纳米氧化铝的体外DNA损伤及氧化应激研究

目的 通过研究不同粒径及不同浓度纳米氧化铝颗粒对中国仓鼠肺细胞(CHL细胞)DNA损伤及氧化应激的影响,探索纳米氧化铝颗粒遗传毒性及作用机制.方法 选用13、50 nm和10μm 3种粒径的氧化铝颗粒为3个粒径组,每种粒径氧化铝又分别设低剂量(15 μg/ml)、中剂量(30 μg/ml)、高剂量(60μg/ml)组,另设空白对照组和阳性对照组.染毒24 h后处理细胞.用荧光显微镜观察cy5.5荧光标记纳米颗粒进入细胞的情况.用单细胞琼脂糖凝胶电泳(SCGE)检测DNA损伤,谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)评估氧化应激反应的指标.结果 荧光标记的纳米颗粒在细胞核周围分布.SCGE结果显示,与空白对照组相比,各染毒剂量组Olive尾矩有增加趋势,中、高剂量组Olive尾矩均明显增加(P＜0.05).氧化应激指标结果显示,随着染毒剂量的增加各种氧化应激指标明显变化,高剂量组与空白对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 纳米氧化铝颗粒可以引起CHL细胞DNA损伤和氧化应激反应,氧化应激反应可能是导致遗传毒性的机制之一.     

Fe2O3纳米粒子对RAW264．7细胞活力影响

目的 探讨Fe2O3纳米粒子对小鼠腹腔巨噬细胞(RAW264.7)的活力与凋亡的影响.方法 Fe2O3纳米粒子对RAW264.7细咆染毒,用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法确定受试物的染毒剂量.用0.24,0.48,0.96mg/ml Fe2O3纳米粒子染毒,并设阴性对照组.分别对各个组行乳酸脱氢酶(LDH)活力测定、流式细胞术检测细胞线粒体膜电位(MMP)变化及凋亡.结果 MTT试验结果表明,Fe2O3纳米粒子在0.816～3.523 mg/ml范围内均可抑制RAW264.7细胞增值,半数抑制浓度(IC50)为1.76 mg/ml.Fe2O2纳米粒子在0,0.24,0.48,0.96 mg/ml剂量组的细胞外液中LDH活力高于对照组(P＜0.05);流式细胞仪检测结果表明,剂量组细胞线粒体膜电位均较对照组有所下降,且细胞凋亡率显著增高.结果 Fe2O3纳米粒子可以抑制RAW264.7的增殖并导致细胞膜通透性的增加,在一定剂量范围内引起线粒体膜电位的降低最终导致细胞凋亡.     

亚硝酸钠对中国仓鼠肺细胞染色体畸变率的影响

[目的]研究亚硝酸钠(NaNO2)致中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变的作用. [方法]测定NaNO2对CHL细胞的半数抑制浓度(IC50),根据IC50设立不同剂量组,进行正式实验,分别观察不加及加S9后的染色体畸变情况,根据标准进行结果判定. [结果]NaNO2染毒在不加S9时,128、12.8和1.28μg/ml 3个剂量组的染色体畸变率均＞5%而≤10%,为可疑阳性,而高剂量组(1.28 mg/ml)畸变率＞10%而＜20%,为阳性反应.NaNO2染毒在加入活化系统S9后,各剂量组引起CHL细胞染色体畸变率在12.8和1.28 μg/ml 2个剂量组的染色体畸变率均＞5%而≤100%,为可疑阳性,而中(128μg/ml)和高(1.28 mg/ml)剂量组畸变率均＞10%而＜20%,为阳性反应. [结论]NaNO2在1.28 mg/ml剂量下可引起CHL细胞染色体畸变率增高.     

Fe3O4及Fe3O4-Glu纳米颗粒的毒性和致突变性研究

[目的]研究直径约15 nm的四氧化三铁纳米颗粒(nano-Fe3O4)、谷氨酸包覆的四氧化三铁纳米颗粒(nano-Fe3O4-Glu)的毒性及致突变性.[方法]①单次给药实验在以往急性毒性实验的基础上,对昆明种小鼠口服一次给药,分别得到nano-Fe3O4、nano-Fe3O4-Glu的最大耐受量.②小鼠骨髓细胞微核试验nano-Fe3O4及nano-Fe3O4-Glu分别设150mg/kg、300mg/kg和600mg/kg各三个剂量组,另设阴性对照组和环磷酰胺组,分别计算其微核率.③小鼠精子畸形试验两种受试物分别设150 mg/kg、300 mg/kg、600 mg/kg三个剂量组及阴性对照组和环磷酰胺组,连续5 d染毒,染毒后第35 d处死,分别计算其精子畸形率.④体外CHL细胞染色体畸变试验nano-Fe3O4设1.05μg/ml、2.10μg/ml、4.20μg/ml三个剂量组,nano-Fe3O4-Glu设30μg/ml、60 μg/ml、120 μg/ml三个剂量组,另设阴性、阳性对照组和空白对照组.在加S9mix和不加S9mix时,分别计算细胞染色体畸变率.[结果]两种受试物的小鼠经口染毒最大耐受量均大于600 mg/kg;小鼠骨髓细胞微核试验中两种受试物的微核率均低于2‰;小鼠精子畸形试验中,nano-Fe3O4各剂量组小鼠精子畸形率均高于3.8%,与阴性对照组比较有统计学差异(P＜0.01);体外CHL细胞染色体畸变试验中,在加与不加体外活化系统(S9mix)的条件下,两种受试物的CHL细胞染色体畸变率均低于5%.[结论]在本试验条件下,nano-Fe3O4及nano-Fe3O4-Glu对小鼠体细胞均未见有致突变性,而nano-Fe3O4对雄性小鼠生殖细胞有致突变性;在体外试验中,两种纳米颗粒均未见有致突变性.     

挥发性有机化合物甲醛、苯联合细胞毒性作用

目的研究2种主要的挥发性有机化合物（VOCs）甲醛、苯对中国仓鼠肺（CHL）细胞的联合细胞毒性作用。方法将CHL细胞暴露于不同浓度的甲醛、苯及两者的混合溶液中。采用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法检测甲醛和苯对CHL细胞相对增殖率的影响，评价其联合细胞毒性作用。结果作用48h后，苯对CHL的IC50为48．35μg／ml，甲醛处理组的IC50为75．10μg／ml。两者联合作用的类型为协同作用。结论甲醛和苯可引起细胞损伤，具有一定的细胞毒性作用，两者混合作用的细胞毒性远远大于两者单独作用的细胞毒性。     

纳米和微米SiO_2对A549细胞毒性及其炎性因子分泌的影响

目的探讨不同粒径的纳米二氧化硅(nm-Si O2)与微米二氧化硅(μm-Si O2)对人肺腺癌上皮A549细胞(A549细胞)的细胞毒性及其炎性因子分泌的影响。方法选择3种粒径的纳米Si O2(20、60、100 nm)和微米Si O2(0.1~5μm)按照不同作用浓度(0、12.5、25、50、100、200μg/m L)对A549细胞进行染毒,24 h后采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法测定A549细胞的存活率,采用微量酶标法测定乳酸脱氢酶(LDH)活性、白细胞介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子(TNF-α)含量。结果 3种粒径nm-Si O2均可引起细胞存活率降低,细胞释放LDH升高,存在剂量效应关系;20-nm-Si O2对细胞的毒性作用最大,在较低剂量25μg/m L时可使细胞存活率显著低于对照组(P<0.01),在染毒浓度相同的条件下,20-nm-Si O2组LDH活力显著高于60-nm-Si O2组(P<0.01)、60-nm-Si O2组LDH活力显著高于100-nm-Si O2组(P<0.05);μmSi O2仅在最高剂量时引起细胞存活率降低(P<0.05)。3种粒径nm-Si O2均可使细胞分泌IL-8的量增加,但是并未引起TNF-α变化,在染毒浓度为50μg/m L时,20-nm-Si O2组IL-8的分泌量均显著高于100-nmSi O2组(P<0.01)。μm-Si O2未引起细胞分泌IL-8和TNF-α的变化。结论 3种粒径nm-Si O2均可引起A549细胞的细胞毒性,引起细胞炎性因子IL-8分泌增加,且nm-Si O2粒径越小,其毒性效应愈强,但并未引起TNF-α变化;μm-Si O2对A549细胞的毒性效应不明显。     

昆明山海棠雄性抗生育活性提取物TH5的毒性评价

目的:对昆明山海棠雄性抗生育活性提取物TH5的毒性试验结果进行评价。方法:TH5的毒性试验用急性毒性试验(LD50)、Ames试验、CHL细胞染色体畸变试验及微核试验方法进行检测。结果:TH5之ID_(50)为3.27g/kg;Ames试验在0.5～5000μg/皿5个剂量范围内加与不加S9条件下,4个菌株的回变菌落数均未有2倍增加;TH5之CHL细胞染色体畸变试验在其最终浓度为1/4IC50、1/2IC50及IC50(11～44μg/ml)时无论加S9与否,细胞畸变率与溶剂对照组无显著差异(P>0.05);TH5在30～300mg/kg3个剂量水平其微核率与溶剂对照组也均无显著差异(P>0.05)。结论;TH5的抗生育有效剂量(116mg/kg)范围内3种诱变试验结果均为阴性,仍不失其开发价值。     

纳米氧化铁对细胞膜流动性影响及其遗传毒性

目的从细胞膜流动性和胞内遗传物质损伤程度对纳米氧化铁的氧化作用进行检测与评价。方法以1，6-二苯基-1，3，5．己三烯（DPH）作为荧光标记，通过荧光分光光度计检测荧光强度变化，计算细胞膜的流动度；单细胞凝胶电泳（SCGE）检测胞内遗传物质在DNA水平的氧化损伤情况。结果仅在128μg／ml剂量水平观察到细胞膜流动性的降低，但8，32，128μg／ml3个剂量组均未引起细胞内DNA损伤。结论一定剂量的纳米氧化铁（Fe2O3）颗粒可引起细胞膜结构的氧化损伤，表现为膜流动性的降低。但各剂量组均未观察到纳米Fe2O3的遗传毒性效应。     

纳米钴对小鼠胚胎成纤维细胞的毒性

目的探讨纳米钴对小鼠胚胎成纤维细胞(Balb/c3T3)的毒性作用。方法将处于对数生长期的Balb/c3T3细胞暴露于分别暴露于30、50、100 nm的0(对照)、1、5、10、50、100μg/ml纳米钴培养液培养24 h。测定细胞活性、培养液上清中LDH的活力及细胞内ROS的含量。结果与对照组比较,10~100μg/ml的30 nm纳米钴染毒组和50、100μg/ml的50、100 nm纳米钴染毒组Balb/3T3细胞的存活率均较低,差异有统计学意义(P0.05);且随着纳米钴染毒浓度的升高,不同粒径纳米钴染毒Balb/3T3细胞的存活率均呈下降趋势。与对照组比较,10~100μg/ml的30、50、100 nm纳米钴染毒组Balb/3T3细胞培养液中的LDH活力及细胞内ROS的含量均较高,差异均有统计学意义(P0.05);且随着纳米钴染毒浓度的升高,不同粒径纳米钴染毒Balb/3T3细胞培养液中的LDH活力及细胞内ROS的含量均呈上升趋势。结论纳米钴对小鼠成纤维细胞的毒性作用与暴露剂量及颗粒直径有关,暴露剂量越大、颗粒直径越小,毒性越大。     

支气管灌注Fe_2O_3纳米粒对大鼠肺组织影响

目的观察支气管灌注Fe2O3颗粒对大鼠肺组织的氧化损伤及致纤维化作用。方法雄性大鼠经支气管灌注单次染毒(7 d)及多次染毒(30 d)不同剂量的20和280 nm Fe2O3粒子悬浮液,测定其肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-Px)、羟脯氨酸(HYP)含量。结果20 nm Fe2O340 mg/kg剂量组大鼠肺组织中SOD(32.5±3.8)U/(mg.prot)、MDA(2.29±0.18)nmol/(mg.prot)及GSH-Px(80.4±9.61)U(mg.prot)含量明显高于对照组(P0.05);除30 d的GSH-Px外,20 nm高剂组的SOD、MAD及GSH-Px含量均高于280 nm高剂量组(P0.05),表明纳米级Fe2O3颗粒比微米级损伤更为严重。结论20 nm Fe2O3可致大鼠肺脏氧化损伤且较280 nm Fe2O3更为严重,但无明显致纤维化作用。     

火麻仁蛋白毒理学安全性研究

目的:测试火麻仁蛋白毒理学安全性,为火麻仁研究和开发提供一定的实验依据。方法:小鼠经口急性毒性试验、Salmonella基因回复突变试验、骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、90天喂养实验。结果:经口急性毒性试验表明,LD50>10 g/kg;Am es试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核和小鼠精子畸形试验试验结果阴性;90天喂养实验中体重增加和食物利用率、血液学指标值无异常,生化指标值在正常值范围内,未见大鼠器官组织病理学改变。结论:在本研究中,未见受试物具有毒性作用。     

氯敌鼠钠盐对长爪沙鼠急性毒力的研究

目的测定氯敌鼠钠盐对长爪沙鼠(Meriones unguiculatus)的急性毒力。方法依据孙氏改良寇氏综合计算法,以测致死中量(LD50)的方式,配制5个浓度梯度的氯敌鼠钠盐药液供给试鼠;试验采用经口一次灌胃法。结果测得其LD50值为0.325mg/kg,标准误为0.058,其95%平均可信限为(0.325±0.085)mg/kg;试鼠性别、体重、死亡时间各项指标经方差检验差异均无统计学意义(P>0.05)。结论按毒力分级标准,氯敌鼠钠盐对长爪沙鼠急性毒力达到极毒水平,在实际鼠防工作中可作为慢性毒药的补充,也可独立使用。     

孤独症患儿感觉门控P50研究

【目的】探讨孤独症患儿感觉门控P50的特征,以期为孤独症的早期诊断找到脑电生理的相关依据。【方法】应用美国Nicolet Bravo脑电生理仪,采用条件刺激(S1)-测试刺激(S2)模式对39名孤独症患儿及31名正常儿童进行感觉门控P50的检测,分析孤独症患儿感觉门控P50的特征。采用SPSS11.0软件包进行统计。【结果】1)孤独症患儿对条件刺激的反应波幅(S1-P50)与对测试刺激的反应波幅(S2-P50)之间差异无统计学意义;2)孤独症患儿感觉门控P50:S1-P50波幅、S2-P50波幅及S2/S1、S1-S21、00(1-S2/S1),在3个脑区差异无统计学意义;3)孤独症患儿对声音刺激的潜伏期较长;4)孤独症患儿听觉P50抑制明显减弱;S1-P50波幅健康对照组为(5.71±3.75)μV,孤独症组为(4.09±2.42)μV(P0.05);S2-P50波幅健康对照组为(2.71±2.29)μV,孤独症组为(4.47±3.02)μV(P0.01);波幅S1-S2的差值健康对照组为(3.00±3.52)μV,孤独症组为(-0.38±2.41)μV(P0.01)。【结论】孤独症患儿的感觉门控P50明显受损;孤独症患儿对声音刺激的加工速度较慢。     

全反式维甲酸预防后囊膜混浊的研究

目的 研究在体外细胞培养条件下,全反式维甲酸对人类晶体上皮细胞增殖的抑制作用及有效抑制浓度,为预防后囊膜混浊发生的研究提供线索.方法 传代培养的人类晶体上皮细胞经计数后在37℃,5%CO₂的条件下培养48小时,再加入浓度分别为2,5,10,15,20μg/ml全反式维甲酸完全培养基作为实验组,继续培养24及72小时后进行活细胞计数并与所设空白对照组对比,观察全反式维甲酸对传代细胞的抑制作用并找出有效作用浓度及半效抑制量(ID₅₀).同时观察培养24小时后全反式维甲酸对传代细胞贴壁的抑制作用.结果 全反式维甲酸对体外培养的人类晶体上皮细胞的增殖有明显的抑制作用.从2μg/ml浓度即有显着的抑制效应,到10μg/ml浓度时达到最大作用.全反式维甲酸作用24小时的ID₅₀是9.22μg/ml;作用72小时的ID₅₀为4.75μg/ml.结论 全反式维甲酸具有有效地抑制体外培养的人类晶体上皮细胞的增殖和贴壁作用,有可能成为预防人类晶体后囊膜混浊的理想药物.     

某进口硼肥的小鼠急性毒性实验及机理初探

[目的]利用霍恩氏法对某进口硼肥进行急性毒性实验。[方法]实验将小鼠随机分为10.00、4.64、2.15、1.00 g/kg.BW 4个剂量组,每组10只,雌雄各半。隔夜禁食不禁水,各组均按25 ml/kg.BW量24 h内经口2次灌胃给予受试物,观察并记录小鼠中毒表现和死亡情况;实验后处死存活动物,解剖检查。[结果]灌胃后当日陆续出现小鼠死亡,解剖可见全胃肠胀气、胃部充血,部分单侧或双侧肾脏淤血;存活动物精神状况差,全身肌肉抽搐;眼结膜充血,面部、尾部及四肢可见皮肤呈鲜红色,疑为充血。[结论]小鼠急性经口毒性实验表明该样品属低毒。     

敌鼠钠盐对羊的毒性研究和危险性

敌鼠钠盐对山羊的口服急性LD_(50)为974.09mg/kg;对山羊和绵羊的口服慢性LDP_(50)(给药5次)分别为218.88和155.63mg/kg。连续给药15天对山羊的毒力大人增强,LD_(50)为4.02mg/kg,比慢性毒力强54倍。在使用敌鼠钠盐毒饵灭鼠时,羊若连续15天捡食到地面上的毒饵,即有中毒死亡的危险。     

产毒节菱孢培养物对大型溞的毒性研究

本文以国际标准实验生物大型溞做为实验动物研究了节菱孢毒性培养物的毒性。结果表明节菱孢毒性培养物对大型溞的EC_(50)值分别为29.07mg/L(24h);20.57mg/L(48h);7.53mg/L(96h)。LC_(50)值分别为38.07mg/ (24h);24.37mg/L(48h);10.67mg/L(96h)。     

细胞培养电刺激器的研制

目的:借助外加电场进行调整,可使机体的结构和功能恢复正常.研制一种电刺激器,为细胞培养提供外加电场.方法:采用ATMEL公司的AVR单片机作为系统的核心,编程控制各对电极的输出脉冲强度、频率、脉宽等3项参数;D/A转换器与运算放大器配合实现单极向双极的转换;功率放大器PB50使得输出满足了电压与电流的要求;继电器实现PB50的复用,多对电极分时输出.结果:提供幅度、频率、脉宽均可调的双极性脉冲:电压可达±40V,频率为0.01～10Hz,脉宽为0.4～24ms.结论:该仪器可提供双极刺激脉冲,与专用电极板配合使用可实现多对电极分时提供有效外加电场,电场范围有效,目前该仪器已应用于内皮祖细胞在电刺激培养下迁移、黏附、分化和成血管能力变化的机制研究中.     

Supa Kil杀虫气雾剂的药效报告

笔者以淡色库蚊、家蝇和美洲大蠊为试验对象,对Supa Kil气雾剂进行了实验室和模拟现场试验。结果表明,在实验室内按0.76g/m~3剂量,对淡色库蚊的KT_(50)为6.4min,对家蝇为4.9min;对美洲大蠊按1g/筒剂量,KT_(50)为10.1min。模拟现场按1.04g/m~3剂量,对淡色库蚊的KT_(50)为6.9min,对家蝇为5.6min;按1.84g/m~2剂量喷雾,对美洲大蠊的KT_(50)为7.4min。该制剂对家蝇的杀灭能力较强。     

致乏库蚊对6种常用杀虫剂的抗性监测

目的为调查现场致乏库蚊对敌敌畏等6种常用杀虫剂的抗性动态,以制订适宜的防治对策和相应的措施,指导灭蚊工作的深入开展.方法药液浸渍法(WHO推荐方法),测定Ⅳ龄期幼虫半数致死浓度.结果现场致乏库蚊对敌敌畏、巴沙、三氯杀虫酯、氯菊酯、溴氰菊酯、高效氯氰菊酯等6种常用杀虫剂的抗性倍数依次为:3.58,2.78,1.20,4.43,7.58,2.24.结论现场致乏库蚊对6种常用杀虫剂均产生了不同程度的抗性,尤其是溴氰菊酯和氯菊酯为最高.