苦参碱与顺铂合用对小鼠肝癌移植瘤的影响

目的观察苦参碱联合顺铂对小鼠H22肝癌移植瘤生长的抑制作用。方法复制H22肝癌小鼠移植瘤模型。将40只接种H22肝癌细胞昆明小鼠随机分成4组：对照组、苦参碱组（MW）、顺铂组（DDP）、联合组（MW＋DDP）。治疗期间，观察小鼠的毒副反应以及生存质量。实验19d后，处死全部小鼠，剥离皮下肿瘤，称小鼠肿瘤重量，计算出抑瘤率。结果MW单用组的H22肝癌平均瘤重为（0．89±0．27）g，明显低于对照组的（1．23±0．36）g（P〈0．01）。MW与DDP舍用组的H22肝癌平均瘤重为（0．17±0．11）g，均明显低于MW单用组（P〈0．01）和DDP单用组（P〈0．01）；其抑瘤率达86．2％，明显高于MW单用组（P〈0．01）和DDP单用组（P〈0．01）。联合治疗组小鼠毒副反应明显低于DDP组，生存质量优于DDP组。结论苦参碱和顺铂对小鼠H22肝癌移植瘤的生长具有协同抑制作用，并能降低顺铂毒副反应，提高生存质量。     

小柴胡汤对H22肝癌小鼠癌细胞的增殖抑制作用及其作用机制研究

目的:探讨小柴胡汤对改善H22肝癌小鼠免疫功能及其抑制肿瘤增殖的效果,为H22肝癌临床治疗提供实验依据。方法:优选昆明小鼠30只为研究对象,通过腹腔注射H22瘤株建立H22肝癌小鼠模型。随机将其分为健康对照组、低剂量小柴胡、中剂量小柴胡、高剂量小柴胡、5-FU组以及H22肝癌模型组,每组小鼠各5只。对比分析治疗组各组用药前后体重、抑瘤率、血清肿瘤标记物以及炎症因子水平的差异。结果:①体重分析:小柴胡中、高剂量组用药后小鼠体重与正常对照组无统计学意义(P>0.05),5-FU组小鼠与对照组相比体重显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。②抑瘤率:5-FU组抑瘤率高于其他治疗组,而小柴胡中、高剂量组抑瘤率高于低剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。③血清肿瘤标记物:柴胡中、高剂量组血清甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)低于低剂量组及5-FU组,而铁蛋白(SF)高于低剂量组及5—FU组。④炎症因子水平:小柴胡中、高剂量组NK细胞活性、IL—2、INF—γ水平显著高于低剂量组及5—FU组,而TNF—α水平显著低于低剂量组及5—FU组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:一定剂量的小柴胡汤能有效抑制H22肝癌小鼠癌细胞的生长,并能改善机体免疫水平。     

苦参碱对小鼠免疫器官的影响

目的 观察苦参碱(MT) 对昆明小鼠免疫器官的影响.方法 将40只昆明小鼠分为苦参碱组、5-Fu组、苦参碱+5-Fu组和生理盐水(NS)阴性对照组.给药组小鼠分别按40,30,20+30 mg/kg腹腔注射给药.计算不同组别小鼠的胸腺指数,脾脏指数和肝脏指数,并进行病理组织学观察.结果 苦参碱组小鼠的胸腺、脾脏和肝脏指数均无显著变化(P>0.05);5-Fu组小鼠胸腺和脾脏指数均显著降低(P<0.01);苦参碱+5-Fu组小鼠的胸腺指数与对照组相比显著降低(P<0.01).病理组织学光镜观察结果显示,苦参碱组小鼠胸腺和脾脏没有明显的萎缩和破坏,肝脏组织无明显病理变化.结论 苦参碱可以拮抗5-Fu对脾脏的免疫抑制,使脾脏指数增加.     

川牛膝多糖对小鼠肝癌细胞H22抑制作用研究

观察川牛膝多糖对小鼠肝癌细胞H22抑制作用。结果表明：川牛膝多糖ig,对小鼠肝癌细胞H22（腹水型）有一定的抑制作用趋势。     

扶正消瘤方对H_(22)荷瘤小鼠抑癌及其化疗减毒作用

目的考察扶正消瘤方(人参、黄芪、猪苓等)抗肝癌作用及其减轻环磷酰胺引起的毒性。方法 ICR小鼠采用右前肢皮下接种造H_(22)荷瘤模型,灌胃给予扶正消瘤方后,检测生命延长率、瘤重、抑瘤率、T淋巴细胞增殖率、血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平。H_(22)荷瘤小鼠腹腔注射环磷酰胺(50 mg/kg),测定扶正消瘤方给药后血液学指标、血清溶血素水平及抗体形成细胞数。结果扶正消瘤方可明显抑制肿瘤生长,升高血清SOD活性,减少MDA水平,促进T淋巴细胞增殖。而且,它还能拮抗环磷酰胺引起的白细胞及血小板数量下降,并升高抗体形成细胞数。结论扶正消瘤方具有良好的抗肝癌作用,并能减轻化疗所致的毒性,可能与增强机体抗氧化和免疫能力有关。     

解毒颗粒对H22荷瘤小鼠体内抑瘤作用的研究

目的:观察解毒颗粒对小鼠H22皮下移植瘤的抑制作用。方法:建立H22皮下瘤小鼠模型,随机分为解毒颗粒低剂量组(JL)、解毒颗粒高剂量组(JH)、索拉非尼组(SF)、生理盐水组(NS),造模1天后开始给药,连续14天,第15天每组处死6只小鼠,观察小鼠实体瘤、肝脏、肾脏组织病理形态的变化,记录给药后第21天各组小鼠的生存率。结果:与生理盐水组相比,3种治疗方案均有一定的抑瘤作用,其中解毒颗粒低剂量组和高剂量组抑瘤效果较好,并在第21天的生存率较高。解毒颗粒高剂量组和索拉非尼组均出现了肿瘤坏死程度上升,肿瘤细胞密度下降,肿瘤细胞异型性下降,核分裂像计数下降的现象(P0.01),且在肿瘤细胞密度评分和肿瘤细胞异型性方面,解毒颗粒高剂量组效果优于低剂量组(P0.05)。结论:解毒颗粒在肝癌小鼠移植瘤模型体内具有一定抗肿瘤效果,本研究为今后解毒颗粒的临床推广提供了一定的实验基础。     

石见穿对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长的影响

目的:观察石见穿对肝癌H22小鼠肿瘤生长的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:肝癌H22荷瘤小鼠随机分为5组:模型组、石见穿提取物高、中、低(40,10,2.5 g·kg-1 ig)3个剂量组和阳性药环磷酰胺(CTX,0.025 g·kg-1,ip)对照组.连续10d.于第11天观测抑瘤率、脾指数、胸腺指数、血清中肿瘤坏死因子-a(TNF-α)和血骨内皮细胞生长因子(VEGF)的含量.结果:与模型组比较,石见穿提取物高、中、低剂量组的抑瘤率分别为23.83％,48.93％ (P ＜0.01)和27.48 (P＜0.05);石见穿提取物中、低剂量组脾指数和胸腺指数升高,但差异无统计学意义;石见穿提取物各剂量组血清中TNF-α和VEGF含量下降,以中剂量组VEGF含量下降明显,模型组(28.64±7.18)pg·mL-1,中剂量组(21.22 +5.60)pg·mL-1(P＜0.05).结论:石见穿提取物对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤的生长具有明显的抑制作用,其作用机制可能与下调细胞因子VEGF含量有关.     

苦参碱对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及对免疫功能的影响

目的　研究苦参碱的体内抑瘤效应与荷瘤机体免疫功能的关系 ,初步探讨苦参碱抑瘤作用的免疫学机制。方法　采用 MTT法观察不同剂量苦参碱对荷瘤小鼠外周血淋巴细胞 (PBL )增殖能力的影响 ;采用小鼠 H2 2 肝癌细胞实体瘤模型进行苦参碱的体内抑瘤实验 ,测定肿瘤生长抑制率 (IR) ,观察荷瘤小鼠免疫器官质量和病理学形态的改变 ;EL ISA法检测小鼠血清中白细胞介素 - 2 (IL - 2 )和白细胞介素 - 12 (IL - 12 )水平。结果　高、低剂量苦参碱对小鼠 H2 2 实体瘤生长具有明显抑制作用 ,抑瘤率分别为 6 0 .7%和 6 2 .5 % (P<0 .0 1) ;体外增殖试验显示 ,苦参碱单独作用时 ,对荷瘤小鼠静止 PBL体外增殖的抑制作用较明显 ,但对刀豆蛋白 A (Con A)活化的荷瘤小鼠PBL 的体外增殖反应表现出一定的促进作用 ,随苦参碱质量浓度的增高 ,促进作用随之减弱 ;苦参碱治疗后小鼠的脾脏和胸腺质量减轻 ,其中以脾脏变化更为明显 (P<0 .0 1) ,病理切片显示胸腺皮质变薄 ;苦参碱不能提高荷瘤小鼠血清 IL - 2和 IL - 12水平 (P>0 .0 5 )。结论　苦参碱在体内具有较强的抗肿瘤作用 ,但在体内、体外都表现出一定的免疫抑制作用 ,显示苦参碱的抗肿瘤活性不是通过提高机体的免疫功能来实现的。     

肿瘤细胞接种数对建立小鼠肝癌移植瘤模型的影响

目的:本研究将通过观察不同肿瘤细胞接种数于不同品系小鼠后的生物学状态、肿瘤进展状况及小鼠生存期等指标,分析肿瘤细胞接种数对建立小鼠肝癌移植瘤模型的影响,为今后小鼠肿瘤模型的建立提供参考。方法:将收集种鼠腹水H22细胞按比例稀释,调整细胞浓度约为1.7×10~8/m L、5.1×10~7/m L、2.5×10~7/m L、1.0×10~7/m L,接种至KM小鼠、ICR小鼠右腋皮下。观察小鼠生物学状态、肿瘤体积变化及小鼠生存率等指标。结果:各组ICR及KM小鼠基本情况与接种数负相关,出瘤时间与肿瘤细胞接种数成正比,荷瘤小鼠预后及小鼠生存率与接种数负相关。结论:KM小鼠与ICR小鼠在荷瘤小鼠基本情况、肿瘤生长与进展及生存期方面无明显差异。将种鼠腹水按1∶10比例稀释,接种浓度为10~7/m L时,瘤体发展较为平稳,生存率较高,更利于监测和评估小鼠给药前后变化情况。     

辽东楤木叶总皂苷对荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究

目的:研究辽东楤木叶总皂苷对荷瘤小鼠抑瘤作用的效果,初步探讨其体内抑瘤作用机制。方法:采用小鼠H22肝癌细胞实体瘤模型进行体内抑瘤实验,测定肿瘤生长抑制率,利用光镜、电镜等方法进行形态学观察,是否产生凋亡小体。结果:辽东楤木叶总皂苷对小鼠的H22实体瘤生长具有明显的抑制作用,形态学观察显示,治疗组与对照组比较,肿瘤团块较小,异型性不明显,病理性核分裂和间质血管较少,淋巴细胞浸润明显。电镜下可见凋亡小体形成,其中以总皂苷组最明显。结论:辽东楤木叶总皂苷对荷瘤小鼠具有较强的体内抗肿瘤作用,作用机制可能与其能够抑制肿瘤细胞分裂、增殖及能够诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

氧化苦参碱及苦参碱Au(III)金属配合物对肿瘤细胞增殖的影响及分子机制初探

目的 合成氧化苦参碱Au（Ⅲ）金属配合物（OMT-Au）和苦参碱Au（Ⅲ）金属配合物（MT-Au）,并比较2种配合物体外抑制肿瘤细胞增殖的效果,初步探讨其分子机制及构效关系。方法 溶剂热法合成配合物,X射线单晶衍射表征结构,不同剂量配合物分别处理10种肿瘤细胞株,MTT法观察细胞增殖抑制,流式细胞术检测配合物对细胞凋亡和细胞周期的影响,琼脂凝胶电泳探究配合物对拓扑异构酶I（TOPO I）活性的影响。结果 OMT-Au明显抑制人胃癌MGC803细胞增殖,阻滞MGC803细胞于G₂/M期,抑制TOPO I介导的pUC19 DNA质粒的解旋反应,呈剂量依赖关系,且抑制作用均强于MT-Au配合物。结论 OMT-Au抗肿瘤活性强于MT-Au,原因可能与配体的分子构象差异有关。     

藤黄炮制品对大鼠肠道组织病理学研究

目的:观察藤黄各制剂单次大剂量ig给药后大鼠消化系统病变情况,并比较藤黄炮制前后对大鼠肠上皮细胞株IEC-6毒性差异,探讨藤黄炮制减毒机制.方法:单次ig给予藤黄生品(200 mg· kg-1)、清水制藤黄(200 mg· kg-1)和藤黄酸(50 mg· kg-1),观察给药后大鼠的活动情况,于24 h后处死并采集大鼠心、肝、肾、食管、胃、十二指肠、空肠、回肠和结肠等主要脏器,观察大鼠口服给药后消化系统病变情况.以大鼠肠上皮细胞株IEC-6为研究对象,采用MTT法检测藤黄炮制前后对IEC-6细胞增殖的影响,采用倒置显微镜观察细胞形态.结果:病理切片结果显示,给药后大鼠的肝脏、肾脏、心脏、胃和食道均未见明显的毒性反应;但十二指肠、空肠有轻度至重度的毒性作用,表现为肠绒毛水肿.3种藤黄制剂均会引起给药大鼠肠道的毒性作用,生品藤黄所致的十二指肠和空肠水肿程度最严重,其次是清水制藤黄和藤黄酸.细胞的毒性结果显示,与空白组相比,藤黄生品及炮制品均可明显降低IEC-6细胞的活性(P＜0.01)与形态,且呈一定的剂量相关性;与藤黄生品组相比,藤黄3种炮制品组对IEC-6细胞的增殖抑制作用(P＜0.01)和形态变差的趋势均显著性降低.结论:藤黄单次大剂量ig给药后大鼠的病理变化及IEC-6细胞的毒性作用结果表明,藤黄经炮制后毒性显著降低.     

基于红细胞免疫功能调节的石蒜碱体内抗肿瘤作用机制研究

目的 研究石蒜碱对肝癌H22细胞荷瘤小鼠红细胞膜结构功能的影响.方法 通过抑瘤率实验、生命延长率实验、流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率实验,验证石蒜碱的体内抗肿瘤活性;采用试剂盒测定红细胞膜总蛋白、胆固醇和唾液酸含量,考察石蒜碱对H22荷瘤小鼠红细胞膜主要组分的影响;采用荧光偏振法检测红细胞膜流动性,荧光染色法检测红细胞膜...     

理冲汤加减联合5-氟尿嘧啶对H22荷瘤小鼠移植瘤上皮间质转化的影响

目的:探讨理冲汤加减联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对H22荷瘤小鼠皮下移植瘤上皮间质转化(EMT)的影响。方法:构建小鼠移植性肝癌模型。成瘤后,将其随机分为空白组,5-FU组(5-FU,2. 5 mg·kg-1),理冲汤加减联合5-FU组(5-FU+理冲汤加减组),理冲汤加减组(理冲汤加减25 g·kg-1),每组10只。观察理冲汤加减对小鼠皮下移植瘤的作用及与5-FU合用的效果;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组瘤体中EMT相关基因上皮型钙黏蛋白(E-cadherin),神经型钙黏蛋白(N-cadherin),锌指转录因子Snail,Twist mRNA表达;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组瘤体内EMT相关蛋白E-cadherin,N-cadherin,Snail,波形蛋白(Vimentin)的表达。结果:5-FU组,5-FU+理冲汤加减组,理冲汤加减组的抑瘤率分别为59. 18%,84. 42%,10. 39%,均能抑制肝癌移植瘤的生长,且5-FU+理冲汤加减组抑瘤率显著高于5-FU组(P 0. 01)。胸腺指数、脾指数显示,5-FU+理冲汤加减组胸腺指数与脾指数均高于5-FU组(P 0. 05,P 0. 01)。PCR显示,与空白组比较,5-FU组,5-FU+理冲汤加减组E-cadherin的表达上调,N-cadherin,Snail,Twist的表达下调(P 0. 05,P 0. 01);与5-FU组比较,5-FU+理冲汤加减组E-cadherin的表达上调,N-cadherin,Snail,Twist的表达下调(P 0. 05,P 0. 01)。Western blot显示,与空白组比较,5-FU组,5-FU+理冲汤加减组,理冲汤加减组E-cadherin的表达上调,N-cadherin,Snail,Vimentin的表达下调(P 0. 05,P 0. 01);与5-FU组比较,5-FU+理冲汤加减组E-cadherin的表达上调,N-cadherin,Snail,Vimentin的表达下调(P 0. 05,P 0. 01)。结论:理冲汤加减与5-FU单独和联合使用均对肝癌小鼠移植瘤的生长有抑制作用,且两药合用能增强化疗效果,且一定程度上抑制了5-FU的毒性,其机制可能与对肝癌EMT的抑制有关。     

黄芪注射液对H22荷瘤小鼠瘤组织Bax 及Bcl-2蛋白表达的影响

目的:研究黄芪注射液对H22荷瘤小鼠瘤组织Bax及Bcl-2蛋白表达的影响。方法:建立H22荷瘤小鼠模型进行体内抗肿瘤试验,将50只荷瘤小鼠随机分为空白对照组(模型组)、环磷酰胺组(CTX组)、黄芪注射液(高、中、低剂量)组,连续ip给药10 d,观察肿瘤生长情况以及小鼠一般情况,绘制肿瘤生长曲线。10 d后处死小鼠,剥取瘤组织称重,计算抑瘤率;采用流式细胞术测定药物作用后肿瘤细胞凋亡率;免疫组化方法检测肿瘤组织Bax及Bcl-2的蛋白表达。结果:小鼠移植瘤H22试验结果显示,在128,,4 g.kg-1的剂量下黄芪注射液的抑瘤率分别为52.36%,33.68%,17.28%。流式细胞术及免疫组化结果表明黄芪注射液各剂量组均可明显增加肿瘤细胞凋亡率;增强Bax蛋白表达,降低Bcl-2蛋白表达,且Bax/Bcl-2明显增高(P<0.05)。结论:黄芪注射液通过促进Bax蛋白表达、抑制Bcl-2蛋白表达来诱导H22肿瘤细胞凋亡,进而发挥抑瘤效应。     

地鳖纤溶蛋白对荷S180和H22小鼠的抑瘤作用研究

目的 研究地鳖虫纤溶活性先导蛋白(EFP)对荷S180和H22小鼠肿瘤的抑制作用.方法 通过体外实验,构建荷瘤小鼠模型,药物实验分为阳性对照组(环磷酰胺),阴性对照组(生理盐水),药物高浓度组、中浓度组和低浓度组.实体瘤通过瘤重计算抑瘤率,腹水瘤通过细胞浓度计算抑瘤率.结果 EFP对S180腹水瘤有较好的抑制率, 药剂量为2.90mg/kg的抑制率为69.56%,明显高于环磷酰胺(20mg/kg)的51.75%的抑制率;EFP对S180实体瘤有较好抑制作用,药剂浓度为1.45 g/kg时,抑制率为37.48%,高于环磷酰胺(20 mg/kg)的35.59%的抑制率,并呈现一定的药物剂量依赖性;药剂浓度为0.73 mg/kg时,对H22实体瘤抑瘤率为41%,高于环磷酰胺(20 mg/kg)的37%的抑制率.结论 EFP对荷S180和H22小鼠肿瘤有较好的抑制作用.     

免疫印迹技术分析树舌多糖GF对H22肝癌移植瘤PTEN蛋白表达的影响

目的探明树舌多糖(GAPS)GF对H22肝癌移植瘤PTEN蛋白表达的影响。方法昆明种小鼠随机分为两组:肿瘤组和树舌多糖组,接种后各组肌肉注射给药,分别给与生理盐水和树舌多糖GF。连续10 d,于末次给药24 h,处死小鼠,剥离肿瘤组织。Western blot技术检测各组样品PTEN蛋白的表达量。结果肿瘤组检测结果为阴性,树舌多糖组检测结果为阳性。结论树舌多糖GF抗肿瘤的作用靶点之一可能为抑癌基因PTEN。     

白藜芦醇固体脂质纳米粒抑制小鼠移植性肿瘤H22的研究

目的:研究白藜芦醇固体脂质纳米粒(resveratrol-solid lipid nanopartieles,Res-SLN)对H22移植性肿瘤模型小鼠的肿瘤抑制作用.方法:将昆明种小鼠接种肝癌H22瘤株造成相应的移植性荷瘤小鼠模型后,随机分为荷瘤模型组、环磷酰胺(CTX)阳性药对照组(25 mg·kg-1),Res-SLN低、中、高(35,70,105 mg·kg-1)3个剂量组、白藜芦醇(resveratrol,Res)混悬液组(105 mg·kg-1)、空白辅料组,以实体瘤模型小鼠的瘤重、抑瘤率观察Res-SLN对小鼠移植性肿瘤H22的抑制作用;以胸腺指数、脾脏指数为指标观察Res-SLN对免疫器官的影响;以小鼠平均生存时间观察Res-SLN对腹水瘤模型小鼠的生命延长作用.结果:Res-SLN能有效地抑制实体瘤模型荷瘤小鼠体内肿瘤的生长,低、中、高3个剂量组的抑瘤率分别为61.95％,72.39％,85.52％;Res-SLN给药组小鼠胸腺指数和脾脏指数与荷瘤对照组相比,无显著性差异;Res-SLN中、高剂量组对腹水瘤肿瘤模型小鼠的生存时间具有延长作用,与荷瘤对照组相比具显著性差异.结论:Res-SLN对荷瘤小鼠肿瘤生长具有一定的抑制作用,抑制作用强于Res,并有剂量依赖性.     

在体皮肤微透析技术评价苦参碱传递体的透皮释药性能

目的 考察苦参碱传递体对大鼠经皮给药后皮肤局部药物质量浓度经时变化,评价其透皮释药性能。方法 大鼠腹部脱毛,以非封闭方式经皮给予苦参碱传递体混悬液,应用微透析采样技术,结合RP-HPLC法,测定皮肤透析液中的药物质量浓度;比较苦参碱传递体及其脂质体、水溶液（含0.8%去氧胆酸钠）经皮给药后大鼠皮肤透析液中药物质量浓度经时曲线的差异。结果 苦参碱传递体给药后透析液中药物质量浓度达峰时间（t_max）为（4.200±0.447）h,最大药物浓度（C_max）为（0.927±0.251）μg/mL,药时曲线下面积（AUC_0-8）为（5.033±1.526）μg?h?mL^?1。苦参碱传递体的C_max和AUC_0-8显著高于其脂质体和水溶液（含0.8%去氧胆酸钠）,而t_max较后两者显著减小（P＜0.05）。结论 在体皮肤微透析可用于苦参碱传递体的透皮释药性能评价;苦参碱传递体具有透皮快、渗透量高等特点。