测细胞凋亡。将microRNA-21反义寡核苷酸转染SGC7901/CDDP细胞,观察其对细胞增长率、凋亡和Bcl-2表达的影响。采用小干扰RNA转染实验证明Bcl-2与胃癌耐药的关系。结果:非毒性浓度雷公藤甲素可提高SGC7901/CDDP细胞对顺铂敏感性,并且降低mi-croRNA-21的表达。microRNA-21反义寡核苷酸转染SGC7901/CDDP细胞后,降低Bcl-2表达,提高顺铂敏感性和顺铂诱导的细胞凋亡。小干扰RNA实验证明Bcl-2水平与SGC7901/CDDP细胞顺铂耐药有关。结论:雷公藤甲素通过降低microRNA-21的表达,抑制Bcl-2蛋白表达,促进顺铂诱导的细胞凋亡,从而提高胃癌SGC7901/CDDP细胞顺铂敏感性。 相似文献
16.
乳腺癌细胞过表达iASPP对顺铂作用的影响 总被引:2,自引:1,他引:2
目的构建过表达iASPP的乳腺癌细胞株,分析过表达iASPP对顺铂(cis-dichlorodiamine platinum,DDP)作用下乳腺癌细胞的影响。方法采用RT-PCR方法在乳腺组织中扩增出iASPP,转染人MCF-7,G418筛选获得过表达iASPP的乳腺癌细胞株,MTT和流式细胞仪分析过表达iASPP的乳腺癌细胞株在DDP作用下增殖和凋亡情况。结果成功构建了过表达iASPP的乳腺癌细胞株,过表达iASPP可明显降低DDP对乳腺癌细胞增殖的抑制作用(P〈0.01),并降低细胞凋亡的百分数(P〈0.01)。结论过表达iASPP可以明显降低乳腺癌细胞MCF-7对DDP作用的敏感性。 相似文献
17.
多西他赛联合顺铂治疗晚期乳腺癌临床观察 总被引:1,自引:2,他引:1
目的: 观察多西他赛联合顺铂治疗晚期乳腺癌的近期疗效与不良反应。方法: 47例晚期乳腺癌患者应用多西他赛70mg/m2静脉滴注1 h,第1天,用药前24 h口服地塞米松7.5 mg,每天2次,连用3天;顺铂25~30 mg/m2静脉滴注,第1~4天,每21天为1周期。结果: 完全缓解5例,部分缓解29例,总有效率72.3%。不良反应主要为中性粒细胞减少、恶心、呕吐等。结论: 多西他赛与顺铂联用治疗晚期乳腺癌疗效显著、耐受性好。 相似文献
18.
目的设计靶向DNA错配修复基因MSH3的siRNA干扰片段,观察MSH3有效沉默对舌癌细胞顺铂耐药性的影响。方
法针对MSH3基因CDS区序列,设计3条siRNA片段,体外化学合成小干扰RNA(siRNA)片段,通过脂质体介导转染人舌癌细
胞CAL27。Real-time PCR及Western 检测干扰后MSH3 的表达。MTS,凋亡双染法及细胞免疫荧光检测顺铂处理后细胞存
活、凋亡及DNA双链断裂的情况。结果3 条siRNA 片段转染细胞后,与对照组相比,3 号siRNA 片段转染后能显著降低
MSH3 mRNA及蛋白质表达水平,该片段被选为后续实验。MSH3表达下调后,顺铂的半数抑制浓度(IC50值)分别由21.32降
至13.95 μmol/L(P<0.05),凋亡指数分别由4.23±1.27升至11.32±1.82(P<0.05),舌癌细胞中γ-H2AX焦簇(Foci)的数量显著增
加。结论MSH3表达下调可以明显增加舌癌细胞对顺铂的敏感性,减少DNA双链断裂修复是其主要机制之一。 相似文献
19.
目的研究LKB1对乳腺癌细胞顺铂化学敏感性的作用及机制。方法构建LKB1高表达的稳定转染细胞MDA-MB-231/LKB1及其空载对照细胞MDA-MB-231/VEC。RT-PCR、Western印迹法检测细胞间隙连接蛋白Cx26、Cx32、Cx43和Cx50的核酸、蛋白水平表达;免疫荧光实验对Cx43进行胞内表达定位;染料传输实验评估间隙连接细胞通讯功能;细胞毒实验检测顺铂杀伤乳腺癌细胞的"旁观者效应"及计算顺铂的半数抑制浓度。结果 LKB1增加了间隙连接蛋白Cx43的核酸及蛋白水平表达(P〈0.01),但对Cx26、Cx32及Cx50的表达水平无明显影响。LKB1增加了细胞膜上Cx43的表达,增强了细胞传递荧光黄染料的能力,并使顺铂对细胞的旁观者杀伤效应增强。LKB1也增加了细胞对顺铂的敏感性,MDA-MB-231、MDA-MB-231/VEC和MDA-MB-231/LKB1的半数抑制浓度分别为22.46、24.72、6.55 nmol/L,差异有统计学意义(P〈0.01)。结论 LKB1通过增强乳腺癌细胞的Cx43表达及间隙连接细胞通讯功能增强了顺铂的旁观者杀伤效应,并增加了细胞对顺铂的敏感性。 相似文献
20.
目的探讨土贝母皂苷甲(tubeimoside 1,TBMS1)促进人卵巢癌A2780/DDP细胞对顺铂(cisplatin,DDP)的增敏作用。方法采用MTT法分别检测顺铂和TBMS1对A2780/DDP细胞作用的半抑制浓度值(IC50),将实验分为对照组:只加等量生理盐水;顺铂组:给予6μmol/L顺铂处理;联合用药Ⅰ组:6μmol/L顺铂+3μmol/L TBMS1;联合用药Ⅱ组:6μmol/L顺铂+6μmol/L TBMS1。按上述方法处理细胞后,MTT法检测细胞活力;电泳法检测细胞内DNA损伤;流式细胞技术检测细胞凋亡及周期;Western blot分析周期蛋白A(Cyclin A)和周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达。结果 TBMS1(3、6μmol/L)与顺铂(6μmol/L)联用使人卵巢癌A2780/DDP细胞对顺铂的敏感性增强;细胞的DNA损伤随TBMS1浓度的增加而明显增多;细胞周期被阻滞在S期,联合用药Ⅰ和Ⅱ组S期所占比例分别为(51.23±3.53)%、(77.34±2.80)%;细胞凋亡率为(5.19±0.78)%、(7.11±1.06)%;Cyclin A的表达为1.89±0.28及2.91±0.43,CyclinD1为0.66±0.09及0.28±0.05(P<0.05,P<0.01)。结论 TBMS1显著增加顺铂对A2780/DDP细胞增殖抑制作用,Cyclin A、Cyclin D1可能参与其调节。 相似文献