酸枣仁汤对REM睡眠剥夺老年大鼠脑神经细胞凋亡及c-fos基因表达水平的影响

目的观察酸枣仁汤对快动眼(REM)睡眠剥夺导致的老年大鼠脑皮层和海马部位神经细胞凋亡及cfos基因表达Fos蛋白水平变化的影响。方法将自然衰老24月龄Wistar大鼠随机分成空白对照组(等容生理盐水),老年REM睡眠剥夺组(等容生理盐水),阳性对照组(舒乐安定0.18 mg/(kg·d)),酸枣仁汤低、高剂量组(12.96,25.92 g/(kg·d))。各组灌胃给药2周后,除空白对照组外其余各组用自制改良多平台法剥夺大鼠睡眠48 h制作老年大鼠REM睡眠剥夺模型。通过原位末端标记法(TUNEL)测定各组大鼠大脑皮层和海马部位神经细胞凋亡水平,用免疫组化法检测c-fos基因表达Fos蛋白的水平变化,探讨酸枣仁汤对老年失眠引起的脑神经损害及c-fos基因表达变化的影响。结果与空白对照组比较,老年REM睡眠剥夺组大鼠脑皮层和海马部位神经凋亡细胞增多,Fos蛋白表达明显增高。与老年REM睡眠剥夺组比较,酸枣仁汤组脑神经凋亡细胞及Fos蛋白表达明显下降,但仍高于正常对照组。结论c-fos基因很可能参与了老年大鼠REM睡眠剥夺后的细胞凋亡过程,酸枣仁汤可能是通过抑制脑组织c-fos基因表达上调,抑制神经细胞凋亡而发挥脑保护作用。     

酸枣仁汤对ＲＥＭ 睡眠剥夺老年大鼠脑神经 细胞凋亡及ｃ ｆｏｓ基因表达水平的影响

目的　观察酸枣仁汤对快动眼（ＲＥＭ）睡眠剥夺导致的老年大鼠脑皮层和海马部位神经细胞凋亡及ｃｆｏｓ 基因表达Ｆｏｓ蛋白水平变化的影响。方法　将自然衰老２４月龄Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分成空白对照组（等容生理盐水）， 老年ＲＥＭ睡眠剥夺组（等容生理盐水），阳性对照组（舒乐安定０１８ｍｇ／（ｋｇ·ｄ）），酸枣仁汤低、高剂量组（１２９６， ２５９２ｇ／（ｋｇ·ｄ））。各组灌胃给药２周后，除空白对照组外其余各组用自制改良多平台法剥夺大鼠睡眠４８ｈ制作老年大 鼠ＲＥＭ睡眠剥夺模型。通过原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）测定各组大鼠大脑皮层和海马部位神经细胞凋亡水平，用免疫 组化法检测ｃ ｆｏｓ基因表达Ｆｏｓ蛋白的水平变化，探讨酸枣仁汤对老年失眠引起的脑神经损害及ｃ ｆｏｓ基因表达变化的影 响。结果　与空白对照组比较，老年ＲＥＭ睡眠剥夺组大鼠脑皮层和海马部位神经凋亡细胞增多，Ｆｏｓ蛋白表达明显增 高。与老年ＲＥＭ睡眠剥夺组比较，酸枣仁汤组脑神经凋亡细胞及Ｆｏｓ蛋白表达明显下降，但仍高于正常对照组。结论 　ｃ ｆｏｓ基因很可能参与了老年大鼠ＲＥＭ睡眠剥夺后的细胞凋亡过程，酸枣仁汤可能是通过抑制脑组织ｃ ｆｏｓ基因表达 上调，抑制神经细胞凋亡而发挥脑保护作用。     

REM睡眠剥夺对大鼠焦虑行为的影响及瘦素的作用

目的:研究REM睡眠剥夺对大鼠焦虑行为的影响及瘦素的作用.方法:成年雄性Wistar大鼠90只随机分为9组(n=10),分别为生理盐水群居对照(NS)24 h、72 h、120 h组;生理盐水REM睡眠剥夺(NS-SD)24 h、72 h、120 h组和瘦素REM睡眠剥夺(L-SD)24 h、72 h、120 h组.均为腹腔注射给药.大鼠的REM睡眠剥夺模型采用小平台水环境法建立,大鼠的焦虑行为采用高架十字迷宫(elevated plus-maze,EPM)测试,分别观察瘦素和生理盐水对REM睡眠剥夺(SD)大鼠(第24、72、120小时)焦虑行为的影响.结果:成功建立REM睡眠剥夺模型及高架十字迷宫焦虑模型.大鼠焦虑行为结果:(1)与NS组相比,NS-SD组在24 h(F=5.32,P=0.01)和120 h(F=15.06,P=0.00)时EPM的总次数增加,L-SD组在120 h时的总次数降低;(2)NS-SD组在120 h时的开臂次数%(χ2=21.55,P=0.00)和开臂时间%(χ2=22.53,P=0.00)均显著增加,L-SD组在120 h时的开臂次数%和开臂时间%显著减少.结论:REM睡眠剥夺与大鼠焦虑行为的变化呈时间相关性,瘦素可减少长期REM睡眠剥夺导致的大鼠焦虑行为.因此,瘦素可能参与了REM睡眠剥夺的抗焦虑作用.     

睡眠剥夺后急性力竭运动大鼠血清的氧化应激状态

背景:有研究表明,大负荷的运动训练可造成自由基的生成急剧增加这些内源性自由基生成增多以及由此导致的组织细胞及亚细胞的脂质过氧化加强,使组织细胞的结构和功能受损,从而导致运动能力下降。睡眠剥夺也可造成机体氧自由基增加。目的:观察不同睡眠剥夺时间后急性力竭运动大鼠血清丙二醛、谷胱甘肽含量和超氧化物歧化酶活力的变化。设计:随机对照动物实验。单位:湖南师范大学体育学院运动人体科学实验室。材料:选用30只健康雄性10周龄SD大鼠,体质量(220±13)g,清洁级,由湖南农业大学实验动物服务部提供。方法:实验于2006-04/05在湖南师范大学体育学院运动生物化学实验室完成,随机摸球法将大鼠分为5组,空白对照组,单纯运动组,剥夺睡眠24h组,剥夺睡眠24h组,剥夺睡眠72h组,每组6只;空白对照组大鼠正常睡眠、不运动;单纯运动组大鼠正常睡眠、急性力竭运动后处死;剥夺睡眠24,48,72h组大鼠分别在剥夺睡眠24,48,72h,进行急性力竭运动后处死。大鼠睡眠剥夺模型采用的是轻柔刺激法;单纯运动组和睡眠剥夺后力竭运动组大鼠依据Bedford建立的大鼠运动模型方案进行运动:跑台坡度为10°,速度为19.3m/min,所有运动大鼠至力竭(力竭标准:运动末期,大鼠先后滞留跑道后1/3处达3次以上,各种刺激驱赶均无效,停跑后体征表现为呼吸急促,神情倦怠,腹卧位,对刺激反应迟钝,捕捉时,逃避反应较运动前减弱)。各组大鼠于实验后麻醉处死,将血液取出,自然凝固后离心,取上清检测丙二醛、谷胱甘肽的含量及超氧化物歧化酶活性。主要观察指标:大鼠血清的丙二醛、谷胱甘肽含量和超氧化物歧化酶活力的变化。结果:纳入大鼠30只均进入结果分析。①单纯运动组丙二醛含量高于空白对照组[(4.37±0.26),(3.35±0.14)μmol/L,P<0.01]。剥夺睡眠24,48,72h组丙二醛含量分别为(4.89±0.20),(5.15±0.12),(7.29±0.42)μmol/L,均高于单纯运动组,其中睡眠剥夺72h组高于其他睡眠剥夺组,差异有统计学意义(P<0.01)。②单纯运动组的谷胱甘肽含量低于空白对照组[(83.33±1.73),(93.16±2.44)mg/g,P<0.01],剥夺睡眠24h组谷胱甘肽含量为(94.98±1.69),高于单纯运动组(P<0.01),剥夺睡眠48,72h组谷胱甘肽含量分别为(79.89±2.16),(72.38±3.19)mg/g,低于单纯运动组(P<0.05,0.01),睡眠剥夺各时间组差异均有统计学意义(P<0.01)。③单纯运动组超氧化物歧化酶活力低于空白对照组[(4.59±0.21),(5.21±0.11)mkat/g,P<0.01],剥夺睡眠24,48,72h组超氧化物歧化酶活力分别为(5.03±0.15),(3.95±0.19),(3.27±0.31)mkat/g,均低于单纯运动组(P<0.01),但睡眠剥夺48h和72h的超氧化物歧化酶明显低于空白对照组(P<0.01);睡眠剥夺各时间组差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:睡眠剥夺能够引起大鼠血清氧化应激损伤;随着睡眠剥夺时间的加长并做力竭运动使大鼠血清的氧自由基产物堆积越多,清除氧自由基能力越差,对机体的损伤明显。     

睡眠剥夺对力竭运动大鼠胸腺谷胱甘肽、丙二醛、超氧化物歧化酶的影响

目的:观察不同睡眠剥夺时间后力竭运动对大鼠胸腺谷胱甘肽、丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性的变化,探讨睡眠剥夺对大鼠抗氧化能力的影响。方法:实验于2006-04/05在湖南师范大学体育学院运动生物化学实验室完成。实验分组:选择10周龄健康雄性SD大鼠30只,按随机数字表法分为5组,每组6只:睡眠非运动组,睡眠 力竭运动组和睡眠剥夺24,48,72h 力竭运动组。实验方法:①采用轻柔刺激法制备大鼠睡眠剥夺模型。②睡眠非运动组和睡眠 力竭运动组不进行睡眠剥夺。③睡眠 力竭运动组和睡眠剥夺各组大鼠运动方案:跑台坡度为10°,速度为19.3m/min(相当于76%VO2max),所有大鼠运动至力竭(运动末期,大鼠先后滞留跑道后1/3处达3次以上,各种刺激驱赶均无效,停跑后体征表现为呼吸急促,神情倦怠,腹卧位,对刺激反应迟钝,捕捉时,逃避反应较运动前减弱)。实验评估:①大鼠一般状态。②力竭时间。③大鼠力竭后麻醉处死,测定胸腺谷胱甘肽、丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性。结果:纳入大鼠30只,均进入结果分析。①大鼠一般状态:睡眠 力竭运动组大鼠表现为形态正常,活泼好动,皮毛光亮,眼睛有神;睡眠剥夺48,h 力竭运动组大鼠均出现神态倦怠,眼神黯淡,四肢亦有不同程度的红肿;睡眠剥夺24h 力竭运动组大72鼠介于以上两者之间。②睡眠 力竭运动组和睡眠剥夺24,7248,h组大鼠的力竭时间分别为(232.36±37.67),(269.19±38.61),(162.42±35.70),(141.07±28.56)。③谷胱甘肽含量、超氧化物歧化酶活性:睡眠 力竭运动组谷胱甘肽含量和超氧min化物歧化酶活性均低于睡眠非运动组[分别为(25.54±0.79),(27.09±1.31)mg/g;(±0.21),(±0.10)mkat/g],差异有显4.594.88著性意义(P<0.05);睡眠剥夺24h 力竭运动组谷胱甘肽含量和超氧化物歧化酶活性均高于睡眠非运动组[分别为(28.60±0.96),(27.09±1.31)mg/g;(±0.10),(±0.10)5.234.88mkat/g],差异有显著性意义(P<0.05),睡眠剥夺48,h 力竭运动组P72均低于睡眠非运动组[分别为(23.74±1.19),(22.43±0.52),(27.09±1.31)mg/g;(±0.14),(±0.18),(±0.10)mkat/g],4.523.354.88差异均有非常显著性意义(P<0.01);睡眠剥夺各组与睡眠 力竭运动组间谷胱甘肽含量和超氧化物歧化酶活性差异均有非常P显著性意义(P<0.01);睡眠剥夺各组间比较差异有显著性意义(P<0.05)。④丙二醛浓度:睡眠 力竭运动组丙二醛浓度高于P睡眠非运动组[分别为(±0.27),(±0.24)μmol/L],差异有非常显著性意义(P<0.01);睡眠剥夺各组与睡眠非运动组之间6.565.35P差异均有非常显著性意义(P<0.01);睡眠剥夺24,48,72h 力竭运动组丙二醛含量均高于睡眠 力竭运动组[分别为(±0.12),(±P7.398.850.72),(10.89±0.82),(±0.27)μmol/L],差异有显著性意义(P<0.05;P<0.01);睡眠剥夺各组间比较,睡眠剥夺48h与睡眠剥夺24h差6.56异无显著性意义(P>0.05),睡眠剥夺72h与睡眠剥夺24h、睡眠剥夺72h与睡眠剥夺48h间比较差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论:①睡眠剥夺24h可引起大鼠胸腺氧化应激,使氧自由基能力有所增强。②睡眠剥夺48,72h力竭运动后氧自由基能力降低。     

快速眼动睡眠剥夺对抑郁模型大鼠海马5-HT NE及腺苷的影响

目的 通过对抑郁模型大鼠的快速眼动睡眠剥夺,观察大鼠强迫游泳不动时间及大鼠海马5-羟色胺、去甲肾上腺素和腺苷水平的变化,了解睡眠剥夺快速改善抑郁情绪的可能机制.方法 将30只成年健康雄性大鼠分为正常对照组(A组)、抑郁模型组(B组)、抑郁模型+睡眠剥夺组(C组),每组10只,在建立慢性轻度不可预见性应激的抑郁模型后,采用小平台水环境法对大鼠进行72 h快速眼动睡眠剥夺,以强迫游泳实验检测大鼠的不动时间,并测定3组大鼠海马5-羟色胺、去甲肾上腺素及腺苷水平.结果 21 d慢性轻度不可预见性应激后,大鼠的强迫游泳不动时间显著延长(P＜0.05),快速眼动睡眠剥夺后大鼠强迫游泳不动时间显著缩短(P＜0.01);A组海马5-羟色胺、去甲肾上腺素及腺苷水平均显著高于B组(P＜0.05);B组海马5-羟色胺、去甲肾上腺素显著低于C组,腺苷水平显著高于C组(P＜0.01).结论快速眼动睡眠剥夺可以逆转大鼠的抑郁样行为,并提高大鼠海马5-羟色胺、去甲肾上腺水平,腺苷可能参与了睡眠剥夺的抗抑郁过程.     

被动吸烟对急性睡眠剥夺大鼠行为的影响

背景:睡眠剥夺是一种在特殊职业环境中存在的特殊生理心理反应,目前不少人认为香烟烟雾能有效缓解睡眠剥夺后产生的低靡精神状态和异常情绪波动,暂时减轻睡眠剥夺对行为、情绪的不良影响。至今有关香烟烟雾对人体各方面危害的研究已较全面,但有关在急性睡眠剥夺情况下被动吸烟对行为和情绪状态的影响,目前争论颇多。目的:探讨被动吸烟对急性睡眠剥夺大鼠行为、情绪的影响。设计:完全随机分组设计,随机对照实验。单位:解放军第四军医大学基础部教学实验中心及预防医学系放射医学教研室。材料:实验于2004-04/06在第四军医大学基础部教学实验中心完成。选择成年鼠龄3个月、雄性、健康SD大鼠49只,体质量(180±15)g,随机分为5组:睡眠剥夺 被动吸烟24h组(n=8),睡眠剥夺24h组(n=8),睡眠剥夺 被动吸烟54h组(n=8),睡眠剥夺54h组(n=8),空白对照组(n=17)。方法:①睡眠剥夺 被动吸烟24h组,睡眠剥夺24h组,睡眠剥夺 被动吸烟54h组,睡眠剥夺54h组,分别采用小平台水环境法进行24h和54h睡眠剥夺,睡眠剥夺 被动吸烟24h组和睡眠剥夺 被动吸烟54h组在睡眠剥夺同时进行被动吸烟,每日12次,120min/次,每次同时点燃3支香烟(有滤嘴香烟),自燃至灰烬。②采用旷场实验测试大鼠的情绪、行为变化:用摄像仪跟踪记录大鼠在旷场中5min内的活动情况,计算并记录大鼠5min内在旷场中距旷场中心的平均距离和运动的总距离,分别考察大鼠的探索性行为及兴奋性状态。距旷场中心的平均距离越近,说明大鼠的探索性行为越多,兴奋性越高;运动总距离越长,也说明大鼠的兴奋性越高。③所有数据以x±s表示,所用方法为非参数秩和检验,以P<0.05为有统计学意义。主要观察指标:以各组大鼠旷场实验中距旷场中心的平均距离和运动总距离的比较,观察各组大鼠行为和情绪的变化。结果:纳入大鼠49只,最终进入结果分析49只,无脱失值。①大鼠情绪状态观察结果:实验结束后观察显示,睡眠剥夺 被动吸烟24h组较睡眠剥夺24h组,睡眠剥夺 被动吸烟54h组较睡眠剥夺54h组,睡眠剥夺54h组较睡眠剥夺24h组情绪低靡,蜷缩喜静,对外界刺激不敏感,反应冷漠,对其他鼠的攻击行为较少。②旷场实验测试结果:睡眠剥夺24h组距旷场中心的平均距离明显小于空白对照组及睡眠剥夺 被动吸烟24h组[(53.93±1.83,58.21±4.45,58.11±1.62)cm,(P<0.01～0.05)],睡眠剥夺54h组距旷场中心平均距离明显大于睡眠剥夺24h组[(61.53±3.02,58.11±1.62)cm,(P<0.01)],睡眠剥夺24h组的运动总距离明显大于睡眠剥夺 被动吸烟24h组及空白对照组[(3310.45±1445.97,1818.20±733.25,2338.15±694.70)cm,(P<0.01～0.05)],睡眠剥夺54h组运动总距离明显大于睡眠剥夺 被动吸烟54h组,小于睡眠剥夺24h组[(2410.70±548.64,1473.50±945.89,3310.45±1445.97)cm,(P<0.05)]。结论:大鼠的行为和情绪反应随睡眠剥夺时间的延长呈现先兴奋后抑制的趋势,而被动吸烟在整个大鼠睡眠剥夺过程中对大鼠的行为和情绪状态起抑制作用。     

快速眼动期睡眠剥夺对大鼠学习记忆和海马NR2B含量的影响

目的观察快速眼动期（ rapid eye movement ,REM）睡眠剥夺对大鼠空间学习记忆能力以及海马N-甲基-D-天冬氨酸（ N-methyl-D-aspartic acid receptor ,NMDA）受体亚基NR2B表达的变化,探讨睡眠剥夺影响认知功能的可能机制。方法20只成年健康雄性SD大鼠随机分为两组：（1）睡眠剥夺组（n＝10）;（2）普通鼠笼对照组（ n＝10）。睡眠剥夺组采用改良多平台睡眠剥夺法剥夺大鼠快速眼动期睡眠,连续72 h快速眼动期睡眠剥夺后,利用Morris水迷宫测定大鼠空间学习记忆能力,Western blot方法检测大鼠海马NR2B亚型的表达。结果 Morris水迷宫定位航行实验中,睡眠剥夺组大鼠找到月台的平均逃避潜伏期明显大于对照组;空间探索实验中睡眠剥夺组大鼠在月台所在象限时间的百分比为（26.84±4.99）％,明显低于对照组[（44.31±7.48）％,P＜0.05]。睡眠剥夺组大鼠海马NR2B的相对含量为0.46±0.14,而对照组为0.96±0.32（P＜0.01）。结论睡眠剥夺可导致大鼠的空间学习记忆能力降低,其机制可能与海马NR2B表达减少有关。     

间歇缺氧及睡眠剥夺大鼠血管内皮细胞相关指标的变化

背景:血管内皮功能损坏是睡眠呼吸暂停的病理基础。目的:观察间歇缺氧、睡眠剥夺对SD大鼠有创动脉收缩压及血浆一氧化氮、内皮素、降钙素基因相关肽水平的影响。方法:将3月龄雄性SD大鼠16只随机等分为2组,模型组大鼠每天置入睡眠剥夺合并间歇性缺氧条件10h(22:00-08:00),单纯睡眠剥夺条件12h(08:00-20:00),剩余时间置大鼠笼饲养。对照组无睡眠剥夺、无缺氧条件饲养。结果与结论:造模8周后,与对照组比较,模型组大鼠有创动脉压明显升高(P<0.01),血浆一氧化氮、降钙素基因相关肽水平显著降低(P<0.01),血浆内皮素水平显著升高(P<0.01)。说明间歇性缺氧、睡眠剥夺可以引起SD大鼠血压增高,血管内皮功能受损。     

加味酸枣仁颗粒镇静催眠作用实验研究

目的探讨加味酸枣仁颗粒的镇静、催眠作用。方法取SPF级昆明小鼠60只(雌雄各半),随机分为5组,每组12只,采用不同剂量加味酸枣仁颗粒对小鼠自发活动及戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠潜伏期和睡眠时间进行镇静催眠试验研究。结果加味酸枣仁颗粒中、高剂量组较空白对照组小鼠自主活动次数显著减少,睡眠潜伏期显著缩短,睡眠时间显著延长(P<0.05或0.01)。结论加味酸枣仁颗粒具有明显的镇静、催眠作用。     

心肺复苏大鼠海马神经元磷脂酰肌醇-3-激酶、蛋白激酶B和磷酸化cAMP应答元件结合蛋白表达的变化及APP17肽的影响

目的 探讨心肺复苏后大鼠海马神经元磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)、磷酸化cAMP应答元件结合蛋白(phosphorylation of cAMP respouse element binding protein,p-CREB)表达的变化,以及APP17肽对它们的影响.方法 实验地点在宣武医院神经变性病学重点实验室.雄性Wistar大鼠21只,随机分3组,每组7只:假手术对照组(A组)、心肺复苏组(B组)、心肺复苏+APP17肽组(C组).自主呼吸循环恢复(return of spontaneous circulation,ROSC)标准为心电图出现正常的QRS波群,心室内压≥60 mmHg,持续10 min以上;夹闭气管制作大鼠心跳呼吸停止模型,行心肺复苏.当大鼠出现ROSC时,复苏组静脉注射生理盐水;APP17肽组静脉注射APP17肽10μg·(300 g)~(-1).对照组行假手术,静脉注射生理盐水.维持生命体征至2 h,断头取脑,行冰冻切片.应用免疫组化法观察3组大鼠复苏2 h后海马神经元PI3K,PKB,p-CREB表达情况;三组中各取1只大鼠于ROSC后2 h,分离海马;应用Western-blot方法测定海马神经元PKB,p-CREB蛋白含量.数据以均数±标准差((x)±s)表示,组间数据用方差分析,以P<0.05为差异具有统计学意义.结果 免疫组化法显示:B组PI3K阳性细胞表达为(2.75±1.80),略高于A组(2.53±1.53),差异没有统计学意义;而C组为(5.85±2.83),较B组增加,差异具有统计学意义(P<0.01).B组PKB和p-CREB阳性细胞分别较A组明显减少[(2.45±1.36)vs.(5.22±2.50),(P<0.05);(2.41±1.11)vs.(8.31±3.02),P<0.01];C组PKB和p-CREB阳性细胞分别较B组增高[(9.66±4.32)vs.(2.45±1.36),P<0.01;(14.18±3.96)vs.(2.41±1.11),P<0.01].Western-blot法测定PKB,p-CREB蛋白含量B组较A组明显减少;C组较B组明显增加.结论 心肺复苏大鼠ROSC 2 h海马神经元PKB,p-CREB表达降低,APP17肽能恢复神经元PI3K,PKB,p-CREB的表达,对心肺复苏后海马神经元损伤有保护作用.     

联合应用维生素E和维生素C对睡眠剥夺后大鼠心肌氧化应激指标的影响

目的观察联合应用维生素E(VE)和维生素C(VC)对睡眠剥夺后大鼠心肌损伤的保护作用,探讨其作用机制。方法将大鼠随机分8组,每组10只。采用改良多平台睡眠剥夺法(MMPM)建立睡眠剥夺模型,联合VE、VC灌胃给药(VE 500 mg/kg;VC 1.5 g/kg)。观察联合VE、VC对睡眠剥夺后心肌组织丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。结果与大平台组比较,睡眠剥夺后心肌细胞中MDA的含量明显增加,SOD活性有明显下降趋势;与睡眠剥夺组比较,联合VE、VC组心肌细胞中SOD活性显著提高,细胞中MDA的含量明显降低。提示联合使用VE、VC干预后,可明显降低睡眠剥夺后心肌组织氧化应激反应。结论 联合使用VE、VC可明显降低睡眠剥夺后大鼠心肌氧化应激损伤。     

睡眠剥夺对大鼠胃排空及胃肠激素的影响

目的:探讨睡眠剥夺对大鼠胃排空及胃肠激素的影响。方法:接随机数字法将SD大鼠分为:单独笼养组,睡眠剥夺1d组,3d组,5d组,7d组和对照组,各组8只。采用小站台水环境法建立大鼠睡眠剥夺模型。用放射性核素99Tcm灌胃测定大鼠胃液体排空率,用放射免疫法测定胃黏膜中胃泌素、胃动素、生长抑素水平。结果:睡眠剥夺条件下可导致胃排空障碍,大鼠睡眠剥夺3d,5d,7d组胃排空率分别为(72±4)%,(71±5)%,(70±6)%。分别与单独笼养组、对照组及睡眠剥夺1d组比较均明显降低(t=2.763～3.684,P均<0.01)。同时胃肠激素水平发生改变,在睡眠剥夺3d,5d,7d大鼠胃黏膜中胃泌素含量分别为(268±118),(306±151),(405±164)ng/L分别与单独笼养组、对照组及睡眠剥夺1d组比较均明显升高(t=2.104～4.787,P<0.05～0.01)。胃动素含量分别为(51±32),(43±28),(36±20)ng/L,分别与单独笼养组、对照组及睡眠剥夺1d组比较均明显降低(t=2.054～3.062,P<0.05～0.01)。生长抑素水平分别为(219±110),(260±78),(236±88)ng/L,分别与单独笼养组、对照组及睡眠剥夺1d组比较均明显升高(t=2.023～3.120,P<0.05～0.01)。结论:睡眠剥夺可导致胃排空障碍和胃粘膜中胃泌素、胃动素、生长抑素含量发生变化。     

睡眠剥夺大鼠癫痫诱发后CB1受体与脑细胞凋亡的关系

目的探讨睡眠剥夺大鼠癫痫诱发后海马大麻素CB1受体表达与脑细胞凋亡的关系。方法48只Sprague-Dawley（SD）大鼠,随机分为癫痫诱发前和癫痫诱发后两组,每组24只。每组大鼠又随机分为空白对照组（CC）,睡眠剥夺1d、3d、5d组（SD1d、SD3d、SD5d）。用改良多平台睡眠剥夺法建立快速动眼期（REM）睡眠剥夺模型,戊四氮诱发癫痫。应用RT-PCR方法检测癫痫诱发前后大麻素CB1受体mRNA表达,并观察海马超微结构改变。结果SD1d组神经元轻度固缩,染色质轻度边聚,SD3d组和SD5d组均出现神经元凋亡。癫痫诱发后发现CC组大鼠无抽搐,CB1受体mRNA表达较癫痫诱发前明显升高（P〈0．01）。SD1d、SD3d、SD5d组大鼠抽搐严重,CB1受体mRNA表达较癫痫诱发前相比差异无显著性（P〉0．05）。结论睡眠剥夺能造成神经元凋亡,影响大麻素CB1受体表达。CB1受体表达增高对脑损伤有一定保护作用,能抑制癫痫发作。     

穴位埋线对脑缺血后肢体痉挛大鼠GABA_B、mGluR1表达的影响

目的:观察穴位埋线对脑缺血后肢体痉挛大鼠γ-氨基丁酸B受体(GABAB)、代谢性谷氨酸受体1(mGluR1)表达的影响。方法 :60只SD大鼠随机分成3组,假手术组10只,治疗组和模型组各25只。治疗组和模型组采用大脑中动脉栓塞法制备脑缺血再灌注模型,造模后肢体痉挛的大鼠入组。假手术组仅分离左侧的颈动脉。造模3 d后,治疗组给予穴位埋线,穴位选取大椎、关元、中脘。选用神经功能缺损症状评分标准、改良Ashworth肌张力评定量表(MAS)以及离体组织灌流系统测量治疗前后大鼠神经缺损功能及肌张力的改善情况,运用免疫组织化学法检测大鼠脑干GABAB、mGluR1表达情况。结果 :(1)神经功能缺损症状方面,治疗组治疗后比较明显改善(P0.05),与模型组比较改善显著(P0.05);(2)MAS和离体肌张力方面,治疗组治疗后明显改善(P0.01,P0.05),治疗后比模型组明显降低(P0.05);(3)免疫组织化学方面,治疗组与模型组比较,GABAB表达增高,mGluR1表达下降(P0.01,P0.05)。结论:穴位埋线能够缓解脑缺血后出现的肢体痉挛,并提高GABAB及降低mGluR1的表达水平。     

酸枣仁汤对血虚小鼠的镇静催眠作用

目的:观察机体在血虚模型状况下,酸枣仁汤的镇静催眠作用。方法:①实验于2004-03/05在中国药科大学中医药教研室实验室完成。选用昆明种雄性小鼠246只。②观察酸枣仁汤(酸枣仁、甘草、知母、茯苓、川芎经煎煮制成酸枣仁汤颗粒。酸枣仁颗粒溶于蒸馏水,制成0.6,1.2,2.4g/mL溶液)对血虚小鼠戊巴比妥钠致睡眠时间的影响:取昆明种小鼠60只,随机分为5组:正常对照组、模型组(灌服生理盐水),酸枣仁汤低、中、高剂量组(灌服酸枣仁汤生药量6,12,24g/kg),每组12只。除正常对照组以外,其余各组造失血性贫血模型:小鼠眼眶放血0.5mL,24h后给药,连续给药5d,最后1d给药1h后,腹腔注射戊巴比妥钠35mg/kg。15min内翻正反射消失达30s以上为进入睡眠,翻正反射恢复为清醒,其间为睡眠时间,记录各组小鼠的睡眠潜伏期和睡眠期。③观察酸枣仁汤对血虚小鼠戊巴比妥钠阈下催眠剂量的影响:取昆明种小鼠66只,随机分成5组:正常对照组、模型组(n=12,21),酸枣仁汤低、中、高剂量组(n=11,12,10)。每组干预时间及干预措施同睡眠时间实验。分别腹腔注射戊巴比妥钠27mg/kg。腹腔注射后15min内翻正反射消失1min(睡眠)记为阳性(+),否则(清醒)记为阴性(-)。④观察酸枣仁汤对血虚小鼠自发活动的影响:每组小鼠只数、干预措施及干预时间同“睡眠时间”观察,进行旷野法实验:将小鼠放入直径30cm,高20cm的圆柱型笼中,笼底部分为19格,笼上方1m处放置60W白炽灯,描记小鼠在笼内2min的活动轨迹,轨迹与笼底格线相交记为1次。⑤观察酸枣仁汤对血虚小鼠血红蛋白的影响:每组小鼠只数、干预措施及干预时间同“睡眠时间”观察。用HiCN法测血红蛋白含量,给药第1天,第6天分别测血红蛋白含量,比较血红蛋白的变化值。⑥计数结果差异比较采用χ2Test孙氏直接概率法,组间计量结果比较采用t检验。结果:小鼠246只均进入结果分析。①酸枣仁汤低、高剂量组睡眠潜伏期明显短于模型组(P<0.01,0.05),睡眠期明显长于模型组(P<0.05)。②酸枣仁汤高、低剂量组睡眠小鼠只数明显多于模型组(P<0.05),清醒小鼠只数明显少于模型组(P<0.05)。③模型组小鼠自发活动次数明显少于对照组(P<0.01),酸枣仁汤中剂量组小鼠自发活动次数明显多于模型组(P<0.05)。④治疗前模型组小鼠血红蛋白含量明显低于对照组,治疗后酸枣仁汤中、高剂量组小鼠血红蛋白含量变化值明显高于模型组(P<0.05)。结论:①酸枣仁汤对机体在血虚小鼠具有镇静催眠作用。②酸枣仁汤能提高血虚小鼠血红蛋白含量,改善血虚症状,该作用具有剂量依赖性。     

老年大鼠脑室注射β-淀粉样蛋白1-40单体后吸入异氟烷和七氟烷对海马p-CaMKⅡ及p-CREB表达的影响

目的 研究老年大鼠脑室注射β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)单体后吸入异氟烷或七氟烷对海马磷酸化钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(p-CaMKⅡ)和磷酸化cAMP反应结合蛋白(p-CREB)表达水平的影响.方法 选择80只20月龄的雄性老年SD大鼠,随机分为8组,每组各10只.对照组脑室注射0.9%氯化钠注射液,实验1组脑室注射Aβ1-40单体,实验2组脑室注射可溶性Aβ1-40寡聚体,实验3组脑室注射不溶性纤维状Aβ1-40,实验4组脑室注射0.9%氯化钠注射液后吸入异氟烷,实验5组脑室注射Aβ1-40单体后吸入异氟烷,实验6组脑室注射0.9%氯化钠注射液后吸入七氟烷,实验7组脑室注射Aβ1-40单体后吸入七氟烷.2周后各组断头取海马,采用Western-blot生物学技术,检测海马p-CaMKⅡ及p-CREB表达水平.结果 与对照组比较,实验1组海马p-CaMKⅡ和p-CREB含量差异无统计学意义(P>0.05),实验2、3、4、5、6、7组海马p-CaMKⅡ和p-CREB含量均明显降低(P<0.05).与实验2组比较,实验5组海马p-CaMKⅡ和p-CREB均显著降低(P<0.05),实验7组海马p-CaMKⅡ含量差异无统计学意义(P>0.05),而p-CREB明显降低(P<0.05).与实验4组比较,实验5组p-CaMKⅡ和p-CREB含量均明显降低(P<0.05).与实验6组比较,实验7组p-CaMKⅡ和p-CREB含量均明显降低(P<0.05).结论 异氟烷和七氟烷可通过促进Aβ1-40单体产生神经毒性,引起老年大鼠海马与认知功能相关信号传导系统的抑制.     

睡眠剥夺抑郁模型大鼠血清皮质酮和行为学的改变

目的观察慢性轻度不可预见的刺激对大鼠血清皮质酮和行为学的影响及睡眠剥夺的调剂作用.方法实验于2003-10/11在汕头大学医学院完成.选择32只SD大鼠,随机分为4组,即正常对照组,抑郁模型组,睡眠剥夺组和大平台对照组,每组8只.抑郁模型组,睡眠剥夺组和大平台对照组均采用慢性轻度不可预见性的应激抑郁模型.睡眠剥夺组在抑郁模型的基础上,采用小平台水环境法进行72 h的睡眠剥夺.大平台对照组中平台的直径大于睡眠剥夺组,为18 cm,余与异相睡眠剥夺组的环境相同.以旷场实验研究睡眠剥夺对大鼠行为学的影响;采用酶联免疫吸附试验检测大鼠血清皮质酮的含量.结果纳入动物32只,进入结果分析32只,无脱失值.①各组大鼠旷场行为得分抑郁模型组,睡眠剥夺组和大平台对照组造模后的总活动量比造模前降低(17.25±4.03,99.25±5.98;12.13±3.01,90.00±6.04;15.50±3.27,96.25±7.06);睡眠剥夺72 h后,睡眠剥夺组和大平台对照组的总活动量比造模后升高(71.00±5.84,12.13±3.01;53.50±9.42,15.50±3.27).②慢性轻度不可预见刺激使大鼠血清皮质酮提高,睡眠剥夺使抑郁模型大鼠的血清皮质酮下降,正常对照组为(37.62±6.63)μg/L,抑郁模型组高于正常对照组[(91.60±17.63)μg/L],睡眠剥夺组和大平台对照组低于正常对照组[(3.43±0.90),(3.23±0.68),(37.62±6.63)μg/L,P＜0.01],且睡眠剥夺组和大平台对照组均低于抑郁模型组(P＜0.01).结论慢性轻度不可预见刺激可使大鼠血清皮质酮提高,即下丘脑-垂体-肾上腺轴功能亢进,并出现抑郁样行为;睡眠剥夺使抑郁模型大鼠的血清皮质酮下降,即抑制大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的兴奋性,改善抑郁模型大鼠的抑郁表现.     

发作性睡病的临床监测与特征分析

目的探讨多导睡眠图(ploysomnography;PSG)、多次睡眠潜伏期试验(multiplesleeplatencytest;MSLT)在发作性睡病(Narcolepsy;NC)和嗜睡症(lethargy;IH)患者诊断、鉴别诊断中的价值。方法对35例发作性睡病(NC)和30例嗜睡症(IH)进行整夜多导睡眠图(PSG)描记和多次睡眠潜伏期试验(MSLT),分析其睡眠参数异同。结果MSLT结果显示:NC组睡眠潜伏期和快动眼睡眠(REM)潜伏期显著缩短,入睡次数和REM睡眠出现次数明显多于IH组和对照组(P<0.01),睡眠潜伏期<5分钟和ROREMPs≥2次30例(85.7%),与IH组比较差异有统计学意义(P<0.01);整夜PSG结果显示:NC组总睡眠时间和深睡眠(SWS)百分比及REM潜伏期显著低于IH组和对照组,而S1阶段睡眠显著高于IH组,两组比较,差异具有统计学决心义(P<0.01)。结论NC患者具有明显的睡眠潜伏期缩短和反常的REM睡眠特征,MSLT、PSG对NC和IH的诊断和鉴别诊断具有重要参考价值。     

丹红注射液穴位注射治疗老年性失眠疗效评价

目的:观察丹红注射液穴位注射对老年性失眠症患者多导睡眠图(PSG)及睡眠结构(PSQI)的影响,以客观评价疗效。方法:将老年功能性睡眠障碍患者86例随机分为治疗组和对照组各43例,分别采用丹红注射液穴位注射和佐匹克隆治疗,观察治疗前后PSG及PSQI,以判定疗效。结果:PSG及PSQI显示,治疗组较对照组深睡眠时间(S3+S4)、REM睡眠时间显著延长(P<0.01),睡眠质量和日间功能改善明显(P<0.05或P<0.01);治疗组临床疗效治愈率及愈显率分别为33.3%、85.7%,对照组分别为7.3%、51.7%,2组间比较均有显著性差异(P<0.05);治疗组睡眠效率提高,REM时间、深睡眠增加,显著改善了睡眠结构、睡眠质量、日间功能障碍。结论:丹红注射液穴位注射治疗老年功能性睡眠障碍有良好临床疗效,通过增加深睡眠、REM时间,改善睡眠结构、睡眠质量和日间功能,疗效明显优于佐匹克隆,且无明显不良反应。