气相色谱法测定苍术组培苗挥发油中β-桉叶醇的含量

目的:建立苍术组培苗挥发油中β-桉叶醇的含量测定方法.方法:用水溶液提取,采用GC内标法测定β-桉叶醇的含量.结果:β-桉叶醇进样量在500～175 0ng范围内线性关系良好,工作曲线为y=0.875 4X 0.101 3,r=0.999 6.平均回收率为105.2%,RSD为3.62%.(n=5).结论:建立的方法可用于苍术组培苗、愈伤组织等挥发油中β-桉叶醇的含量.     

茅苍术中苍术酮、茅术醇、β-桉叶醇和苍术素的同时含量测定及其聚类分析

目的:建立气相色谱法同时测定茅苍术药材中苍术酮、茅术醇、β-桉叶醇和苍术素的含量,根据含量水平对茅苍术药材进行聚类分析。方法:HP-1弹性石英毛细管色谱柱(0.25 mm×30 m,0.25μm);氢火焰离子化检测器(FID);载气氮气;起始温度145℃,保持25 min,以10℃.min-1升温至250℃,保持10 min;进样方式为分流进样,分流比为40∶1;进样量为2μL;采用SPSS 13.0统计软件进行聚类分析。结果:苍术酮、茅术醇、β-桉叶醇和苍术素进样浓度分别在0.012~2.32(r=0.999 8),0.008~1.68(r=0.999 8),0.008~1.76(r=0.999 9),0.016~3.20 g.L-1(r=0.999 7)呈良好线性关系;平均回收率(n=3)分别为98.0%~99.0%,97.7%~99.4%,98.4%~99.2%,97.8%~99.7%;所分析的茅苍术药材大致划分为两类。结论:该方法准确、简便,具有良好的重复性和稳定性,可用于茅苍术药材中苍术酮、茅术醇、β-桉叶醇和苍术素含量的同时测定;道地产区茅苍术与其它非道地产区茅苍术4种活性成分含量的差异较大。     

孟河医派苍术特色炮制品与其他炮制品中β-桉叶醇、苍术酮和苍术素含量差异的研究

目的:探讨孟河医学特色炮制(泔浸麻油拌炒、黑芝麻拌蒸)及其他炮制方法对苍术中β-桉叶醇、苍术酮和苍术素含量的影响,为苍术及其不同炮制品的质量评价、炮制机制的阐释提供科学依据。方法:制备麸炒苍术、米泔水制苍术、焦苍术、泔浸麻油拌炒苍术、黑芝麻拌蒸苍术,超声提取样品,采用气相色谱-质谱联用方法,同时对生苍术和各种苍术炮制品中的β-桉叶醇、苍术酮和苍术素进行定量分析。结果:与生苍术比较,不同炮制品中β-桉叶醇、苍术酮和苍术素的含量均有不同程度的降低,其中泔浸麻油拌炒苍术的β-桉叶醇、苍术酮含量最低,焦苍术的苍术素含量最低。结论:苍术经孟河医学特色炮制后β-桉叶醇、苍术酮和苍术素含量降低,为苍术不同炮制品的临床合理应用提供理论支撑。     

不同叶型北苍术有效成分含量及其生物合成关键酶基因表达量的差异研究

该研究以“裂叶”“狭长叶”“卵圆叶”及“大圆叶”4种不同叶型北苍术为试验材料,建立北苍术根茎中苍术素、白术内酯Ⅰ、β-桉叶醇和苍术酮4种成分同时测定的方法;利用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGR)和法呢基焦磷酸合酶(FPPS)3种生物合成关键酶基因的表达量,采用HPLC比较不同叶型北苍术中4种有效成分含量差异,并探讨有效成分含量与生物合成关键酶基因表达量二者的相关性。结果表明,苍术素、白术内酯Ⅰ、β-桉叶醇和苍术酮分别在3.30～33.00μg·mL^-1(r=0.999 7),12.04～120.40μg·mL^-1(r=0.999 5),29.16～291.60μg·mL^-1(r=0.999 5),14.20～142.00μg·mL^-1(r=0.999 5)呈良好的线性关系,其平均回收率分别为99.77%(RSD=2.1%),98.56%(RSD=1.2%),103.0%(RSD=1.2%),100.6%(RSD=...     

RP-HPLC测定茅苍术中β-桉叶醇的含量

目的:采用RP-HPLC测定茅苍术中β-桉叶醇的含量,为茅苍术质量标准研究提供依据.方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Inertsil ODS-3(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相乙腈-水(68:32);流速1.0 mL·min-1;检测波长200 nm;柱温为25 ℃.结果:测得10批茅苍术药材中β-桉叶醇含量为0.833～4.466 mg·g-1,β-桉叶醇为0.048～1.200 μg,r=0.999 9,平均回收率99.3%,RSD 1.4%(n=9).结论:建立了高效液相色谱法测定茅苍术中β-桉叶醇含量的方法,该方法准确,可靠,可用于茅苍术药材的测定.     

苍术挥发油中β-桉叶醇的含量测定

目的:建立苍术挥发油中β-桉叶醇含量的气相色谱测定法.方法:以正十五醇为内标物,选用石英毛细管柱,10%SE-30为固定相,氮气为载气,FID检测器.结果:在该色谱条件下,样品中β-桉叶醇与内标物正十五醇能够很好的分离,β-桉叶醇的加样回收率为99.60%,RSD为1.30%.结论:本法灵敏、准确、重现性好,可作为苍术挥发油的质量控制方法.     

HPLC指纹图谱结合网络药理学预测北苍术功效关联物质

目的 建立北苍术药材的指纹图谱，利用化学计量学分析色谱峰贡献率，结合网络药理学方法预测分析北苍术药材的功效关联物质。方法 北苍术甲醇提取物的分析采用Agilent Eclipse XDB-C₁₈柱(250 mm×4.6 mm, 5μm);流动相乙腈-0.2%磷酸，梯度洗脱；体积流量1 mL/min;柱温30℃;检测波长208、220、340 nm。通过网络药理学筛选相关成分靶点和通路，构建“成分-靶点-通路”网络。结果 22批样品指纹图谱中有18个共有峰，4个特征峰被指认，分别为绿原酸、β-桉叶醇、苍术素、苍术酮。综合分析表明，苍术素、β-桉叶醇、苍术酮是苍术发挥活性作用的有效成分，预测分析其可作为北苍术的功效关联物质。结论 通过指纹图谱和网络药理学预测北苍术功效关联物质，为北苍术药材质量的全面控制和评价提供科学依据。     

苍术药材的质量标准研究

目的:完善苍术药材的质量标准。方法:对10批茅苍术与10批北苍术药材,采用显微鉴别法、TLC法进行鉴别;并对其水分、杂质、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物、醇溶性浸出物、重金属进行测定;采用HPLC法建立苍术药材的高效液相特征图谱及测定苍术素含量。结果:苍术药材粉末的显微鉴别与薄层鉴别特征显著。在高效液相特征图谱中,20批苍术检出4个主要共有特征峰,其相似度为0.93~0.98。苍术药材中苍术素含量测定在0.5~60 mg·L-1范围内具有良好的线性关系(R2=0.999 1,n=13),平均加样回收率茅苍术为97.84%(1.62%),北苍术为98.63%(RSD为0.81%)。结论:本研究优化后的苍术药材质控方法符合中药质量控制的整体性、综合性及可适用性的要求,可用于苍术药材质量的综合评价。     

苍术油定性定量方法

目的:制定苍术油定性定量方法。方法:采用薄层色谱法对苍术挥发油进行TLC鉴别;气相色谱法测定苍术挥发油中β-桉叶醇的含量。以正十六烷为内标物,HP-5弹性石英毛细管柱。结果:β-桉叶醇在6～14μg范围线性关系良好,r=0.9999,平均回收率98.8%。结论:苍术的TLC鉴别具有专属性;β-桉叶醇的测定方法稳定,重复性好,可作为苍术油原料质量控制方法。     

基于色差原理分析茅苍术、北苍术有效成分含量与颜色的相关性

探索茅苍术、北苍术药材粉末三色空间值ΔL^*(亮度)、Δa^*(红绿)、Δb^*(黄蓝)与内在倍半萜类、聚炔类等4种有效成分含量的相关性，为苍术质量评价提供参考，并建立基于色度量化值的可区分茅苍术、北苍术的定性识别模型。采用色差仪测定23批茅苍术、北苍术的三色空间值(明暗色度值L^*、红绿色度值a^*、黄蓝色度值b^*);采用高效液相色谱法测定23批药材样品中白术内酯Ⅱ、β-桉叶醇、苍术素、苍术酮4种有效成分的含量；采用主成分分析(PCA)和偏最小二乘法判别分析(PLS-DA),以三色空间值为对象，建立区分茅苍术、北苍术的定性识别模型；通过SPSS,对色度值与上述4种指标成分含量进行相关性分析。结果显示，构建的PCA和PLS-DA识别模型可以将茅苍术与北苍术分成2个区域，茅苍术、北苍术的颜色与β-桉叶醇、苍术素等成分含量具有正相关性。因此，所构建的PCA和PLS-DA模型可以成功鉴别茅苍术与北苍术，其外观色泽可快速预测苍术药材内在品质。此研究对苍术的质量评价研究，以及...     

RP-HPLC测定茅苍术中β-桉叶醇的含量

目的：采用RP-HPLC测定茅苍术中β-桉叶醇的含量,为茅苍术质量标准研究提供依据。方法：采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Inertsil ODS-3(4.6 mm×250 mm,5 μm)；流动相乙腈-水(68∶32)；流速1.0 mL·min^-1；检测波长200 nm；柱温为25 ℃。结果：测得10批茅苍术药材中β-桉叶醇含量为0.833～4.466 mg·g^-1,β-桉叶醇为0.048～1.200 μg,r=0.999 9,平均回收率99.3%,RSD 1.4%(n=9)。结论：建立了高效液相色谱法测定茅苍术中β-桉叶醇含量的方法,该方法准确,可靠,可用于茅苍术药材的测定。     

HPLC测定道地产地和主产地茅苍术中β-桉叶醇及其他成分的含量

目的:通过测定道地产地和主产地茅苍术中有效成分及其他成分的含量,综合评价茅苍术的药材品质。方法:采用HPLC对不同产地的茅苍术中的β-桉叶醇、苍术素、苍术素醇和苍术内酯Ⅱ进行含量测定。结果:不同产地的茅苍术中成分的含量差异显著,各地的茅苍术药材质量存在较大差异。β-桉叶醇和苍术素醇含量最高的是湖北英山的野生品;苍术素和苍术内酯Ⅱ含量最高的产地是江苏茅山。结论:综合考虑茅苍术中苍术素、β-桉叶醇、苍术素醇和苍术内酯Ⅱ主产地的茅苍术的质量要比道地产地茅苍术的质量优,该结果为茅苍术的产业化发展提供依据。     

铜胁迫对茅苍术3种药效成分积累及其生物合成2种关键酶基因表达的影响

目的研究铜胁迫对茅苍术药效成分β-桉叶醇、苍术酮和苍术素积累及其生物合成关键酶3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGR)、法呢基焦磷酸合酶(FPPS)基因表达的影响。方法在铜胁迫下,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定茅苍术HMGR、FPPS的表达量;采用高效液相色谱法测定茅苍术3种药效成分的含量;采用SPSS软件对两者进行相关性分析,DPS软件进行灰色关联度分析。结果当铜胁迫在100 mg/kg以内时,茅苍术根茎内FPPS表达量与苍术酮含量略有增加;但铜浓度继续增加时,HMGR、FPPS表达量与3种药效成分含量呈不同程度的下降趋势。铜胁迫下HMGR、FPPS的表达量与β-桉叶醇、苍术酮和苍术素的含量呈显著正相关(P0.05)。灰色关联度分析发现铜胁迫下茅苍术根茎中β-桉叶醇、苍术酮的含量与HMGR、FPPS的表达量关联较大,FPPS基因的表达对β-桉叶醇和苍术酮合成贡献较大,但苍术素含量与这2种关键酶基因的表达关联度较小。结论阐明了铜胁迫下茅苍术2种关键酶基因表达量与3种药效成分含量的变化规律,揭示了铜胁迫下茅苍术药效成分β-桉叶醇、苍术酮与萜类生物合成关键酶HMGR、FPPS的关系,有助于进一步深入研究铜胁迫下茅苍术药效成分合成的分子调控机制,为提高茅苍术药材的品质提供理论基础。     

HPLC测定不同居群苍术中苍术素醇的含量

目的:应用RP-HPLC方法,对不同居群苍术中苍术素醇的含量进行比较。方法:高效液相色谱法,色谱柱Agi-lent TC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温为30℃,流动相为乙腈-水(49∶51),检测波长为337 nm,流速为1.0 mL.min-1。结果:苍术素醇在9.12×10-2~9.12 mg.L-1(r=0.999 9)呈现良好的线性关系;平均回收率为97.15%,RSD 1.5%(n=5);大别山区苍术各居群样品中苍术素醇含量比江苏茅苍术高出4~6倍。结论:建立了一种准确、简便的苍术质量评价方法;不同居群苍术中的苍术素醇含量与其形态及地理分布有一定的相关性。     

茅苍术及其组培栽培品挥发油气质联用分析

目的 研究茅苍术的挥发油,为茅苍术资源的野生抚育及可持续利用提供基础和科学依据.方法 用气相色谱和质谱联用技术测定不同产地茅苍术挥发油,并进行聚类分析.结果 道地产区茅苍术与其组培栽培品聚为一类,其中主要药效成分苍术酮、苍术素、茅术醇、β-桉叶醇相对百分含量没有显著差异,苍术酮和苍术素含量明显高于非道地茅苍术.结论 研究结果体现了茅苍术药效成分道地性的特征,为茅苍术品质评价提供了依据,组培苗可作为人工补种材料.     

茅苍术道地药材的挥发油组成特征分析

目的 :在个体和总体两个水平上研究南苍术挥发油成分所蕴涵的多样性和特征 ,进而揭示茅苍术道地性的化学本质。方法 :分单株采集 7个居群的 47株南苍术根茎 ,用GC-MS分离鉴定挥发油中的 6个主要成分 ,使用SPSS分析软件进行主成分分析和聚类分析。结果 :聚类分析显示茅苍术挥发油主要组分的含量明显不同于非道地南苍术。其他分析表明 ,与非道地南苍术挥发油相比 ,茅苍术总挥发油含量显著低 (P<0.01) ,其归一化百分含量大于 1%的组分数目显著高 (P<0.01) ,苍术酮加苍术素的含量极其显著高 ,而茅术醇加 β-桉叶醇的含量极其显著低 (P<0.001)。主成分分析表明苍术酮在体现茅苍术道地性特征时具有非常特殊的作用。结论 :茅苍术道地性在挥发油中的表现主要是苍术酮、茅术醇、β-桉叶醇及苍术素呈现出的一种特定配比关系 ,即 (0.70～2.00)∶(0.04～0.35 )∶(0.09～0.40)∶1。     

茅苍术悬浮细胞系建立及内生真菌诱导子对其挥发油积累的影响

目的 建立茅苍术悬浮细胞系,研究2种内生真菌诱导子对茅苍术悬浮细胞产挥发油的影响.方法 用内生真菌诱导子对茅苍术悬浮细胞进行诱导处理后超声提取茅苍术细胞中的挥发油,利用气相色谱法测定挥发油中苍术酮、苍术醇、β-桉叶醇和苍术素的量.结果 获得的茅苍术悬浮细胞生长较快,于第21天生物量达到最大,为6.95 g/L.未经诱导处理的茅苍术悬浮细胞中仅检出β-桉叶醇,其在培养21 d的细胞中的量达到最大,为17.469μg/g.添加2种内生真菌(分别属于小克银汉霉属和孔球孢霉属,编号为AL4和AL12)的粗诱导子对茅苍术悬浮细胞生物量及挥发油积累均有影响,其中AL4粗诱导子综合效果更好.添加AL4粗诱导子到14 d的茅苍术悬浮细胞培养基中,诱导子质量浓度为每升培养基含糖20 mg,诱导处理7 d后收集细胞,发现其干质量比同期对照提高3.31%,且检出细胞中苍术酮、苍术醇、β-桉叶醇和苍术素的干质量分别达到14.715、28.395、38.794、8.310μg/g.其中β-桉叶醇的量是对照的2.22倍.结论 添加内生真菌诱导子对茅苍术悬浮细胞的生长及挥发油积累均有促进作用.     

苍术油β-环糊精包合物中苍术素的RP-HPLC法测定

 采用RP-HPLC法，以80%甲醇为流动相，分离了苍术油β-环糊精包合物中主要有效成分苍术素，以外标法測定了苍术素的含量，平均回收率为99. 01%,RSD小于1%，完成测定仅需25min。     

气相色谱“一测多评”用于苍术多成分含量测定的可行性研究北大核心CSCD

该实验基于气相色谱内标法,通过建立β-桉叶醇与其他3种倍半萜类成分的相对校正因子（RCF）,实现只用1个对照品测定苍术药材中多个倍半萜类成分的含量。结果表明,在一定的线性范围内,β-桉叶醇与苍术酮、白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅱ间的RCF分别为0.823,0.690和0.766,且在不同实验条件下重现性良好。该方法只需测定苍术中β-桉叶醇的含量,其余倍半萜含量由其RCF计算得到,实现一测多评,并与常规内标法比较,所得结果均无显著性差异,所建立的校正因子可用于苍术药材的定量分析及质量评价。     

基于AHP-CRITIC法探讨英山茅苍术最佳采收期

目的基于AHP-CRITIC权重分析法探讨英山茅苍术最佳采收期。方法通过水蒸气蒸馏法测定挥发油含有量、GC法测定β-桉叶醇含有量、HPLC法测定苍术素、(4E,6E,12E)-十四碳三烯-8,10-二炔-1,3-二乙酸酯、苍术酮、白术内酯Ⅰ及白术内酯Ⅲ的含有量,并采用AHP法、CRITIC法及AHP-CRITIC法计算各指标权重,多指标综合评价5至12月英山茅苍术的最佳采收期。结果 3种权重分析方法计算后,7月得分最低,11月得分最高,湖北英山茅苍术的最佳采收期为11月。结论该方法合理,可用于评价英山茅苍术的最佳采收期。