脐带间充质干细胞促进创面愈合的实验研究

目的探究脐带间充质干细胞促进创面愈合的实验价值,为临床应用提供重要参考依据。方法选取30例重度烧伤的大鼠为实验对象,随机分为观察组（从正常足月的新生儿脐带中分离培养脐带间充质干细胞（UC-MSCs）进行移植）和对照组（滴入PRMI 1640培养液）,对比观察两组大鼠的创面愈合情况。结果观察组大鼠的创面愈合时间明显短于对照组（P〈0.05）,且观察组大鼠术后创面愈合率明显高于对照组（P〈0.05）。结论纯化的UC-MSCs应用于创面移植,可有效促进创面新愈细胞的修复与重建,缩短创面愈合时间,提高创面愈合率,改善创面的愈合效果。     

脐带间充质干细胞对重度糖尿病足溃疡创面愈合的促进作用

目的 探讨脐带间充质干细胞(UCMSCs)对重度糖尿病足溃疡(DFU)患者创面愈合的改善作用及其对肝肾功能的影响.方法 选择2019年6月于新乡市第二人民医院伤口治疗科接受常规治疗的1例女性DFU患者为研究对象,入院时患者创面宽度约为2 cm,长度8 cm,第1跖骨处向内连接,中间约有0.5 cm距离,正常组织暴露约有...     

二硫代氨基甲酸吡咯烷在重症胰腺炎肺损伤中的作用

目的:观察二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)对重症胰腺炎(SAP)大鼠肺损伤的作用并探讨其机制.方法:Wistar大鼠40只,逆行胆胰管注射5%牛磺胆酸钠制备SAP模型.观察血清淀粉酶、动脉血氧分压(PaO2)、肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、支气管肺泡灌洗液(BALF)白蛋白含量;胰腺和肺组织病理变化及核因子-κB(NF-κB)和诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)在肺组织中的表达.结果:PDTC组较SAP组血清淀粉酶显著下降,PaO2明显升高,胰腺、肺组织病理损伤减轻,BALF白蛋白含量[PDTC组(17.28±2.55)mg/ml,(16.53±3.08)mg/ml;SAP组(23.56±0.94)mg/ml]和MPO活性[PDTC组(9.18±1.70)U/g,(8.69±2.06)U/g;SAP组(13.29±3.36)U/g]明显下降,同时肺组织NF-κB和iNOS表达下调,P均＜0.05.结论:PDTC对SAP大鼠肺损伤有一定的治疗作用,其机制与其抑制NF-κB活化、抑制中性粒细胞等多种炎性细胞的活化和调控iNOS基因的表达进而抑制一氧化氮的过量生成有关.     

二硫代氨基甲酸吡咯烷对绿脓杆菌性角膜炎的抗炎作用

目的：建立大鼠绿脓杆菌性角膜炎模型,探讨二硫代氨基甲酸吡咯烷（pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC）对绿脓杆菌脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导产生的大鼠角膜炎模型的抗炎作用。方法：建立角膜炎动物模型,模型制作前30min于大鼠球结膜下分别注射生理盐水（炎症组）和PDTC（治疗组）,模型制作后1、3、6、12h观察大鼠表现,角膜的组织学改变;免疫组化法检测核因子．KB（nuclearfactor-κB,NF-κB）的活化情况结果：LPS刺激后大鼠角膜组织中NF-κB早期活化。治疗组大鼠角膜中的NF-κB p65核染色阳性细胞明显少于炎症组;鼠眼表现和角膜组织学改变较炎症组改善显著。结论：成功建立了绿脓杆菌性角膜炎动物模型。NF-κB活化在绿脓杆菌性角膜炎的发病中起重要作用,PDTC可有效减轻角膜炎症。     

二硫代氨基甲酸吡咯烷预防腹腔粘连的实验研究

目的:探讨核因子- k B抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)预防术后腹腔粘连的作用。方法:将32只SD大鼠随机分成模型组及PDTC组。于术后第7天处死,观察各组腹腔粘连的情况。结果:模型组粘连广泛致密,PDTC组粘连轻微,模型组粘连程度分级评定明显重于PDTC组(P<0 .0 1)。结论:核因子- k B抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)可明显减轻腹腔粘连,对腹腔粘连有预防作用。     

二硫代氨基甲酸吡咯烷预防腹腔粘连及其机制探讨

目的:探讨腹腔内注射核因子κB(NF-κB)抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)对腹腔粘连的预防作用及其作用机制.方法:健康成年SD雄性大鼠96只,随机分成对照组、盲肠型肠粘连模型组(模型组)及PDTC 组(术前1 h腹腔注射PDTC)(n=32).各组大鼠随机分成4个亚组,每组8只,分别于术后第1、3、5、7天开腹观察腹腔粘连情况,进行粘连程度分级评定;同期抽取大鼠下腔静脉血,测定血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的含量.结果:腹腔粘连程度分级评定,PDTC组和模型组分别为(1.94±1.16)、 (2.63±1.16),明显高于对照组(0.22±0.42,P<0.01);与模型组相比,PDTC组腹腔粘连程度显著减轻(P<0.05).与模型组相比,PDTC组血清IL-6、TNF-α含量显著降低(P<0.05, P<0.01);对照组与PDTC组无显著差异.结论:腹腔粘连早期,细胞因子TNF-α、IL-6明显升高;PDTC可通过降低血清TNF-α、IL-6的含量来预防腹腔粘连.     

吡咯烷二硫氨基甲酸对小鼠大剂量顺铂肾毒性损伤的防治作用

[目的]探讨抗氧化剂吡咯烷二硫氨基甲酸(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)对大剂量顺铂(cisplatin,DDP)所致肾毒性损伤的防治作用.[方法]昆明种小鼠100只,雌雄各半,依体重随机分为DDP组,DDP+PDTC组,生理盐水(NS)对照组.DDP 12 mg/kg单次腹腔内注射,PDTC 50 mg/kg每日皮下注射1次,连用3 d,等量NS对照.每组取10只小鼠,观察并记录其用药后的反应、体重变化及存活时间;分别取对照组小鼠和DDP用药后24、48、72 h的DDP组和DDP+PDTC组小鼠各10只,内眦静脉取血检测肾脏功能,然后剖腹取两侧肾脏,称重并计算肾系数,统计学分析. [结果]DDP用药后24 h,DDP用药组小鼠体重下降、肾系数增高;用药后48 h,小鼠血尿素氮、肌酐含量明显升高;用药72 h 66%小鼠死亡,与对照组小鼠比较差异具有显著性意义(P<0.01).PDTC可明显减轻DDP所致小鼠的体重下降,并能有效预防DDP用药后小鼠血尿素氮和肌酐的升高,明显提高小鼠的生存率,与DDP用药组小鼠比较差异具有显著性意义(P<0.01).[结论]PDTC可改善小鼠DDP用药的毒副作用,预防大剂量DDP所致的肾损伤.     

骨髓间充质干细胞促进大鼠皮肤创面愈合的作用及机制研究

目的 探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对大鼠皮肤创面的促愈作用及机制,为临床皮肤损伤修复提供新的治疗方法.方法 建立大鼠背部皮肤全层切割伤模型,将大鼠分为2组:空白对照组,MSCs处理组,分别于伤后3、6、9、12 d采用大体观察,常规组织学检查观察2组大鼠背部皮肤伤口愈合状况及RT-PCR观察转化生长因子(TGF-β1)、表皮生长因子(EGF)mRNA在愈合中的变化特点.结果 MSCs处理组大鼠皮肤愈合快,愈合指数高,创伤后第3天MSCs处理组大鼠皮肤TGF-β1上调明显,第6天EGF上调明显.结论 MSCs能促进大鼠皮肤创面愈合,其机制可能与其引起各种生长因子的合成和分泌有关.     

二硫代氨基甲酸吡咯烷对兔肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的 探讨二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)对体外培养的兔肺动脉平滑肌细胞(RPASMCs)增殖的影响及其作用机制.方法 体外培养RPASMCs,经不同浓度的PDTC作用不同时间后,应用MTT法观察细胞增殖情况;流式细胞仪分析细胞周期;RT-PCR法检测RPASMCs细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)mRNA表达水平.结果 PDTC能显著抑制10%FBS刺激下的RPASMCs生长.呈浓度、时间依赖性;细胞周期分析显示,PDTC作用24 h后,RPASMCs生长周期受到明显阻滞;RT-PCR检测显示,PDTC可呈浓度依赖性地抑制RPASMCs Cyclin D1 mRNA的表达.结论 PDTC能明显抑制血清诱导的RPASMCs增殖以及阻滞细胞周期进程,而下调细胞周期蛋白Cyclin D1 mRNA表达可能是其机制之一.     

人脐带间充质干细胞对小鼠皮肤创面愈合及VEGF表达的影响

目的 研究人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)对小鼠全层皮肤切除创面愈合及血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响.方法 采用组织块贴壁法分离培养hUC-MSCs,流式细胞术检测细胞免疫表型,并做向成骨、成脂细胞方向分化.48只雄性BALB/c小鼠采用完全随机分组方法分为hUC-MSCs组和PBS组,每组24只,在其背部形成一全层皮肤缺损创面模型,分别于创周注射hUC-MSCs悬液和PBS液.于3、7、14 d观察创面愈合情况,HE染色观察病理学改变,免疫组织化学及Western blot检测VEGF蛋白的表达.结果 流式细胞术检测显示所培养的细胞为hUC-MSCs,体外诱导其能向成骨、成脂细胞方向分化.hUC-MSCs组创面愈合率在各时间点均较PBS组显著增高(P＜0.05).HE染色显示hUC-MSCs组创面愈合质量优于PBS组.免疫组化显示hUC-MSCs组VEGF在3d时表达最多,7、14 d逐渐减少,但均较PBS组增高.Western blot结果显示hUC-MSCs组3、7、14 d创面VEGF蛋白表达显著高于PBS组(P＜0.05).结论 hUC-MSCs可增强皮肤创面VEGF的表达,促进皮肤创面的修复.     

吡咯烷二硫氨基甲酸对人肺腺癌A549细胞的生长抑制作用

目的:探讨NF-κB抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)对人肺腺癌A549细胞的生长抑制作用及可能机制。方法:不同浓度PDTC(25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)干预A549细胞24h、48h、72h后,MTT法检测细胞生长抑制率,Westernblot和免疫细胞化学法分别检测PDTC干预48h后A549细胞凋亡抑制基因bcl-2和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况。结果:随着PDTC干预浓度的增大和时间延长,A549细胞生长抑制率增加(P<0.05、0.01);PDTC干预后Bcl-2及PCNA蛋白表达均下降,呈剂量依赖性(r=-0.980,P<0.01;r=-0.977,P<0.01)。结论:PDTC可抑制人肺腺癌A549细胞生长,其机制可能与Bcl-2表达下调及抑制细胞增殖有关。     

吡咯烷二硫代氨基甲酸盐对喉癌Hep-2细胞增殖和凋亡的影响

目的研究吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对喉癌Hep-2细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养Hep-2细胞,细胞分为3个组:对照组、实验分为50、100μmol/L组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验检测不同浓度PDTC对Hep-2细胞生长的抑制作用;流式细胞术检测PDTC对Hep-2细胞凋亡的影响;实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测PDTC对Hep-2细胞Bcl-xL和XIAP的mRNA表达的影响;蛋白印迹(Western-blot法)检测p-IκB、Bcl-xL及XIAP的蛋白表达及活化。结果 PDTC对50μmol/L组和100μmol/L组的Hep-2细胞生长抑制与对照组比较,差异有统计学意义,PDTC的浓度越大,抑制效果越明显(P<0.05)。Hep-2细胞经PDTC处理24h后,50μmol/L组和100μmol/L组细胞凋亡率分别为(25.1±2.18)%和(35.4±2.62)%,与对照组(3.12±1.07)%比较,差异有统计学意义。PDTC能导致Hep-2细胞生长抑制和凋亡增加且呈量效关系。结论 PDTC能够通过阻断Hep-2细胞NF-κB的活化,降低与抗凋亡相关基因Bcl-xL及XIAP的表达,抑制Hep-2细胞增殖并促进凋亡。     

肌腱干细胞与骨髓间充质干细胞促进髌腱愈合的对比研究

目的观察肌腱干细胞(TDSC)和骨髓间充质干细胞(BMSC)对大鼠缺损髌腱的修复作用。方法从SD大鼠的髌腱及骨髓组织中,分离出TDSC和BMSC并培养,分别联合纤维蛋白胶移植到大鼠髌腱缺损模型中。60只SD大鼠分为以下三组:TDSC组采用TDSC＋纤维蛋白胶;BMSC组采用BMSC+纤维蛋白胶;对照组采用纤维蛋白胶。术后1、2、4、6、8周检测移植物的大体外观形态、组织学变化及生物力学指标。结果术后8周TDSC组、BMSC组髌腱缺损基本消失,对照组仍可见髌腱缺损边界。术后8周TDSC组、BMSC组均可见类似肌腱样组织;对照组见肉芽组织增生,细胞排列紊乱,组织杂乱无序。随着时间增长各组的最大应力、最大应力百分比和弹性模量、弹性模量百分比均增加(均 P<0.05);在各个时间点,TDSC组、BMSC组的最大应力和弹性模量均高于对照组(均 P<0.05)。在2周时,TDSC组的最大应力百分比和弹性模量百分比均高于对照组(均 P<0.05);TDSC组、BMSC组在4、6、8周时最大应力百分比和弹性模量百分比均高于对照组(均 P<0.05),TDSC组与BMSC组差异无统计学意义( P>0.05)。8周时,TDSC组与BMSC组的弹性模量百分比差异有统计学意义( P<0.05)。 结论同种异体TDSC联合纤维蛋白胶可促进肌腱早期愈合、改善肌腱的生物力学特性,并且其弹性模量优于BMSC联合纤维蛋白胶,提示TDSC能更好地促进肌腱损伤的早期修复。     

吡咯烷二硫代氨基甲酸盐对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用及机制

目的 研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)所致急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的病理过程,探讨吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidine dithiocarbamates,PDTC)对LPS所致Au的保护作用及机制.方法 96只SD雄性大鼠分为对照组、模型组,PDTC预防组.静脉注射LPS(6 mg/kg)复制ALI动物模型,分别于注射后2、4、8、12 h活杀.PDTC预防组在注射LPS前30 min予以PDTC(120 mg/kg)腹腔注射.测定肺湿/干质量比(W/D),石蜡包埋切片经HE染色行肺组织病理评分,TUNEL法测肺泡巨噬细胞(alveolar macrophages,AM)凋亡率,免疫组化法检测核因子-κBp65(nuclear factor-κBpp65,NF-κBp65)表达,RT-PCR法检测AM的sPLA_2ⅡA、Bcl-2、Bax基因的表达.结果 与对照组比较,模型组肺W/D、肺组织病理评分、AM的NF-κBp65表达及凋亡、AM的sPLA_2 IIA基阙表达增加(P<0.05),AM Bcl-2、Bax基因的表达下降(P<0.05).与模型组比较,PDTC预防组上述改变得以逆转,肺损伤程度明显减轻(P<0.05).结论 预防性予以PDTC可抑制AM NF-κB活化,抑制sPLA_2ⅡA基因表达,促进Bcl-2基因表达,抑制AM凋亡,对LPS所致的ALI有一定的保护作用.     

脂肪干细胞调节创面炎症反应并促进创面愈合

目的利用脂肪组织来源的干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)促进创面愈合并初步探讨其机制。方法采用胶原酶消化GFP转基因小鼠(GFP-C57BL)腹股沟处脂肪组织,获得ADSCs,并在体外证明其具有成骨和成脂的多向分化能力。14只C57BL小鼠随机分为两组并制作创面,实验组注射PBS缓冲液悬浮的ADSCs,对照组注射相同体积的PBS缓冲液。观察并分析创面愈合情况,通过荧光显微镜观察移植细胞的存活情况,利用real-time PCR检测创面组织中促炎因子白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(TCP-1)以及抗炎因子白细胞介素-10(IL-10)的表达。结果分离的细胞具有较强的增殖能力,并具有多向分化潜能。同种异体移植ADSCs可以显著促进创面的愈合速度。移植两周后,荧光显微镜观察创面区域有少量ADSCs存活。与对照组相比,实验组小鼠的创面组织中促炎因子IL-1、IL-6和TCP-1表达下降,抗炎因子IL-10表达上升。结论通过同种异体局部注射ADSCs可以显著促进皮肤创面的愈合,其机制可能与AD-SCs降低了创面局部的炎症反应相关。     

NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸对顺铂肾毒性的影响

[目的]观察NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)对顺铂毒性的影响.[方法]SD大鼠40只,随机分为4组,对照组和PDTC组各10只连续用药13 d,于第14天处死;顺铂组和PDTC-顺铂联合用药组各10只连续给药5 d后处死;测定体重和肾重、血肌酐、血...     

吡咯烷二硫代氨基甲酸铵的定性与定量分析

目的建立抗结核病新药吡咯烷二硫代氨基甲酸铵（pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC）的定性鉴别与定量分析方法。方法以化学法、紫外光谱（UV）法、红外光谱（IR）法和高效液相色谱（HPLC）法结合对照品进行定性鉴别,采用HPLC法测定PDTC合成产品的质量分数。结果 PDTC水溶液有特征的硫取代显色反应。PDTC 50%（体积分数）甲醇溶液在255、278 nm波长处有最大吸收,在225 nm波长处有最小吸收。PDTC在3 250、2 500 cm-1间出现VSH较强的宽峰,在1 716 cm-1附近为VCS较弱的宽峰。以PDTC对照品为对照,进行PDTC合成产品定量分析,在25.75-206.00μg/mL范围内线性关系良好（r=0.999 8）,低、中、高3个水平的平均加样回收率分别为100.09、100.06%、100.10%,RSD分别为0.59%、1.47%、0.58%（n=3）。结论建立的定性鉴别和定量分析方法准确、可靠、重复性好,可用于PDTC合成产品的质量控制。     

生长激素促进糖尿病创面愈合的研究进展

糖尿病创面是目前国内外临床治疗复杂难愈型创面的难题之一.由于糖尿病所带来的长期高血糖对全身各个脏器的持续损害,造成大小血管、神经发生病变,同时会造成创面持久不退的慢性炎性反应.无论是对于糖尿病所致的溃疡,还是各种原因所造成的创面,治疗起来都十分棘手.生长激素不仅具有促进生长,调节蛋白质、脂肪、葡萄糖氧化代谢等生理作用,...     

吡咯烷二硫代氨基甲酸对食管癌细胞系EC1增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的:观察吡咯烷二硫代氨基甲酸(PDTC)对食管癌细胞系EC1增殖、凋亡和细胞周期的影响.方法:用不同剂量PDTC(1、5、10、50、100 μmol/L)处理EC1细胞24、48和72 h后,MTT法观察细胞增殖情况,计算细胞增殖抑制率.用不同剂量PDTC(0、5、10、50、100 μmol/L)处理EC1细胞48 h后,测定细胞凋亡率和细胞周期.结果:PDTC可剂量依赖性和时间依赖性地抑制EC1细胞的增殖(F剂量=8.950,P=0.005;F时间=30.718,P<0.001;F交互=60.504,P<0.001).不同剂量PDTC作用48 h后,随着PDTC剂量的增加,EC1细胞凋亡率增加(F=7.020,P=0.001),G0/G1期细胞比例降低(F=771.064,P<0.001),G2/M和S期细胞比例增加(F=963.002、309.332,P均<0.001).结论:PDTC可以抑制食管癌细胞系EC1的增殖,诱导其发生凋亡,并将其阻滞在S期.