线粒体DNA tRNA^leu（UUR）和DN1双重突变——糖尿病家系报道

目的：探讨线粒体ＤＮＡ突变在糖尿病发病中的作用。方法：采用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ、亚克隆及ＤＮＡ序列分析等技术，对一个母系遗传糖尿病家系成员的线粒体ＤＮＡ ｔＲＮＡ＾ｌｅｕ（ＵＵＲ）及其临近区域进行了突变分析。结果：发现ｍｔＤＮＡ ｔＲＮＡ＾ｌｅｕ（ＵＵＲ）ｎｔ ３２４３ Ａ→Ｇ和ＮＤ １ ｎｔ ３３６５ Ｔ→Ａ双重突变。结论：结合该家系糖尿病患者具有发病年龄早（〈３０岁），对胰岛素依赖，伴耳聋等较严重     

家族性糖尿病中线粒体tRNA~(Leu(UUR))基因突变的发生率及临床特点

应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法，对１４０例有家族史的糖尿病患者的线粒体ｔＲＮＡ１ｅｕ（ＵＵＲ）基因ｎｔ３２４３Ａ→Ｇ突变进行筛查，结果发现６例（４．３％）该突变基因阳性者。总结其主要临床特征为：①呈母系遗传，②起病早（＜４０岁），③多消瘦（ＢＭＩ＜２４ｍｇ／ｍ２），④继发性口服降糖药失效需用胰岛素治疗，⑤多伴有神经性耳聋。本研究提示该突变在中国人家族性糖尿病群体中有较高的发生率；在临床上属于另一种糖尿病亚型。     

线粒体DNA突变与糖尿病

线粒体ＤＮＡ突变与糖尿病临床学院内科任伟综述张素华审校中图分类号Ｒ８７．１近年来，有研究提出。人线粒体ＤＮＡ－（ｍｔＤＮＡ）突变可能是糖尿病（ＤＭ）的病因之一，有人称之为线粒体糖尿病，此病并不罕见。临床上以母系遗传伴神经性耳聋为特征。其ＤＭ类型可为Ｉ...     

线粒体DNA突变糖尿病的特点

对线粒体DNA突变，尤其是转移核糖核酸亮氨酸tRNA（Leu，UUR）基因nt3243A→G点突变在糖尿病发病机制中的作用作一综述．nt3243A→G点突变常常是导致MIDD（母系遗传糖尿病伴耳聋）、MELAS（线粒体脑肌病、乳酸酸中毒、癫痫样发作综合征）及肾衰的常见病因．由于mtDNA突变影响ATP生成及可改变细胞内线粒体代谢产物的含量，从而可能导致与mtDNA突变有关的特殊类型糖尿病的发生，临床上出现一系列的特殊表现．     

线粒体基因ND1/T3394C突变与糖尿病

【目的】调查线粒体NADH脱氢酶亚单位 1(ND1)基因的T3394C位点突变与中国人糖尿病的发病情况。【方法】随机收集 338例无血缘关系的糖尿病患者及 2 6 2例正常对照组 ,用聚合酶链反应扩增、限制性内切酶HaeⅢ消化进行突变筛查 ,DNA序列分析确认。【结果】糖尿病患者中T3394C突变者共 8例 (2 37%) ,正常对照组中只有 1例 (0 38%,P <0 0 1)。糖尿病突变患者中 4例有糖尿病家族史 ,4例病人由于胰岛素分泌功能下降和 /或出现并发症 ,需用胰岛素治疗。【结论】ND1/T3394C突变在糖尿病患者中的发生率明显高于正常对组 ,提示这个位点突变可能是导致线粒体糖尿病的易感基因之一。     

线粒体tRNA~(Leu(UUR))基因点突变与非胰岛素依赖型糖尿病亚型的关系探讨

探讨线粒体ｔＲＮＡＬｅｕ（ＵＵＲ）基因点突变与母系遗传方式传递的非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）亚型的关系。采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）２０６ｂｐ结合ＡＰａⅠ酶解方法，辅以阳性对照，即可确认线粒体ｔＲＮＡＬｅｕ（ＵＵＲ）基因核苷酸３２４３→Ｇ点突变。作者应用此种线粒体在基因突变诊断方法，对中国东北地区９７例≤４５岁、无亲缘关系，但各自均有糖尿病家族史的非胰岛素依赖型糖尿病病人中筛选此基因突变，结果发现２例基因诊断阳性，在具有不常见临床表现表现的ＮＩＤＤＭ亚群中占２．０６％～６．２５％。此结果进一步证实线粒体基因突变对ＮＩＤＤＭ亚型的发病起重要作用。     

线粒体DNA tRNALeu(UUR)基因A3243G点突变糖尿病病人的监测

①目的 调查青岛地区糖尿病人群中线粒体DNA tRNALeu(UUR)基因np3243A→G点突变糖尿病流行情况，评价所用方法检测该点突变的灵敏度。②方法 制定调查人选条件，选择可疑病例。由外周血白细胞提取基因组DNA。基因检测采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR—RFLP)技术。③结果 糖尿病病人中该点突变检出率为5‰，在可疑病人中为14‰，在高危人群中为200‰。通过增加电泳上样量可以检测到7％的突变比例。④结论 该点突变在糖尿病人群中有一定流行。高危人群检出率高，提示对线粒体基因突变糖尿病的高危人群进行基因诊断非常必要。PCR—RFLP结合大的电泳上样量可以提高检测灵敏度。     

浙江汉族人群线粒体DNA ND1基因G3316A突变与2型糖尿病

目的：研究与日本人2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）相关的线粒体DNA（mitochondria DNA,mtDNA）ND1基因G3316A突变在浙江汉族T2DM人群中的发生率及其临床意义。方法：采用PCR产物直接测序法对浙江籍汉族人群中无血缘关系的315名T2DM患者及158名正常对照的外周血mtDNA进行检测,并用DNASTAR和Antheprot 5.0软件分析突变位点。结果：在T2DM患者中检测到6例（占1.90%）G3316A突变,对照组中发现3例（占1.90%）突变,突变发生率在两组间差异无显著性（P＆gt;0.05）。携带G3316A位点突变的T2DM组与无该突变的T2DM组之间的临床特点（发病年龄、体重指数和血糖水平等）比较差异亦无显著性。蛋白二级结构中α-螺旋、β-折叠、β-转角和不规则卷曲的构成比没有发生改变。结论：线粒体DNA ND1基因G3316A突变可能与浙江汉族人群T2DM的发生无关,仅为人群中的基因多态性。     

中国人线粒体tRNA~(Leu(UUR))基因突变糖尿病研究

近年非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)分子遗传学研究的进展之一为发现线粒体基因突变糖尿病。1992年,Van den Ouweland等用分子生物学技术发现第一个线粒体tRNA~(Leu(UUR))基因nt3243 A—G突变糖尿病家系。其临床上呈母系遗传,部分伴神经性耳聋的不典型且病情较重的NIDDM,提示这可能是群体中常见NIDDM和     

线粒体基因ND1／T3394C突变与糖尿病

目的：调查线粒体NADH脱氢酶亚单位1（ND1）基因的T3394C位点突变与中国人糖尿病的发病情况，方法：随机收集338例无血缘关系的糖尿病患及262例正常对照组，用聚合酶链反应扩谱，限制性内切酶Hae Ⅲ消化进行突变筛查，DNA序列分析确认。结果：糖尿病患中T3394C突变共8例（2．37％），正常对照组中只有1例（0．38％，P＜0．01），糖尿病突变患中4例有糖尿病家族史，4例病人由于胰岛素分泌功能下降和／或出现并发症，需用胰岛素治疗。结论：ND1／T3394C突变在糖尿病患中的发生率明显高于正常对组，提示这个位点突变可能是导致线粒体糖尿病的易感基因之一。     

Rett综合征患儿一例多种组织的线粒体DNA突变分析

探讨线粒体DNA在Rett综合征发病中的作用。方法：利用Southern杂交、聚合酶链式反应（PCR）-单链构象多态性（SSCP）分析及DNA直接测序等方法．对一例Rett综合征患儿的外周血白细胞、死后的脑、骨骼肌组织及其母亲外周血白细胞的线粒体DNA的部分片段进行分析。结果：患儿3种组织及其母亲外周血白细胞的线粒体DNA上编码16SrRNA的2650～3000区域的DNA存在突变，进一步测序证实患儿3种组织均存在2706位点A→G的点突变。结论：提示线粒体DNA在Rett综合征的发病中起一定作用。     

线粒体DNA ND1基因3394 T→C突变与2型糖尿病

线粒体基因（mitochondrial DNA，mtDNA）是目前发现的除核基因以外惟一存在于人类细胞质中的DNA分子，具有自我复制、转录、和编码功能。mtDNA缺陷可导致胰岛素分泌障碍，从而参与糖尿病的发生。有关糖尿病与mtDNA基因突变的研究国内外均有报道，但结果不一。我们采用PCR-RFLP、DNA测序和结构预测的分析方法，对武汉地区95例2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）患者和168例健康对照mtDNA的ND1基因（np3307-4263）的3394（T-C）突变位点进行筛选检测。     

线粒体DNA与糖尿病的研究进展

线粒体细胞内氧化应激的平衡会影响线粒体DNA(mt DNA)的生物合成,导致mt DNA突变和水平的改变,线粒体基因突变导致三羧酸循环障碍,引起胰岛β细胞分泌胰岛素不足导致糖尿病。同一个体不同组织mt DNA的水平不同,外周血mt DNA水平的改变与2型糖尿病的关系尚无定论。该文将探讨mt DNA突变的研究进展,mt DNA单倍群涉及糖尿病及其并发症的病理学,以线粒体为靶向位点的药物或者治疗对于预防和治疗2型糖尿病具有巨大潜力。     

线粒体DNA ND4 12026基因突变与糖尿病

目的 研究线粒体DNADN412026位点在中国上海地区非肥胖2型糖尿病患者中的突变情况。并探讨该位点突变的临床特征。方法 采用PCR-SSCP、PCR-RFLP及PCR产物直接测序等技术检测线粒体DNAND4片段的突变情况。结果 发现286例糖尿病患者血样中有12例患者mtDNAND4基因上12026位点存在AtoG的点突变,导致异亮氨酸错义突变成缬氨酸,而在242例非糖尿病对照组个体中仅1例存在同样突变,对该位点突变的临床分析发现起病年龄低。58%有家族史,需要胰岛素治疗。结论 12026位点AtoG的突变可能与糖尿病的发生有关,并有一定的临床特征。     

线粒体DNA ND1基因G3316A突变与2型糖尿病相关性研究

目的 研究浙江台州地区汉族人群线粒体DNA ND1基因中G3316A突变的发生率与2型糖尿病的相关性.方法 应用聚合酶链反应技术对无血缘关系的270例2型糖尿病患者和185例健康对照者的外周血DNA进行检测.结果 发现10例T2DM患者存在G3316A突变(3.70%),对照组中有1例突变(0.54%),G3316A在两组间比较有显著性差异(P＜0.05).结论 线粒体DNA ND1 G3316A突变可能与浙江台州地区汉族人群2型糖尿病的发生与发展有关.     

线粒体DNA ND4基因12026（A→G）点突变与2型糖尿病相关性研究

目的 研究中国云南2型糖尿病人群线粒体ND4基因ntl2026A→G点突变的发生频率及其与2型糖尿病的相关性.寻求准确、快速、简易的临床糖尿病基因诊断方法.方法 随机选取350例中国云南2型糖尿病患者和225例无糖尿病家族史的健康对照者作为研究对象.通过聚合酶链式反应及限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)检测线粒体12026A→G点突变.结果 经DNA直接测序确证.结果 350例2型糖尿病患者中12026A→G点突变者11例(3.14%),225例对照者中携带该突变者6例(2.67%),突变发生率在两组间差异尤统计学意义(x2=0.0059,P=0.8064).结论 线粒体ND4基因12026A→G突变可能仪为人群中线粒体基因组的正常多态,不是中国(特别是云南)人群中2型糖尿病的常见致病因.     

糖尿病线粒体ND1基因3316 G→A突变的功能研究

目的 探讨线粒体ND1基因3316 G→A突变对线粒体生物学功能的影响及其在糖尿病发病中的作用.方法 利用真核表达载体pcDNA3.1B和大肠杆菌DH5α构建野生型和线粒体DNA的ND1基因3316 G→A突变型重组子pcDNA3.1B-ND1;设计特异性siRNA序列干扰Hela细胞内源性线粒体DNA表达,使其内源性ND1基因沉默;经脂质体转入野生型和突变型重组子pcDNA3.1B-ND1,使其在Hela细胞内表达.通过RT-PCR、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和荧光显微镜,从mRNA水平→蛋白质水平→线粒体膜电势位检测干扰效果,以筛选有效干扰siRNA序列.结果 线粒体ND11和线粒体ND12 siRNA序列均具有一定的干扰效果,后者效果明显优于前者;转入3316 G→A突变型重组子pcDNA3.1B-ND1的Hela细胞表达的线粒体蛋白低于野生型.结论 线粒体DNA的ND1基因正常表达对维持正常的呼吸链功能和细胞增殖至关重要,携有3316 G→A突变基因的糖尿病的发病与线粒体蛋白表达下降有关.     

Rett综合征患儿一例多种组织的线粒体DNA突变分析

目的：探讨线粒体ＤＮＡ在Ｒｅｔｔ综合征发病中的作用。方法：利用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、聚合酶链式反应（ＰＣＲ）－单链构象多态性（ＳＳＣＰ）分析及ＤＮＡ直接测序等方法，对一例Ｒｅｔｔ综合征患儿的外周血白细胞、死后的脑、骨骼肌组织及其母亲外周血白细胞的线粒体ＤＮＡ的部分片段进行分析。结果：患儿３种组织及其母亲外周血白细胞的线粒体ＤＮＡ上编码１６Ｓ ｒＲＮＡ的２６５０￣３０００区域的ＤＮＡ存在突变，进一步     

云南地区2型糖尿病患者线粒体tRNALeu（UUR） 3243 A/G突变的筛查

目的探讨线粒体tRNALeu(UUR)基因3243位点A/G突变在云南地区2型糖尿病(T2DM)患者中的发生率.方法采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)、DNA测序技术,对235例T2DM患者和128例糖耐量正常的健康对照者进行检测.结果在235例T2DM患者及128例对照者中未检出线粒体tRNALeu(UUR)3243 A/G突变.结论线粒体tRNALeu(UUR)基因3243位点A/G突变在云南地区T2DM人群中并不常见,可能不是该地区T2DM的常见遗传易感因素.