细胞焦亡参与早期子鼠坏死性小肠结肠炎的发病

  目的  通过建立坏死性小肠结肠炎的小鼠模型,检测新生子鼠发生NEC早期时血清中细胞焦亡的关键蛋白分子,从而初步判断细胞焦亡是否参与早期新生儿坏死性小肠结肠炎的发病。  方法  将新出生的子鼠随机分为实验组和对照组,实验组的子鼠诱导为NEC的动物模型,抽取2组子鼠血液,用Elisa试剂盒检测所有子鼠血清中IL-18、Gasdermin D、Caspase-1的浓度,运用秩和检验统计学方法,比较2组血清中目标蛋白的浓度,检验水准α = 0.05。   结果   2组子鼠血清中Gasdermin D、Caspase-1的浓度差异有统计学意义,P值分别为0.017、< 0.001,可认为实验组子鼠血清中Gasdermin D、Caspase-1的浓度高于对照组,2组血清中IL-18的浓度无明显差异,P = 0.755。   结论  由Gasdermin D介导的细胞焦亡可能参与早期NEC的发病。     

IL-1β与IL-18在急性肺损伤中的表达及临床意义

目的 基于细胞焦亡理论研究白介素(IL)-1β与IL-18在急性肺损伤(ALI)中的表达及临床意义.方法 选取2016年1月至2017年1月在广州中医药大学第一附属医院重症医学科收治的符合ALI患者100例为观察组,期间同时招募50例健康体检者为对照组.酶联免疫法检测并比较两组受试者入组后IL-1β及IL-18的血清浓度水平,并比较观察组中存活患者与病死患者血清IL-1β与IL-18的含量.结果 观察组患者经常规治疗后,病死率为38.00%(38/100),而存活率为62.00%(62/100);入组后,两组受试者血清IL-18[(106.43±21.73)pg·mL-1 vs(174.29±36.31)pg·mL-1]与IL-1β[(62.14±15.88)pg·mL-1 vs(94.35±16.23)pg·mL-1]水平比较,对照组均明显低于观察组,差异均有统计学意义(P<0.05);在临床结局方面,病死组和存活组患者的IL-1β[(118.32±19.52)pg·mL-1 vs(87.86±16.49)pg·mL-1]与IL-18[(195.64±36.13)pg·mL-1 vs(136.74±23.09)pg·mL-1]水平比较,病死组均明显高于存活组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 细胞焦亡是ALI患者的重要病理机制之一,ALI的发生发展和IL-1β与IL-18的参与有关.     

miRNA-1在大鼠心搏骤停心肺复苏后心肌焦亡及损伤中的作用

目的：探讨微小RNA-1（miR-1）在大鼠心搏骤停/心肺复苏（CA/CPR）后心肌细胞焦亡与损伤中的作用。方法：心搏骤停/心肺复苏模型的建立和分组：SD大鼠按照随机数字表法分为心搏骤停复苏（CA）组和假手术对照（Sham）组。前者再分为5组：CA组,CA+antago miR-1组,CA+antago miR NC组,CA+ago miR-1组,CA+ago miR NC组,每组n=6。所有6组大鼠在自主循环恢复（ROSC）后6 h取心尖部心肌组织、血样待测。用Real-time PCR法检测各组心肌细胞中miR-1的mRNA水平,Western blot法检测各组心肌细胞中焦亡相关的蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18的表达情况,用TUNEL染色技术检测心肌细胞焦亡率,ELISA技术检测血清中CK-MB、cTnI浓度。结果：各组大鼠体质量、基础平均动脉压（MAP）差异无统计学意义（P＞0.05）。与Sham组比较,CA组大鼠miR-1表达水平、心肌焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18表达、焦亡率、血清CK-MB与cTnI浓度升高（P＜0.05）。与CA组比,CA+antago miR-1组大鼠miR-1表达水平、心肌焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18表达、焦亡率、血清CK-MB与cTnI浓度降低（P＜0.05）,CA+ago miR-1组大鼠miR-1表达水平、心肌焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18表达、焦亡率、血清CK-MB与cTnI浓度升高（P＜0.05）,CA+antago miR NC组与CA+ago miR NC组大鼠miR-1表达水平、心肌焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18表达、焦亡率、血清CK-MB与cTnI浓度差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：CA/CPR大鼠ROSC后存在明显心肌焦亡和心肌损伤,静脉使用ago miR-1和antago miR-1可以调节CA/CPR后大鼠心肌miR-1的表达,miR-1促进大鼠CA/CPR后心肌焦亡和心肌损伤,miR-1调节大鼠CA/CPR后心肌损伤机制可能和其促进心肌细胞焦亡相关。     

细胞焦亡因子在稽留流产蜕膜组织中的表达研究

目的 探讨稽留流产妇女蜕膜组织中细胞焦亡因子的表达情况及细胞焦亡对稽留流产的影响。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和免疫组织化学法(IHC)分别检测稽留流产妇女(稽留流产组)和正常早期妊娠、正常人工流产妇女(正常人流组)蜕膜组织中细胞焦亡因子半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)mRNA、白介素-1β(IL-1β)mRNA及其蛋白的表达情况。结果 实时FQ-PCR检测结果显示,稽留流产组蜕膜组织Caspase-1 mRNA、IL-1β mRNA相对表达量明显高于正常人流组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。IHC结果显示,Caspase-1主要表达于细胞质内,IL-1β主要表达于细胞质和胞核内;稽留流产组蜕膜组织中的Caspase-1、IL-1β表达量均高于正常人流组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 细胞焦亡因子Caspase-1和IL-1β在早期稽留流产患者蜕膜组织中的表达上调,细胞焦亡与稽留流产可能存在明显的关联。     

细胞焦亡因子Caspase-1、IL-1β与IL-18在子宫内膜息肉组织中的表达和意义

  目的  检测细胞焦亡相关因子Caspase-1、IL-1β与IL-18在子宫内膜息肉组织中的表达情况,探讨细胞焦亡与子宫内膜息肉发病的关系,为深入研究子宫内膜息肉的发病机制提供依据。  方法  选取2020年1月至2021年1月在昆明医科大学第一附属医院妇科行宫腔镜探查术 + 诊刮术的60例患者,将术后病检为子宫内膜息肉的30例患者纳入观察组,术后病检为增生期子宫内膜的30例患者纳入对照组。采用免疫组化法检测Caspase-1、IL-1β与IL-18在观察组和对照的表达情况。  结果  Caspase-1主要表达于胞浆内,观察组的IRS得分为:（4.88±1.8）分,对照组的IRS得分为:（1.37±1.13）分,Caspase-1在观察组的表达高于对照组（t = 8.95,P < 0.05）。IL-1β在2组中均不表达。IL-18主要表达于胞浆和胞核内,观察组的IRS得分为:(6.84±2.41)分,对照组的IRS得分为:（1.73±0.90）分,IL-18在观察组的表达高于对照组（t = 10.87,P < 0.05）。  结论  Caspase-1和IL-18在子宫内膜息肉组织中高表达,这两种细胞焦亡相关因子可能参与子宫内膜息肉的发生。     

鼠诺如病毒在新生小鼠坏死性小肠结肠炎模型中的保护作用

目的 探讨鼠诺如病毒(murine norovirus,MNV)在新生小鼠坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)模型中的作用,并分析其可能的作用机制.方法 将75只新生1d的C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为3组(n=25):正常对照组、给予PBS的NEC模型组(PBS+NEC组)和给予MNV干预的NEC模型组(MNV+ NEC组).正常对照组与母鼠同笼,不予任何处理;其余两组进行NEC动物模型构建.新生小鼠于生后1d给予联合抗生素,连续灌胃10 d模拟无菌后,行NEC建模3d,建模前后固定时间点称量体质量,第14天处死小鼠,HE染色观察回盲部肠组织病理学变化;qPCR法检测TLR-3、MDA-5、IL-6、IL-10、IL-1β、IL-22基因表达水平;流式细胞仪检测3型天然淋巴样细胞(type 3 innate lymphoid cells,ILC3)数量;ELISA法检测肠组织匀浆IL-10水平.结果 与正常对照组相比,PBS+ NEC组、MNV+NEC组小鼠体质量明显降低(P＜0.01),肠道损伤明显.与PBS+ NEC组相比,MNV+ NEC组体质量下降较少(P＜0.05),肠上皮损伤也较轻;而在mRNA表达水平上,TLR-3(0.73 ±0.26 vs 0.62 ±0.40,P＞0.05)、MDA-5(0.98 ±0.35 vs 0.67 ±0.39,P＞0.05)、IL-10(1.22±0.36 vs0.60 ±0.31,P＜0.01)、IL-22(1.20 ±0.38 vs 0.65 ±0.22,P＜0.05)基因表达增高,IL-6 (0.75±0.33 vs 1.22 ±0.34,P＜0.05)、IL-1β(0.39 ±0.2 vs 1.25 ±0.59,P＜0.01)炎症因子基因表达降低;IL-10水平显著升高[(165.55 ±53.51) pg/mL vs (129.59 ±26.22) pg/mL,P＜0.05],ILC3数量差异无统计学意义[(12.88±1.45)％ vs(12.80 ±0.76)％,P＞0.05],但其分泌的IL-22表达升高.结论 MNV在新生小鼠NEC模型肠道损伤中起保护作用,可能与MNV下调炎症因子IL-6、IL-1β,上调抑炎因子IL-10及分泌IL-22的ILC3的功能有关.     

钠-氢交换蛋白调节细胞内环境酸化并激活肝癌细胞焦亡的作用及相关机制

目的探讨钠-氢交换蛋白1（NHE1）调节细胞内环境酸化并激活肝癌细胞焦亡的作用及相关机制。方法采用Westernblot和RT-qPCR法检测4株肝癌细胞中NHE1蛋白及mRNA表达水平,选出表达最高的MHCC97细胞株进行实验。小干扰RNA（siRNA）技术沉默MHCC97细胞中NHE1,将常规培养的MHCC97细胞作分为对照组、NHE1无关对照的序列转染的细胞作为siRNA-NC组、NHE1转染的细胞株作为siRNA-NHE1组,检测3组细胞活性,细胞凋亡情况,细胞中半胱氨酸蛋白酶-1（Caspase-1）、炎性小体（NLRP3）、消皮素D（GSDMD）表达水平,培养基中IL-1β、IL-18水平以及细胞乳酸脱氢酶（LDH）漏出水平,观察NHE1沉默对细胞焦亡的影响。另取NHE1沉默后细胞设立NHE1沉默组和Caspase-1抑制组（用Caspase-1抑制剂AC-YVAD-CMK干预）,观察阻断Caspase-1对细胞焦亡的影响。结果NHE1沉默后的MHCC97细胞活性下降（P＜0.05）,凋亡增多;细胞Caspase-1、NLRP3表达水平,培养基IL-1β、IL-18水平及LDH漏出水平升高,GSDMD表达水平降低,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。阻断Caspase-1后细胞活性增强（P＜0.05）,凋亡减少;细胞Caspase-1、NLRP3表达水平,培养基IL-1β、IL-18水平及LDH漏出水平降低,GSDMD表达水平升高,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论NHE1沉默会造成细胞内酸化,同时激活细胞焦亡,这是NHE1在肝癌中的作用机制之一;阻断Caspase-1可以抑制细胞焦亡。     

Syndecan-1介导双歧杆菌对新生大鼠坏死性小肠结肠炎保护作用的研究

目的 探索Syndecan-1蛋白在新生大鼠坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)模型肠组织中的表达情况,明确双歧杆菌对Syndecan-1蛋白的修复作用.方法 建立新生大鼠NEC模型.按随机数字表法将新生大鼠分为3组(n=10):健康对照组、NEC组和双歧杆菌组.HE染色观察回盲部肠组织病理学变化.qRT-PCR技术检测各组TNF-α、IL-1 β、MMP-7和Syndecan-1 mRNA的表达水平.Western blot检测分析各组Syndecan-1蛋白的表达水平.免疫组化分析各组Syndecan-1蛋白的定位表达.结果 NEC组TNF-α、IL-1β和MMP-7 mRNA表达水平高于健康对照组,而双歧杆菌可以抑制TNF-α、IL-1β和MMP-7的表达.NEC组Syndecan-1 mRNA的表达水平略高于健康对照组,双歧杆菌组略低于NEC组,但差异均无统计学意义.Western blot结果显示,健康对照组Syndecan-1蛋白呈高水平表达,NEC组几乎未检测到Syndecan-1蛋白的表达,而双歧杆菌组可见Syndecan-1蛋白的表达.免疫组化结果显示,对照组绒毛上皮细胞膜呈深棕色,而NEC组绒毛上皮细胞膜棕色染色明显减弱,双歧杆菌组上皮细胞膜着浅棕色.结论 NEC炎症时,Syndecan-1蛋白被切割,双歧杆菌可保护Syndecan-1蛋白的表达.双歧杆菌对肠黏膜的保护作用可能是通过抑制MMP-7等因子的表达,从而保护了Syndecan-1蛋白.     

卡维地洛对ox-LDL诱导内皮细胞中NLRP3炎症小体介导焦亡及炎症的影响

目的研究卡维地洛对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导内皮细胞中NLRP3炎症小体介导焦亡及炎症的调控作用。方法人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分为对照组、ox-LDL组、低剂量组(0.01 mmol/L)、高剂量组(0.1 mmol/L);转染阴性对照腺病毒(Ad-NC)或过表达NLRP3腺病毒(Ad-NLRP3)后分为Ad-NC组、Ad-NC+ox-LDL组、Ad-NC+高剂量组、Ad-NLRP3+高剂量组。检测各组细胞活力和白细胞介素(IL)-1β、IL-18含量,以及GSDMD-N、NLRP3、Cleaved Caspase-1表达水平。 结果ox-LDL组细胞活力低于对照组,IL-1β、IL-18及GSDMD-N、NLRP3、Cleaved Caspase-1均高于对照组(P＜0.05)。低剂量组和高剂量组细胞活力高于ox-LDL组,IL-1β、IL-18及GSDMD-N、NLRP3、Cleaved Caspase-1均低于ox-LDL组(P＜0.05)。转染NLRP3腺病毒后,Ad-NLRP3+高剂量组和Ad-NC+ox-LDL组细胞活力低于Ad-NC+高剂量组,IL-1β、IL-18及GSDMD-N、NLRP3、Cleaved Caspase-1均高于Ad-NC+高剂量组(P＜0.05)。 结论卡维地洛显著抑制ox-LDL诱导HUVEC中NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡及炎症反应。     

妊娠期糖尿病孕妇血清细胞焦亡因子的表达及其与妊娠结局的关系

目的:探讨妊娠期糖尿病(GDM)孕妇血清细胞焦亡因子的表达与胰岛素抵抗及妊娠结局的关系。方法:选取2020年12月至2021年8月在郑州大学第三附属医院产科门诊行孕中期75 g口服葡萄糖耐量试验(OGTT)并住院分娩的单胎妊娠孕妇265例为研究对象,根据OGTT结果分为正常糖耐量(NGT)组123例、GDM组82例、孕前糖尿病(PGDM)组60例。采用ELISA法检测血清中核苷酸结合寡聚域样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸酶1(Caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-18(IL-18)等焦亡因子的水平,全自动电化学发光免疫分析仪检测孕妇空腹血糖(FPG)和空腹胰岛素(FIN)水平,并计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。采用Logistic回归分析孕妇血清细胞焦亡因子与妊娠结局的关系。结果:与NGT组比较,GDM组和PGDM组血清NLRP3、Caspase-1、IL-1β及IL-18水平升高,且PGDM组高于GDM组(P<0.05)。GDM组孕妇血清中细胞焦亡因子NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18水平与FPG、FIN...     

牙髓炎模型大鼠血清褪黑素水平及其对牙髓炎症反应的抑制作用

目的：探讨牙髓炎大鼠血清褪黑素水平对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3/含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1（NLRP3/caspase-1）信号通路的影响,阐明褪黑素对牙髓炎的作用机制。方法：将130只大鼠随机分为对照组（n=40）、牙髓炎组（n=60）和牙髓炎+褪黑素组（n=30）,其中30只牙髓炎大鼠随机分为牙髓炎1 d组、牙髓炎3 d组和牙髓炎5 d组,采用开髓暴露法建立牙髓炎大鼠模型,牙髓炎+褪黑素组大鼠开髓术后腹腔注射褪黑素。HE染色确定各组大鼠牙髓炎建模情况,ELISA法检测各组大鼠血清白细胞介素1β（IL-1β）和褪黑素水平以及牙髓组织中IL-1β水平,RT-PCR法检测各组大鼠牙髓组织中NLRP3和caspase-1 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组大鼠牙髓组织中NLRP3和caspase-1蛋白表达水平。结果：HE染色,对照组大鼠牙髓组织正常,牙髓炎组大鼠牙髓有脓腔形成,可见大量炎性细胞聚集。牙髓炎1 d和3 d组大鼠血清IL-1β水平明显高于对照组（P<0.05）,褪黑素水平明显低于对照组（P<0.05）;牙髓炎3 d组大鼠血清IL-1β水平明显低于牙髓炎1 d组（P<0.05）,褪黑素水平明显高于牙髓炎1 d组（P<0.05）;牙髓炎组和牙髓炎+褪黑素组大鼠牙髓组织中IL-1β水平明显高于对照组（P<0.05）,且牙髓炎+褪黑素组大鼠牙髓组织中IL-1β水平明显低于牙髓炎组（P<0.05）;牙髓炎组和牙髓炎+褪黑素组大鼠牙髓组织中NLRP3和caspase-1mRNA和蛋白表达水平均明显高于对照组（P<0.05）,且牙髓炎+褪黑素组大鼠牙髓组织中NLRP3和caspase-1mRNA和蛋白水平明显低于牙髓炎组（P<0.05）。结论：牙髓炎大鼠血清褪黑素水平降低,褪黑素可通过抑制NLRP3/caspase-1信号通路降低牙髓炎大鼠牙髓组织的炎症反应。     

哮喘患儿外周血单个核细胞中NLRP3炎症小体及血清中IL-1β和IL-18表达变化及其意义

目的：观察哮喘患儿外周血单个核细胞中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）炎症小体表达水平及血清中下游因子白细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素18（IL-18）水平变化,探讨其对患儿病情评估的意义。方法：176例哮喘患儿根据临床表现分为急性发作期组（n=91）、慢性持续期组（n=49）和缓解期组（n=36）,同期从门诊体检中心选取健康儿童60名作为对照组,采用肺功能仪检查各组研究对象肺功能。采用实时荧光定量PCR法检测各组研究对象外周血单个核细胞中NLRP3、含有CARD结构域的凋亡相关斑点样蛋白（ASC）和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1（Caspase-1） mRNA表达水平,采用酶联免疫吸附（ELISA）实验检测各组研究对象血清中IL-1β和IL-18水平。结果：与对照组比较,急性发作期组、慢性持续期组和缓解期组哮喘患儿第1秒用力呼气容积占预计值百分比（FEV1%）和第1秒用力呼气容积所占肺活量比值（FEV1/FVC）均降低,且急性发作期组<慢性持续期组<缓解期组,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）;哮喘患儿外周血单个核细胞中NLRP3、ASC和Caspase-1 mRNA表达水平及血清中IL-1β和IL-18水平均高于对照组（P<0.01）;急性发作期组患儿外周血单个核细胞中NLRP3、ASC和Caspase-1 mRNA表达水平及血清中IL-1β和IL-18水平高于慢性持续期组和缓解期组（P<0.05）,且慢性持续期组患儿高于缓解期组（P<0.05）。Pearson相关分析,哮喘患儿外周血单个核细胞中NLRP3 mRNA表达水平与ASC、Caspase-1 mRNA表达水平和血清中IL-1β、IL-18水平均呈正相关关系（P<0.05）,而与FEV1%和FEV1/FVC呈负相关关系（P<0.05）;ASC mRNA表达水平与Caspase-1 mRNA表达水平和血清中IL-1β、IL-18水平呈正相关（P<0.05）,而与FEV1%和FEV1/FVC呈负相关关系（P<0.05）;Caspase-1 mRNA表达水平与血清中IL-1β和IL-18水平呈正相关关系（P<0.05）,而与FEV1%和FEV1/FVC呈负相关关系（P<0.05）;血清中IL-1β水平与FEV1%和FEV1/FVC呈负相关关系（P<0.05）;IL-18水平与FEV1%和FEV1/FVC呈负相关关系（P<0.05）。结论：哮喘患儿外周血NLRP3炎症小体及下游因子IL-1β和IL-18水平升高,且与哮喘患儿的临床分期有关,NLRP3炎症小体通路可能促进了儿童哮喘的发病过程。     

非布司他对高尿酸血症模型大鼠血清尿酸水平和肾组织中NLRP3蛋白表达水平的影响

目的：探讨非布司他对高尿酸血症模型大鼠血清尿酸水平和肾组织中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）蛋白表达水平的影响,并阐明其作用机制。方法：将45只大鼠随机分为对照组、高尿酸血症组和非布司他组,每组15只。高尿酸血症组和非布司他组大鼠采用氧嗪酸钾灌胃建立高尿酸血症模型,非布司他组大鼠每天给予7.2 mg·kg^-1非布司他,对照组大鼠每天给予等量生理盐水,共4周。HE染色观察各组大鼠肾组织病理形态表现。全自动生化仪测定各组大鼠血清尿酸、肌酐和尿素氮水平,酶联免疫吸附测定（ELISA）法测定各组大鼠血清白细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素18（IL-18）水平,免疫组织化学法测定各组大鼠肾组织中凋亡相关斑点样蛋白（ASC）和NLRP3蛋白表达水平。结果：与对照组比较,高尿酸血症组大鼠尿量和饮水量升高（t=5.317,t=3.674,P<0.05）,体质量降低（t=6.374,P<0.05）,血清尿酸、肌酐和尿素氮水平升高（t=21.463,t=15.342,t=4.603,P<0.05）,血清IL-1β和IL-18水平升高（t=35.761,t=44.168,P<0.05）,肾组织中ASC和NLRP3蛋白表达水平升高（t=17.064,t=26.314,P<0.05）;与高尿酸血症组比较,非布司他组大鼠尿量和饮水量降低（t=4.027,t=2.976,P<0.05）,体质量升高（t=3.694,P<0.05）,血清尿酸、肌酐和尿素氮水平降低（t=13.064,t=7.461,t=3.528,P<0.05）,血清IL-1β和IL-18水平降低（t=24.162,t=17.314,P<0.05）,肾组织中ASC和NLRP3蛋白表达水平降低（t=8.061,t=11.057,P<0.05）。结论：非布司他可能通过抑制大鼠肾组织中NLRP3炎症小体的激活及其下游炎性因子水平发挥对高尿酸血症模型大鼠的肾脏保护作用。     

《新乡医学院学报》稿约

<正>《新乡医学院学报》(Journal of Xinxiang Medical University)是新乡医学院主管、主办的综合性医药卫生类学术期刊,月刊,每月5日出版,国内外公开发行。国际标准连续出版物号:ISSN 1004-7239,国内统一连续出版物号:CN 41-1186/R,CODEN XYIXEQ,邮发代号:36-145。近几年来本刊取得多项荣誉,被教育部科学技术司评为中国高校优秀科技期刊奖,被教育部科技发展中心评为"中国科技论文在线优秀期刊"一等奖2次、二等奖1次,被中国科学技术信息研究所收录为中国科技核心期刊(中国科技论文统计源期刊)、中国     

NLRP3炎性小体在胃癌细胞中的表达及对其焦亡、增殖、侵袭、迁移的影响

目的 研究胃癌细胞中NLRP3炎性小体的表达及其对增殖、侵袭和迁移的影响。并初步探讨NLRP3介导caspase-1依赖的焦亡信号通路在胃癌发展中的作用。 方法qRT-PCR和Western blotting法分别检测人胃黏膜上皮细胞(GES-1)和人胃癌细胞(MKN45及MGC803)中NLRP3、caspase-1表达;随后下调NLRP3,检测胃癌细胞NLRP3、caspase-1 mRNA和蛋白的表达;Western blotting检测GSDMD、白细胞介素(IL)-18、IL-1β蛋白表达;ELISA法检测细胞培养液上清液中IL-1β、IL-18含量;乳酸脱氢酶(LDH)实验、流式细胞术检测细胞焦亡;CCK-8法及细胞周期试剂盒检测细胞增殖情况;Transwell和划痕实验检测胃癌细胞侵袭和迁移能力。 结果NLRP3、caspase-1在胃癌细胞中较GES-1表达增高(P < 0.01)。下调NLRP3后,胃癌细胞LDH释放率及焦亡率显著降低(P < 0.01);GSDMD、IL-1β、IL-18表达降低(P < 0.01);细胞增殖阻滞在G₁期(P < 0.01);细胞增殖以及侵袭迁移能力显著减弱。 结论NLRP3在胃癌中高表达,其表达影响胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移以及其介导的caspase-1依赖焦亡信号通路关键蛋白的表达。     

核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性体在2型糖尿病并发冠心病过程中的作用

目的 探究核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎性体在2型糖尿病并发冠心病过程中的作用.方法 选取第三军医大学新桥医院心血管内科的住院患者共130例,分为单纯冠心病组(n=40)、单纯2型糖尿病组(n=20)、2型糖尿病并发冠心病组(n=40)及正常对照组(n=30).分离外周血单个核细胞及血浆.采用RT-qPCR、Western blot分别检测各组外周血单个核细胞中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein,ASC)、半胱天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1) mRNA及蛋白表达情况,ELISA法检测各组血浆中IL-1β含量.结果 单纯冠心病组、单纯2型糖尿病组及2型糖尿病并发冠心病组外周血单个核细胞中NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA及蛋白表达水平均较正常对照组显著增高(P＜0.05),其中,2型糖尿病并发冠心病组ASC、Caspase-1 mRNA在外周血单个核细胞中的表达显著高于单纯冠心病组及单纯2型糖尿病组(P＜0.05),而2型糖尿病并发冠心病组NLRP3蛋白在外周血单个核细胞中的表达显著高于单纯冠心病组及单纯2型糖尿病组(P＜0.05).同时,测得单纯冠心病组、单纯2型糖尿病组及2型糖尿病并发冠心病组血浆中IL-1β含量分别为(24.05±1.00)、(22.86±1.66)、(26.85±1.45) ng/L,较正常对照组(12.53±2.79) ng/L均显著升高(P＜0.05),其中,2型糖尿病并发冠心病组血浆中IL-1β含量显著高于单纯冠心病组及单纯2型糖尿病组(P＜0.05).结论 NLRP3炎性体的异常激活可促进2型糖尿病并发冠心病病理过程的发生、发展,其可能成为防治2型糖尿病并发冠心病的新靶点.     

右美托咪定预处理通过抑制NLRP3炎性小体激活减轻大鼠肠缺血再灌注诱导的急性肺损伤

目的 探讨右美托咪定（Dex）对大鼠肠缺血再灌注（II/R）所致急性肺损伤（ALI）的保护作用以及核苷酸结合域样受体蛋白3（NLRP3）炎性小体活性的影响。方法 将32只健康雄性SD大鼠,随机分为4组（8只/组）。假手术组（Sham组）仅暴露肠系膜上动脉（SMA）,肠缺血再灌注组（II/R组）阻断SMA 1 h后再灌注2 h,II/R+右美托咪定处理组（Dex+II/R组）右美托咪定干预后行再灌注,Dex假手术组（Dex组）右美托咪定预处理假手术组。Sham组和II/R组腹腔注射等量生理盐水。采取夹闭SMA 1 h再灌注2 h的方法建立肠缺血再灌注损伤模型。测定各组大鼠肺部组织湿/干质量比值（W/D）、髓过氧化物酶（MPO）活性,HE染色评估肺组织病理学变化以及行肺损伤评分;ELISA检测肺部组织中炎性因子TNF-α、IL-18、IL-1β水平;Western blot检测肺部组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、Caspase-1及磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（p-AMPK）蛋白的表达水平。结果 相较于Sham组,II/R组肺组织病理损伤明显,W/D值、MPO活性及肺组织中的TNF-α、IL-18、IL-1β表达显著升高（P<0.05）,肺组织中NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达增加（P<0.05）,p-AMPK蛋白表达减少（P<0.05）;相较于II/R组,Dex+II/R组肺组织病理损伤轻微,W/D值、MPO活性及肺组织中的TNF-α、IL-18、IL-1β表达明显下降（P<0.05）,肺组织NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达明显下降（P<0.05）,p-AMPK蛋白表达明显增加（P<0.05）。结论 右托美咪定通过对NLRP3炎性小体激活的抑制,减轻炎性反应,进而改善大鼠II/R所致的ALI。     

半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1活化在胆红素神经毒性中的作用研究

目的 明确半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)活化是否参与胆红素神经毒性的发生机制;VX-765抑制caspase1活化是否能抑制胆红素神经毒性,发挥神经保护作用.方法 建立胆红素脑病动物模型,Western blot检测脑组织caspase-1蛋白的表达,ELISA法检测炎症因子IL-1β的水平,免疫荧光染色检测脑组织中GFAP蛋白的表达;VX-765干预后动态观察各组新生鼠的神经系统临床表现,记录新生鼠体质量变化,评估生活能力.原代培养大鼠皮层星型胶质细胞分为胆红素组、VX-765组、对照组:改良MTT法检测细胞存活率,Western blot检测细胞caspase-1蛋白的表达,ELISA法检测培养液上清IL-1β的水平.结果 胆红素脑病动物模型,建模后12 h,胆红素组较对照组,脑组织中活化型caspase-1表达增加(P＜0.05),IL-1β水平增高(P＜0.01),脑组织切片皮层区星型胶质细胞活化(P＜0.05).与胆红素组相比,VX-765组新生鼠建模后异常神经系统表现减少(P＜0.01),生活能力改善(P＜0.05).原代培养大鼠皮层星型胶质细胞,胆红素干预6h后,活化型caspase-1表达显著高于对照组(P＜0.05);与胆红素组相比,VX-765干预可抑制caspase-1活化(P＜0.05),提高细胞存活率(P＜0.05),减少培养液上清IL-1β的释放(P＜0.01).结论 胆红素可诱导活化型caspase-1表达增加;VX-765抑制caspase-1活化可减轻胆红素神经毒性,提高原代培养星型胶质细胞存活率,减少炎症因子释放.     

新风胶囊含药血清抑制脂多糖诱导的类风湿关节炎大鼠的滑膜成纤维细胞焦亡

目的 观察新风胶囊（XFC）含药血清对脂多糖（LPS）诱导的类风湿关节炎滑膜成纤维细胞（RA-FLS）焦亡的影响及其机制。方法 将20只SD大鼠利用随机数字表法分为2组：空白组和XFC组,XFC组予0.324 mg/g灌胃7 d后制备含药血清。CCK-8法检测XFC含药血清作用于RA-FLS最佳干预浓度和时间。将RA-FLS分为空白组（RA-FLS）、模型组（RA-FLS+5μg/mL LPS）、MCC950组（RA-FLS+LPS+MCC950）、XFC组（RA-FLS+LPS+XFC含药血清）。CCK-8法检测细胞活性,电镜观察RAFLS焦亡形态,ELISA检测IL-1β、IL-18浓度,Western blotting和q RT-PCR检测NLRP3、caspase-1、GSDMD的蛋白和mRNA的表达。结果 XFC作用于RA-FLS最佳干预浓度和时间分别为20%和24 h。与空白组相比,模型组细胞活性显著上升（P<0.05）,电镜下可见RA-FLS内形成大量小泡,膜上形成孔隙,胞膜破裂,细胞内容物流出,IL-1β、IL-18浓度和NLRP3、GSDMD、caspase-1...