INPP4B mRNA 及蛋白在胃癌患者外周血中的表达及意义

目的：探讨 INPP4B mRNA 及蛋白在胃癌患者外周血中的表达水平,并分析其表达水平与临床病理参数（TNM分期、淋巴结转移和浸润深度）的关系。方法：应用实时荧光定量 PCR（QRT －PCR）及酶联免疫吸附实验（ELISA）测定50例胃癌患者及30例健康志愿者外周血 INPP4B mRNA 及蛋白的表达水平。结果：胃癌患者外周血中 INPP4B mRNA 比健康志愿者外周血中 INPP4B mRNA 的表达水平显著下降（P ＜0．05）,IN-PP4B 蛋白在胃癌患者外周血中的浓度[（845．118±293．560）ng／L],显著低于健康志愿者外周血中的浓度[（2089．204±603．829）ng／L]（P ＜0．05）。INPP4B mRNA 及蛋白的表达水平在胃癌外周血中与 TNM分期、淋巴结转移和浸润深度相关（P ＜0．05）。结论：外周血中 INPP4B mRNA 及蛋白的表达与胃癌关系密切,可作为反映胃癌发生、发展过程的有效分子指标。     

食管鳞状细胞癌患者外周血和肿瘤组织中ERCC1及ERCC2表达的相关性研究

目的:探讨检测食管鳞状细胞癌患者外周血替代肿瘤组织中切除修复交叉互补基因1(excision repair cross-complementing 1,ERCC1)及ERCC2表达的可行性.方法:收集39例食管癌患者的术前外周血、肿瘤组织及癌旁正常组织,应用RT-PCR法检测ERCC1和ERCC2 mRNA的表达,应用ELISA法检测血清蛋白中ERCC1和ERCC2的含量,以10名健康志愿者外周血作为对照.结果: ERCC1和ERCC2 mRNA以及蛋白在健康志愿者外周血中的表达高于食管癌患者外周血(P<0.05);食管癌患者外周血中ERCC1和ERCC2 mRNA的表达水平与其在肿瘤组织中的表达水平呈明显的正相关关系(P<0.01).结论:食管鳞状细胞癌患者外周血中ERCC1和ERCC2 mRNA的表达水平能在一定程度上间接反映其在肿瘤组织中的表达水平.     

胃癌患者外周血Th17和Treg细胞的特异性转录因子与相关细胞因子的检测及临床意义

目的 了解胃癌患者外周血Th17和Treg细胞的转录因子及其相关细胞因子的表达水平,探讨其在胃癌发展进程中的作用.方法 收集57例胃癌患者、31例胃部良性疾病患者和40例健康志愿者的外周血,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(QRT-PCR)技术,检测外周血单个核细胞中Th17和Treg细胞的特异性转录因子RORγt和FoxP3 mRNA的表达水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA),检测胃癌患者血浆中IL-17、IL-23、转化生长因子β(TGF-β)和IL-10的浓度.结果 胃癌组FoxP3和RORγt mRNA的表达水平分别为2.349±0.491和0.794±0.304,明显高于健康对照组和良性疾病组(均P<0.05),FoxP3/RORγt比值也高于健康对照组和良性疾病组(P<0.05),而良性疾病组与健康对照组差异无统计学意义(P>0.05).中晚期胃癌组的FoxP3/RORγt比值明显高于早期胃癌组(P<0.05).胃癌组血浆中IL-17、IL-23、TGF-β和IL-10的水平明显高于健康对照组(P<0.05),中晚期胃癌组TGF-β和IL-10水平明显高于早期胃癌组(P<0.05).结论 胃癌患者存在高Th17和Treg细胞水平,且随着病程的进展Treg细胞仍维持强势,FoxP3/RORγt比值明显增高.监测胃癌患者外周血Th17和Treg细胞的特异性转录因子和相关细胞因子水平,有助于对病程的判断.     

培美曲塞联合铂类化疗对晚期非小细胞肺癌患者外周血TGF-β1、MMP2的影响

目的:观察培美曲塞联合铂类化疗对晚期非小细胞肺癌患者外周血TGF-β1、MMP2的影响及临床意义。方法:收集2011年1月至2012年12月,我院收治的50例选用培美曲塞联合铂类化疗的Ⅲ-Ⅳ期非小细胞肺癌患者外周血血清,用酶联免疫方法检测化疗前后外周血TGF-β1、MMP2表达水平,比较其动态变化;15例健康体检者为正常对照组。结果:健康者及肺癌患者外周血TGF-β1浓度分别为（9.62±2.70）μg/L、（41.56±7.54）μg/L,MMP2浓度分别为（44.47±11.47）μg/L、（101.60±16.43）μg/L(P<0.05),肺癌患者外周血TGF-β1、MMP2水平高于正常人。疾病控制组患者,化疗前后外周血TGF-β1浓度分别为（41.16±7.15）μg/L、（24.99±8.13）μg/L,MMP2浓度分别为（101.39±16.82）μg/L、（70.61±17.77）μg/L(P<0.05),差异均有统计学意义。疾病进展组患者化疗前后外周血TGF-β1浓度分别为（42.57±8.68）μg/L、（60.14±11.31）μg/L,MMP2浓度分别为（102.14±15.99）μg/L、（130.71±17.38）μg/L(P<0.05),差异均有统计学意义。结论:非小细胞肺癌患者外周血TGF-β1、MMP2的表达升高,疾病得到控制后TGF-β1、MMP2表达下降,而进展后升高。TGF-β1、MMP2可能是评价培美曲塞联合铂类化疗近期疗效的潜在指标。     

CD133 mRNA在胃癌患者外周血单核细胞中的表达及意义

[目的]通过检测胃癌患者外周血单核细胞中CD133的表达,探讨其与临床病理特征的关系。[方法]于术前抽取30例胃癌患者、15例胃溃疡患者、15名健康志愿者外周静脉血,密度梯度离心法分离单核细胞。半定量反转录聚合酶链反应检测CD133 mRNA表达水平。分析胃癌患者外周血CD133 mRNA表达与临床病理特征的关系。[结果]胃癌患者外周血中CD133mRNA表达水平明显高于胃溃疡患者和健康志愿者（0.2804±0.1835 vs 0.0984±0.1321,t=6.724,P〈0.001;0.2804±0.1835 vs 0.0282±0.0597,t=-7.327,P〈0.001）。CD133 mRNA表达与肿瘤最大直径、淋巴结转移、TNM分期有关（P〈0.05）,而与性别、分化程度、淋巴管浸润、血管浸润、浸润深度无关。Spearman相关分析显示,CD133 mRNA表达与淋巴结转移呈正相关（P〈0.01）。[结论]胃癌患者外周血中CD133 mRNA的表达与胃癌的发展、转移及预后密切相关。     

FoxP3mRNA在胃癌患者CD4+CD25+调节性T细胞中的表达及其临床意义

目的探讨胃癌患者体内CD4 CD25 调节性T细胞的含量及FoxP3 mRNA在Treg中的表达情况及其临床意义。方法应用流式细胞术(FCM)测定20例胃癌患者外周血中Treg细胞含量,同时采用RT-PCR技术检测其FoxP3 mRNA的表达情况,并与20例健康志愿者的外周血进行对比研究和统计学分析。结果胃癌患者外周血中Treg细胞占CD4 T细胞总数的(12.76±0.46)%,显著高于健康对照组的(6.81±0.66)%,(P<0.01);FoxP3 mRNA在胃癌患者外周血Treg细胞中呈现高表达(0.84±0.02)%,明显高于其在健康对照组中表达(0.76±0.03)%,(P<0.05)。结论胃癌患者外周血中Treg的数量较正常人明显增高,同时伴随有FoxP3 mRNA高表达,提示FoxP3基因可能对Treg有重要的调节功能,从而影响胃癌病人的抗肿瘤自身免疫功能。     

MMP-11在胃癌患者血清中的表达及临床意义

背景与目的:基质金属蛋白酶11(MMP-11)是基质金属蛋白酶家族中的一员,已有文献报道其与食管癌、肺癌等疾病的预后相关,尚缺乏MMP-11与胃癌的相关研究,本实验旨在观察基质金属蛋白酶11(MMP-11)在胃癌患者外周血清中的表达情况及临床意义。方法:收集2005年3月—2007年2月北京肿瘤医院收治的130例胃癌患者血清,采用逆转录-聚合酶链反应及酶联免疫技术检测MMP-11mRNA及蛋白表达情况。取20例正常健康人血清为对照组。结果:MMP-11mRNA在正常人群中表达的阳性率为5%,而在胃癌患者外周血清中阳性表达率(68.4%)高于正常人群;MMP-11蛋白在胃癌患者外周血清中表达量为(44±27)ng/ml,高于正常人群的(3±3)ng/ml;130例胃癌患者中,根治术后辅助治疗未见复发30例;术后复发或(和)转移的胃癌患者30例,复发、转移组血清MMP-11蛋白表达量(51±27)ng/ml,术后未见复发、转移的胃癌患者血清MMP-11蛋白表达量(27±28)ng/ml;两组患者外周血清MMP-11mRNA表达差异与蛋白水平一致。结论:MMP-11在胃癌患者外周血清中高表达,显著高于正常人群,尤其在根治术后转移和(或)复发的晚期患者的外周血中,推测其可能作为胃癌诊断、复发/转移的分子标志物。     

转录因子T-bet和GATA-3在食管癌患者外周血单个核细胞中的表达及其与患者免疫状态的关系

目的 观察转录因子T-bet和GATA-3在食管痛患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,并探讨其与患者免疫状态的关系.方法 采用逆转录-荧光定量-聚合酶链反应(RT-FQ-PCR)检测60例食管癌患者和30例健康对照者PBMC中T-bet和GATA-3的mRNA表达水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血浆中干扰素γ(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)的水平.结果 与健康对照组相比,食管癌患者T-bet mRNA表达明显降低(Ⅰ、Ⅱ期食管癌组为0.27±0.05,Ⅲ、Ⅳ期食管癌组为0.12±0.02),GATA-3 mRNA表达明显升高(Ⅰ、Ⅱ期食管癌组为0.45±0.06,Ⅲ、Ⅳ期食管癌组为0.55±0.03),IFN-γ表达明显降低[Ⅰ、Ⅱ期食管癌组为(12.12±1.48)ng/L,Ⅲ、Ⅳ期食管癌组为(8.44±0.90)ng/L],IL-4表达明显升高[Ⅰ、Ⅱ期食管癌组为(18.64±0.77)ng/L,Ⅲ、Ⅳ期食管癌组为(25.28±2.02)ns/L],Ⅰ、Ⅱ期食管癌组与Ⅲ、Ⅳ期食管癌组间差异无统计学意义(均P>0.05).IFN-γ水平与T-bet mRNA表达呈正相关(r=0.79,P<0.05),IL-4与GATA3 mRNA表达呈正相关(r=0.43,P<0.05).结论 食管癌患者外周血中T-bet表达降低,GATA-3表达升高,Th1和Th2平筏被打破,Th2占优势.T-bet和GATA-3参与了Th1和Th2平衡的调控.     

胃癌患者外周血及骨髓微转移检测的临床意义

目的:探讨检测胃癌患者外周血和骨髓CK20 mRNA表达的敏感性、特异性及临床意义.方法:采用RTPCR技术,同时对照检测49例胃癌患者、5例胃良性病变患者及5例健康志愿者骨髓与外周血中的CK20 mRNA表达.结果:49例胃癌患者中,骨髓和外周血CK20阳性表达率分别为49.0%(24/49),32.7%(16/49),二者差异有统计学意义(P＜0.05).其中2例外周血CK20表达阳性,骨髓表达阴性.健康志愿者及良性病变患者外周血及骨髓中未检测到CK20表达.本实验中CK20 mRNA RT-PCR技术的灵敏度为10～-5.胃癌的微转移状况与组织分化程度和肿瘤TNM分期有关.结论:应用RT-PCR法以CK20为标志物检测胃癌微转移细胞特异性高.骨髓检测胃癌微转移较单次采血更敏感,但外周血检测仍能提供一些有价值的资料.     

荧光定量PCR检测外周血CK20 mRNA对子宫内膜癌微转移的诊断意义

目的:研究子宫内膜癌患者外周血中角蛋白20(CK20)mRNA的表达情况,并探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)检测子宫内膜癌微转移的可行性及临床价值。方法:采用FQ-PCR方法对64例子宫内膜癌患者外周血、42例良性子宫病变患者及20位健康女献血员外周血中的CK20 mRNA表达水平进行检测;并同法检测20例术中切除的肿瘤组织的CK20 mRNA。结果:子宫良性病变患者及健康女性外周血中CK20 mRNA表达均<103copies/μL的检测下限;子宫内膜癌组织CK20 mRNA表达水平为(2.08±0.84)×106copies/μL,阳性率为100%。而64例子宫内膜癌患者外周血中CK20 mR-NA表达水平为(5.52±1.14)×104copies/μL,高表达率(阳性率)为40.6%(26/64)。CK20 mRNA表达水平与临床分期差异有统计学意义,P<0.05,与病理分级无关,P>0.05。结论:FQ-PCR可快速、灵敏地定量子宫内膜癌外周血CK20 mRNA的表达,对预测子宫内膜癌微转移以及判断患者预后具有一定指导意义。     

hMAM mRNA表达情况与乳腺癌的关系

目的 探讨人乳腺珠蛋白(hMAM)mRNA在乳腺癌患者外周血中的表达情况及意义.方法 选取87例乳腺癌患者、70例乳腺良性肿瘤患者和50例健康志愿者,采用巢式-逆转录-聚合酶链反应检测其外周血hMAM mRNA的表达水平.结果 乳腺癌患者的外周血hMAM mRNA阳性率为54.02%,高于乳腺良性肿瘤患者的1.43%和健康志愿者的0,差异均有统计学意义(P﹤0.05);乳腺良性肿瘤患者和健康志愿者的外周血hMAM mRNA阳性率比较,差异无统计学意义(P﹥0.05).Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移的乳腺癌患者的hMAM mRNA阳性率高于Ⅰ~Ⅱ期和无淋巴结转移的患者(P﹤0.05).乳腺癌患者化疗后的外周血hMAM mRNA阳性率为18.39%,低于化疗前的54.02%(P﹤0.05).结论 乳腺癌患者外周血hMAM mRNA的阳性表达与TNM分期和淋巴结转移情况有关,可为临床诊断和预后判断提供依据.     

胃癌患者血清炎性因子水平的检验分析

目的:探讨胃癌患者血清炎性因子的表达水平检测在其临床诊治中的意义。方法:选取92例胃癌患者为观察组,并选择同期105例发生胃良性病变的患者作为良性病变对照组,同期76例急性胃炎和胃溃疡合并作为急性炎症对照组,对三组患者的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、中期因子（MK）、白细胞介素（IL）-6、白细胞介素（IL）-8和C-反应蛋白（CRP）表达水平进行检测,比较上述血清炎性因子在三组中的表达情况。结果:胃癌患者TNF-α、MK、IL-6、IL-8、CRP等血清炎性因子水平分别为（15.7±2.1）ng·L-1、（616.5±254.6）pg·ml-1、（12.6±2.4）ng·L-1、（234.3±31.4）ng·L-1、（12.3±2.6）mg·L-1,与胃良性病变组和急性炎症对照组比较,均明显增高,差异有统计学意义（P<0.05）。胃良性病变组上述血清炎性因子水平和急性炎症对照组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。TNF-α、MK、IL-6、IL-8、CRP等血清炎性因子在胃癌组III期-IV期和发生淋巴结转移患者的表达水平,分别与I期-II期和无淋巴结转移患者相比显著增高,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:TNF-α、MK、IL-6、IL-8、CRP等血清炎性因子与胃癌的发生和进展具有一定的相关性,有进一步扩大研究的价值。     

胃癌患者外周血Survivin水平与幽门螺杆菌感染的关系

目的 探讨胃癌患者外周血中Survivin mRNA水平与幽门螺杆菌（Hp）感染的关系。方法 应用实时荧光定量qPCR技术检测胃炎及化疗前胃癌各50例患者外周血中Survivin mRNA表达,并采用快速尿素酶试验与Giemsa 染色2种方法检测Hp感染情况。结果 胃炎患者外周血中未检测到Survivin mRNA表达;胃癌组患者Survivin表达检测率为84.0％（42/50）,外周血Survivin mRNA表达水平的中位数为0.46。Survivin表达水平与胃癌患者的年龄、性别及淋巴结转移均无关（P＞0.05）,而与TNM分期有关（P＜0.0001）。胃癌患者Hp感染率为80.0％（40/50）,显著高于胃炎患者的58.0％（29/50）,差异有统计学意义（P＜0.05）。Hp阳性的胃癌患者外周血Survivin mRNA表达水平为0.578±0.507,显著高于Hp阴性患者的0.194±0.419,差异有统计学意义（P＜0.05）。经Spearman相关分析,胃癌患者Survivin mRNA表达与Hp感染呈正相关（r=0.464, P＜0.05）。结论 Hp感染及Survivin与胃癌发生可能有关,Survivin可能参与了Hp感染性胃癌的发展。     

Expression and Clinical Significance of REGy in Gastric Cancer Tissue and Variously Differentiated Gastric Cancer Cell Lines

OBJECTIVE To evaluate the REGy expression in gastric cancer tissue and gastric cancer cell lines of various differentiation levels and its clinical significance.METHODS Immunohistochemistry was used to detect the expression of REGy protein in 70 specimens of gastric cancer and 30 specimens of normal gastric mucosa. The relationship between the expression of REGy protein and the biological behaviors of gastric cancer was analyzed. RT-PCR and Western blot were used to detect the mRNA level and the protein expression of REGγ in normal gastric cell line GES-1, well differentiated gastric cancer cell line MKN-28, moderately differentiated gastric cancer cell line SGC-7901 and poorly differentiated gastric cancer cell line BGC-823.RESULTS The expression rate of REGγprotein in gastric cancer tissue (52/70, 74.29%) was significantly higher than that in normal gastric tissue (12/30, 40%) (P<0.01). The expression rate of REGywas correlated with tumor size (P<0.01), lymph node metastasis (P<0.05), differentiation degree (P<0.01), infiltration depth (P<0.01)and distant metastasis (P<0.05). RT-PCR analysis showed that theexpression of REGγ mRNA was 0.459±0.079 in the normal gastric mucosa cell line, 0.588±0.118 in the well differentiated gastric cancer cell line, 0.715±0.066 in the moderately differentiated gastric cancer cell line, and 0.873±0.099 in the poorly differentiated gastric cancer cell line, showing a negative correla- tion between REGγmRNA expression and differentiation level (P <0.05). Western blot analysis showed that the expression of REGy protein was 0.712±0.065 in the normal gastric mucosa cell line, 1.176±0.185 in the well differentiated gastric cancer cell line, 1.533 ±0.127 in the moderately differentiated gastric cancer cell line, and 2.061±0.398 in the poorly differentiated gastric cancer cell line, showing a negative correlation between REGγprotein expression and differentiation level (P<0.05).CONCLUSION REGγ is expressed in gastric cancer tissue and normal gastric tissue. In gastric cancer tissues, REGγexpression is positively correlated with the tumor size, lymph node metastasis,differentiation degree, infiltration depth and distant metastasis. Detecting the expression of REGy mRNA and protein is helpful for early diagnosis and predicting prognosis of gastric cancer.