联合应用Schwann细胞与同种异体基底膜修复鼠坐骨神经缺损的实验研究

目的 :观察自体Schwann细胞与同种异体基底膜合用促进鼠坐骨神经再生的能力。方法 :将无细胞成分的同种异体基底膜与Schwann细胞混合培养 7d ,获得含Schwann细胞的基底膜。 2 4只BALB/C小鼠随机分为A、B两组并分别移植含有Schwann细胞的基底膜及无细胞成分的基底膜。术后 1,2 ,4,8周测定A、B两组坐骨神经功能指数 (SFI)及再生髓鞘平均厚度 (TRMS)。结果 :术后 1,2周 ,A、B两组SFI及TRMS无差异 (P >0 .0 5 ) ,术后 4,8周 ,A组SFI及TRMS优于B组 (P <0 .0 1)。结论 :自体Schwann细胞与同种异体基底膜合用可较单纯的基底膜更好地促进神经再生及功能的恢复。     

CSEA用于肾移植麻醉的研究

为探讨脊麻 硬膜外联合阻滞（ＣＥＳＡ） 在同种异体肾移植手术中的效果,对２２ 例同种异体肾移植手术病人,使用脊麻 硬膜外联合阻滞（Ａ 组） ,并与２２ 例连续硬膜外阻滞（Ｂ 组） 进行比较。结果：Ａ 组麻醉起效快〔Ｔ８ 阻滞时间（２ ．９ ±１ ．１） ｍｉｎ〕,与Ｂ 组〔（９ ．０ ±１ ．９） ｍｉｎ〕比较有非常显著性差异（ Ｐ＜ ０ ．０１） ;２ 组对循环系统影响相似（ Ｐ＞０ ．０５） 。Ａ 组病人无１ 例主诉术后头痛。结果提示：脊麻 硬膜外联合阻滞是同种异体肾移植手术安全、可靠的麻醉方法之一。     

冷冻保存神经后自体和异体移植的实验研究

目的：探讨冷冻保存神经自体和异体移植对神经再生的影响。方法：４０只ＳＤ大鼠用反复冷冻、复温的神经和未经任何处理的坐骨神经移植体,进行自体和异体移植。Ａ组为冷冻神经移植于自体原位中;Ｂ组为冷冻神经移植于异体中;Ｃ组为未冷冻神经移植于异体中;Ｄ组为未冷冻神经移植于自体原位中。术后６,１２周光镜、电镜下行组织学观察,检测各项电生理指标。结果：Ａ 组可见到较多的再生轴突通过移植体;Ｂ组可以看到炎性细胞侵润,但仍可见再生轴突通过移植体;Ｃ组可见到大量炎性细胞侵润,有极少量再生轴突通过移植体;Ｄ组可见到大量再生轴突通过移植体。电生理指标和伸趾长肌恢复率Ａ,Ｄ两组明显好于Ｂ,Ｃ两组。结论：神经冷冻处理可以降低抗原性,本实验为同种异体神经移植提供理论依据。     

血清IL-2水平在大鼠心脏移植术后早期急性排斥反应诊断中的意义

大鼠同种异体心脏异位移植模型实验动物分为：对照组、 Ａ Ｌ Ｓ 组、 Ｃｓ Ａ 组及不用药组,分别于术后２ 、４ 、６ 天应用 Ｍ Ｔ Ｔ 法测定受体大鼠血清 Ｉ Ｌ－ ２ 水平,并于处死后行病理组织学检查。其中 Ａ Ｌ Ｓ 组为受体胸腺内注射供体脾细胞及腹腔注射 Ａ Ｌ Ｓ（ 抗淋巴细胞血清） 移植组。实验结果：不用药组的 Ｉ Ｌ－ ２ 水平较对照组、 Ａ Ｌ Ｓ 组、 Ｃｓ Ａ 组明显增高。病理组织学检查不用药组的排斥反应明显高于其它３ 组。结论：受体胸腺内注射供体脾细胞同时腹腔内注射 Ａ Ｌ Ｓ可诱导产生同种异体心脏移植免疫耐受。在心脏同种异体移植排斥反应中,受体血清 Ｉ Ｌ－ ２ 水平的增高可作为诊断心脏同种异体移植术后早期急性排斥反应的一个有效指标。     

同种异体神经与自体神经瘤联合修复周围神经缺损的实验研究

目的 探讨用优化法处理后的脱细胞同种异体神经和自体神经瘤组成的联合体修复大鼠坐骨神经缺损的效果. 方法 30只SD大鼠随机分为2组(每组15只):A组(自体神经瘤模型组),行同种异体神经与自体神经瘤联合移植;B组(坐骨神经缺损模型组),做自体神经移植.将30只成年Wistar大鼠作为神经供体,取其单侧坐骨神经,制备为脱细胞同种异体神经.在术后的8周、16周进行坐骨神经功能指数评价、神经电生理和组织学检查. 结果 两组模型制备成功后,术后8周时大鼠均出现肢体躲避反应;术后16周时均有大量神经纤维通过移植体,两组再生神经的纤维数量、直径及髓鞘比较,差异无统计学意义;术后8周电生理检测发现A组再生神经的传导速度明显慢于B组(P<0.05),术后16周两组比较,差异无统计学意义(P>0.05);术后16周A组和B组坐骨神经功能指数比较,差异无统计学意义(P>0.05). 结论 同种异体神经与自体神经瘤组成的联合体能修复周围神经缺损,恢复神经的传导功能,有效地促进神经的再生,此联合体是一种良好的自体神经移植替代材料.     

大鼠坐骨神经缺损的神经移植对脊神经节的P物质阳性神？…

目的：研究大鼠坐骨神经缺损的神经移植对脊神经节的Ｐ物质阳性神经元的影响。方法：ＳＤ大鼠１５只,切除右侧坐骨神经１ｃｍ,在手术显微镜下将异体或自体右侧坐骨神经１ｃｍ移植于神经缺损处。对照组只切除右侧坐骨神经１ｃｍ,不进行神经移植。术后１２周取两侧脊神经节,冰冻切片,免疫细胞化学染色显示Ｐ物质（ＳＰ）,对ＳＰ阳性神经元进行图像分析。结果：ＳＰ阳性神经元为中、小型细胞,分散于大的脊神经节细胞中。手术侧与     

5/6肾大部分切除大鼠甲状旁腺细胞凋亡的变化及钙三醇的调节作用

目的：探讨慢性肾功能衰竭（ＣＲＦ）大鼠甲状旁腺细胞凋亡的变化以及钙三醇的调控作用。方法：研究对象为ＳＤ大鼠，分３组：Ａ组：ＣＲＦ组；Ｂ组：ＣＲＦ加用钙三醇组，每天皮下注射钙三醇５０ｎｇ；Ｃ组：假手术对照组。术后８周，采用流式细胞术检测大鼠甲状旁腺凋亡细胞比率（ＡＰＯ）和细胞周期，同时检测血清肌酐（ＳＣｒ）、Ｃａ＋｛２＋｝、Ｐ＋｛３－｝、碱性磷酸酶（ＡＬＰ）、全段甲状旁腺素（ｉＰＴＨ）以及尿内生肌酐清除率（ＣＣｒ）。结果：Ａ组和Ｂ组大鼠ＣＣｒ均较Ｃ组下降了近一半；Ａ组ＡＬＰ和ｉＰＴＨ显著高于Ｂ组和Ｃ组（％Ｐ％＜０．０１），而Ｂ组和Ｃ组差异无显著性（％Ｐ％＞０．０５）；Ａ组ＡＰＯ、Ｓ期细胞比率（ＳＰＲ）和增殖指数（ＰＩ）分别为（０．２３±０．１９）％、（１１．９９±２．７３）％和（１６．９３±３．４２）％，Ｂ组分别为（１．３２±０．５１）％、（２．９５±１．５８）％、（５．２４±２．２９）％，Ｃ组分别为（１．２９±０．４５）％、（０．７３±０．４６）％、（１．７６±０．７０）％，Ａ组ＡＰＯ显著低于Ｂ组和Ｃ组（％Ｐ％＜０．０１），Ａ组ＳＰＲ和ＰＩ显著高于Ｂ组和Ｃ组（％Ｐ％＜０．０１），但Ｂ组ＳＰＲ和ＰＩ仍高于Ｃ组     

经皮球囊二尖瓣分离术与闭式二尖瓣分离术效果比较

对行经皮球囊二尖瓣分离术（ＰＢＭＣ）９８例风湿性二尖瓣狭窄患者与近年基本条件相似而行外科闭式二尖瓣交界分离术（ＣＭＶ）的４０例患者的疗效进行了比较。结果表明：①ＰＢＭＣ组二尖瓣口面积（ＭＶＡ）由０．９２±０．２４ｃｍ２增至２．１４±０．７１ｃｍ２（Ｐ＜０．００１）；ＣＭＶ组ＭＶＡ由０．８５±０．２２ｃｍ２增至２．３５±０．５４ｃｍ２（ｐ＜０．００１）。ＭＶＡ增值两组差异无显著性（Ｐ＞０．５０）。②Ｂ超二尖瓣形态特征记分，两组结果相仿。③两组患者术后１～２周Ｘ线心胸比例，无论与同组术前相比较或两组间比较均无显著性差异（Ｐ＞０．５０），但肺淤血、心功能均明显改善。④ＰＢＭＣ不需开胸，创伤小，康复快，对术后再狭窄患者更为适宜。     

大鼠肝大部切除后脾对其再生能力的影响

目的；探讨脾脏大肝大部分切除后对其再生能力的影响，方法：将５０只ＳＤ大白鼠随机分成两组；Ａ组：行脾切除加７０％肝大部分切除；Ｂ组：模拟脾切除加７０％肝大部分切除，结果：在肝大部分切除后第１天和第２天，Ａ组肝再生指数分别为２．６３％±０．２９％和３．５１％±０．２２％，Ｂ组分别为１．６５％±０．２７％和２．６２％±０．３２％，Ａ组明显高于Ｂ组（Ｐ〈０．０５）。血清转氨酶：Ｂ组术后第１天９７２．４７±     

小鼠脾来源树突状细胞与NS_1骨髓瘤细胞融合体的抗肿瘤作用

目的：观察ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾来源树突状细胞（ｓｐｌｅｅｎｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌｓ,ｓＤＣ）与肿瘤细胞融合体的抗肿瘤效应。方法：以灭活的ＮＳ１细胞免疫活化ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠,取其ｓＤＣ与ＮＳ１骨髓瘤细胞融合,并筛选出融合细胞;用此融合细胞作为瘤苗,免疫治疗皮下荷ＮＳ１瘤的小鼠２次,间隔１周。结果：融合细胞瘤苗本身无致瘤性。用融合细胞瘤苗免疫治疗荷瘤小鼠后,其瘤体消失,且在观察期６０ｄ内未见肿瘤转移和复发。结论：脾来源树突状细胞与ＮＳ１细胞融合瘤苗免疫荷瘤小鼠后,激发其体内存在的抗ＮＳ１肿瘤效应。     

抗人乳腺癌血清抗原单克隆抗体GB2的制备及鉴定

采用人乳腺癌血清抗原免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０融合，经ＥＬＩＳＡ筛选，有限稀释及克隆后获得了一析玢泌特异抗体的杂交瘤细胞株，命名为单克隆抗体ＧＰ２（ＭｃＡｂＧＢ２）。ＭｃＡｂＧＢ２经硫酸铵及ＤＥＡＥ纤维素纯化后效价达１：２×１０＾６，经琼脂糖免疫双扩证明ＭｃＡｂＧＢ２属小鼠ＩｇＧ１亚类。免疫印迹结果表明ＭｃＡｂＧＢ２识别的抗原呈两条区带，分子量分别为１１６ｋｄ及４５ｋｄ     

甲壳胺膜管修复周围神经缺损的实验研究

观察甲壳胺膜管桥接大鼠坐骨神经缺损，对神经再生的作用。方法ＳＤ大鼠１０２只，随机分为Ａ、Ｂ、Ｃ３组，按缺损长度与神经干直径之比制作实验动物模型（Ａ组：缺损３倍，Ｂ组：缺损５倍，Ｃ组：缺损８倍）。设自身对照，双后肢随机作为实验侧和对照侧。实验侧用甲壳胺膜管桥接缺损，对照侧用肌表面旷置法。术后４，８，１２周作大体观察、组织学观察和远端轴突再生率的比较。结果４周后各组双后肢均形成溃疡；８周后Ａ组溃疡愈合；１２周后Ｂ组实验侧溃疡愈合，Ａ、Ｂ组均无明显肌萎缩，能展趾活动，有肌肉收缩现象。Ｃ组及Ｂ组对照侧溃疡及肌萎缩加重。桥接体周围无瘢痕粘连，与周围组织分界清楚。各时相每组内实验侧远端轴突再生率优于对照侧（Ｐ＜０００１）。１２周后，３组间实验侧远端轴突再生率两两比较：Ａ组优于Ｂ、Ｃ组，Ｂ组优于Ｃ组（Ｐ＜０００１）。Ａ、Ｂ组髓鞘成熟良好，Ｃ组仍有髓鞘溃变现象；３组实验侧均无胶原纤维增生。结论甲壳胺膜管桥接周围神经缺损，可防止瘢痕侵入，有利于轴突再生。     

加味当归补血汤及枸杞子对TH细胞缺陷小鼠的实验治疗

实验性ＴＨ细胞缺陷小鼠口饲加味当归补血汤（ＢＴ）和枸杞子（ＬＢ）２周后，其免疫功能得到明显改善，表现为：（１）脾细胞对ＣｏｎＡ，ＬＰＳ的反应性及自然增殖率明显高于未治疗免疫缺陷组（ＩＤ），Ｐ＜０．０１；（２）ＭＬＲ：ＢＴ组提高１．６倍，ＬＢ组提高３．６倍；（３）对ＴＤ抗原的免疫应答，ＩｇＧ，ＩｇＥ抗体应答及ＤＴＨ都著高于ＩＤ组；（４）ＣｏｎＡ活化的脾细胞对外源性ＩＬ－２的反应性大大高于ＩＤ组，接近     

乙型肝炎病毒DNA疫苗的免疫效果

用已构建的不同载体乙型肝炎。基因疫苗（ＰＣＲ３．１－Ｓ，ｐｃＤＮＡ３－Ｓ）和乙型肝炎Ｃ基因疫苗（ＰＣＲ３．１－Ｃ０分别给Ｂａｌｂ／ｃ小鼠多点肌肉注射，２周后追加免疫一次，用ＥＬＩＳＡ法及ＭＴＴＩ地分别检测小鼠血清抗－ＨＢｓ、抗－ＨＢＣ抗体及地ＨＢｓＡｇ或ＨＢｃＡｇ的特异性增殖反应。结果：免疫接种２周后小鼠血清抗－ＨＢＳ及抗－ＨＢＣ抗体ＯＤ值分别为０．８３７３和０．７９６１均明显高于对照组（０．１２     

单克隆抗体SZ—39识别的人脑胶质瘤细胞SHG—44膜蛋白的提取

目的：提取ＭｃＡｂ ＳＺ－３９识别的人脑胶质瘤细胞ＳＨＧ－４４膜抗原蛋白,为其进一步研究作准备。方法：分别以两组去污剂（１）２％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１１４;（２）１％ＳＤＳ、１％去氧胆酸钠、１％ＮＰ－４０、１ｍｍｏｌ／Ｌ ＥＤＴＡ裂解ＳＨＧ－４４细胞,提取细胞蛋白,再以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法分离蛋白,并以Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ法分析鉴定。结果：ＭｃＡｂ ＳＺ－３９识别的蛋白呈一条区带,分子量为６０ｋＤ     

周围神经损伤的瓦勒变性期修复

目的：研究瓦勒变性期修复神经损伤的效果。方法：２０只ＳＤ大鼠均分为两组,切断右侧坐骨神经,Ａ组在神经损伤后两周修复,Ｂ组在神经损伤时就修复。术后３个对比两组再生神经的功能,电生理和形态学指标。结果：Ａ组大鼠再生神经的功能,电生理和形态学指标与Ｂ组比较差异有显著性。     

γ—干扰素对过度增生的血管平滑肌细胞癌基因表达的抑制作用

本实验建立了兔腹主动脉球囊扩张（ＢＡ）动物模型。以地高辛标记的Ｃ一ｆｏｓ、Ｃ一ｍｙｃ，Ｎ一ｒａｓ癌基因探针进行ＢＡ术后血管段组织的原位杂交，以生物素标记的Ｃ一ｆｏｓ、ｃ一ｍｙｃ、Ｎ一ｒａｓ探针对经ＢＡ组织培养液刺激的、培养的血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）进行细胞的原位杂交。结果显示：（１）ＢＡ术后再狭窄的血管段中ｃ一ｆｏｓ、ｃ一ｍｙｃ、Ｎ一ｒａｓ三种癌基因表达均增高，而且表达颗粒主要分布于粥样斑块中，中膜平滑肌层颗粒稀少。正常血管段无这三种癌基因表达。（２）经ＢＡ组织培养液刺激的ＳＭＣ胞浆中充满ｃ一ｆｏｓ，ｃ一ｍｙｃ癌基因表达颗粒。Ｎ一ｒａｓ癌基因表达主要位于细胞核膜部位。未给ＢＡ组织液刺激的ＳＭＣ未见以上癌基因表达。γ—干扰素可以部分抑制其表达。     

黄曲霉毒素B_1单克隆抗体的制备和鉴定

以自己合成的黄曲霉毒素Ｂ＿１一人血清白蛋白（ＡＦＴＢ＿１－ＨＳＡ）偶联物免疫ＢＡＬＢ／ｃ鼠，应用杂交瘤技术，建立了两株能持续分泌抗ＡＦＴＢ＿１单克隆抗体（ＡＦＴＢ＿１ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株，命名为ＩＢ５和２Ｆ１，接种ＢＡＬＢ／ｃ鼠腹腔均能诱发产生含特异性抗体的腹水。用间接竞争抑制ＥＬＩＳＡ鉴定ＭｃＡｂ的反应特异性，使ＭｃＡｂ与固相黄曲霉毒素Ｂ＿１一牛血清白蛋白（ＡＦＴＢ＿１－ＢＳＡ）结合产生５０％抑制所需的ＡＦＴＢ＿１、Ｂ＿２、Ｇ＿１、Ｇ＿２浓度依次为：１Ｂ５４．０、３６．９、２３．３、４０３．３ｎｇ／ｍｌ，２Ｆ１２．４、２．６、２．８、４。７ｎｇ／ｍｌ。     

急性白血病Bcl-2反义寡核苷酸基因治疗的实验研究

目的选用２０ｎｔＢｃｌ－２反义硫代磷酸寡核苷酸（Ａｓ－Ｐｓ－ＯＤＮ，ＡＳＰＯ），并以其正义寡核苷酸（ＳＰＯ）为对照做如下问题探讨：（１）普通剂量（５～２０μｍｏｌ）ＡＳＰＯ对ＨＬ６０细胞、正常及缺铁性贫血患者骨髓细胞及急性白血病病人骨髓细胞或外周白血病细胞（幼稚细胞≥８５％）的作用；（２）大剂量（１６０μｍｏｌ）正义或反义寡核苷酸对ＨＬ６０细胞作用的特点，并通过ＡＳＰＯ引起ＨＬ６０细胞Ｂｃｌ－２蛋白表达变化和ＳＰＯ对ＨＬ６０细胞毒性的变化，寻找可能的最佳效应剂量和最小毒性剂量；（３）ＡＳＰＯ联合化疗药物对ＨＬ６０细胞和原代急性白血病细胞的作用。方法台盼蓝拒染试验和克隆培养测定细胞的生长能力；免疫细胞化学染色和流式细胞仪检测Ｐ２６Ｂｃｌ－２蛋白表达，ＲＴ－ＰＣＲ法检测Ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ（Ｂｃｌ－２／β－ａｃｔｉｎ）相对水平；光、电镜下观察凋亡细胞形态，吖啶橙染色及流式细胞仪检测细胞凋亡率，ＤＮＡ提取及电泳观察凋亡细胞ＤＮＡ降解片段的形成；ＭＴＴ法检测ＰＳ－ＯＤＮ及化疗药物的细胞毒作用。结果（１）普通剂量的ＡＳＰＯ即能降低ＨＬ６０细胞及白血病细胞Ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达，并抑制ＨＬ６０细胞及１８／２０例白血病细     

血清IL—2水平在大鼠心脏移植术后早期急性排斥反应诊断中 …

大鼠同种异体心脏异位移植模型实验动物分为：对照组、ＡＬＳ组、ＣｓＡ组及不用药组，分别于术后２、４、６天应用ＭＴＴ法测定受体大鼠血清ＩＬ－２水平，并于处死后行病理组织学检查。其中ＡＬＳ组为受体胸腺内注射供体脾细胞及腹腔注射ＡＬＳ（抗淋巴细胞血清）移植组。实验结果：不用药组的ＩＬ－２水平较对照组、ＡＬＳ组、ＣｓＡ组明显增强。病理组织学检查不用药组的排斥反应明显高于其它３组。结论：受体胸腺内注射供体脾细