健脾清化方对肾纤维化大鼠肾功能、蛋白尿及肾组织Col-IV表达的影响

目的 探讨健脾清化方对肾切除联合阿霉素诱导局灶节段性肾小球硬化模型大鼠肾功能、蛋白尿及肾组织IV型胶原（Col-IV）表达的影响。方法 建立单侧肾切除合并阿霉素3 mg/kg尾静脉2次注射大鼠肾硬化模型,分别予以健脾清化方、健脾清化方拆方（益气健脾方及清热化湿方）、尿毒清颗粒干预8周。测定用药后各组肾功能及24 h尿蛋白定量,实时荧光定量PCR法测定肾组织Col-IV表达水平。结果 模型组与空白组及假手术组相比,血清肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量及肾组织Col-IV表达水平均明显升高（P<0.01）。与模型组相比,健脾清化方组血清肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量及肾组织Col-IV表达水平均明显下降（P<0.01）,清热化湿方组血清肌酐及肾组织Col-IV表达水平明显下降（P<0.01）,尿素氮降低（P<0.05）,尿毒清组尿素氮及肾组织Col-IV表达水平明显下降（P<0.01）,血清肌酐、24 h尿蛋白定量降低（P<0.05）,益气健脾方组各项指标均无明显下降（P>0.05）。结论 健脾清化方能下调肾组织IV型胶原的表达,从而抑制细胞外基质的积聚和肾小球系膜增殖,发挥抗肾纤维化和保护残存肾功能的效用。其拆方清热化湿方在改善肾功能和肾纤维化方面的疗效与健脾清化方接近,提示清热化湿类药物是健脾清化方抗肾纤维化的关键。     

健脾益肾方对5/6肾切除大鼠肾组织TGF-β1表达的影响

目的:探讨健脾益肾方治疗慢性肾功能衰竭(CRF)及其抗肾纤维化的作用机制,为临床应用提供实验依据.方法:将70只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(假手术组)10只、模型组、低剂量治疗组、高剂量治疗组各20只.除假手术组外其余各组均行5/6肾切除手术制作CRF动物模型.于造模第二次手术后1 w开始干预,干预8 w后取血清及肾组织标本,全自动生化分析仪检测血清尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr);免疫组织化学方法检测肾组织TGF-β1的表达.结果:模型组、低剂量治疗组、高剂量治疗组大鼠血清BUN、Scr、肾脏组织TGF-β1与假手术组比较,有显著性差异(P＜0.01);模型组血清BUN、Scr、肾脏组织TGF-β1与高、低剂量治疗组比较,有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01).结论:健脾益肾方是治疗CRF的有效方剂,其机理可能与抑制大鼠肾组织内TGF-β1等细胞因子的表达,从而抑制参与肾纤维化的细胞增殖和转分化,延缓肾纤维化的进展,达到治疗和延缓CRF进展的目的.     

健脾益肾方对5／6肾切除大鼠肾组织TGF-β1 mRNA表达的影响

目的:探讨健脾益肾方治疗慢性肾衰竭(CRF)及其抗肾纤维化的作用机制.方法:将Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组(N组),模型组(M组),健脾益肾方低剂量治疗组(L组)、高剂量治疗组(H组),除N组外均行5/6肾切除手术复制CRF动物模型.治疗组给予健脾益肾方灌胃.于第8周后用全自动生化分析仪检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(SCr);RT-PCR法检测肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA的表达.结果:各组大鼠肾脏均有TGF-β1 mRNA表达,N组有较弱表达,M组、L组大鼠肾组织表达较N组显著增加(P＜0.01),H组表达较N组增加,但差异无显著性(P＞0.05);L组及H组表达较M组明显减少(P＜0.01);H组表达较L组均显著减少(P＜0.01).结论:健脾益肾方可能通过抑制大鼠肾组织TGF-β1的表达,延缓肾纤维化的进展,达到治疗和延缓CRF进展的目的.     

健脾清化方对2型糖尿病大鼠肝脏糖异生的影响

目的:探讨健脾清化方对2型糖尿病大鼠肝脏糖异生的影响。方法:取Wistar大鼠,除正常组外,采用高脂喂养联合小剂量链脲左菌素(STZ)腹腔注射诱导2型糖尿病大鼠模型,成模后随机分为模型组、健脾清化方组。健脾清化方组予以含生药15 g·kg~(-1)·d~(-1)的混悬液灌胃,正常组和模型组用同体积双蒸水灌胃。连续灌胃4周后观察各组大鼠葡萄糖耐量和丙酮酸耐量,Western blot法测大鼠肝脏糖异生相关蛋白pFOXO1、FOXO1、PEPCK、G6Pase蛋白的表达,RT-PCR法测大鼠肝脏PEPCK、G6Pase的mRNA表达。结果:腹腔葡萄糖耐量和丙酮酸耐量试验结果显示,与正常组比较,模型组各时间点的血糖和曲线下面积(AUC)显著增加(P0.01);与模型组比较,健脾清化方能降低各时间点的血糖和AUC(P0.05)。肝糖异生相关蛋白及mRNA结果显示,与正常组比较,模型组大鼠肝脏pFOXO1/FOXO1蛋白表达的比值显著降低(P0.01),G6Pase、PEPCK蛋白及mRNA表达显著增加(P0.01);与模型组比较,健脾清化方组大鼠肝脏pFOXO1/FOXO1蛋白表达的比值显著增加(P0.01),G6Pase、PEPCK蛋白及mRNA表达降低(P0.05)。结论:2型糖尿病大鼠肝脏糖异生增加;健脾清化方可通过影响2型糖尿病大鼠肝脏糖异生相关酶的表达,减少其肝脏糖异生,从而降低血糖。     

健脾清化方对糖尿病模型大鼠血糖波动的影响

目的:观察中药复方健脾清化方对糖尿病模型大鼠血糖波动幅度和糖脂代谢的影响。方法:实验分为正常组、模型组和健脾清化方组,除正常组外均采用小剂量链脲佐菌素联合高脂高糖饲料诱导建立Wistar大鼠糖尿病模型。健脾清化方组以13 g·kg-1·d-1的剂量灌胃,正常组和模型组分别给予同体积的蒸馏水灌胃,共干预4周。采用葡萄糖氧化酶方法检测大鼠血清葡萄糖,快速血糖仪测定大鼠尾尖血糖;通过公式计算血糖波动相关指数,包括平均血糖波动幅度(mean amplitude of glycemic excursions,MAGE)、最大血糖波动幅度(largest amplitude of glycemic excursions,LAGE)及M值;腹腔糖耐量检测糖代谢,包括腹腔糖耐量(IPGTT)、曲线下面积(AUCg)、平均血糖;ELISA法测定脂代谢,包括总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、三酰甘油(TG)。结果:与模型组比较,健脾清化方能明显降低糖尿病大鼠IPGTT各时间点血糖、平均血糖和AUCg(P0.05,P0.01);健脾清化方能有效改善糖尿病大鼠血糖波动,降低MAGE、M值(P0.05,P0.01);健脾清化方能有效改善脂代谢,降低糖尿病大鼠的TG水平(P0.05)。结论:健脾清化方能有效改善糖尿病模型大鼠的血糖波动,并对糖尿病模型大鼠的糖脂代谢也具有一定的改善作用。     

健脾清化方对不同蛋白饲料喂养慢性肾衰竭大鼠肾功能及血脂的影响

目的：观察健脾清化方对不同蛋白饲料喂养慢性肾衰竭大鼠肾功能及血脂的影响。方法：以5/6肾切除法及不同蛋白饲料喂养,建立3种不同蛋白饲料喂养的慢性肾衰竭大鼠模型,以蒸馏水、健脾清化方和蒙诺灌胃干预8周。干预结束后,检测不同组别大鼠24h尿蛋白定量及血尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）、胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）和低密度脂蛋白（LDL）的水平。结果：各模型组大鼠24h尿蛋白定量及BUN、Scr、TC、TG、HDL和LDL水平均较正常组明显升高;应用高脂饲料两种模型组的TC、TG、HDL及LDL明显高于正常饲料模型组。健脾清化方能显著降低各模型24h尿蛋白定量和高脂饲料两种模型Scr、TG、TC、LDL。结论：高脂饮食可以加重慢性肾衰竭大鼠的脂质代谢异常;健脾清化方可减少慢性肾衰竭高脂血症大鼠24h尿蛋白定量,改善其肾功能,其作用机制可能与改善脂质代谢紊乱相关。     

健脾清化方对阿霉素肾病大鼠免疫炎症损伤的作用机制

目的 从细胞免疫介导的炎症损伤角度,探讨健脾清化方对阿霉素致局灶节段硬化（focal segmental glomurular sclerosis,FSGS）模型大鼠FSGS的影响。方法 左侧肾切除加尾静脉注射阿霉素致大鼠肾脏FSGS,观察健脾清化方对模型大鼠脾淋巴细胞CD4+/CD8+比值,肾小管间质纤维连接蛋白（FN）mRNA、Ⅲ型胶原（Col Ⅲ）mRNA、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）6表达的影响。结果 健脾清化方能明显降低模型鼠脾淋巴细胞CD4+/CD8+比值,肾小管间质FN mRNA、Col Ⅲ mRNA、TNF-α、IL6水平。结论 健脾清化方对阿霉素肾病模型大鼠肾脏FSGS有一定的改善作用,该机制可能与健脾清化方抑制细胞免疫介导的炎症损伤有关。     

健脾清化方对肾衰大鼠磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶介导的炎症因子的调控作用

目的：研究中药复方健脾清化方对慢性肾衰肾纤维化大鼠磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（p-p38MAPK）介导的炎症因子的调控作用,探讨其改善肾纤维化可能的作用机制。方法：用5/6肾切除（Platt法）建立慢性肾衰大鼠模型,分为假手术组、模型组、健脾清化方组和氯沙坦钾片（科素亚）组。治疗60 d后用免疫组化法测定各组肾组织TNF-α的表达,用ELISA法测定IL-10水平,用蛋白免疫印迹（Western blotting,WB）法检测p-p38MAPK蛋白表达。结果：与假手术组比较,各组大鼠肾组织TNF-α、IL-10及p-p38MAPK蛋白表达均明显增加（P〈0.05）;与模型组比较,健脾清化方组和科素亚组肾组织TNF-α、IL-10及p-p38MAPK蛋白表达均明显下降（P〈0.05）。结论：健脾清化方可通过有效阻止p38MAPK信号通路的活化,继而动态调控致炎因子TNF-α与抑炎因子IL-10的表达,从而改善慢性肾衰炎症状态,延缓肾衰进程。     

山葡萄多酚对高血压大鼠NADPH氧化酶活性的影响

目的探讨山葡萄多酚对由血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)引起的高血压大鼠的治疗作用,并探讨其抗高血压的机制。方法40只Wistar大鼠随机分成4组,即阴性对照组、试验对照组、山葡萄多酚治疗组、NADPH氧化酶抑制组,每组10只。每组大鼠均需要测血压以及NADPH亚单位p22phox、noxl和nox4mRNA的变化。结果大鼠NADPH氧化酶被抑制后血压明显下降,应用山葡萄多酚治疗AngⅡ引起的高血压组发现血压明显下降,NADPH氧化酶的亚单位p22phox、noxl以及nox4mRNA表达也明显下降。结论山葡萄多酚有降低由AngⅡ引起的高血压的效果,其机制是通过降低NADPH氧化酶的亚单位来实现的。     

单侧肾切除 微渗透泵灌注灌注血管经张素II诱导小鼠肾纤维化模型

【摘要】目的 建立单侧肾切除及微渗透泵灌注血管紧张素II诱导小鼠肾纤维化模型。方法 将36只雄性野生型 c57BL/6小鼠随机分为3组正常组、模型组、生理盐水对照组,每组12只。正常组不做处理,模型组行单侧肾切除及微渗透泵灌注血管紧张素II,生理盐水对照组行单侧肾切除及微渗泵灌注生理盐水。观察造模前及造模后第2周、第4周小鼠血压及肾脏病理变化。结果 实验第二周时,生理盐水对照组（P＜0.05）及模型组（P＜0.01）的血压较正常组升高,模型组较生理盐水对照组也升高（P＜0.05）;实验第四周时,模型组血压较正常组（P＜0.01）及生理盐水对照组（P＜0.05）均升高。模型组HE染色结果近曲小管上皮细胞浑浊肿胀;模型组Masson染色结果胶原纤维阳性率显著高于正常组和生理盐水对照组（P＜0.05）。结论 单侧肾切除+微渗透泵灌注血管紧张素II可以成功建立小鼠肾纤维化模型及高血压模型。     

健脾清化方治疗脾虚湿热型慢性肾衰的临床观察

目的:观察健脾清化方治疗脾虚湿热型慢性肾功能衰竭患者的临床疗效及作用机制.方法:将脾虚湿热型慢性肾功能衰竭患者随机分为两组,对照组与健脾清化方组各53例.对照组予以纠正水、电解质紊乱,现代营养及血管紧张素转换酶或受体抑制剂等治疗;健脾清化方组在对照组治疗的基础上加用健脾清化方治疗.结果:健脾清化方组患者的临床症状有明显改善,血肌酐、尿素氮、甘油三酯和低密度脂蛋白均有下降,而红细胞总花环有显著增加,与对照组比较,有统计学意义(P<0.05).结论:早、中期慢性肾功能衰竭患者在常规治疗的基础上加用健脾清化方,能显著降低血脂,提高细胞免疫功能,从而改善肾功能,降低蛋白尿.     

健脾清化方对慢性肾功能衰竭高脂血症大鼠肾组织氧自由基和转化生长因子β1 mRNA表达的影响

目的观察健脾清化方对慢性肾功能衰竭高脂血症大鼠肾组织氧自由基和转化生长因子β1(trans-forminggrowthfactorβ1,TGFβ1)mRNA表达的影响。方法模型组和健脾清化方治疗组大鼠予以高脂饲料喂养结合5/6肾切除法,建立慢性肾功能衰竭高脂血症大鼠模型,并分别予以蒸馏水和健脾清化方灌胃干预8周。干预结束后,检测正常对照组、模型组和健脾清化方治疗组大鼠24h尿蛋白定量及血尿素氮、肌酐、胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白的水平;并检测各组大鼠肾组织超氧化物歧化酶的活性及丙二醛和游离脂肪酸的含量。采用RT-PCR技术检测各组大鼠肾组织TGFβ1mRNA的表达水平。结果模型组大鼠24h尿蛋白定量及血尿素氮、肌酐、胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白水平均较正常对照组明显升高;肾组织超氧化物歧化酶活性较正常对照组明显下降;肾组织丙二醛、游离脂肪酸含量及TGFβ1mRNA表达水平则较正常组对照组明显升高,差异均有统计学意义。健脾清化方治疗组上述指标则均较模型组有不同程度的改善,差异有统计学意义。结论健脾清化方可减少慢性肾功能衰竭高脂血症大鼠24h尿蛋白定量,改善其肾功能,其作用机制与改善脂质代谢紊乱、调节氧化-抗氧化系统及降低肾组织TGFβ1的表达相关。     

益气健脾方对化疗后骨髓及免疫功能影响简

目的：探讨益气健脾方对环磷酰胺化疗后骨髓抑制及免疫抑制的影响。方法：灌胃第11天：眼眶取血,进行血细胞分析;采用称重法测定胸腺、脾脏重量并计算脏器指数;腹腔巨噬细胞吞噬功能的测定;NK细胞活性检测。结果：益气健脾方显著提高化疗小鼠胸腺指数、腹腔巨噬细胞吞噬功能和NK细胞活性。结论：益气健脾方具有促进骨髓细胞生长,提高机体免疫功能,抵御化疗所引起的骨髓抑制及免疫功能下降的作用。     

扶正化瘀方对大鼠中毒性肾间质纤维化的作用

目的:观察扶正化瘀方对大鼠中毒性肾间质纤维化的作用.方法:Wistar大鼠40只,分为正常组、模型组、扶正化瘀方药物组.采用二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)腹腔注射4周和含汞等重金属的饲料喂饲造模8周,制备大鼠肝纤维化-肾间质纤维化模型.药物组以扶正化瘀方自第5周起灌胃,1次/d,共4周.肾组织HE染色及六胺银(periodic acidsilvermetheramine,PASM)染色,观察肾组织炎症与胶原纤维沉积变化;试剂盒方法检测血清尿素氮与肌酐含量,观察肾功能变化;盐酸水解法测定肾组织羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量,观察胶原生成变化.结果:模型大鼠肾小管上皮细胞浊肿、坏死与脱落,炎性细胞浸润;肾间质增宽,大量胶原沉积;肾小管基底膜增厚,出现皱褶;血清尿素氮与肌酐含量上升,肾组织Hyp含量显著增加.扶正化瘀方药物组明显减轻模型大鼠肾小管炎症坏死与肾间质胶原沉积,减轻肾组织Hyp含量,降低异常增高的血清尿素氮与肌酐水平.结论:DMN腹腔注射与汞等重金属饲料口服可造成大鼠肾间质纤维化,扶正化瘀方可明显改善大鼠肾功能,有抗肾间质纤维化的作用.     

Rho/ROCK通路与NADPH氧化酶在糖尿病肾病中的作用

Rho/ROCK通路与NADPH氧化酶的激活,都能够促进糖尿病肾病的发生发展。Rho/ROCK通路与NADPH氧化酶可能也存在着某些联系,研究二者之间的关系与相关机制,对发现治疗糖尿病肾病的新药可能具有重要的意义。本文首先介绍了Rho/ROCK通路与NADPH氧化酶及二者的激活因素,然后总结了二者在糖尿病肾病中对肾脏血流动力学、滤过功能以及肾内基质的影响,最后简要介绍了与二者相关的糖尿病肾病药物治疗靶点。     

Effects and mechanism of irbesartan on tubulointerstitial fibrosis in 5/6 nephrectomized rats

Tubulointerstitial fibrosis(TIF)is a common pathological feature of end-stage kidney disease.Previous studies showed that upregulation of TGFβ1 notably contributed to the chronic renal injury and irbesartan halted the development of TIF in rats with 5/6 renal mass reduction.This study was to investigate the effects of irbesartan on chronic TIF and the mechanism involved TGFβ1 in the rodent model of chronic renal failure involving 5/6 nephrectomy.The results showed that irbesartan significantly attenuated th...     

血管紧张素II和洛沙坦对肝星状细胞生长、增殖的影响

目的探讨血管紧张素II(AngII)及其1型受体(AT1a)拮抗剂洛沙坦(losartan),对肝星状细胞(HSCs)生长、增殖的影响。方法①分离大鼠HSCs,培养及鉴定;②在不同浓度的AngII或losartan作用下,观察HSCs生长情况分别绘制细胞生长曲线、采用MTT法、3H-胸腺嘧啶核苷掺入释放法检测AngII或losartan对HSCs生长、增殖的影响。结果AngII刺激组在浓度高于10-9 mol/L时,与对照组相比HSCs数量明显增多,DNA含量显著增加(P<0.05 );losartan在浓度高于10-8 mol / L时,HSCs数量明显减少,DNA含量显著降低(P<0.05 );(losartan AngII)组HSCs数量与对照组相比无显著性差异(P>0.05)。结论AngII可以促使HSCs迅速增殖,其拮抗剂losartan明显抑制HSCs的生长、增殖。