头颈部鳞状细胞癌的抑癌基因研究

抑癌基因是一大类抑制细胞生长和癌变的基因群。Ｐ５３，Ｒｂ，ｐ１６，ｎｍ２３等抑癌基因目前在肿瘤研究中是热点。Ｐ５３基因与头颈鳞癌的发生，发展密切相关，Ｒｂ，ｐ１６基因产物是细胞周期重要调控因子，Ｐ１６基因是新近确定的多肿瘤抑癌基因，在早期诊断和基因治疗上有研究前景；ｎｍ２３基因与人类多种肿瘤转移相关，与头颈鳞癌转移的关系有待确定。     

p16基因在口腔鳞癌中的缺失及其临床意义

目的 探讨ｐ１６基因的缺失表达与口腔鳞状细胞癌（ＳＣＣ）发生发展的关系。方法 应用ＲＴ－ＰＣＲ及免疫组化方法检测３０例口腔鳞癌中ｐ１６基因的缺失表达。结果 ３０例口腔鳞癌患者中１６例存在ｐ１６的缺失,缺失率为５３．３％。ｐ１６基因的缺失表达与口腔鳞癌的临床分期及淋巴结有无转移有关系（Ｐ〈０．０５）。结论 ｐ１６基因缺失可能参与了口腔鳞癌的癌变过程,ｐ１６基因的缺失表达可作为估计口腔鳞癌患者预后的一     

颊癌中肿瘤转移抑制基因nm23mRNA的表达 Ⅰ.Northern斑点杂交研究

通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎ斑点杂交技术研究５２例颊癌及相关组织中肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ的表达。结果发现：颊癌组织中ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ表达比正常颊粘膜、白斑、癌旁粘膜均有不同程度增高。颊癌有转移组中ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达比无转移组明显降低，转移灶中ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ的表达更低（Ｐ＜０．０５）。１１例有转移颊癌患者中有９例（８１．８％）为ｎｍ２３－Ｈ１低表达；而１９例无转移颊癌，有１５例（７８．９％）为高表达（Ｐ＜０．０５）。ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ表达在有无转移组患者中无明显差异（Ｐ＞０．０５）。结果提示，在颊癌的转移过程中，ｎｍ２３－Ｈ１比ｎｍ２３－Ｈ２起着更重要的作用。ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达可作为预测有无颊癌淋巴结转移的一个有价值的指标。     

肿瘤抑制基因nm23—H1在口腔鳞癌组织中的蛋白表达及 …

目的 研究ｎｍ２３－Ｈ１蛋白在口腔鳞癌中的表达情况，并探讨它与口腔鳞癌患者预后的关系。方法 采用免疫组化ＳＡＢＣ法检测７５例口腔鳞癌、１９例癌旁粘膜、８例正常口腔粘膜及９例颈淋巴结转移灶中ｎｍ２３－Ｈ１蛋白染色，利用Ｘ＾２检验及单因素、多因素Ｃｏｘ比较风险模型进行统计分析。结果 Ｘ＾２检验发现，ｎｍ２３－Ｈ１蛋白表达水平在生存期小于３年组和大于７年组间差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。单因素Ｃｏｘ模型     

人乳瘤病毒16型和EB病毒感染与口腔鳞癌关系

用多聚酶链反应技术为２１例口腔鳞癌及癌旁正常组织成对标本中的人乳头瘤病毒１６型（ＨＰＶ１６）和ＥＢ病毒（ＥＢＶ）ＤＮＡ作检测。结果口腔鳞癌和癌旁正常组织ＨＰＶ１６ＤＮＡ阳性率分别为５２．４％和１４．３％，ＥＢＶ为８５．７％和３３．３％，ＨＰＶ１６和ＥＢＶ均为阳性者分别为４７．６％和９．５％，癌组织和癌旁正常组织间统计学上均有显著性差异。提示口腔粘膜ＨＰＶ１６或ＥＢＶ感染均与口腔鳞癌发生有关。ＨＰＶ１６和ＥＢＶ在口腔粘膜感染可能有协同致口腔鳞癌作用。     

口腔鳞癌组织中染色体9P的杂合性丢失

由等位基因缺失导致的抑癌基因失活是肿瘤发生的重要机制。为检测染色体９Ｐ在口腔鳞癌发生发展中的作用,以便定位新的抑癌基因,我们应用聚合酶链反应检测２２对经显微切割的口腔鳞癌组织和正常口腔粘膜对照组织的基因组ＤＮＡ,分析染色体９Ｐ２１座位的微卫星多态标记...     

口腔鳞癌中人乳头瘤病毒的研究

为了探讨人乳头瘤病毒（ｈｕｍａｎｐａｐｉｌｏｍａｖｉｒｕｓ，ＨＰＶ）１６、１８型及其与癌的关系，作者采用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）技术，检测２３例口腔鳞状细胞癌（ｏｒａｌｓｑｕａｍｏｕｓｃｅｌｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＯＳＣＣ），正常口腔粘膜（ｎｏｒｍａｌｏｒａｌｍｕｃｏｓａ，ＮＯＭ）中的ＨＰＶ１６型和１８型ＤＮＡ中的Ｅ６、Ｅ７基因片段，并对其ＰＣＲ产物进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交分析，以研究ＨＰＶ与ＯＳＣＣ的关系。结果显示：ＯＳＣＣ中ＨＰＶＤＮＡ阳性率４７．８％（１１／２３），其中ＨＰＶ１６型６例，ＨＰＶ８型３例，ＨＰＶ１６和１８型复合感染２例，ＮＯＭ中ＨＰＶ阳性率２０％（２／１０），２例阳性者，均为ＨＰＶ１６型。研究结果提示：高危型ＨＰＶ与口腔鳞癌可能有关，二者的确切关系尚需进一步研究。但ＨＰＶ致癌基因Ｅ６、Ｅ７片段在口腔鳞癌中的检出，为鳞癌的病因研究开辟了新的前景     

nm23基因在涎腺腺样囊性癌中的表达及其与肺转移的关系

为探讨肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３与涎腺腺样囊性癌（ａｄｅｎｏｉｄｃｙｓｔｉｃｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＡＣＣ）的关系，应用ＬＳＡＢ免疫组化染色方法，研究ｎｍ２３表达产物二磷酸核苷激酶（ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅｋｉ－ｎａｓｅ，ＮＤＰＫ）在ＡＣＣ中的表达。结果：ＮＤＰＫ／ｎｍ２３在ＡＣＣ中有较高表达，阳性率为６４．０％（１６／２５）；其中，有肺转移者阳性率为１２．５％（１／８），无肺转移者阳性率为８８．２％（１５／１７），差异有极显著性（Ｐ＜０．０１）；ＮＤＰＫ表达与临床分期有关，分期越高，阳性率越低，差异有显著性（Ｐ＜０．０５），与病理分型差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论：ｎｍ２３基因在人ＡＣＣ肺转移过程中起到抑制转移的作用，可作为临床颈侧ＡＣＣ患者转移和预后的指标。     

口腔白斑和鳞癌中p53基因突变的免疫组化及PCR—SSCP分析

本实验应用免疫组化－链霉素抗生物素蛋白过氧化酶连接法（ＳＰ）和聚合酶链反应单链构象多态性分析（ＰＣＲＳＳＣＰ）对５例正常口腔粘膜，２２例白斑（轻、中、重度异常增生各为８、８、６例）和３０例鳞癌（有和无淋巴结转移各为１６、１４例）组织中ｐ５３突变进行检测。结果表明：轻、中、重度异常增生白斑和鳞癌ｐ５３蛋白表达率为１２．５％，２５．０％，３３．３％和５０．０％；ｐ５３基因突变率为１２．５％，３７．５％，５０．０％和７０．０％。正常粘膜无一例阳性。白斑和鳞癌ｐ５３变化有显著性差异。ｐ５３基因突变与蛋白表达间存在不一致性，且与鳞癌有否淋巴结转移无关。     

颊癌中肿瘤转移抑制基因nm23mRNA的表达 Ⅱ.定量逆转录多聚酶链反应检测

采用定量逆转录多聚酶链反应（Ｑ－ＲＴ－ＰＣＲ）技术检测ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ在４７例组织标本中的表达情况，发现ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ在颊癌原发灶、癌旁粘膜、正常颊粘膜、颌下腺、白斑、正常淋巴结和有转移的淋巴结中均有不同程度的表达。ｎｍ２３－Ｈ１在肿瘤转移组颊癌原发灶中的表达低于无转移组（Ｐ＜０．０５），ｎｍ２３－Ｈ２在颊癌有、无转移中的表达无差异（Ｐ＞０．０５）；ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２表达与临床病理参数间均无关（Ｐ＞０．０５）。结果提示：ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达下降与颊癌转移关系密切，而ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ表达与颊癌转移无关；通过Ｑ－ＲＴ－ＰＣＲ检测ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ的表达水平可为临床预测颊癌的转移提供有价值的指标。Ｑ－ＲＴ－ＰＣＲ技术的主要优点在于通过少量组织提取的总ＲＮＡ即可检测ｎｍ２３ｍＲＮＡ的表达。     

Mutated and wild-type p53 expression and HPV integration in proliferative verrucous leukoplakia and oral squamous cell carcinoma

The frequencies of overexpression and mutation in the p53 tumor suppressor gene were examined in proliferative verrucous leukoplakia and oral squamous cell carcinoma with immunohistochemistry and single-strand conformation polymorphism analysis of DNA fragments amplified by polymerase chain reaction. Ten samples each of normal oral mucosa, proliferative verrucous leukoplakia, and squamous cell carcinoma were immunostained with antibodies against p53 protein; 8 of 10 cases of proliferative verrucous leukoplakia cases and 7 of 10 cases of oral squamous cell carcinoma were positive for p53 protein. Minimal staining was observed in normal oral tissues. The quantified labeling indexes demonstrated a range that corresponded to lesion progression. Single-strand conformation polymorphism analysis revealed p53 gene mutations within exons 5 to 8 in 40% (4 of 10) of the squamous cell carcinoma samples. Two of the 4 mutated squamous cell carcinoma samples lacked p53 expression. No p53 mutations were detected in proliferative verrucous leukoplakia tissues. Human papillomavirus 16 was identified in 2 of 7 p53 positive oral squamous cell carcinoma samples. Human papillomavirus 16 and 18 were identified in two of eight p53 positive proliferative verrucous leukoplakia samples. One p53 negative squamous cell carcinoma sample was positive for human papillomavirus 16 and had a mutation in exon 6 of the p53 gene. Human papillomavirus infection along with p53 expression plays a yet to be defined role in the pathogenesis of a limited number of cases of proliferative verrucous leukoplakia and squamous cell carcinoma. p53 Immunohistochemistry, p53 gene mutations, and human papillomavirus infection prevalence do not provide a means to differentiate between leukoplakia and carcinoma and do not provide a predictive test for progression of leukoplakia to carcinoma.     

口腔鳞状细胞癌组织中P53、bcl-2、nm23蛋白表达与肿瘤生物学行为的关系

目的观察P53,bcl-2,nm23蛋白在口腔鳞状细胞癌(鳞癌)组织中的表达情况,以探讨其在口腔鳞癌生物学行为及预后预测方面的意义。方法采用免疫组化S-P法检测65例口腔鳞形细胞癌(OSCC)组织中P53,bcl-2,nm23蛋白的表达,分析其与肿瘤病理表现的相关性。结果在65例口腔鳞癌中,P53,nm23,bcl-2蛋白阳性检出率分别为56.92%,53.85%,46.15%。P53蛋白阳性表达率与各项病理参数均无明确相关关系,但表达水平随肿瘤分化程度降低而增高;bcl-2蛋白阳性表达率与肿瘤组织学分级和浸润方式有关(P<0.05),中低分化和微灶浸润性生长的肿瘤有较高的阳性表达率;nm23蛋白阳性表达率与颈淋巴结转移明显负相关(P<0.01)。结论P53,nm23,bcl-2蛋白表达与口腔鳞癌的生物学行为关系密切,有助于评估肿瘤进展和预后预测。     

口腔鳞癌组织中Ki-67和p53蛋白的表达

目的 探讨口腔鳞癌组织中Ki-67和p53蛋白的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学S-P法对10例正常口腔黏膜组织、16例口腔白斑（OLK）组织、48例口腔鳞癌（OSCC）组织中的Ki-67和p53蛋白表达进行检测,结合患者临床病理资料进行分析,使用SPSS17.0 软件包对数据进行统计学处理。结果Ki-67蛋白在正常口腔黏膜组织、口腔白斑和口腔鳞癌组织中的阳性表达率分别为30.0%、56.3%和79.2%;p53的阳性表达率分别为0.0%、43.8%和70.8%,Ki-67和p53在正常黏膜组与口腔白斑和口腔鳞癌组差异均具有显著性（P<0.05）;Ki67蛋白在口腔鳞癌组织中的表达与肿瘤的临床分期、分化程度、有无淋巴结转移有关（P<0.05）,p53蛋白的表达与肿瘤的分化程度有关(P<0.05);Ki-67和p53蛋白在口腔鳞癌组织中的表达呈正相关（P<0.05）。结论Ki-67和p53蛋白在口腔鳞癌组织中高表达,可能在口腔鳞癌的发生、发展过程中起着重要作用。     

局部应用IL-2联合化疗前后口腔鳞癌 PCNA、p53的表达

目的探讨IL-2局部应用联合化疗前后口腔鳞癌PCNA、p53的表达.方法34例T3、T4期口腔鳞癌患者随机分两组接受术前治疗,其中23例行免疫化疗(IL-2局部注射合并PVP化疗),11例行单纯PVP化疗.采用免疫组化法检测两组患者治疗前后肿瘤增殖细胞核抗原、p53的表达情况.结果免疫化疗组治疗后肿瘤细胞增殖指数明显低于单纯化疗组(P＜0.05).两组均有p53阳性表达,但无显著性差异(P＞0.05).结论PCNA、p53表达与口腔鳞癌的发生发展有关,PCNA的检测有助于判断免疫化疗的治疗效果.     

nm23基因在口腔鳞状细胞癌中表达的意义

目的:探讨nm23基因表达与口腔鳞状细胞癌转移的关系.方法:采用免疫组化方法检测40例口腔鳞状细胞癌nm23基因表达情况,分析nm23基因表达变化与口腔鳞癌的临床病理特点及其转移的关系.结果:12例nm23基因阴性表达病例中11例发生转移,转移率91.7%,28例nm23基因阳性表达病例中1例发生转移,转移率3.6%,两者比较有高度显著性差异(P<0.001);nm23基因表达与肿瘤大小、部位、病理类型无显著性差异(P>0.05).结论:nm23基因在抑制口腔鳞状细胞癌转移方面起着重要作用.     

口腔粘膜上皮癌前及癌变中PCNA和P53的表达

目的：检测口腔粘膜上皮癌前及癌变组织中ＰＣＮＡ和ｐ５３的表达，探讨口腔癌变的机理。方法：采用免疫组化的方法检测８０例口腔粘膜病变组织中ＰＣＮＡ和ｐ５３的表达。结果：正常口腔粘膜基底层有少数ＰＣＮＡ阳性细胞，随着粘膜异常增生程度的加重到鳞癌，ＰＣＡＮ表达的阳性分级升高，ＰＣＮＡ的相对含量也升高。Ｐ５３的阳性表达仅见于重度异常增生及鳞癌组织中。结论：对ＰＣＮＡ和ｐ５３的研究有助于探讨口腔粘膜癌变多阶段发生过程的机理，并可为监测癌变提供生物学指标。     

C-erbB-2蛋白和nm23蛋白在口腔粘膜鳞癌组织中的表达研究

目的 研究口腔粘膜鳞癌组织中C-erbB-2蛋白和nm23蛋白的表达及意义。方法 采用免疫组化方法检测80例口腔粘膜鳞癌组织中C-erbB-2蛋白和nm23蛋白的表达。结果 口腔粘膜鳞癌组织中C-erbB-2蛋白的阳性表达率为67.5％,nm23蛋白的阳性表达率为38.8％。C-erbB-2蛋白表达与口腔粘膜鳞癌临床分期及组织学分级有关,而nm23蛋白表达仅与淋巴结转移有关。结论 C-erbB-2蛋白和nm23蛋白的表达状况可能提示口腔粘膜鳞癌患者的预后。     

口腔粘膜鳞癌和癌前病变p53、ras基因突变的检测及p53、p21蛋白的表达

目的　探讨 p5 3、ras基因改变在口腔粘膜鳞癌及癌前病变发生过程中的意义。方法　应用聚合酶链反应和免疫组织化学法检测 2 3例口腔粘膜鳞癌和 15例癌前病变 p5 3、ras基因突变和 p5 3、p2 1蛋白的表达。结果　43.5 % (10 / 2 3)的口腔粘膜鳞癌存在 p5 3基因第 8外显子突变 ,47.8% (11/ 2 3) ras基因有突变 ;口腔粘膜鳞癌 p5 3、p2 1蛋白表达阳性率分别为 43.5 % (10 / 2 3)和 6 0 .9% (14/ 2 3)。癌前病变有 1例存在 p5 3基因第 8外显子和 ras基因突变 (6 .7% ) ;p5 3、p2 1蛋白表达阳性率分别为 13.3% (2 / 15 )和 2 0 % (3/ 15 )。两组间差异显著 (P<0 .0 5 )。结论　 p5 3、ras基因突变和 p5 3、p2 1蛋白过量表达与口腔粘膜鳞癌的发生过程密切相关 ,可作为癌前病变发展为癌危险性的生物指标     

非同位素PCR-SSCP-EB染色技术检测头颈部鳞癌p53基因点突变

应用非同位素ＰＣＲ－ＳＳＣＰ－ＥＢ染色技术检测新鲜头颈部鳞癌组织中ｐ５３基因点突变。结果显示１３例标本中７例有异常电泳带，其中位于第５外显子者１例，位于第６，７，８外显子者各２例，说明头颈部鳞癌的发生与ｐ５３基因突变有密切关系。与传统的同位素ＰＣＲ－ＳＳＣＰ相比，非同位素ＰＣＲ－ＳＳＣＰ－ＥＢ染色技术是一种更简便、安全、快速、有效的检测基因点突变的方法，适用于大量标本基因点突变的筛选性检测。