重离子12 C诱发人淋巴细胞染色体畸变和微核的研究

目的 探讨不同LET重离子12C诱发人淋巴细胞的生物效应.方法 采集2名健康男性自愿献血者血样,用60Co γ射线及LET为29和148 keV/μm的12C重离子照射,剂量为0.5～5.0 Gy,剂量率为0.5 Gy/min.采用同时加秋水仙素和松胞素B的方法,检测了淋巴细胞染色体畸变双着丝粒和着丝粒环(双加环)及淋巴细胞微核.结果 29和148 keV/μm的重离子12C诱导染色体畸变和微核的剂量-效应关系分别为线性和线性平方模式.诱发的染色体畸变率随着LET的增高而增高;诱发的微核率剂量＜3.0 Gy,随着LET的增高而增高,剂量＞3.0 Gy微核率趋于饱和.148 keV/μm的12C离子诱导的染色体畸变双加环,随着培养时间的延长,从0.41 ～ 1.32增加到0.68 ～ 3.00.结论 重离子12C诱导的染色体畸变随着时间和LET的增高而增加,微核在一定剂量范围内随着LET的增高而增加,其生物效应比低LET辐射60Co γ射线强.     

慢性电离辐射对猕猴淋巴细胞及PHA激活淋巴细胞微核效应的比较研究

实验采用健康雄性猕猴,分成慢性照射和对照两组,每组5条.⁶⁰coγ线照射.平均日剂量率:50mGy/d,持续照射54天,总累积剂量为J2Gy.共分成O.1、0.25、O.5、1.O、1.5及2.0Gy六个累积剂量点,分别进行了淋巴细胞及PHA激活淋巴细胞微核率测定.结果显示,诱发上述二项指标明显增高的累积剂量分别为l及O.25Gy,且均与剂量呈线性正比关系.停照后动态观察表明,淋巴细胞,PHA激活淋巴细胞徽核率分别于停照后2及6个月恢复到照前水平.鉴于PHA激活淋巴细胞微核率灵敏度较高、停照后持续增高时间较长,因而更适于用来评价职业性放射线工作人员所受的慢性辐射损伤.     

重离子束12C6+照射人离体血建立淋巴细胞微核的剂量-效应曲线

目的　研究建立重离子束1 2 C6 + 照射人离体血诱发淋巴细胞微核的剂量 效应曲线。方法　用地面加速器产生的重离子1 2 C6 + (平均LET为 36 70keV μm) ,不同吸收剂量、不同吸收剂量率照射离体人血 ,用CB微核法观察双核淋巴细胞中的微核。结果　在 0～ 6Gy吸收剂量范围内 ,淋巴细胞微核率随吸收剂量的增加而增加 ,拟合的最佳方程为Y =6 6 5 0 9×D0 .85。结论　1 2 C6 + 照射人离体血诱发淋巴细胞微核在 0～ 6Gy吸收剂量范围内呈幂函数关系。     

外周血淋巴细胞微核测定作为估算辐射剂量的生物剂量计

用胞质分裂阻断微核法分析60Coγ射线和X射线照射人体外周血淋巴细胞后诱发的微核剂量效应关系,同时对不同个体微核的自发率进行检测,以阐明微核作为辐射生物剂量计的可行性.     

低剂量辐射诱导细胞遗传学适应性反应的某些规律

10mGyX射线可诱导人外周血淋巴细胞和家兔外周血淋巴细胞产生对相继较大剂量(1.5Gy)X射线诱发染色体畸变的抗性, 称之为适应性反应。在离体和整体条件下, 该反应广泛存在于体细胞和生殖细胞中, 其反应程度与低剂量辐射的剂量呈负相关, 即辑先照射的剂量愈低, 诱导的适应性反应愈明显。同时还发现该反应也受许多因素的影响, 如: 低剂量辐射的剂量、剂量率, 照射时间以及生物个体差异等因素。     

3-AB在人类Go期淋巴细胞中不影响X线诱发细胞遗传学损伤

目前,对人类Go期淋巴细胞辐照后,多聚(腺苷二磷酸核糖)多聚酶抑制剂,即3-氨基苯甲酰胺(3-aminobenzamide,3-AB)影响X线诱发染色体畸变存在两种相互矛盾的报道。Natarajan等(1982)用1或2GyX线照射未经刺激的淋巴细胞,并在PHA     

快中子与60Coγ射线诱发人外周血淋巴细胞的微核效应

为比较快中子与γ射线的辐射损伤效应及其修复过程,用胞质分裂阻断微核分析法,对照射人体外周血淋巴细胞诱发的微核剂量-效应关系进行了比较研究。     

鼻咽癌的放射敏感性预测初探

目的　探索原位缺口平移、早熟凝集染色体分析和胞质分裂阻断微核法等技术成为判断鼻咽癌放射敏感性预测指标的可能性。方法　以原位缺口平移法研究了鼻咽癌细胞株ＣＮＥ、ＣＮＥ－ ２Ｚ细胞对γ射线的放射效应;以早熟凝集染色体分析技术和胞质分裂阻断微核法研究了鼻咽癌活检组织的放射敏感性。结果　在０ ～８ Ｇｙ 之间,ＣＮＥ 及ＣＮＥ－ ２Ｚ 的脱氧三磷酸核苷（ｄＮＴＰ） 掺入率与照射剂量间有良好的剂量效应关系,来源于低分化肿瘤的ＣＮＥ－ ２Ｚ细胞株的放射敏感性高于ＣＮＥ;３２ 例鼻咽活检标本进行早熟凝集染色体分析,其早熟凝集染色体周期分布与鼻咽癌患者放疗疗效有明显关系,临床上对放疗呈高敏的患者,晚Ｇ１ 细胞比例显著升高;胞质分裂阻断微核法提示２０ 例患者照射后微核形成有显著个体差异,其中低反应者２ 例有复发倾向。结论　实验结果提示上述３ 项指标可望成为综合判断鼻咽癌放射敏感性的重要参数。     

不同剂量率γ射线照射诱发淋巴细胞早熟凝集染色体环产额的研究

目的 比较不同剂量率γ射线照射诱发的淋巴细胞早熟凝集染色体环(PCC-R)的产额,建立不同剂量率的人外周血早熟凝集染色体环与辐射剂量之间的剂量效应曲线。方法 取健康成年人外周血,分别用吸收剂量率为0.5和1.0Gy/min的 ⁶⁰Co γ 射线照射,吸收剂量为 0、 1、 2、 5、 10、 15、 20和25Gy。培养48h,终止培养前1h加入冈田酸(okadaic acid)诱导早熟凝集染色体,观察人外周血淋巴细胞PCC-R产额与照射剂量的关系。结果 在20 Gy剂量范围内,人外周血淋巴细胞PCC-R产额随着剂量的增加而增加。在25 Gy剂量范围内,在相同剂量情况下,吸收剂量率为1.0 Gy/min的PCC-R产额都要高于0.5 Gy/min的产额,且在20和25 Gy剂量点的差异有统计学意义。结论 PCC-R作为大剂量受照情况下的生物剂量指示剂,基于不同剂量率建立的剂量效应关系曲线所估算剂量的结果会有所不同。     

细胞遗传学指标在慢性放射损伤诊断中的意义

用染色体畸变估算全身一次比较均匀的Ｘ、γ射线和中子的过量照射时的生物剂量比较准确 ,对不均匀和局部照射可给出相当于均匀照射的等效剂量当量。淋巴细胞微核也已被用作估算受照射剂量的指标 ,并取得了较为满意的结果。但在慢性放射损伤时 ,染色体畸变和微核的变化特点及其在慢性放射病诊断中的作用 ,是值得探讨和深入研究的问题。在《外照射慢性放射病诊断标准及处理原则》(ＧＢ82 81 87) [1] 中将“外周血淋巴细胞染色体畸变率显著增加和 /或外周血淋巴细胞微核率显著增加” ,作为慢性放射病诊断的参考指标。到目前为止 ,还不能用染色…     

胞质分裂阻滞微核法对辐射事故受照射人员的生物剂量估算

目的 探讨胞质分裂阻滞微核(CBMN)分析在估算辐射事故受照射者的生物剂量中的应用价值.方法 2008年山西太原辐射事故发生后16 h收集5名受照射者(1、2、3、4和5号)的外周血及I号的骨髓,进行CBMN分析,以微核(MN)频率估算生物剂量.对较严重的受照射者(1号)结合体外"co 1射线大剂量照射实验获得的核分裂...     

甲状腺滤泡细胞对γ射线与质子照射反应的比较:1.DNA损伤、微核形成、细胞凋亡、细胞存活和细胞周期分布等的基本特征

目的 :研究不同质的辐射对甲状腺滤泡上皮细胞 DNA和染色体损伤、细胞杀死及细胞周期的影响。方法 :大鼠甲状腺细胞 FRTL - 5在 DMEM/ F12培养基中培养 ,以 6 0 Co源照射 0～ 12 Gy(剂量率 1.5 Gy/ min)和同步加速器产生的 2 5 0 Me V质子照射 (剂量率约 0 .7Gy/ min)。照射后不同时间收获 FRTL- 5细胞。用末端脱氧核苷酸转移酶介导的荧光素 (FITC)共轭溴脱氧尿苷 (Brd U)参入核酸的自由 3′端 ,以激光扫描细胞仪测量 DNA链的断裂 ;用胞质分裂阻断方法测定微核 ;以荧光素共轭 annexin V标记 ,用激光扫描细胞仪测定细胞凋亡 ;用…     

胞浆分裂阻滞微核法对山东"10·21"辐射事故病人受照射剂量的估算

目的 对山东"10·21"辐射事故中2例严重受照射者进行淋巴细胞微核(MN)检测,并估算受照射剂量.方法 用胞浆分裂阻滞微核(CBMN)法对2例患者(A和B)的外周血和骨髓样本分别进行MN检测.结果 2例患者的外周血培养均未见双核淋巴细胞.患者A的骨髓培养所获双核细胞极少,依据双核淋巴细胞多少粗估剂量＞20Gy.患者B的骨髓MN率为2.42个/细胞,剂量估计为8.7(8.0～9.4)Gy,与用染色体畸变分析、物理方法及ESR法所估算剂量接近,与临床表现基本一致.结论 MN法简便快速,结果准确,是除染色体畸变分析之外又一种可靠的生物剂量计.     

人工智能识别60Co γ射线照射诱导人外周血微核的剂量-效应曲线建立

目的 根据扫描显微镜搭配玻片扫描软件(Metafer 4),在松弛素B(CB)阻断微核法试验中识别和鉴定微核,建立⁶⁰Co γ射线照射剂量与人外周血淋巴细胞微核率的剂量-效应曲线。方法 采集4名健康人(2男2女)肘静脉血样品,用0、0.25、0.5、1、2、3、4和5 Gy ⁶⁰Co γ射线(剂量率0.74 Gy/min)离体照射,胞质分裂阻断微核法培养、收获和制备标本玻片,人工智能彩色识别分析系统分析并记录双核细胞和微核数。应用CABAS 软件拟合基于微核率的剂量-效应曲线。2份照射后的盲样进行生物剂量估算验证。结果 在0~5 Gy 剂量范围内,拟合的微核剂量-效应曲线符合二次多项式模型,回归方程为y=0.0321D²+0.0237D+0.0127(R²=0.998,D为剂量)。用拟合曲线对验证样本的剂量估算结果与实际照射剂量基本接近。结论 成功建立基于人工智能识别微核的剂量-效应曲线,为估算辐射生物剂量提供了可行方法。     

人淋巴细胞质分裂阻断微核法——活体年龄和低剂量X线效应

人淋巴细胞微核法虽然是快速简便的细胞遗传学方法,但它不能分辨所分析的细胞分裂与否。因为微核仅出现在诱发后经过一次分裂的细胞。胞质分裂阻断(Cytokinesis-block,CB)微核法能克服它的内在问题。该法用松胞素B(Cytochalasin-B)     

不同LET射线及其联合照射下淋巴母细胞微核率的剂量效应

目的 探讨在α粒子、γ射线以及联合照射下淋巴母细胞微核率的剂量效应.方法 以HMy2.CIR淋巴母细胞为对象,分别以不同剂量的α粒子和γ射线进行照射,以及先以0.025 ～0.500 Gy的α粒子照射后即刻以不同剂量的γ射线进行照射,用胞质分裂阻断法检测淋巴细胞微核,建立不同照射条件下淋巴母细胞微核率的剂量-效应曲线.结果 对于γ射线照射,微核率剂量-效应符合线性平方模型Y=c+αD+ βD2.对于α粒子照射,当照射剂量＜0.250 Gy时,细胞微核率随剂量的增加呈线性增加,当其剂量进一步增加时,微核率剂量-效应曲线呈现下弓型,可以采用反映辐射旁效应的BaD模型Y=c +αD +σ[1 -exp(-δD)]exp(-βD)进行很好地拟合.对于联合照射,当α粒子剂量较低时,微核率的剂量效应与γ射线照射时的相似;但当α粒子剂量较大时,微核率的剂量-效应更接近于α粒子照射.同时,0.2、0.5 Gyα粒子联合γ射线照射引起的微核率显著高于它们单独照射时的微核率之和(=5.22 ～ 11.86,P＜0.05).结论 α粒子照射具有与γ射线不同的辐射损伤规律,辐射旁效应可能在其中发挥了重要作用,而联合照射则可以引起细胞损伤的协同增强.     

用染色体特异的DNA文库进行原位杂交检测X线诱发的人外周血淋巴细胞中染色体的易位频率

研究采用6条不同染色体特异的DNA文库对X射线诱发人外周血淋巴细胞染色体易位频率进行了检测.血样品来自两名健康的女献血员,分成数份后,分别用15kV-6mA ENKAF X射线机(剂量率3Gy/min)进行不同剂量的照射.37℃常规培养50小时后,制备染色体标本.用于检测双着丝粒染色体标本片以Giemsa染色,其余的置于-20℃中干     

氚相对生物效应的实验研究及遗传危害的估计

本研究采用指数下降剂量和相对恒定剂量照射小鼠,以显性致死突变、显性骨胳突变、精母细胞染色体畸变率,初级卵母细胞和精原细胞存活率,外周血淋巴细胞和骨髓有核细胞微核细胞率为生物终点,并⁶⁰Coy射线作为参考辐射,研究了氚的相对生物效应(RBE)值.结果表明:在剂量率为0.02～0.06Gy/d,连续照射10天的情况下,观察到氚的平均RBE值约为3.6～2.7之间,以外周血琳巴细胞微核细胞率为终点对RBE值最高,而初级卵母细胞存活率为终点时,RBE值最低,如果考虑到氚的遗传危害,如以显性骨胳突变为终点,则RBE值约大于3.     

哈尔滨1.2860Co源放射事故受照者的生物剂量估算

淋巴细胞染色体畸变分析是估算受照剂量的一种可靠的生物学方法。胞质分裂阻断微核法被证明是继染色体畸变分析后又一较为有价值的估算受照剂量的生物学方法。作者用本实验室建立的染色体畸变和微核的剂量效应曲线,对１９９８年１月２８日哈尔滨６０Ｃｏ源放射事故受照者所受剂量进行了估算,并用双着丝粒加环的泊松分布ｕ检验,判断是否为不均匀照射。现将结果报道如下。　　一、材料和方法１－患者受照情况：１９９８年１月２８日哈尔滨市某公司工人,男,４０岁,因排除设备故障,误受６０Ｃｏγ源全身照射（源活度为１－１１×１０１６…     

低剂量照射TK6和U937细胞的效应:诱导p53及其对细胞周期延迟和适应性反应的作用

目的 :研究小剂量辐射对 TK6 (含有野生型 p5 3的淋巴母细胞 )和 U937(p5 3突变的单核粒细胞白血病细胞 )细胞周期的影响和诱导对随后大剂量的适应性反应。方法 :TK6和 U 937细胞系在 RPMI 16 40培养液中悬浮培养。所有实验接种密度为 2× 10 5 / ml的细胞悬液 ,在实验前 2 0 h照射 ,用剂量率为 0 .75和 0 .88Gy min- 1 的 6 0 Coγ射线 ,第一次照射诱导剂量 ,随后在不同时间给与攻击剂量。细胞周期分布和周期素用双色流式细胞仪测定。用 Western-blot方法测量 p5 3和 p2 1。用胞质分裂阻滞技术测定微核。按核质破碎和浓缩等核形态学…