复方鳖甲软肝片防治大鼠腺嘌呤性慢性肾衰竭作用的实验研究

目的:观察复方鳖甲软肝片对大鼠腺嘌呤性慢性肾衰竭的防治作用.方法:将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、尿毒清组、复方鳖甲软肝片小、中、大剂量组.尿毒清组、复方鳖甲软肝片小、中、大剂量组,以200 mg/kg的腺嘌呤及尿毒清组、复方鳖甲软肝片不同剂量灌胃,共4周,在第2周和第4周时留取24 h尿液、称重,第4周处死大鼠,取血、留取肾组织.测定尿、血Ca2 、P3-及Scr、BUN,用SPSS 11.0进行统计学处理.结果:复方鳖甲软肝片组与模型组比较,慢性肾衰竭大鼠的尿、血Ca2 、P3-及Scr、BUN有不同程度的改善.结论:复方鳖甲软肝片对腺嘌呤性大鼠慢性肾衰竭有一定的防治作用.     

肾毒宁冲剂对慢性肾衰竭大鼠肾组织TGF-β1和CTGF的影响

目的：观察肾毒宁冲剂对5/6肾切除慢性肾衰竭（CRF）大鼠肾组织转化生长因子-β1（TGF-β1）、结缔组织生长因子（CTGF）的影响。方法：取雄性SD大鼠,通过Platt法5/6肾切除制作CRF模型,术后2周行大鼠断尾采血,测定血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）值,根据Scr随机分为模型组、尿毒清组及肾毒宁组,并设正常组和假手术组。饲养或治疗8周后处死大鼠,测定血Scr、BUN、Hb、RBC,用Real-time PCR法测定肾组织内TGF-β1及CTGF的表达。结果：肾毒宁组血Scr、BUN、Hb、RBC与模型组相比有统计学差异（P〈0.01）。肾毒宁冲剂对肾组织内TGF-β1、CTGF表达有较强的抑制作用（P〈0.05和P〈0.01）,尿毒清冲剂作用次之,肾毒宁组与尿毒清组间无统计学差异。结论：肾毒宁冲剂通过抑制肾组织TGF-β1、CTGF的表达,降低血清Scr、BUN含量,从而起到延缓CRF肾功能的恶化,改善肾脏纤维化的作用。     

复方鳖甲软肝片对单侧输尿管结扎大鼠肾组织NF-κB 表达的影响

目的:探讨核转录因子-κB(NF-κB)在肾间质纤维化中的表达情况及其复方鳖甲软肝片的干预作用.方法:采用单侧输尿管结扎(UUO)肾间质纤维化模型.将大鼠随机分为7组,即:正常组、假手术组、模型组、苯那普利组和复方鳖甲软肝片低、中、高剂量组.术后4周处死大鼠,观察肾组织病理改变,并应用免疫组织化学方法检测肾组织NF-κB的表达.结果:模型组肾组织表现为纤维化病理改变,正常组及假手术组肾小管上皮细胞、肾间质细胞胞浆有较弱的NF-κB表达;模型组肾小管上皮细胞、肾间质细胞激活的NF-κB在胞核强阳性表达;复方鳖甲软肝片组病理改变较模型组纤维化程度减轻,NF-κB的表达较模型组显著减少,有统计学差异(P<0.05),与苯那普利组比无统计学差异但也有所减少.结论:复方鳖甲软肝片通过抑制NF-κB的过度表达而减缓肾纤维化病程进展.     

温阳活血方对UUO大鼠肾组织TGF-β1表达的影响

目的：探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）在肾间质纤维化中的表达情况及温阳活血方的干预作用。方法：采用单侧输尿管结扎（UUO）肾间质纤维化模型。将大鼠随机分为6组，即：假手术组、UUO模型组、蒙诺治疗组、温阳活血方治疗组、肉苁蓉治疗组和桃仁治疗组。药物治疗14d后，检测尿β2-微球蛋白（β2-MG），观察肾组织病理改变，并应用免疫组织化学方法检测肾组织TGF-β1的表达。结果：假手术组肾小管上皮细胞、肾间质细胞胞浆TGF一融有较弱的表达，模型组呈强阳性表达，温阳活血治疗组病理改变较模型组纤维化程度减轻，且TGF-β1的阳性表达较模型组显著减弱，β2-MG排出减少，有统计学差异（P〈0．05）。结论：温阳活血方可能通过抑制TGF-β1的表达，从而减少β2-MG的排出，减轻肾小管上皮细胞的损害，保护肾小管功能，减缓间质纤维化的进展。而此方中桃仁的作用优于肉苁蓉。     

海昆肾喜胶囊对慢性肾衰竭大鼠TGF-β_1表达的影响

慢性肾衰竭（CRF）是严重影响人类健康的公共问题之一,其防治已得到广泛重视,海昆肾喜胶囊是目前临床常用药物之一,对于CRF早期治疗具有一定的疗效,本文建立CRF动物模型,观察海昆肾喜胶囊对CRF大鼠转化生长因子-β1（trans,forming growlh factor—betal,TGF-β1）表达的影响,进一步探讨其治疗机制,为临床药用提供依据。     

水飞蓟素对单侧输尿管结扎大鼠肾组织TGF-β1及TSP-1表达的影响

目的 探讨水飞蓟素对肾间质纤维化的影响及其可能机制.方法 将36只雄性SD大鼠随机分为假手术组（C组）、模型组（M组）和水飞蓟素治疗组（S组）,各12只.对M组和S组大鼠建立单侧输尿管结扎（UUO）模型,C组仅分离左侧输尿管,未行结扎.S组大鼠给予水飞蓟素（50 mg/kg）灌胃.每组大鼠于术后第7、21天分别处死6只.观察各组大鼠肾组织病理学表现,采用RT-PCR方法检测各组大鼠肾组织转化生长因子β1（TGF-β1）和血小板反应蛋白1（TSP-1）mRNA表达水平.结果 术后第7天,M组大鼠肾组织出现肾小管明显扩张,偶见肾小管上皮细胞坏死、肾间质水肿、轻度纤维化,并有较多单个核细胞浸润;第21天,肾小管扩张进一步加重,并出现肾小管上皮细胞大量坏死,并可见肾间质大量胶原纤维组织增生,伴大量炎症细胞浸润;S组较M组肾组织损伤减轻,肾小管间质损伤指数降低（P〈 0.05）.术后第7、21天,M组TGF-β1和TSP-1 mRNA表达均较C组升高（P〈0.01）,S组TGF-β1和TSP-1 mRNA表达均较M组降低（P〈0.05）.结论 水飞蓟素可减轻肾组织损害,延缓肾间质纤维化的进展,可能与其抑制肾组织TSP-1及TGF-β1的表达有关.     

健脾清化方对慢性肾衰竭大鼠血清刺激肾小管上皮细胞TGF-β1表达的影响

目的观察健脾清化方对慢性肾衰竭（CRF）大鼠血清刺激肾小管上皮细胞转化生长因子β1（TGF-β1）mRNA表达的影响。方法模型组和治疗组大鼠予以5／6肾切除法建立CRF模型,并分别予以蒸馏水和健脾清化方灌胃8周。干预结束后,腹主动脉采血,分离血清。体外培养猪近端肾小管上皮细胞株（LLC-PK）,分别用含5％、10％的各组大鼠血清的培养液培养,在第8h和24h时用消化液消化并收集细胞,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测各组大鼠。肾组织TGF-β1mRNA的表达水平。结果在血清浓度及培养时间相同的情况下,治疗组肾小管上皮细胞TGF-β1mRNA的表达较模型组降低（P〈0．01）。结论健脾清化方治疗8周后提取的含药血清能明显降低肾组织TGF-β1mRNA的表达,这可能是健脾清化方延缓CRF进展的机制之一。     

消瘀泄浊饮对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织TGF-β_1表达的影响

目的：通过研究消瘀泄浊饮及其化裁方痰瘀同治方对单侧输尿管（UUO）大鼠肾间质TGF-β1表达的影响,探讨其抗肾间质纤维化的可能机制。方法：实验采用UUO大鼠模型,将40只SD大鼠随机分为5组：假手术组、模型组、洛汀新治疗组、消瘀泄浊饮组、痰瘀同治组。药物治疗14天后测定大鼠血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）水平;肾组织HE染色观察病理改变;采用免疫组织化学方法检测肾组织TGF-β1的表达;RT-PCR检测肾组织TGF-β1mRNA的表达;Western-blot检测肾组织TGF-β1蛋白表达。结果：与假手术组比较,模型组大鼠Scr、BUN、TGF-β1表达显著升高,差异有统计学意义（P〈0.01,P〈0.05）;消瘀泄浊饮、痰瘀同治方能够明显降低实验大鼠血清肌酐、尿素氮水平,能降低肾组织中TGF-β1表达,与模型组比较差异有统计学意义（P〈0.01,P〈0.05）,形态学观察也显示其肾脏损害轻于模型组。从实验数据来看,痰瘀同治方治疗组有优于消瘀泄浊饮治疗组的趋势。结论：消瘀泄浊饮、痰瘀同治方能通过下调TGF-β1的表达,从而延缓肾间质纤维化的进展。痰瘀同治方的作用可能优于消瘀泄浊饮。     

复方鳖甲软肝片方对TGF-β1诱导的肾间质成纤维细胞增殖及分泌细胞外基质的影响

目的：观察中药“复方鳖甲软肝片方”对TGF-β1诱导的肾间质成纤维细胞（NRK-49F）增殖及分泌细胞外基质的影响。方法：以2 ng/ml hTGF -β1诱导 NRK -49F 细胞,并以软肝片方大、中、小剂量（分别以7g/kg、3.5 g/kg、1.75 g/kg）药物血清进行干预,分别应用MTT法、ELISA、免疫细胞化学方法,观察肾间质成纤维细胞增殖、细胞上清FN浓度及ColⅠ、ColⅢ的表达。结果：软肝方含药血清对hTGF-β1诱导的细胞增殖无影响;但大、中剂量软肝方能不同程度地降低FN的分泌及ColⅠ、ColⅢ的表达,软肝方大剂量组作用最强（P〈0.01）。结论：复方鳖甲软肝片方在一定程度上抑制TGF-β1诱导的肾间质成纤维细胞ColⅠ或ColⅢ的表达,大剂量软肝方作用最强。     

INF-γ对肝纤维化大鼠TGF-β1/Smad3蛋白表达的影响

目的通过干扰素-γ(IFN-γ)治疗大鼠肝纤维化,观察大鼠肝脏组织病理学及TGF-β1,Smad3蛋白表达水平的变化,探讨INF-γ抗肝纤维化作用机制。方法将48只雄性SD大鼠随机分成对照组、模型组和实验组3组。用3%硫代乙酰胺(TAA)100mg/kg复制大鼠肝纤维化模型,实验组同时肌肉注射INF-γ5U/d。在肝纤维化诱导第8周处死,用Masson染色观测肝组织纤维化程度,免疫组化法检测肝组织TGF-β1、Smad3蛋白表达水平。结果实验组肝纤维化程度、TGF-β1和Smad3表达比正常组增高(P<0.05),比模型组显著降低(P<0.05)。结论 IFN-γ可能通过抑制TGF-β1/Smad3蛋白的表达,从而起到抗肝纤维化的作用。     

肾衰2号方抑制残余肾TGF-β1与CTGF mRNA的过度表达

目的：探讨肾衰2号方通过抑制转化生长因子-β1（transforming growth factor beta1,TGF-β1）、结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）mRNA的过度表达而减轻肾脏纤维化的作用机制。方法：制作大鼠5/6肾切除慢性肾衰竭大鼠肾纤维化模型,分别给予肾衰2号方及主要单味药党参、桃仁灌胃,并设科素亚对照组。治疗2个月后用RT-PCR的方法检测CTGF和TGF-β1 mRNA的表达。结果：在5/6肾切除慢性肾衰竭肾纤维化模型组中表现为TGF-β1、CTGF mRNA的过度表达（P〈0.01）,经肾衰2号方治疗后TGF-β1、CTGF mRNA的表达降低（P〈0.01）,科素亚也有一定的作用,而党参、桃仁的作用不明显。结论：肾衰2号方减轻肾纤维化的机制在于抑制细胞因子TGF-β1、CTGF mRNA的过度表达。     

补肾祛毒汤对腺嘌呤肾衰竭大鼠肾脏TGF-β1、HGF表达的干预作用

目的：研究补肾祛毒汤对腺嘌呤慢性肾衰竭（chronic renal failure,CRF）大鼠肾脏组织转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）、肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）的干预作用,试探究补肾祛毒汤的作用机理。方法：腺嘌呤灌胃制作大鼠CRF模型,并设立尿毒清对照组。造模与给药同步进行,模型制备30 d,给药35 d。结束后腹主动脉采血检测血肌酐（serum creatinine,Scr）、血尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）,免疫组化检测肾脏组织TGF-β1、HGF的表达。结果：与模型对照组比较,尿毒清及补肾祛毒汤各组Scr、BUN水平均显著下降（P〈0.01或P〈0.05）,但同等剂量下,后者较前者下降更明显（P〈0.01或P〈0.05）,而尿毒清及补肾祛毒汤3个剂量组间则差异无统计学意义（P〉0.05）;光镜下,模型对照组在肾小管及肾小球区均可见明显的TGF-β1阳性表达,与之相比,尿毒清及补肾祛毒汤各组TGF-β1均有明显下降（P〈0.01）,但同等剂量下,后者阳性表达明显更少（P〈0.01或P〈0.05）;模型对照组肾脏组织肾小管及肾小球区亦均可见较明显HGF阳性表达;与其相比,尿毒清及补肾祛毒汤各组HGF均有表达明显增多（P〈0.01）,而同等剂量下,后者较前者表达明显更多（P〈0.01或P〈0.05）;然而尿毒清及补肾祛毒汤3个剂量组间TGF-β1、HGF的表达差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：补肾祛毒汤能抑制TGF-β1的表达,促进肾脏组织HGF的表达,从而抑制肾间质纤维化的进展。这可能是其能降低CRF大鼠的Scr、BUN水平,改善其肾功能的机制之一。     

健肾片对IgA肾病模型大鼠肾组织TGF-β1含量及其mRNA表达的影响

目的:探讨健肾片治疗IgA肾病的作用机理.方法:采用口服牛血清白蛋白和葡萄球菌肠毒素B感染的复合方法,复制大鼠IgA肾病模型,并分别给予健肾片和雷公藤多甙片治疗,检测各组大鼠肾组织TGF-β1含量及其mRNA表达.结果:健肾片可明显抑制IgA肾病模型肾组织中TGF-β1的分泌及其mRNA表达.结论:健肾片抑制IgA肾病模型肾组织的TGF-β1分泌作用可能是其治疗IgA肾病的作用机理之一.     

苦参碱对大鼠慢性环孢素肾毒性模型TGF-β1和BMP-7表达的影响

目的：探讨苦参碱对大鼠慢性CsA肾毒性是否具有保护作用及其可能机制.方法：SD大鼠56只,随机分为对照组（橄榄油0.2 ml/d）,CsA模型组（CsA 20 mg·kg^-1·d^-1）,安博维组（CsA 20 mg·kg^-1·d^-1＋安博维10 mg·kg^-1·d^-1）和苦参碱组（CsA 20 mg·kg^-1·d^-1＋苦参碱10 mg·kg^-1·d^-1）,实验共4周,于第2周和第4周末2次采集肾脏标本,行常规病理检查,免疫组化检测TGF-β1和BMP-7表达.结果：与对照组比较,CsA组小管间质损伤评分,TGF-β1表达明显增加,而BMP-7明显下降,P＜0.05.苦参碱能下调TGF-β1表达,促进BMP-7表达,减轻肾脏小管间质损伤,P＜0.05.结论：苦参碱对实验性大鼠慢性CsA肾毒性具有一定的保护作用.     

糖肾方对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1及MMP-9表达的影响

目的：研究糖肾方对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1、MMP-2、MMP-9及Ⅳ型胶原表达的影响,探讨糖肾方对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护机制。方法：50只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、蒙诺组（0．833mg／kg）、糖肾方大剂量组（2．67g／kg）、糖肾方小剂量组（1．33g／kg）,每组10只,利用单侧肾切除加腹腔注射链脲佐菌素造成糖尿病肾病大鼠模型,连续给药20周。动态检测血糖和尿蛋白／肌酐水平;取肾组织进行病理组织学观察并对肾小球硬化和肾小管间质纤维化程度进行评分;RT-PCR方法检测TGF-β1、MMP-2及MMP-9 mRNA表达,免疫组化方法检测肾组织TGF-β1及Ⅳ型胶原表达。结果：大剂量糖肾方能显著降低糖尿病肾病大鼠尿蛋白／肌酐（P〈0．05）,降低肾小球硬化指数（P〈0．01）和肾小管间质纤维化指数（P〈0．01）,减少TGF-β1mRNA与蛋白表达（P〈0．05）,增加MMP-9mRNA表达（P〈0．05）,减少Ⅳ型胶原蛋白表达（P〈0．05）。结论：糖肾方可减轻实验大鼠肾小球硬化和肾小管间质纤维化,其作用机制可能与抑制TGF-β1表达和提高MMP-9mRNA水平有关。     

肾安丸对慢性肾衰竭患者血清中组织纤维化相关指标的影响

目的探讨肾安丸对慢性肾衰竭患者肾纤维化的影响。方法选取2016年6月至2017年6月在潍坊益都中心医院肾内科确诊的慢性肾脏病3～5期患者,随机分为治疗组(42例)和对照组(50例),两组患者均嘱其优质低蛋白(0.6 g·kg~(-1)·d~(-1))、低磷饮食,进行磷结合剂、降压药(血肌酐265μmol/L时加用ACEI或ARB类药物)等对症治疗。治疗组患者规律服用肾安丸治疗。两组患者均观察6个月。比较两组患者治疗前以及治疗3、6个月时的肾脏功能、炎症指标及肾纤维化指标变化。结果治疗前两组患者各项指标无明显统计学差异(P0.05),治疗3个月及6个月时,治疗组患者的超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血清肌酐(Scr)、Ⅳ型胶原(Collagen-Ⅳ,Col-Ⅳ)、转化生长因子-β(transform growth factor-β,TGF-β)水平均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05),eGFR水平均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论肾安丸在临床观察中可以打破"虚、湿、瘀、毒"恶性循环,调节水液代谢,活血化瘀,降低体内毒素,改善患者症状;肾安丸中的大黄成分可通过抑制细胞增殖、抑制促纤维化因子的产生、调节细胞外基质的合成和分解,从而起到延缓肾纤维化的作用。     

化瘀解毒汤对TGF-β1及MMP1mRNA表达作用的探讨

目的：探讨化瘀解毒汤抑制肾间质纤维化的可能作用机制。方法：采用单侧输尿管梗阻（UUO）法诱导肾间质纤维化动物模型,以免疫组化和原位杂交方法分别检测大鼠肾间质组织ECM成分（Ⅰ、Ⅲ型胶原）、TGF－β1mRNA及MMP1mRNA表达,并作尿α1－MG检测以及相关肾组织学检查。结果：模型组和各治疗组大鼠肾组织Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF－β1mRNA的面积比显增加（P＜0．05）,MMP1mRNA面积比显降低（P＜0．05）;各治疗组大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF－β1mRNA面积比较模型组减少（P＜0．05）,MMP1mRNA面积比较模型组增加（P＜0．05）;治疗组中以中药预防组鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF－β1mRNA面积比最低、MMP1mRNA面积比最高（P＜0．05）。经治疗后肾脏组织病理检查有明显改善。结论：化瘀解毒汤通过下调TGF－β1mRNA表达、上调MMP1mRNA表达、以抑制肾间质ECM的增生和积聚,防止肾间质的纤维。此外还可减轻肾小管病理性损伤。     

TGF-β1、Smad4在慢性非细菌性前列腺炎大鼠模型前列腺组织中的表达及意义

目的:研究慢性非细菌性前列腺炎(CNP)SD大鼠前列腺组织中转化生长因子(TGF-β1)和Smad4的表达,并初步探讨前列腺组织纤维化的发病机制及意义。方法:将60只6月龄SD大鼠随机分为对照组(假手术)、30dCNP模型组和45dCNP模型组,每组20只。CNP模型组采用去势+高剂量苯甲酸雌二醇肌注方法建立CNP大鼠模型。用免疫组化和免疫印迹方法检查TGF-β1、Smad4在前列腺组织中的表达变化。结果:两个CNP模型组TGF-β1表达显著高于对照组(P均<0.05),而且45dCNP模型组高于30dCNP模型组(P<0.05)。两个模型组Smad4表达显著低于对照组(P均<0.05),而且45dCNP模型组低于30dCNP模型组(P<0.05)。TGF-β1、Smad4在CNP大鼠模型前列腺组织中表达呈负相关。结论:TGF-β1、Smad4可能参与CNP发病过程,前列腺纤维化可能是导致临床难以治愈的重要因素。     

阿魏酸钠对糖尿病大鼠肾组织中TGF-β1和Smad4表达的影响

目的 探讨阿魏酸钠对糖尿病大鼠肾组织TGF-β1和Smad4表达的影响。方法 制作链脲佐菌素诱导的Wistar糖尿病大鼠模型,将其随机分为3组（对照组、糖尿病非治疗组、糖尿病阿魏酸钠治疗组）,给药8周后将其处死,检测各组大鼠的平均动脉压、血糖、肾功能指标、24h尿蛋白,并检测TGF-β1,及Smad4mRNA表达水平和蛋白定位的表达。结果与对照组相比,糖尿病大鼠平均动脉压、血糖、肾功能指标、24h尿蛋白均升高;肾小球细胞外基质（ECM）明显增多、系膜区扩大（PAS染色）;TGF-β1及Smad4mRNA水平上升;TGF-β1,及Smad4蛋白的表达明显增加。阿魏酸钠治疗后上述指标明显下降。结论 糖尿病肾病患者,TGF-β1／Smad通路被激活,使用阿魏酸钠治疗可以延缓肾脏损害的发生。     

阿托伐他汀对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质中TGF-β1及TIMP-1表达的影响

目的:研究单侧输尿管梗阻(UUO)后转化生长因子-β1(TGF-β1)、组织金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的表达变化,从而探讨肾间质纤维化的发生机制及阿托伐他汀的保护作用.方法:将45只大鼠随机分为假手术组、模型组和阿托伐他汀组(简称治疗组).采用UUO模型,在术后5 d 、10 d、15 d每组各取5只处死,留取空腹血清检测血脂浓度和肾功能,左肾组织行HE和Masson染色,动态观察肾脏病理学变化,并用免疫组化方法测定肾组织中TGF-β1、TIMP-1的表达变化.结果:各组大鼠血脂浓度无统计学差异.模型组大鼠肾间质中TGF-β1、TIMP-1的表达随梗阻时间的延长逐渐增多,与假手术组相比有统计学差异 (P<0.001).治疗组与模型组相比,各时间点TGF-β1、TIMP-1的表达下调有统计学差异(P<0.001),且两者之间存在一定的相关性(r=0.37,P< 0.01). 结论:阿托伐他汀可能通过阻断肾组织中TGF-β1的作用和抑制TIMP-1的过度表达而发挥其肾保护作用,这一作用与其降血脂作用无关.