兔及大鼠不同脑区褪黑素受体鉴定及意义

目的:证实兔及大鼠不同脑区存在125I褪黑素结合位点.方法:采用Scachard分析方法检测兔及大鼠大脑及脊髓125I褪黑素结合最大结合容量(Bmax)及平衡解离常数(Kd),动力学分析研究125I褪黑素解离过程,以及药物对125I褪黑素特异结合的影响.结果:兔及大鼠视网膜特异结合的Bmax最高,视交叉及嗅球次之;下丘脑、海马及脑干也较多;动力学分析表明褪黑素与其受体为可逆性结合;特异性结合分析提示对褪黑素呈高度特异性.结论:兔及大鼠脑和脊髓组织存在125I褪黑素结合位点.     

肿瘤坏死因子在梗阻性黄疸并发肝功能失常中的作用

为探讨肿瘤坏死因子在梗阻性黄疸并发的肝功能失常中的作用，用ＲＩＡ法测定４５例梗阻性黄疸患者血浆肿瘤坏死因子值并观察其与血清总胆红素、谷丙转氨酶之间的关系，结果发现梗阻性黄疸患者术后肝功能失常的发生率高达３１．１％；肿瘤坏死因子水平显著升高并与血清总胆红素、谷丙转氨酶之间均有正相关关系。肿瘤坏死因子在梗阻性黄疸术后并发的肝功能失常中有重要作用。     

肝细胞肝癌与癌旁肝组织胰岛素受体结合特性的对比研究

目的　研究肝细胞肝癌与癌旁肝组织胰岛素受体密度与亲和力的差异。方法　采用体外受体结合实验 ,通过 Scatchard分析 ,计算两种细胞膜的最大结合容量 (Bmax)与平衡解离常数 (Kd值 )。结果　肝癌细胞膜胰岛素受体 Bmax为 1.94± 0 .6 4pm ol/ mg蛋白 ,Kd值为 2 .12± 0 .6 2 nmol/ L;癌旁肝组织细胞膜胰岛素受体 Bmax为1.42± 0 .5 7pmol/ mg蛋白 ,Kd值为 2 .2 1± 0 .78nm ol/ L。肝癌细胞膜胰岛素受体 Bmax显著高于癌旁组织细胞膜 (P<0 .0 5 ) ,而肝细胞肝癌与癌旁肝组织细胞膜的胰岛素受体亲和力无显著性差异 (P>0 .0 5 )。结论　肝细胞肝癌较癌旁肝组织表达胰岛素受体增高 ,而受体亲和力无明显差异     

大鼠脑加压素受体测定方法的建立

采用~(125)碘标记精氨酸加压素(~(125)I-AVP),建立了大鼠脑粗制膜上AVP受体的测定方法。结果表明,第一次冻融可使~(125)I-AVP与脑粗制膜上受体的结合率降低约35％,第二次冻融则降低约70％。用此方法测得大鼠脑粗制膜上AVP受体的最大结合容量Bmax为157.1±16.3fmol/mg蛋白,平衡解离常数Kd为0.25±0.04nmol/L。     

外周血完整淋巴细胞β受体饱和性质的研究

用放射配基测定法探讨人和大鼠血淋巴细胞β受体与[~3H]DHA结合的饱和性质。试验表明:人及大鼠血淋巴细胞β受体存在高亲和力低容量及低亲和力高容量两个结合部位,在测定有生理活性的高亲和力低容量位点时,正常人完整血淋巴细胞β受体密度(Bmax)为548.64±79.71fmol/10~7细胞,平衡解离常数(Kd)为6.80±1.40nM。正常SD大鼠完整血淋巴细胞β受体Bmax为285.21±32.71 fmol/10~7细胞,Kd为5.94±1.47nM。     

SOD及NF-κB在梗阻性黄疸大鼠肝脏损伤中的作用

目的:检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力及核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)在梗阻性黄疸大鼠肝脏中的表达,探讨其在梗阻性黄疸大鼠肝脏损害中的作用。方法:采用胆总管结扎法构建梗阻性黄疸大鼠模型,检测血清总胆红素(totalbilirubin,TB)、直接胆红素(direct bilirubin,DB)和谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT),以及肝脏组织行HE病理切片检查鉴定梗阻性黄疸大鼠模型。肝脏组织匀浆后检测组织中总SOD和CuZn-SOD活力,以免疫组织化学方法检测NF-κB在肝脏中的表达。结果:胆道结扎(Bile duct ligation,BDL)组血清TB、DB及ALT明显增高(P0.01);胆道结扎组肝组织中总SOD和CuZn-SOD活力较假手术组明显减低(P0.01)。胆道结扎组NF-κBp65蛋白激活并出现核移位,19d组较7d组更加显著。结论:脂质过氧化是梗阻性黄疸器官损伤的最重要的机制之一,而SOD活力的降低及NF-κB的激活,在梗阻性黄疸肝脏过氧化损害中具有重要意义。     

肺内M受体异质性的研究Ⅰ——豚鼠肺内两种不同亲和性M受体结合部位的检定

以~3H-QNB为标记配基,应用放射性配基结合法,对豚鼠肺组织内的M受体进行了检定。发现在豚鼠肺内的M受体对~3H-QNB表现出两种不同的亲和性,其中高亲和性M受体结合部位的平衡解离常数Kd=1.58±0.71nM,最大结合容量Bmax=28.29±5.98fmol/mg蛋白质;低亲和性M受体结合部位的Kd=16.29±3.89nM,Bmax=68.64±12.58fmol/mg蛋白质。高、低亲和性结合占总结合部位的比例分别约为29%和71%,二者的比值(H/L)约为1∶2.4。     

pGenesil-1-MCHR2-shRNA对MCHR2与其放射性配体结合的影响

目的 研究人黑色素浓集激素受体2(MCHR2)基因特异的小发夹RNA(shRNA)真核表达载体(pGenesil-1-MCHR2-shRNA)对MCHR2与其放射性配体结合特征的影响.方法 将pGenesil-1-MCHR2-shRNA表达载体转染到稳定表达人MCHR2基因的中国仓鼠卵巢细胞CHO中,通过放射性配体结合实验(RBA)检测受体最大结合容量(Bmax)及平衡解离常数(Kd值)的变化.结果 与转染pGenesil-1空载体组比较,pGenesil-1-MCHR2-shRNA使Bmax减少39.4%～78.7%,Kd值升高40.9%～81.9%.结论 MCHR2基因shRNA真核表达载体能有效减少Bmax、升高Kd值,为利用RNA干扰技术研究人MCHR2基因功能奠定良好的实验基础.     

血清白蛋白非结合胆红素检测在新生儿黄疸中的临床应用

目的探讨血清白蛋白、非结合胆红素检测在新生儿黄疸中的临床应用价值。方法对我院诊治的80例新生儿黄疸患儿,比较不同严重程度和不同病因患儿的非结合胆红素、非结合胆红素/白蛋白、总胆红素以及β2微球蛋白水平。结果随着病情严重程度的增高,非结合胆红素、非结合胆红素/白蛋白、总胆红素以及β2微球蛋白水平明显升高（P〈0.05）;梗阻性黄疸、溶血性黄疸、感染性黄疸患儿的非结合胆红素、非结合胆红素/白蛋白、总胆红素以及β2微球蛋白水平依次明显升高（P〈0.05）。结论及时检测了解新生儿黄疸严重程度以及病因类型,对于疾病的治疗具有显著的指导作用,可针对性地用药,提高新生儿黄疸治疗的有效率。     

普鲁泊福对GABAA受体结合功能的影响

目的:观察普鲁泊福对离体小鼠脑细胞膜GABAA受体结合功能的影响.方法:采用放射配体受体结合分析法,测定普鲁泊福对小鼠脑细胞膜3H-GABA特异性结合以及GABAA受体饱和曲线的影响.结果:特异性结合试验显示,与对照组相比,10～300 μmol/L浓度组的普鲁泊福明显增强3H-GABA与脑细胞膜GABAA受体的特异性结合,并呈浓度依赖性(P<0.05),而浓度低于10 μmol/L的普鲁泊福无明显增强作用(P>0.05).GABAA受体饱和试验显示,普鲁泊福组(10 μmol/L)的饱和曲线解离常数Kd2值明显低于对照组(P<0.01),但2组的Kd1、Bmax1及Bmax2值相比无统计学差异(P>0.05).结论:临床相关浓度的普鲁泊福可显著增强内源性GABA与GABAA受体的结合功能,其主要机制是通过提高GABA低亲和力结合位点的亲和性而起作用的.     

脂多糖结合蛋白与CD14结合位点模拟肽的初步筛选

目的 应用噬菌体随机12肽库筛选脂多糖结合蛋白(lipopolysaccharide binding protein,LBP)与CD14结合位点的多肽序列.方法 以CD14为固相筛选分子,对噬菌体12肽库进行4轮亲合筛选,采用酶联免疫吸附(ELISA)法鉴定筛选后的噬菌体克隆与CD14的结合活性,取结合活性较高的克隆进行DNA测序,推导其多肽序列并与LBP序列比对,再进行竞争抑制实验检测筛选噬菌体与LBP竞争结合CD14的效力.结果 挑取的20个噬菌体克隆中,16个结合实验鉴定阳性,取6个亲和力最高的克隆测序,得到3条不同编码的12肽序列(FHRWPTWPLPSP、MHRHPPPITLPL和AAFHRAHHLTSP),3条多肽与LBP一级结构同源性低,为模拟肽.6个噬菌体克隆有较高的竞争抑制率.结论 用噬菌体12肽库成功筛选出LBP与CD14结合位点的模拟肽.     

脂多糖结合蛋白/CD14结合位点的初步定位

目的 应用噬菌体随机12肽库、DNAStar分析软件、亲和实验及竞争抑制实验初步定位脂多糖结合蛋白(1ipopolysaccharide binding protein,LBP)与CD14的结合位点.方法 以CD14为筛选分子,联合应用噬菌体肽库展示技术、噬菌体ELISA鉴定、LBP竞争抑制实验及DNA测序推导LBP/CD14结合位点的展示肽序列,采用DNAStar分析软件比对所获展示肽序列与LBP一级结构,初步定位LBP/CD14结合位点并人工合成其模拟肽.采用ELISA检测该模拟肽与CD14的亲和力及与LBP的竞争抑制活性.结果 DNAStar比对结果表明,经噬菌体肽库筛选获得的8条展示肽氨坫酸序列与LBP第252～263位氨基酸有一定相似性.LBP第252～263位氨基酸具有结合位点的特性,即有良好的亲水性、可及性、可塑性及抗原性,该部位可能是LBP/CD14的结合位点.体外活性实验表明,模拟肽FHRNHRSPVTLL可与CD14有良好的亲和力,有较强的与LBP竞争结合CD14的活性.结论 LBP第252～263位氨基酸的模拟肽FHRNHRSPVTLL与CD14有良好的亲和力及有较强的与LBP竞争结合CD14的活性,具有LBP/CD14结合位点的生物学特性,LBP/CD14结合位点初步定位在该区域.     

芦荟大黄素苷与DNA相互作用的研究

目的探讨芦荟大黄素苷与DNA的相互作用。方法采用电子吸收光谱,荧光发射光谱,粘度实验以及凝胶电泳实验进行研究。结果与结论芦荟大黄素以插入方式与DNA分子结合;较高浓度的芦荟大黄素苷能够使Bel-7402肝癌细胞DNA由超螺旋构型转化为缺刻构型。     

脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白的研究

脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(adipocyte fatty-acid binding protein A-FABP,又称脂肪细胞脂类结合蛋白adipocyte lipid binding protein ALBP,FABP4,422蛋白,aP2或P15蛋白),属于小分子量细胞内脂肪酸结合蛋白超家族成员之一[1].近年来研究表明aP2对能量代谢,炎症反应起重要调节作用,和某些肿瘤的临床分期及病理分化程度有较好的对应关系.     

碳水化合物反应元件结合蛋白研究进展

Yamashita等[1]于2001年发现了一种与碳水化合物反应元件(carbohydrate response element,ChRE)结合的蛋白质,命名为碳水化合物反应元件结合蛋白(carbohydrate re-     

病案装订现状调查

目的了解目前各医院病案装订技术,为改进病案装订技术提供依据。方法于2009年8月至2010年2月,采用电话调查的方法对本市78家二级、三级医院的病案装订技术进行调查,调查的装订技术主要包括线绳装订、订书机装订、半自动装订机装订、全自动装订一体机等,然后就几种装订技术固定效果、装订速度、费用、对病案保管和使用的影响等进行比较。结果得到64家医院的调查资料。线绳装订占42%,订书机装订占23%,全自动装订机占13%。几种装订技术对病案使用的影响没有明显的区别;在装订速度上订书机装订最快,线绳装订最慢;固定效果以装订机最佳。结论几种装订技术均在使用,各有利弊,病案装订技术需要不断改进。