环磷酰胺及长春新碱对睾丸支持细胞间隙连接蛋白表达的影响

目的：探讨环磷酰胺、长春新碱对睾丸支持细胞间隙连接蛋白（Cx）43表达的影响。方法：培养小鼠睾丸支持细胞,分别加入环磷酰胺（0、1、2、4、8μg/mL）和长春新碱（0.00、0.01、0.02、0.04、0.08μg/mL）行细胞毒染24 h,MTT法检查细胞毒性。选择4μg/mL环磷酰胺、0.04μg/mL长春新碱作用支持细胞6、12、24及48 h,结果行RT-PCR分析;选择同样浓度药物作用支持细胞24 h,并用免疫荧光染色检测培养的细胞中Cx43的表达情况。结果：环磷酰胺、长春新碱染毒细胞后,Cx43 mRNA水平开始随时间增加而逐渐下降（P〈0.05）,且随剂量增加Cx43表达强度逐渐减弱（P〈0.05）。结论：环磷酰胺及长春新碱对睾丸支持细胞有毒性,并随着药物浓度增大毒性增强,且环磷酰胺比长春新碱更明显。     

麋鹿角醇提液对环磷酰胺致雄鼠性腺损伤的保护作用

目的:观察麋鹿角醇提液对环磷酰胺所致雄性小鼠性腺损伤的保护作用?方法:应用腹腔注射环磷酰胺造成小鼠性腺抑制模型,给予麋鹿角醇提液不同剂量进行干预,然后测定小鼠血清中的睾酮以及黄体生成素的水平,检测睾丸以及副性器官质量指数?精子密度和精子活动率,检测睾丸组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD) 和丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量,光镜检测睾丸组织形态学变化?结果:麋鹿角醇提液能良好对抗环磷酰胺引起的睾酮与黄体生成素下降,能提高模型睾丸质量指数,提高模型精子密度与精子活率,增加模型组睾丸SOD活力,并减少其MDA含量,改善环磷酰胺所致模型小鼠睾丸组织的病理性变化?结论:麋鹿角醇提液对环磷酰胺致雄鼠性腺损伤具有保护作用,可能与其促性激素样作用以及抗氧化作用有关?     

环磷酰胺对小鼠遗传和生殖毒性影响的研究(2)--对雄性小鼠生殖细胞的影响

目的探讨环磷酰胺对雄性小鼠生殖细胞毒性的影响。方法雄性小鼠随机分为对照组与实验组,每组10只,实验组腹腔注射环磷酰胺溶液30 mg/(kg.d),对照组腹腔注射生理盐水,连续5 d染毒,染毒后28 d取双侧睾丸和附睾,计数小鼠精子畸形率和生殖细胞微核发生情况,评价环磷酰胺对小鼠的生殖毒性作用。结果腹腔注射环磷酰胺实验组精子畸形率与对照组相比显著升高(P<0.05);实验组生殖细胞微核率与对照组相比亦显著升高(P<0.05)。结论小鼠腹腔注射环磷酰胺对雄性小鼠生殖细胞有损害作用。     

蛇床子素对生殖系统损伤小鼠睾丸和附睾组织形态的影响

目的研究蛇床子素对环磷酰胺所致生殖系统损伤小鼠的睾丸和附睾组织形态学、血清睾酮含量的影响。方法建立环磷酰胺致生殖系统损伤雄性小鼠模型，连续灌胃蛇床子素20d后，测定血清睾酮水平，观察睾丸和附睾的组织形态改变。结果蛇床子素（150mg／kg）高剂量组可显著升高环磷酰胺致生殖系统损伤雄性小鼠血清中睾酮的含量；蛇床子素（150、75mg／kg）剂量组可减轻睾丸曲细精管间质水肿，管腔内可见成熟精子，生精细胞排列较规则；附睾间质水肿减轻。结论蛇床子素对环磷酰胺所致的生精功能低下有一定改善作用。     

维生素E对抗环磷酰胺对肾小管上皮细胞的毒性作用

目的 研究维生素E抑制环磷酰胺所致肾小管上皮细胞毒性作用的影响.方法 通过MTT和中性彗星实验,分别观察环磷酰胺单独或与维生素E联合应用时对肾小管上皮细胞生存率及DNA损伤的作用.结果 与对照组相比,1、3mol/L环磷酰胺处理肾小管上皮细胞12h后可显著降低细胞生存率,并可造成细胞的DNA损伤(P<0.05);与环磷酰胺处理组相比,1mmol/L维生素E显著降低了环磷酰胺致肾小管上皮细胞DNA损伤的作用(P<0.05),但对环磷酰胺降低肾小管上皮细胞生存率的作用无明显影响(P>0.05).结论 维生素E对抗环磷酰胺致肾小管上皮细胞DNA损伤的作用.     

磷酸二丁酯对原代培养的大鼠睾丸支持细胞的影响

目的 探讨磷酸二丁酯对原代培养的大鼠睾丸支持细胞的损伤情况.方法 采用胰蛋白酶和胶原酶二步消化法分离并提取大鼠睾丸支持细胞,用MTT法来观察磷酸二丁酯对大鼠睾丸支持细胞存活率的影响,计算半数抑制浓度(IC50)确定染毒剂量,并观察给予不同浓度的磷酸二丁酯后,其对大鼠睾丸支持细胞中的一些生化指标和代谢指标的影响.结果 磷酸二丁酯对大鼠睾丸支持细胞的生长有抑制作用并可使大鼠睾丸支持细胞孵育液中乳酸含量减少.结论 磷酸二丁酯对大鼠睾丸支持细胞有损伤,提示其具有一定的生殖毒性.     

氯化汞、氯化镉对小鼠原代肝细胞和睾丸生殖细胞的遗传毒性研究

目的:研究氯化汞(HgCl2)、氯化镉(CdCl2)对小鼠原代肝细胞和睾丸生殖细胞的遗传毒性损伤,比较两种细胞DNA损伤的敏感性差异.方法:分别以0、0.01、0.1、1mmol/L剂量氯化汞和0、0.02、0.1、0.5、2.5mmol/L剂量氯化镉处理离体小鼠肝细胞和睾丸生殖细胞lh.应用彗星实验(Commet assay)技术检测氯化汞和氯化镉对细胞DNA的损伤率和细胞DNA迁移距离的影响.结果:氯化汞、氯化镉处理组两种细胞DNA损伤率增高,DNA迁移距离增加,DNA损伤率和迁移距离都存在明显的剂量效应关系.0.01mmol/L剂量氯化汞、0.5mmol/L氯化镉及以下剂量处理两种细胞引起睾丸生殖细胞DNA的损伤率高于肝细胞的DNA损伤率.结论:氯化汞和氯化镉可引起小鼠肝细胞和睾丸生殖细胞DNA损伤,且睾丸生殖细胞DNA受氯化汞和氯化镉损伤更敏感.     

磷酸二丁酯对大鼠睾丸支持细胞的毒性作用

目的 探讨磷酸二丁酯对原代培养的大鼠睾丸支持细胞的损伤情况.方法 主要采用胰蛋白酶和胶原酶二步消化法分离并提取大鼠睾丸支持细胞,用MTT法来观察磷酸二丁酯对大鼠睾丸支持细胞存活率的影响,计算半数抑制浓度(IC50)确定染毒剂量,并观察给予不同浓度的磷酸二丁酯后,其对大鼠睾丸支持细胞中的一些生化指标和代谢指标的影响.结果 磷酸二丁酯对大鼠睾丸支持细胞的生长有抑制作用并可使大鼠睾丸支持细胞孵育液中乳酸含量减少.结论 磷酸二丁酯对大鼠睾丸支持细胞有损伤,提示其具有一定的生殖毒性.     

环磷酰胺对睾丸组织中SCF表达的影响及意义

目的：通过环磷酰胺对大鼠睾丸组织中干细胞因子的表达及增殖指数影响的研究,以探讨环磷酰胺所致生精功能损害的原因.方法：选取9天龄雄性Wistar大鼠,腹腔注射大、中、小剂量的环磷酰胺后24h、4w、8w分别采集睾丸标本,应用RT-PCR技术检测睾丸组织中SCF的表达,同时光镜下计数4w时睾丸组织的增殖指数.结果：（1）对照组随年龄的增加,睾丸组织中分泌型干细胞因子表达无显著差异（P＞0.05）,膜型干细胞因子均有显著增加（P＜0.05）.（2）同一时期各实验组和对照组比较,分泌型干细胞因子表达无显著差异（P＞0.05）,但膜型干细胞因子表达均有显著降低（P＜0.05）;同一时期各实验组间比较,随环磷酰胺剂量增加,膜型干细胞因子表达有显著降低（P＜0.05）.（3）同一剂量三个时期比较,各实验组分泌型干细胞因子无显著差异（P＞0.05）;膜型干细胞因子比较,大剂量组中无显著差异（P＞0.05）,中、小剂量组中24h较4w、8w均有显著降低（P＜0.05）,4w与8w比较无显著差异（P＞0.05）.（4）增殖指数检测,4w时各实验组与对照组比较,均有显著降低（P＜0.01）,并与剂量负相关.结论：本研究结果提示由于环磷酰胺的毒性作用,导致了睾丸组织中膜型干细胞因子表达下调,进而影响增殖指数降低,这可能即是临床上环磷酰胺使用后产生不同程度生精功能障碍的原因之一.     

长期接触贫铀对大鼠遗传毒性的初步研究

目的研究贫铀植入/摄入3个月后对大鼠的毒性作用.方法观察大鼠精子畸形率,骨髓微核率的改变,睾丸的超微结构和病理形态学改变以及采用显性致死突变试验观察贫铀对大鼠的生殖毒性.结果植入/摄入贫铀后大鼠精子畸形率和微核率均有增加,睾丸超微结构均有不同程度的改变,而病理形态学观察则未见显著影响.植入组大鼠受孕率明显低于对照组.结论贫铀长时间暴露可对大鼠产生生殖毒性损害以及超微结构的损伤.     

低剂量辐射对环磷酰胺所致小鼠DNA及遗传物质损伤的影响(英文)

目的 研究低剂量γ射线预照射对大剂量环磷酰胺化疗所致外周血淋巴细胞DNA及遗传物质损伤的影响.方法 昆明种雄性小鼠55只,随机分为空白对照组、荷瘤对照组(假照组)、荷瘤低剂量照射组(LDR组)、荷瘤环磷酰胺化疗组(CTX组)和荷瘤低剂量照射联合化疗组(LDR CTX组).小鼠常规饲养7 d后于左腹股沟皮下各接种S180肉瘤细胞(空白对照组除外),接种后第8、11天LDR组和LDR CTX组小鼠给予75 mGy γ射线全身照射,照射30 h后分别给予CTX组和LDR CTX组小鼠腹腔注射环磷酰胺3.0 mg,第13天处死所有小鼠,分别取血,采用单细胞凝胶电泳法检测外周血淋巴细胞DNA损伤情况;采用骨髓嗜多染红细胞微核率(MNF)检测遗传物质损伤情况.结果 环磷酰胺化疗后DNA损伤程度较空白对照及假照组均显著增加;环磷酰胺化疗前给予75 mGy γ射线照射则可显著降低大剂量环磷酰胺化疗所致的DNA损伤.大剂量环磷酰胺化疗后小鼠骨髓MNF较空白对照组及单纯荷瘤组有显著增加(t=3.63～5.46,P＜0.05);环磷酰胺化疗前给予75 mGy γ射线照射则可降低环磷酰胺所致微核率的增加,但差别无统计学意义(P＞0.05).结论 大剂量环磷酰胺化疗可引起外周血淋巴细胞DNA损伤;化疗前给予75 mGy γ射线照射对DNA损伤可能产生一定的保护作用.环磷酰胺有强大的致突变作用,可导致骨髓MNF显著增加, 75 mGy γ射线预照射对大剂量环磷酰胺化疗的遗传学毒性未表现出明显的保护作用.     

除草剂胺草灵毒性试验 Ⅳ.小鼠精子畸变试验

除草剂胺草灵的迟发性神经毒性试验时发现睾丸明显萎缩,睾丸脏器系数比对照组小5～6倍,小鼠睾丸细胞染色体畸变分析,对精母细胞有诱变作用;显性致死试验,在100mg/kg时对小鼠初级精母细胞有显性致死效应。为进一步验证胺草灵对生殖细胞的影响,又进行了小鼠精子畸变试验。实验动物用C57雄性小黑鼠,体重20～25g,共分6个组,即空白对照组、食油对照组、环磷酰胺(30mg/kg)阳性对照组及胺草灵100、20、4 mg/kg组,除环磷酰胺腹腔     

人参茎叶总皂甙和西洋参茎叶总皂甙抗致突变作用

本实验以DNA合成抑制(DNA Synthesis inhibition,DSI)为指标研究了人参茎叶总皂甙(SSLG)和西洋参茎叶总皂甙(SSLQ)对环磷酰胺(CP)所致BALB/c.OLa小鼠睾丸和脾脏DNA损伤的影响。结果表明,SSLG和SSLQ均有非常明显的抗DNA损伤作用。作者根据本实验结果和其它有关的文献.讨论了SSLG和SSLQ抗DNA损伤的机理和意义。     

甲氧滴滴涕对雄性生殖系统的氧化损伤作用

目的观察甲氧滴滴涕(MXC)对雄性小鼠的生殖系统毒性作用并探讨其毒性作用的可能机制.方法光镜观察喂服MXC小鼠睾丸和附睾的变化,并以生物化学的方法测定氧化损伤相关指标的改变.结果精子活动度和活率降低,畸形率增高,生精小管上皮变薄;睾丸和附睾的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和超氧化物歧化酶(SOD)活力显著下降(p＜0.001),丙二醛(MDA)含量明显升高(P＜0.01),维生素E组各项指标的变化均较21 d组的变化小(P＜0.05).结论MXC对雄性小鼠生殖系统具有一定的毒性作用,可导致睾丸和附睾抗氧化能力下降,脂质过氧化增加,其毒性作用可被维生素E减轻.     

维生素E抗环磷酰胺致睾丸损伤的实验研究

目的观察维生素E对环磷酰胺致小鼠睾丸损伤的拮抗作用,并探讨其相关机制。方法随机将小鼠分成3组:正常对照组、CP对照组、维生素E治疗组。CP对照组和维生素E治疗组小鼠经口灌胃5 mg/kg.d-1CP,维生素E治疗组小鼠每天给予CP处理后4 h,皮下注射50 mg/kg.d-1维生素E;正常对照组小鼠经口灌胃等量生理盐水。各组均连续处理28天。观察血清FSH、LH、T水平,睾丸组织SOD、GSHPx、CAT的活性及MDA量,睾丸重量系数,睾丸组织结构。结果与CP对照组相比,维生素E治疗组血清FSH、LH、T水平显著升高,自由基清除酶SOD、GSHPx、CAT活性明显提高,脂质过氧化产物MDA量显著下降,睾丸重量系数增加,生精功能恢复。结论维生素E可有效拮抗环磷酰胺的睾丸毒副作用,其作用机制可能与维生素E清除氧自由基、抗氧化作用及其促进垂体前叶促性腺激素的释放等有关。     

2—巯基乙基磺酸钠的合成

2-巯基乙其磺酸钠(Sodium-2-mer-captoethane-suironate MESNA,HSCH_2CH_2SO_3Na)系活性巯基化合物,为甲基转移酶的辅因子,亦称为辅酶M,早期的合成品曾作为粘液溶解剂及重金属解毒剂,用于祛痰治疗慢性支气管炎及解砷、汞等的毒性。由于它对环磷酰胺类(Oxazaphospho-rine)烷化剂(包括环磷酰胺、异环磷酰胺、曲络磷胺、Snfosfamide等)的泌尿系毒性(出血性膀胱炎、肾脏及尿路损伤、膀胱癌)的发生有预防及解除作用,从而消除了限制环磷酰胺类烷化剂应用的泌尿系毒性,促进了该类药物的临床应用。     

环磷酰胺对大鼠肝细胞的毒性

目的：探讨环磷酰胺对大鼠原代培养肝细胞的毒性作用.方法：采用“二步灌流法”制备大鼠原代肝细胞,分别给予10、20、40、80及160 μmol/L的环磷酰胺干预24h,溶剂对照组不予环磷酰胺干预.噻唑蓝（ MTT）法观察环磷酰胺对肝细胞的毒性,测定各组培养基上清液生化和细胞内氧化及抗氧化指标.结果：不同浓度的环磷酰胺对大鼠原代培养肝细胞均具有明显的毒性.与溶剂对照组比较,环磷酰胺干预的各实验组肝细胞培养上清液丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶均升高;细胞冻融液丙二醛含量均升高,超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶活性均降低（均P ＜0.05）.结论：成功建立了环磷酰胺致大鼠原代培养肝细胞脂质过氧化模型.     

三苯氧胺对小鼠睾丸形态结构的影响

目的观察三苯氧胺 (TAM )对小鼠睾丸形态结构的影响。方法将雄性小鼠随机分成阴性对照组、TAM(低、中、高 )组和阳性对照组 ,分别以生理盐水、TAM (0 .0 2mg·kg-1·d-1、0 .2mg·kg-1·d-1、2mg·kg-1·d-1)和环磷酰胺(40mg·kg-1·d-1)连续灌胃 2 0天 ,于末次后 15天处死小鼠 ,计算实验前后体重变化、睾丸重量与睾丸指数 ,并观察光镜和电镜下睾丸组织的形态。结果高TAM组小鼠的体重变化、睾丸指数与阴性对照组比较差别显著 (p <0 .0 5 ) ,高TAM组睾丸组织的形态结构明显改变。结论高剂量TAM对小鼠的睾丸组织有毒性作用。     

缺硒对TNT染毒大鼠睾丸毒性的影响

三硝基甲苯(TNT)是一常见工业毒物,能引起机体多系统损伤。我们曾在缺硒惜况下,观察了TNT染毒对大鼠肝脏毒性的影响。本文主要研究对睾丸毒性的影响。     

环境污染物邻苯二甲酸酯类对睾丸间质细胞的雄性生殖毒性作用

邻苯二甲酸酯类(phthalate acid esters,PAE)已经成为学术界普遍关注的一类重要的环境有机污染物,其毒性作用的主要靶器官是雄性生殖系统,睾丸间质细胞是PAE生殖毒性的靶细胞之一.文中就PAE对睾丸间质细胞的毒性作用作一综述,为预防PAE的生殖毒性提供理论依据.