HPLC法同时测定尖叶假龙胆中三种山酮类化合物的含量

目的:利用高效液相色谱法同时测定尖叶假龙胆中当药醇苷、雏菊叶龙胆酮、去甲基雏菊叶龙胆酮的含量。方法:取尖叶假龙胆粗粉0.5 g,用甲醇25 m L超声震荡提取30 min,制成供试品溶液。色谱条件:Waters Symmetry C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相:甲醇-磷酸水(p H2.6);柱温35℃;流速1 m L/min;进样量:10μL;梯度洗脱45 min。结果:尖叶假龙胆中当药醇苷、去甲基雏菊叶龙胆酮、雏菊叶龙胆酮分别在13.6~122.4μg/m L,10~90μg/m L,10.8~97.2μg/m L的范围内线性关系良好(r值分别为0.997 4,0.996 7,0.998 0);当药醇苷、去甲基雏菊叶龙胆酮、雏菊叶龙胆酮平均回收率(n=6)分别为99.97%,102.02%,98%。结论:尖叶假龙胆中当药醇苷,去甲基雏菊叶龙胆酮和雏菊叶龙胆酮的含量分别为23.94 mg/g,4.49 mg/g,7.92 mg/g。     

HPLC法测定尖叶假龙胆中雏菊叶龙胆酮和去甲基雏菊叶龙胆酮含量

目的:建立HPLC法同时测定尖叶假龙胆中雏菊叶龙胆酮和去甲基雏菊叶龙胆酮的含量。方法:色谱柱:Thermo Syncronis C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:0.5%磷酸水(A)-乙腈(B),梯度洗脱,0~15 min,40%~45%B,15~30 min,45%~60%B;检测波长:254 nm;柱温:30℃;流速:1.0 m L·min-1。结果:雏菊叶龙胆酮和去甲基雏菊叶龙胆酮分别在1.99~79.52μg·m L-1(R2=0.999 9)、2.28~56.90μg·m L-1(R2=0.999 7)范围内线性关系良好;平均加样回收率(n=9)分别为100.01%(RSD=1.50%)、100.65%(RSD=1.14%)。结论:该方法简便、快速、准确、可靠,为尖叶假龙胆的质量控制提供参考。     

尖叶假龙胆入血成分的初步研究

目的:研究尖叶假龙胆的入血成分。方法:建立尖叶假龙胆生药材与不同采血时间含药血浆的UPLC图谱,通过比对图谱,确认尖叶假龙胆入血成分。结果:尖叶假龙胆中去甲基雏菊叶龙胆酮以原型成分入血。结论:血浆中去甲基雏菊叶龙胆酮直接作用于体内,对其进行后续药理学研究,将有助于阐述尖叶假龙胆治疗疾病的物质基础与药理作用。     

高速逆流色谱法分离尖叶假龙胆中[口山]酮类活性成分

目的:建立利用高速逆流色谱法分离尖叶假龙胆中两个主要的[口山]酮类活性成分雏菊叶龙胆酮和去甲基雏菊叶龙胆酮的方法。方法:先后采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(9:10:9:10,v/v/v/v)和正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(6:5:6:5,v/v/v/v)两个溶剂系统,进行梯度洗脱,对尖叶假龙胆乙酸乙酯提取物进行分离,对所得馏分用Sephadex LH-20进行纯化,所得单体利用UV、MS和NMR数据确定其结构。结果:分离得到两个具有显著生理活性的[口山]酮类成分雏菊叶龙胆酮和去甲基雏菊叶龙胆酮。结论:高速逆流色谱法是一种有效的分离制备尖叶假龙胆中[口山]酮类活性成分雏菊叶龙胆酮和去甲基雏菊叶龙胆酮的方法。     

愈风宁心片中葛根素在小鼠体内的药动学和生物利用度研究

目的测定口服愈风宁心片在小鼠体内葛根素的药-时曲线,并与葛根素静注相比较,计算其体内药动学参数和生物利用度.方法将NIH小鼠随机分成不同的时间组,采用6%高氯酸水溶液沉淀血浆蛋白,HPLC法测定小鼠血浆中的葛根素含量,用PK solutions 2.0(非房室模型)程序计算药动学参数和生物利用度.结果 小鼠静脉注射(0.01 g/kg)葛根素注射液主要药动学参数分别是t1/2=98.359 min,CL=35.548 mL·min-1,AUC(0-∞)=281.3 μg·min·mL-1;小鼠灌胃愈风宁心片(相当于葛根素0.2 g/kg)主要药动学参数分别是t1/2=35.562 min,CL=898.685 mL·min-1,Cmax=9.3μg·mL-1,Tmax=30 min,AUC(0-∞)=222.5μg·min·mL-1,与静脉注射相比较,生物利用度为3.95%.结论小鼠口服愈风宁心片,葛根素在小鼠体内吸收极少.提高愈风宁心片口服的生物利用度,将提高临床用药有效性.     

一测多评法同时测定尖叶假龙胆中龙胆苦苷、芒果苷、当药醇苷、木犀草素、去甲基雏菊叶龙胆酮及雏菊叶龙胆酮

目的建立基于HPLC-UV技术的一测多评法(QAMS)同时测定尖叶假龙胆Gentianella acuta药材中雏菊叶龙胆酮、龙胆苦苷、芒果苷、当药醇苷、木犀草素和去甲基雏菊叶龙胆酮的含量。方法采用HPLC-UV技术,以雏菊叶龙胆酮为内参物,分别测定其与龙胆苦苷、芒果苷、当药醇苷、木犀草素和去甲基雏菊叶龙胆酮的相对校正因子,并计算含量;通过外标法与QAMS法分别对6种成分含量进行比较,以检验QAMS法的适用性、准确性和可重复性。结果 QAMS法与外标法所测得的结果无显著性差异。结论所建立的QAMS方法可满足尖叶假龙胆在缺乏对照品的情况下,完成尖叶假龙胆中多指标成分的同时测定,为尖叶假龙胆质量控制标准的建立提供依据。     

西红花苷-1经大鼠肌肉注射的体内药动学研究

目的探讨西红花中西红花苷-1经肌肉注射后在大鼠体内的药动学特征。方法大鼠经肌肉注射西红花苷-1后,采用反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中西红花苷-1的量,DAS 2.0软件计算各组大鼠西红花苷-1的药动学参数。结果西红花苷-1在大鼠体内的血药浓度经时曲线符合单室模型,主要药动学参数:t1/2a(107±23.18)min,t1/2(160±59.45)min,Tmax(87±29.83)min,Cmax(3.75±0.71)μg/mL,AUC(764±82.05)μg/(min·mL),CL(0.019±0.005)L/(min·kg),V(4.01±1.07)L/kg,MRT(142±23.09)min。结论西红花苷-1肌肉注射后吸收较快,分布广泛,平均体内滞留时间短,为快速处置类药物。     

雏菊叶龙胆酮对脑缺血损伤的保护作用及机制研究

目的:探究雏菊叶龙胆酮用于脑缺血损伤治疗的保护作用及其作用机制。方法:采用不同的方法制备两种动物全脑缺血损伤模型,并观察不同剂量(50mg·kg~(-1)、75mg·kg~(-1)、100mg·kg~(-1))雏菊叶龙胆酮对断头后小鼠张口喘息时间以及对大鼠脑缺血后脑指数、脑SOD活力、脑MDA含量、脑兴奋性氨基酸Glu以及抑制性氨基酸GABA含量的影响,同时比较雏菊叶龙胆酮与尼莫地平的作用效果差异。结果:与模型组比较,雏菊叶龙胆酮50mg·kg~(-1)、75mg·kg~(-1)、100mg·kg~(-1)组可显著延长小鼠断头后张口喘息时间(P0.05);雏菊叶龙胆酮组脑SOD活力、脑MDA含量、脑兴奋性氨基酸Glu以及抑制性氨基酸GABA浓度均改善,且75mg·kg-1浓度组改善效果最佳(P0.05)。结论:雏菊叶龙胆酮能明显延长小鼠断头后张口喘息时间,并且对于脑SOD活力、脑MDA含量、脑兴奋性氨基酸Glu以及抑制性氨基酸GABA含量改善效果显著,其对于临床脑缺血损伤治疗药物的开发具有重要的参考价值。     

青藤碱在Beagle犬体内的药动学和绝对 生物利用度研究

目的:研究青藤碱在Beagle犬体内药动学和口服绝对生物利用度.方法:采用双周期自身交叉设计,在10只Beagle犬中研究单次口服或静脉注射青藤碱10 mg·kg~(-1)的药动学参数和绝对生物利用度,用高效液相色谱法测定血药浓度,利用3p97软件计算药动学参数.结果:口服青藤碱后犬体内药-时曲线呈一室模型,主要药动学参数T_(max)(82.5±13.9)min,C_(max)(0.15±0.027)mg·L~(-1),t_(1/2)(87.6±28_3)min,AUC_(O～T)(28.43±3.48)m·min·L~(-1),静注青藤碱后犬体内药.时曲线呈二室模型,主要药动学参数t_(1/2β)(106.7±120.2)min,Auc_(O～T)(93.32±82.08)mg·min·L~(-1),青藤碱的口服绝对生物利用度为(30.46±4.24)%.结论:青藤碱口服绝对生物利用度较低,且在犬体内消除较快.     

注射用新藤黄酸包合物在大鼠体内药物代谢动力学研究

目的考察大鼠注射新藤黄酸包合物后的药动学行为。方法两组大鼠分别单次注射新藤黄酸包合物(受试样品)及新藤黄酸(参比样品),HPLC法测定不同时间的血药浓度,采用3p97药动学软件拟合药动学参数。结果受试样品中新藤黄酸的C0,T1/2,AUC0-80分别为(1 502.2±283.8)mg/L、(1.76±0.84)min、(3 815.2±1 468.2)(mg/L·min);参比样品中新藤黄酸的C0,T1/2,AUC0-80分别为(346.6±64.7)mg/L、(2.32±1.16)min、(1 160.1±380.2)(mg/L·min)。结论注射新藤黄酸后大鼠血浆药时曲线符合一室模型。建立的测定方法适用于体内新藤黄酸的定量测定及药动学研究。     

人参皂苷Rg3及其代谢产物在大鼠体内药动学研究

目的:建立人参皂苷Rg3和其代谢产物人参皂苷Rh2血浆药物测定方法,探讨它们在大鼠体内药代动力学情况。方法:采用交叉给药设计,应用高效液相色谱法测定Wistar大鼠单次单剂量灌胃人参皂苷Rg3(50 mg/kg)后的血液中人参皂苷Rg3和人参皂苷Rh2的浓度,利用DAS2.0软件计算药动学参数。结果:口服人参皂苷Rg3后,人参皂苷Rg3在大鼠体内药-时曲线呈二室模型,主要药动学参数Cmax(81.55±24.57)mg/L,t1/2(4.27±1.35)min,AUC0-t(219.25±81.38)mg·min/L。人参皂苷Rh2在大鼠体内药-时曲线同样呈二室模型,主要药动学参数Cmax(6.17±1.34)mg/L,t1/2(3.25±0.17)min,AUC0-t(11.48±3.72)mg·min/L。结论:人参皂苷Rg3口服灌胃后,虽然在大鼠体内可以代谢为人参皂苷Rh2,但是人参皂苷Rh2在体内的量远小于人参皂苷Rg3。     

花椒与青椒的毒性和药动学比较研究

目的 比较花椒与青椒的急性毒性以及口服给药后在小鼠体内的药动学差异.方法 采用简化几率单位法,计算花椒与青椒的LD50,并比较二者的急性毒性;采用药物累积法,以死亡率为指标测定花椒与青椒的表观药动学参数,并比较二者的差异.结果 花椒的LD50为(51.14±4.47)g·kg-1;青椒的LD50为(78.02±6.86)g·kg-1.花椒、青椒口服给药后体存量的表观药动学过程均符合一室开放模型;花椒主要的药动学参数为t1/2＝1.321 h,AUC(0-t)＝102.015 g·h-1·kg-1,Tmax＝0.500 h,Cmax＝46.720 g·kg-1;青椒主要的药动学参数为t1/2＝0.607 h,AUC(0-t)＝83.561 g·h-1·kg-1,Tmax＝0.250 h,Cmax＝75.050 g·kg-1.结论 花椒与青椒的LD50与体内药动学过程均存在显著性差异,花椒的毒性大于青椒.     

注射用苦参素纳米球与普通粉针剂在大鼠体内药动学比较

目的比较注射用苦参素纳米球(KU-PLGA-NS)与注射用苦参素普通粉针剂(KUI)在大鼠体内的药动学特性。方法建立HPLC法检测大鼠血浆中苦参素,采用ANOVA法选择房室模型,将所测得的血药浓度-时间数据,采用DAS程序进行分析,根据F值与AIC选择房室模型求算药动学参数。结果等剂量KU-PLGA-NS和KUI的AUC0-t分别为(785.57±170.92)、(342.43±54.49)mg·L-1.min,Cmax为(18.51±2.47)、(28.48±5.40)mg/L,t1/2Ke为(91.69±1.94)、(11.51±2.47)min。结论 KU-PLGA-NS在大鼠体内的药动学特性与KUI比较AUC和Cmax增加,t1/2延长。     

黄连解毒汤中栀子苷在缺血性脑血管病模型大鼠体内的药动学研究

目的研究黄连解毒汤中栀子苷在缺血性脑血管病模型大鼠体内的药动学规律。方法采用线拴法制造大鼠缺血性脑血管病模型,用HPLC法测定血浆中栀子苷浓度的经时变化,浓度-时间数据用3P97药代动力学软件进行分析,计算药动学参数。结果缺血性脑血管病模型大鼠灌胃黄连解毒汤后,黄连解毒汤中栀子苷的药动学模型符合二室开放模型,其主要药动学参数分别为:t1/2α=(90.99±31.29)min,t1/2β=(1054.08±148.42)min,t1/2Ka=(68.00±17.05)min,T(peak)=(166.97±83.75)min,Cmax=(10.19±8.52)μg/ml,AUC=(8642.81±3086.92)μg.ml-1.min-1。结论明确黄连解毒汤中栀子苷在缺血性脑血管病大鼠体内的药动学特征,为临床合理用药提供一定的参考作用。     

黄连解毒汤中栀子苷在大鼠体内的药动学研究

[目的]探讨黄连解毒汤中栀子苷在大鼠体内的药动学.[方法]大鼠灌胃给药,取血经处理后采用高效液相色谱(HPLC)法测定栀子苷含量.[结果]大鼠灌胃黄连解毒汤后,体内栀子苷的药-时曲线符合二室开放模型,药动学参数为:分布速率常数(α)=(0.03±0.01)/min,消除速率常数(β)=(0.000 6±0.000 2)/min,二室模型分布相的半衰期(t1/2α)=(79.02±22.38)min,二室模型消除相的半衰期(t1/2β)=(13 031.81±8 817.76)min,达峰时间(T(peak))=(99.46±28.73)min,血药峰浓度(Cmax)=(5.02±1.52)mg/L,血药浓度一时间曲线下面积(AUC)=(69 334.66±15565.92)mg/(L·min).[结论]明确了黄连解毒汤中栀子苷在大鼠体内的药动学过程,为黄连解毒汤的临床应用提供可参考的依据.     

GC-FID测定大鼠静脉注射新型醒脑静后龙脑的血药浓度及药动学研究

目的:建立大鼠血浆中龙脑浓度的GC-FID测定方法,探讨新型醒脑静静脉注射后龙脑在大鼠体内的药代动力学过程.方法:大鼠以10.00 mg· kg-1(以艾片量计)剂量尾静脉注射新型醒脑静后,0.5,1,3,5,8,12,20,30,45 min眼底采血,分离血浆,十八烷为内标,乙酸乙酯萃取,GC-FID测定血浆中龙脑浓度,以Kinetica软件拟合药动学参数.结果:龙脑血药浓度在1.67～16.67 mg·L-1线性关系良好,r =0.999 6,测得低、中、高浓度萃取回收率分别为(92.81±1.11)％,(85.38±0.86)％,(84.58±0.58)％;日内、日间精密度RSD均小于3.0％.静脉注射新型醒脑静后,龙脑在大鼠体内药动学符合二室开放模型,主要药动学参数为t1/2α=(1.18±0.20) min,t1/2β=(22.27±6.85) min,Cmax(Calc)=(18.76±2.10) mg·L-1,MRT=(23.84±7.67) min-1,AUC =(100.00±15.85) mg·min·L-1.结论:建立的GC-FID适用于龙脑血浆药物含量测定及药代动力学研究,新型醒脑静中龙脑在体内分布迅速,代谢较快.     

川芎挥发油中藁本内酯在大鼠体内的药动学研究

目的 测定川芎挥发油中藁本内酯在大鼠体内的药动学.方法 采用RP-HPLC法,以蛇床子素为内标物测定大鼠口服川芎挥发油的β-环糊精包合物后藁本内酯的血药浓度,使用3P97药动学软件计算其药动学参数.结果 藁本内酯在大鼠体内符合二室模型,主要的药动学参数:t_(1/2)(α)为(1.429±1.161)h,t_(1/2)(β)为(6.877±2.275)h,t(peak)为(3.401±1.951)h,AUC为(70.87±25.92)μg/mL·h.结论 以蛇床子素为内标,RP-HPLC法能够准确、灵敏地测定藁本内酯在大鼠体内的药动学.     

HPLC-UV法测定大鼠血清中柴胡皂苷C浓度

目的:建立大鼠血清中柴胡皂苷C的HPLC血药浓度测定方法,并用于柴胡皂苷C在大鼠体内药代动力学的研究。方法:大鼠血清样品采用甲醇沉淀蛋白,HPLC法测定血药浓度。色谱柱为Waters C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水梯度洗脱,流速为1.0ml/min,检测波长为210nm。测定大鼠单次腹腔注射528mg/kg后血药浓度,采用DAS2.0药动学分析软件拟合主要药动学参数。结果:大鼠血清中柴胡皂苷C在58.4~7300mg/L浓度范围内线性关系良好,该成分的最低检测浓度(S/N=3)为14.6mg/L,平均回收率在85%以上,日内、日间精密度及稳定性的RSD8%。大鼠单次腹腔注射528mg/kg后,主要药动学参数t1/2z、AUC0-t、MRT0-t分别为(1.25±0.84)h、(943.79±39.16)h/(mg·L)、(0.91±0.05)h。结论:该方法简便、准确,可作为柴胡皂苷C血药浓度定量分析方法,并能满足其在大鼠体内的药代动力学研究。     

乙酰葛根素在大鼠体内的药动学研究

目的 考察乙酰葛根素ig和iv给药后葛根素在大鼠体内的药动学特征.方法 大鼠ig给予400 mg/kg或尾iv给予160 mg/kg乙酰葛根素.采用高效液相色谱(HPLC)法检测血浆样品中葛根素.结果 乙酰葛根素在大鼠体内代谢为葛根素,葛根素药动学过程符合二室模型,主要药动学参数:ig给药葛根素AUC0～∞为(44.76±4.13) mg·h·L-1,iv给药葛根素AUC为(36.67±5.3) mg·h·L-1,ig给予乙酰葛根素后大鼠体内葛根素的暴露水平(生物利用度)为48.12％,ig给药的Cmax为(12.07±0.15) μg/mL,tmax(1±0.33)h,t1/2为(2.52±0.21)h.结论 HPLC法可作为乙酰葛根素在大鼠体内药动学的检测手段,ig乙酰葛根素后,葛根素在大鼠体内的暴露水平得到显著提高.     

一测多评法测定鱼胆草中4种活性成分

目的:建立测定鱼胆草中獐牙菜苦苷、去甲基雏菊叶龙胆酮苷、去甲基雏菊叶龙胆酮和龙胆酮酚含量的一测多评法,探讨一测多评法用于鱼胆草质量控制的可行性。方法:采用高效液相色谱法,以獐牙菜苦苷为内参物,分别建立獐牙菜苦苷与去甲基雏菊叶龙胆酮苷、去甲基雏菊叶龙胆酮和龙胆酮酚的相对校正因子,计算各成分的含量,实现一测多评;同时利用外标法和一测多评法测定4种化学成分的含量,并比较二者结果的差异。结果:各相对校正因子重复性良好,一测多评法的计算结果与外标法测得结果无显著差异。结论:一测多评法可用于鱼胆草中4种化学成分的定量分析,为进一步完善鱼胆草的质量标准提供参考。