基于近红外光谱法对温郁金源3种药材的快速鉴别

目的建立温郁金源3种药材的近红外快速鉴别方法。方法采用近红外光谱法结合主成分分析-马氏距离判别分析方法建立定性鉴别模型,并对鉴别模型进行预测集验证。结果实验选取谱段为9 881.46～4 119.20 cm~(-1),采用"标准正则变换+原始光谱"组成对原始光谱进行预处理,主成分数为9,建立定性鉴别模型;并经预测集验证,鉴别准确率达到100%。结论说明建立的近红外光谱结合模式识别方法对温郁金源3种药材的定性鉴别在技术上是可行的,可以作为对温郁金源3种药材的快速鉴别。     

瑶药“老班药”特殊分类的化学模式识别方法研究

目的运用近红外漫反射技术结合主成分-马氏距离判别分析方法,对瑶药"老班药"的传统分类进行科学表征。方法采集二十种瑶药"老班药"的近红外漫反射光谱,经预处理后,通过主成分分析-马氏距离判别分析方法构建瑶药"老班药"模式识别模型。结果所得模型对二十种瑶药"老班药"四种类别"虎、牛、钻、风"的正确识别率达到90%以上,表明该模型具有较好的预测分类能力。结论运用简便、快速、无损的近红外漫反射技术结合主成分分析-马氏距离判别分析方法,对瑶药"老班药"的传统分类进行了科学表征,结果表明瑶药"老班药"-"虎、牛、钻、风"的特殊分类有比较可靠的物质基础。近红外光谱漫反射技术结合马氏距离判别分析是一种适用于瑶药"老班药"特殊分类研究的可靠的模式识别方法。     

基于HPLC-ESI-MS法续断发汗前后的成分分析

目的建立高效液相色谱-电喷雾-质谱(HPLC-ESI-MS)分析续断发汗前后成分变化的方法。方法 HPLC采用Agilent Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5.0μm)色谱柱;流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱:0~45 min,6%~20%乙腈;45~90 min,20%~35%乙腈;90~110 min,35%~70%乙腈;110~120 min,70%乙腈;柱温为30℃,体积流量为0.8 m L/min;质谱采用电喷雾离子源,正负离子模式下全扫描检测,并通过[M-H]-、[M+HCOO]-、[M+H]+、[M+Na]+等离子信息推断化合物。结果建立了续断发汗前后的HPLC-ESI-MS图谱,均得到42个色谱峰,通过与对照品和文献对照,推断出了31个化合物;续断经产地加工发汗后,有些成分的量下降,如马钱苷酸、隐绿原酸、绿原酸、咖啡酸、马钱苷、异绿原酸B、续断苷A、续断苷B等;有些成分的量升高,如茶茱萸苷、川续断皂苷X、川续断皂苷VI、川续断皂苷VII、川续断皂苷乙、川续断皂苷XIII、川续断皂苷A等;其他成分的量几乎不变。结论所建立的HPLC-ESI-MS图谱,便于全面控制续断发汗与未发汗药材的质量。     

基于聚类、主成分和判别分析的海马醇提物红外指纹图谱研究

 目的 利用红外光谱指纹图谱技术和数理统计分析方法建立一种海马（Hippocampus）种类鉴别和质量控制方法。方法 应用红外光谱技术分析35个不同来源的海马样品乙醇提取物,通过聚类分析和相似度分析建立海马乙醇提取物的红外光谱指纹图谱;利用主成分分析及判别分析进行海马种类鉴别和质量控制研究。结果 各海马样品乙醇提取物的红外光谱与所建立的指纹图谱共有模式比较相似度良好,符合指纹图谱要求;三斑海马（Hippocampus trimaculatus）与刺海马（H. histrix）分别聚集为不同的类群,实现了不同种类海马的鉴别;在主成分分析的基础上进行判别分析时,吸收峰3 305.4~3 297.7 cm^-1、2 919.7~2 915.9 cm^-1、2 852.2~2 848.4 cm^-1、1 656.6~1 652.7 cm^-1、1 542.8~1 538.9 cm^-1、1 456.0~1 452.2 cm^-1在主成分1上的载荷较大,而1 045.2~1 041.4 cm^-1在主成分2上的载荷最大,据此建立的判别函数可用于区分三斑海马与刺海马,正确率达到93.55%。结论 本实验建立的乙醇提取物红外光谱指纹图谱结合主成分分析及判别分析可快速、准确地鉴别不同种类的海马。     

薏苡仁近红外光谱快速定性定量模型的建立

目的 建立薏苡仁主要成分甘油三油酸酯的近红外定量模型和薏苡仁生品与麸炒炮制品的近红外定性鉴别模型。方法 采用高效液相色谱法测定薏苡仁中甘油三油酸酯的含量,然后运用傅立叶变换近红外光谱技术并结合偏最小二乘法(PLC)、选择谱段为5669.69～4,242.63cm~(-1),以"标准正则变换+一阶导数"对原始光谱进行预处理建立定量分析模型;采用校正模型的相关系数(R)、校正均方根误差(RMSEC)和预测模型相关系数(R)、预测均方根(RMSEP)对校正模型进行评价;同理选择波段9881.46～4119.20cm~(-1),选择主成分数为9,对定性鉴别模型进行校正评价。结果 所建立的定量校正模型中甘油三油酸酯的R值为0.99507,RMSEC为0.0133,RMSEP为0.0231;所建立的定性校正模型的性能指数PI值为92.3,模型预测率为100%。结论 该研究建立的近红外定量定性模型稳定性较好、预测结果较准确,可用于薏苡仁甘油三油酸酯含量的快速测定和薏苡仁不同炮制品的快速鉴定。     

近红外光谱结合主成分分析和聚类分析鉴别炉甘石生品、伪品和炮制品

目的:利用主成分判别分析和聚类分析建立炉甘石生品、伪品和炮制品的近红外光谱鉴别模型。方法:采集炉甘石生品、伪品和炮制品的近红外光谱,每类样品随机划分为训练集和测试集。对光谱预处理方法和建模谱段进行筛选,分别建立主成分判别分析模型及聚类分析模型。结果:光谱经一阶导数预处理,主成分判别分析模型的特征谱段为4 800~4 000 cm~(-1),聚类模型的特征谱段为7 300~7 000,4 800~4 000 cm~(-1)。在主成分判别分析模型中,预测准确率94.34%;在聚类模型中,模型的预测准确率96.23%。结论:所建立的近红外主成分判别分析模型和聚类分析模型均可用于炉甘石生品、伪品和炮制品的鉴别。     

基于UPLC-Triple-TOF/MS分析续断“发汗”前后化学成分

目的通过超高效液相色谱串联三重四级杆飞行时间质谱法(UPLC-Triple-TOF-MS)快速分析续断DipsaciRadix"发汗"前后的化学成分。方法采用Agilent Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5.0μm)色谱柱;流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,体积流量为0.8 mL/min,检测波长215 nm,柱温为25℃;质谱采用UPLC-Triple-TOF 5600+飞行时间液质联用仪,负离子模式下扫描检测,扫描范围m/z 100～1 500。根据高分辨质谱结合二级质谱所得的信息对续断"发汗"前后化学成分进行快速的鉴定。结果根据化合物保留时间、质谱信息,推测了续断"发汗"前后52个共有化学成分,主要包括三萜皂苷类、环烯醚萜类、酚酸类等,同时分析了主要成分的裂解规律。并比较了续断"发汗"前后化学成分的差异,发现发汗后马钱苷酸、绿原酸、马钱苷、异绿原酸A、川续断皂苷VI等20种成分含量降低,咖啡酸、异绿原酸、异绿原酸C、大花双参苷A等成分含量在发汗后升高。结论研究发现续断"发汗"前后化学成分种类上无明显差异,而在成分含量上存在一定差异,未"发汗"续断化学成分含量普遍高于"发汗"续断。本实验采用UPLC-Triple-TOF-MS技术分析"发汗"对续断的化学成分的影响,为探究续断"发汗"前后化学成分物质基础和进一步为续断产地加工方式的研究提供理论依据。     

硫磺熏蒸的葛根横纵截面快速判别分析

采用近红外光谱分析技术,对不同硫磺熏蒸的葛根进行鉴别研究.将葛根饮片及其硫熏饮片进行横截面与纵截面原始光谱的采集,并对原始光谱进行主成分分析(PCA),采用随机法划分样本集,进而比较不同预处理方法,通过对样品不同截面光谱建立判别模型,计算每个模型外部验证的识别率.采用正交性检验和非参数检验对数据进行正态性检验.结果表明不同截面由于结构不同所以吸光度不同,并且对原始光谱进行主成分分析,发现当主成分数为3时累计贡献率达到99.2％,MSC+ 1D+ Savitzky-Golay预处理方法所建模型最好,判别模型中横截面的50个模型,其识别率为(94.4±0.66)％,纵截面的识别率为(95.6±0.75)％,总截面为(95.3±0.65)％.3组识别率的差异并不大.对各组模型的预测性能进行差异性分析,认为横截面、纵截面及总截面建模结果没有明显差异,说明近红外光谱分析技术可以应用于中药材硫熏与否的快速鉴别.     

GC-MS法分析“发汗”对续断挥发性成分的影响

目的通过GC-MS法分析"发汗"对续断Dipsacus asper Wall.ex Henry挥发性成分的影响。方法水蒸气蒸馏法提取续断乙醚萃取物挥发油后,GC-MS法鉴定其成分,面积归一化法计算各成分相对含有量。结果续断在"发汗"前后均鉴定出28种成分,其中26种为共有成分。"发汗"前未检测出9,12,15-十八碳三烯酸甲酯和9-亚甲基-9H-芴,而"发汗"后未检测出顺-13-十八碳烯酸和十七烷醇。结论 "发汗"后续断中共有成分的含有量均有明显变化,变化范围为30.81%~99.34%。     

傅里叶变换红外光谱结合化学计量学方法鉴别不同产地的中药连翘

目的：根据红外光谱的吸收,测定不同产地的连翘,从而为连翘道源产地和质量评价提供依据。方法：收集6个省份66批连翘药材的红外光谱数据,利用多元散射校正(multiplicative signal correction, MSC)、标准正态变量(standard normal variate, SNV)、平滑滤波(Savitzky-Golay, SG)、一阶导数(first derivative, FD)、二阶导数(second derivative, SD)及其组合方法对原始光谱进行预处理,选择最佳预处理方式;利用主成分-马氏距离法和簇类独立软模式法(SIMCA)及偏最小二乘判别分析(PLS-DA)等化学计量学方法对连翘产地进行鉴别研究。结果：利用主成分-马氏距离法、SIMCA分类模型和PLS-DA模型实现了不同产地连翘的100%正确识别。结论：傅里叶变换红外光谱(FT-IR)结合化学计量学方法可以为不同产地的连翘鉴别提供一种新的分析方法。     

续断“发汗”前后HPLC指纹图谱与细胞增殖分化药效的谱效关系研究

目的研究续断"发汗"前后水煎液HPLC指纹图谱与促进大鼠成骨细胞、人成骨样MG-63细胞增殖药效的谱效关系,寻找续断发汗前后发挥药效的物质基础,为明确"发汗"对药效的影响提供依据。方法采用DAD检测器建立续断"发汗"前后水煎液的HPLC指纹图谱,采用灰色关联度分析法建立其谱效关系。结果 14和4号峰代表的化学成分与成骨细胞的增殖分化及MG-63细胞的增殖都具有较高的关联度,关联度均在0.7以上。与成骨细胞增殖、MG-63细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性3个药效指标关联度排序比较靠前的特征峰有14、4、6、16、13、11、5号峰。结合前期研究推断,这些峰可能为川续断皂苷VI、绿原酸、马钱苷、川续断皂苷IV同分异构体、川续断皂苷X、异绿原酸C、咖啡酸。结论川续断皂苷VI、绿原酸、马钱苷、川续断皂苷IV同分异构体、川续断皂苷X、异绿原酸C、咖啡酸可能是续断"发汗"前后影响细胞增殖分化作用的主要物质基础,进而影响其药效。     

续断“发汗”前后水煎液及含药血清对人成骨样MG-63细胞、幼鼠成骨细胞增殖的影响

目的探讨续断"发汗"前后水煎液及含药血清对人成骨样MG-63细胞、成骨细胞增殖的影响。方法将人成骨样MG-63细胞、幼鼠成骨细胞分别与续断"发汗"前后水煎液及大鼠含药血清共同培养。MTT法检测细胞增殖,硝基苯磷酸盐法检测成骨细胞的碱性磷酸酶(ALP)活性。结果续断水煎液和含药血清均能显著促进MG-63细胞和成骨细胞增殖(P0.01),并能显著提高成骨细胞的ALP活性(P0.01),且相同剂量未"发汗"组作用普遍优于或非劣于"发汗"组。结论结合前期成分研究,推断续断"发汗"前后成分的改变影响了其促进细胞增殖和分化的作用,为其进一步研究奠定基础。     

The effect of crude extract from Radix Dipsaci on bone in mice

Radix Dipsaci is used in China for the treatment of bone fractures and other bone diseases. The aim of the study was to assess the systemic effect of Radix Dipsaci consumption on bone histomorphology. Twenty eight-week-old male BALB/c mice were divided into two groups. In the control group, ten mice were daily fed with distilled water. In the Radix Dipsaci group, ten mice were daily fed with distilled water mixed with crude Radix Dipsaci extract. The mice were kept for 5 weeks and were then killed. Using microcomputed tomography, 20 microtomographic slices with an increment of 0.25 mm were acquired to cover the proximal end of the left tibia of each mouse. Quantitative morphometry of the bone structure was performed. Histological sections of the region of micro-tomographic slices were prepared. The results showed that the consumption of Radix Dipsaci extract caused a 4.50% increase in bone volume/tissue volume ratio. The bone trabeculae increased by 11.82% in number so that the bone density was increased. To conclude, Radix Dipsaci extract taken orally increased bone density and altered bone histomorphology.     

续断水提液对小鼠急性毒性和遗传毒性的影响

目的:探讨续断水提液对小鼠的急性毒性和遗传毒性。方法:采用最大耐受剂量法评价续断水提液对小鼠的急性毒性,观察小鼠体重及心脏、脾脏、肝脏、肾脏指数的变化;采用微核实验和单细胞凝胶电泳实验评价其遗传毒性,将40只小鼠随机分成空白组(ig 10 m L·kg~(-1)生理盐水),环磷酰胺组(第4天开始注射0.1 g·kg~(-1)环磷酰胺),续断水提液高、中、低剂量组(ig 32,16,8 g·kg~(-1)续断水提液)。各组小鼠给药5 d后处死并解剖,取骨髓细胞检测嗜多染红细胞的微核率;取胸腺、肝脏及脾脏细胞检测续断水提液对小鼠DNA的损伤。结果:续断水提液经口给药小鼠的最大给药量为80 g·kg~(-1),该剂量对小鼠体重及心脏、脾脏、肝脏、肾脏指数均无显著影响。中、低剂量组小鼠嗜多染红细胞的微核率与空白组比较无显著性差异;但续断高剂量组微核率明显高于空白组(P0.05)。高、中、低剂量组胸腺、脾脏、肝脏细胞尾部DNA百分率,尾矩略高于空白组,但均无显著性差异。结论:续断水提液对小鼠最大给药剂量为80 g·kg~(-1),属无毒级;中和低剂量续断水煎液对小鼠无遗传毒性作用,高剂量续断水提液可诱发小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率升高,存在潜在的遗传毒性。     

续断对去势大鼠骨密度的影响

目的：探讨续断对去势大鼠骨密度的影响。方法：取10月龄雌性SD大鼠60只,随机分为正常组、模型组、雌激素组和续断低、中、高剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组大鼠均行双侧卵巢切除术,术后1周分别给予生理盐水、续断和雌激素进行干预,共90d,观察各组大鼠全身、股骨及腰椎骨密度的变化。结果：正常组和雌激素组大鼠全身骨密度均显著高于其他各组（P〈0.05）;续断低、中、高剂量组大鼠全身骨密度与模型组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;续断低、中、高剂量组大鼠股骨骨密度显著高于模型组（P〈0.05）,续断中、高剂量组大鼠腰椎骨密度显著高于模型组（P〈0.05）。结论：续断能明显抑制去势大鼠股骨及腰椎骨密度的降低,对去势大鼠全身骨密度无明显影响。     

一种基于近红外的红参药材质量快速评价方法

目的应用近红外(NIR)光谱技术和化学计量学方法建立红参药材质量评价的新方法。方法对红参同时进行原料定性鉴别和水分含量检测。将样品NIR光谱同标准光谱库相比较，计算相似度匹配值。以传统的干燥失重法(LOD)为参照方法，应用相关光谱法进行波长选择和多重散射校正(MSC)方法进行光谱预处理，采用偏最小二乘(PLS)回归方法建立NIR光谱预测水分含量的校正模型。结果NIR光谱库可正确区别红参和伪品；最优PLS校正模型相关系数为0．9997。结论此方法快速、准确，可用于中药生产企业的原料药材质量控制。     

基于中红外光谱技术快速测定玄参生品及炮制品中哈巴俄苷含量的研究

 目的 采用中红外光谱衰减全反射光谱技术(attenuated total reflectance,ATR) 对玄参生品与炮制品中哈巴俄苷的含量进行快速无损的测定。方法 以高效液相色谱为对照分析方法,测定玄参炮制前后哈巴俄苷的含量,运用偏最小二乘法（partial least squares,PLS）建立ATR光谱与哈巴俄苷的HPLC分析值之间多元校正模型,并对炮制前后的未知样本进行预测。结果 校正模型决定系数生品为r²=83.81,SEE和SEP分别为0.021 55和0.051 03;制品校正模型决定系数为r²=95.56,SEE和SEP分别为0.007 30和0.034 78。 结论 该法可以作为一种准确、快速、高效、无损的检测方法用于检测中药炮制前后有效成分的变化规律。     

近红外光谱法快速测定天南星药材中水分

目的:应用近红外光谱技术(NIR)建立快速测定天南星药材中水分的方法。方法:采用烘干法测定样品中的水分,运用偏最小二乘法(PLS)建立该含量与NIR光谱之间的多元校正模型,采用相关系数(R),校正均方根误差(RMSEC),内部交叉验证均方根误差(RMSECV)和外部预测均方根误差(RMSEP)对校正模型进行优化和评价。利用校正模型对未知样品的水分进行预测,检验模型的准确度。结果:采用二阶导数法对光谱进行预处理,在4 774~9 845 cm~(-1)波段,选择前6个主成分建立最优校正模型,所建模型的R为0.990 6,RMSEC为0.16,RMSECV为0.38。经外部验证,校正模型的RMSEP和平均回收率分别为0.298和99.8%。结论:该方法具有简便快速、结果准确、无损样品的特点,可以应用于天南星中水分的快速测定。     

续断药材指纹图谱的研究

目的建立续断药材的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,为科学评价及有效控制续断药材质量提供可靠方法。方法采用高效液相色谱法,选用Agilent HC-C18色谱柱,流动相为乙腈(A)-(0.05mol/L)KH2PO4-H3PO4缓冲溶液pH=3.0(B),线性洗脱梯度,检测波长为220nm;流速为1.0mL/min。结果分析了10批不同时间不同产地的道地续断药材,建立了续断药材的HPLC指纹图谱,确立了17个共有峰,并且利用"中药色谱指纹图谱相似度评价软件"对不同样品之间的相似度进行计算。结论该方法准确可靠,重复性好,为续断药材的质量控制提供科学准确的依据。     

基于NIRS技术和PCA-SVM算法6种树脂及其他类中药的快速鉴别

目的:利用近红外漫反射光谱(NIRS)法,结合主成分分析(PCA)和支持向量机(SVM)联用算法,建立6种树脂及其他类中药安息香(Benzoinum),琥珀(Succinum),没药(Myrrha),乳香(Olibanum),松香(Colophonium),天竺黄(Bambusaen Concretio Silicea)的NIR模式识别模型,用于该6味中药的快速鉴别。方法:收集上述6种中药样品,经性状鉴别和理化分析确定正品药材55批,粉碎成均匀粉末,在4 000~12 000 cm~(-1)光谱区,采集各样品粉末的NIR光谱,选取特征谱段9 000~5 400,5 000~4 000 cm~(-1)为建模谱段,分别采用矢量归一化法(vector normalization,VN),一阶导数法(first derivative,FD),二阶导数法(second derivative,SD)3种不同光谱预处理方法进行预处理并分别进行PCA降维。根据主成分空间散点图,优选最佳预处理方法。利用最佳预处理方法处理后光谱的PCA降维数据,建立SVM模式识别模型,SVM模型参数c和g采用网格搜索法结合五折交叉验证进行寻优。对比不同主成分数所建PCA-SVM模型的预测准确率,确定最佳的主成分数,最终建立6种中药NIR快速鉴别模型。结果:在9 000~5 400,5 000~4 000 cm~(-1)建模谱段,确定最佳光谱预处理方法为SD,SD预处理光谱PCA降维后,确定最佳主成分数为3个,累计贡献率达93.57%。经网格搜索法确定最佳SVM建模参数组为c=65 536,g=512。所建PCA-SVM模型对训练集和验证集样品预测正确率均达100%,模型五折交叉验证准确率亦达100%。结论:所建的6种中药NIR光谱PCA-SVM鉴别模型,预测准确率高,模型预测能力强,结合NIRS技术无损、快速的优点,该模型可用于上述6种中药的无损、快速鉴别。