生骨再造丸对激素性股骨头坏死大鼠H型血管生成的影响

目的 观察生骨再造丸对激素性股骨头坏死（SONFH）大鼠H型血管生成及HIF-1α/VEGF信号通路的影响，探讨其骨修复作用的机制。方法 采用甲泼尼龙琥珀酸钠联合脂多糖注射法进行SONFH造模，将50只大鼠分为空白组、模型组和生骨再造丸低、中、高剂量组，每组10只。生骨再造丸低、中、高剂量组分别予0.5、1.0、2.0 g/kg生骨再造丸药液灌胃4周，空白组和模型组予等量生理盐水灌胃。Micro-CT观察股骨头骨小梁结构及囊性变情况，免疫荧光染色检测股骨头内皮黏蛋白（Emcn）、CD31、Osterix表达，qRT-PCR和Western blot检测股骨头缺氧诱导因子（HIF）-1α、血管内皮生长因子（VEGF）及成骨相关转录因子Osterix、Runx2 mRNA和蛋白表达。结果 与空白组比较，模型组大鼠股骨头骨小梁稀疏、断裂，软骨下囊性变形成，股骨头塌陷，股骨头H型血管标记物Emcn、CD31共染色面积和Osterix染色面积明显减少（P<0.01）,HIF-1α、VEGF、Osterix、Runx2 mRNA和蛋白表达明显降低（P<0.01）；与模型组比较，生骨再造...     

基于VEGF/DLL4信号研究桃红四物汤对创伤性股骨头坏死大鼠的作用及机制

目的 通过观察桃红四物汤对创伤性股骨头坏死大鼠的VEGFA、DLL4蛋白表达的影响，探究其防治创伤性股骨头坏死的作用机制。方法 将40只SPF级健康雄性SD大鼠，采用随机数字表分为正常组、模型组、桃红四物汤低剂量组、桃红四物汤中剂量组和桃红四物汤高剂量组，每组8只，共5组。正常组大鼠予以常规喂养加生理盐水灌胃；模型组手术造模成功后予以常规饲料喂养加生理盐水灌胃；桃红四物汤低、中、高剂量组分别予以正常喂养并分别予以桃红四物汤9 g/kg、18 g/kg、36 g/kg的标准进行灌胃。持续干预4周后，采集股骨头标本，观察股骨头组织形态学、Micro CT、股骨头血管微密度、VEGFA和DLL4蛋白表达的情况。结果 Micro CT可见：桃红四物汤能有效改善创伤性股骨头坏死大鼠股骨头关节面塌陷，以中高剂量组改善明显。病理学形态可见，经桃红四物汤灌胃干预后，大鼠股骨头的骨小梁结构、局部血液供应及空骨陷窝较模型组均出现不同程度的改善，并以桃红四物汤中高剂量组为佳。股骨头微血管密度，与模型组相比，其余4组大鼠股骨头微血管密度都要高，差异有统计学意义（P <0.05）；与桃红四物汤高剂量组股骨...     

补肾活血汤通过抑制Wntβ-catenin信号通路对激素性股骨头坏死大鼠疗效及血管形态、VEGF的影响

目的:探究补肾活血汤通过抑制Wntβ-catenin信号通路对激素性股骨头坏死大鼠疗效及血管形态、血管内皮生长因子受体(VEGF)的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术(sham)组、模型组和干预组。通过臀肌下注射醋酸泼尼松龙建立模型组模型。干预组在建模后使用补肾活血汤灌胃。HE染色被用于检测股骨头组织学情况。CT扫描股骨头血管情况。Western Blot检测股骨头组织中Wnt、β-catenin、VEGF蛋白水平。结果:建模后骨小梁稀疏变细,并出现明显的断裂和缺损,骨细胞数目少;干预组骨小梁缺损显著轻于模型组。模型组骨小梁面积显著降低而空骨陷窝率显著增加(P0.01),干预组的骨小梁面积显著高于模型组而空骨陷窝率显著低于模型组(P0.01)。Sham组大鼠股骨头血管呈现网状,分布较为均匀,结构清晰;模型组大鼠股骨头内血管明显减少,微结构不清晰;干预组股骨头内血管呈现网状,部分呈网状。模型组血管体积分数和血管厚度显著低于sham组(P0.01),干预组血管体积分数和血管厚度显著高于模型组(P0.01)。模型组的Wnt、β-catenin、VEGF蛋白水平显著低于Sham组(P0.01),干预组的Wnt、β-catenin、VEGF蛋白水平显著高于模型组(P0.01)。结论:补肾活血汤具有上调Wntβ-catenin信号通路以及VEGF表达的作用,进而促进骨骼组织血管的生成,治疗模型组。     

补肾益髓中药复方对糖皮质激素性骨质疏松症大鼠肾组织Osterix mRNA及蛋白表达的影响

目的观察糖皮质激素性骨质疏松症（GIOP）大鼠肾组织Osterix mRNA及蛋白表达,探讨GIOP的发病机制以及补肾益髓中药复方的疗效机理。方法肌注地塞米松复制GIOP大鼠模型,实验设正常组、模型空白组、补肾益髓中药复方组、补中益气颗粒组、血府逐瘀胶囊组、骨疏康颗粒阳性对照组。造模及灌胃给药9周。应用XR-26型双能X线骨密度仪测定股骨骨密度,实时定量RT-PCR及WesternBlot检测肾组织OsterixmRNA及蛋白表达。结果与正常组比较,模型空白组股骨骨密度明显降低（P〈0．01）、肾组织Osterix mRNA及蛋白表达明显升高（P〈0．01）;与模型空白组比较,补肾益髓中药复方组股骨骨密度明显升高（P〈0．01）、肾组织OsterixmRNA及蛋白表达明显下调（P〈0．01）。结论肾组织OsterixmRNA及蛋白表达升高可能是GIOP的发病机制之一;补肾益髓中药复方可能通过下调肾组织OsterixmRNA及蛋白表达,有效防治GIOP。     

Effect of Reinforcing Kidney to Replenish Marrow Herbs Compound on mRNA and Protein Expression of Osterix in Kidney Tissues of Rats with Glucocorticoid-Induced Osteoporosis

目的 观察糖皮质激素性骨质疏松症(GIOP)大鼠肾组织Osterix mRNA及蛋白表达,探讨GIOP的发病机制以及补肾益髓中药复方的疗效机理.方法 肌注地塞米松复制GIOP大鼠模型,实验设正常组、模型空白组、补肾益髓中药复方组、补中益气颗粒组、血府逐瘀胶囊组、骨疏康颗粒阳性对照组.造模及灌胃给药9周.应用XR-26型双能X线骨密度仪测定股骨骨密度,实时定量RT-PCR及Western Blot检测肾组织Osterix mRNA及蛋白表达.结果 与正常组比较,模型空白组股骨骨密度明显降低(P＜0.01)、肾组织Osterix mRNA及蛋白表达明显升高(P＜0.01);与模型空白组比较,补肾益髓中药复方组股骨骨密度明显升高(P＜0.01)、肾组织Osterix mRNA及蛋白表达明显下调(P＜0.01).结论 肾组织Osterix mRNA及蛋白表达升高可能是GIOP的发病机制之一;补肾益髓中药复方可能通过下调肾组织Osterix mRNA及蛋白表达,有效防治GIOP.     

补肾生骨汤对股骨头无菌性坏死大鼠的影响

目的:探讨补肾生骨汤调节miR-135b-5p/Runt相关基因2(RUNX2)信号轴对股骨头无菌性坏死(ONFH)大鼠的影响。方法:将SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、ONFH组、低/中/高剂量补肾生骨汤(0.13,0.26,0.52 g/mL,L/M/H-补肾生骨汤)组、H-补肾生骨汤+miR-135b-5p agomir组、H-补肾生骨汤+agomir-NC组，采用液氮冷冻法制备ONFH大鼠模型；苏木精-伊红(HE)染色观察股骨头组织病理改变；检测血浆中纤维蛋白原(FIB)、血管内皮生长因子(VEGF)、一氧化氮合成酶(NOS)、骨钙素(BGP)水平；RT-qPCR仪、Western Blot法分别检测股骨头组织中miR-135b-5p、RUNX2表达水平；双荧光素酶实验分析miR-135b-5p与RUNX2的靶向关系。结果:与Sham组比较，ONFH组股骨头组织发生区域性缺损，骨小梁稀疏、行走不规则，空骨陷窝增多明显；血浆中FIB表达升高，VEGF、NOS、BGP表达降低(P<0.05);经L/M/H-补肾生骨汤干预后，上述情况均改善，且经H-补肾生骨汤干预改善更明显...     

补肾活血汤治疗股骨头坏死的作用机制研究

目的：探讨补肾活血汤对股骨头坏死的疗效,同时观察其对Wnt-βcatenin信号通路的影响。方法：将45只SD大鼠随机分为空白组、模型组及中药组,每组15只。利用甲泼尼龙琥珀酸钠制备激素性股骨头坏死动物模型,成模后中药组大鼠接受补肾活血汤灌胃,1次/d,空白组及模型组大鼠接受生理盐水灌胃,均连续灌胃6周,比较各组大鼠股骨形态学、骨密度、股骨头病理学、血清钙、磷、股骨头组织Wnt10b、β-Catenin水平变化。结果：1）模型组大鼠股骨头密度高低不同,股骨头毛糙,骨小梁模糊,中药组大鼠股骨头骨小梁数目较模型组增多,且相对清晰,股骨头面较模型组光滑。2）模型组及中药组大鼠骨密度、血清钙、磷水平、股骨头组织Wnt10b、β-Catenin蛋白均明显下降(P<0.05),中药组高于模型组(P<0.05)。3）模型组大鼠股骨头软骨出现明显病理改变;中药组大鼠股骨头结构尚完整,空骨陷窝较模型组减少,软骨细胞排列欠规则。结论：补肾活血汤对股骨头坏死有保护效应,其作用机制与Wnt-βcatenin信号通路有关。     

纳米钙补肾中药对激素诱导骨质疏松大鼠股骨生物力学及骨形态的影响

目的：观察纳米钙补肾中药对氢化可的松诱导骨质疏松大鼠股骨生物力学及骨形态的影响。方法：氢化可的松15mg·kg^-1肌注，隔日1次连续8周，诱导建立骨质疏松大鼠模型，纳米钙补肾中药每日上午灌胃1次，连续8周后检测股骨生物力学指标及骨形态计量学指标。结果：纳米钙补肾中药组与模型组相比股骨的最大载荷，抗压强度，轴向刚度，水平剪切刚度均明显增高（P〈0．01）；骨小梁面积百分数（％Tb·Ar），骨小梁厚度（Tb·Th），骨小梁数量（Tb·N）显著增加（P〈0．01）；骨小梁分离度（Tb·Sp）显著降低（P〈0．01）。结论：纳米钙补肾中药对氢化可的松所致的大鼠骨强度的降低和结构的改变有明显的对抗作用。     

血府逐瘀汤对心肌缺血大鼠模型血清NO及缺血区心肌组织VEGF、DLL4蛋白表达的影响

目的：探讨血府逐瘀汤对心肌缺血大鼠模型缺血区心肌血管新生的影响及其祛瘀生新（生新络）作用机制。方法：采用结扎大鼠冠状动脉左前降支制备急性心肌缺血模型,用血府逐瘀汤进行干预,分别于第7天、第14天处死动物取血,采用硝酸还原酶法检测大鼠血清NO的含量,HE染色观察缺血区心肌形态学的改变,免疫组化法检测缺血区心肌血管内皮细胞生长因子（VEGF）、Delta样配体4（Delta-like ligand 4,DLL4）蛋白的表达。结果：与假手术组比较,模型组血清NO含量明显降低（P〈0.01）,缺血区心肌VEGF、DLL4蛋白表达增加（P〈0.05）;与模型组比较,血府逐瘀汤组、麝香保心丸组血清NO含量均升高（P〈0.05）,缺血区心肌VEGF、DLL4蛋白表达明显增加（P〈0.01）。结论：血府逐瘀汤可促进心肌缺血大鼠模型缺血区心肌血管新生,对实验性心肌缺血损伤有保护作用,其祛瘀生新（生新络）作用与提高血清NO含量及缺血区VEGF、DLL4蛋白表达有关。     

哈蟆油蛋白对去势大鼠骨组织形态保护的实验研究

目的观察大鼠骨密度(BMD)、生物载荷量及股骨组织切片形态学变化,评价哈蟆油蛋白对去势大鼠骨形态的保护作用。方法利用动物骨密度仪和小动物骨骼强度测定仪测量大鼠BMD和生物载荷量;采用HE染色法观察大鼠股骨骨小梁数量变化,应用免疫组化技术观察哈蟆油蛋白对ALP和BMP2表达的调节作用。结果与模型组比较,哈蟆油蛋白明显提高了大鼠的BMD(P0.05),显著改善了股骨的最大载荷量(P0.01);150mg·kg~(-1)哈蟆油给药组的骨小梁的排列更加有序,结构更加完整;同时低剂量和高剂量组的ALP和BMP2呈现阳性表达。结论哈蟆油蛋白能增强骨强度、降低骨脆性骨折风险,同时能保护骨小梁结构,促进ALP和BMP2的阳性表达,故哈蟆油蛋白对骨组织形态发挥一定的保护作用,可能参与骨代谢平衡,发挥防治绝经后骨质疏松的作用。     

舒肝化癥方对肝纤维化模型大鼠VEGF、CTGF、CD31及vWF表达的影响及其相关性研究

目的：以四氯化碳（CCl4）致大鼠肝纤维化为研究对象,研究舒肝化癥方（SGHZD）对大鼠肝纤维化血瘀证的影响及机理,分析血管内皮生长因子（VEGF）、结缔组织生长因子（CTGF）、血小板-内皮细胞黏附分子（CD31）及血管性血友病因子（vWF）在SGHZD抗肝纤维化过程中的表达及其相关性。方法：SPF级SD大鼠,雄性,54只,按随机原则分成空白组、模型组（2.0 mg/kg 40%CCl4橄榄油溶液+等量的0.9%的生理盐水）、阳性对照组（2.0 mg/kg 40%CCl4橄榄油溶液+0.2 mg/kg秋水仙碱溶液）、SGHZD高剂量组（2.0 mg/kg 40%CCl4橄榄油溶液+29.52g/kgSGHZD）、SGHZD中剂量组（2.0 mg/kg 40%CCl4橄榄油溶液+14.76 g/kgSGHZD）和SGHZD低剂量组（2.0 mg/kg 40%CCl4橄榄油溶液+7.38 g/kgSGHZD）,各9只。造模时间为8周,每周2次,从造模第2天起,用药治疗每天1次,治疗8周,实验期间动态监测所有大鼠的生理情况,马松染色（Masson）对肝组织病理形态学变化和胶原纤维沉积情况进行观察,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测VEGF、CTGF、CD31、vWF mRNA的表达水平,Western blot检测VEGF, CTGF,CD31, vWF的蛋白表达。结果：与空白组相比,模型组大鼠整体状况明显下降,Masson染色结果显示大鼠汇管区和中央静脉区形成假小叶,并伴有纤维间隔形成,胶原纤维沉积增多且有显著意义（P <0.05）;RT-qPCR、Western blot结果显示,VEGF、CTGF、CD31、vWF mRNA和蛋白表达均上升（P <0.05）;与模型组相比,阳性对照组和SGHZD组各剂量Masson染色显示胶原纤维沉积明显减少,纤维间隔程度减轻,差异有统计学意义（P <0.05）,RT-qPCR、Western blot结果显示VEGF、CTGF、CD31、vWF mRNA及蛋白的表达量均下降,但以阳性对照组及中药高剂量组效果最好（P均<0.05）;将Masson染色胶原容积分数分别与VEGF、CTGF、CD31及vWF蛋白表达进行相关性分析,发现VEGF、CTGF、CD31及vWF在肝纤维化的形成过程中随着肝纤维化程度加重其表达上调,而在SGHZD抗肝纤维化过程中随着胶原容积分数减少其表达减少;对VEGF、CTGF、CD31及vWF蛋白表达进行相关性分析,发现VEGF、CTGF、CD31及vWF在肝纤维化的形成发展中和SGHZD抗肝纤维化的过程中均呈显著正相关。结论：SGHZD对CCl4所致肝纤维化大鼠有显著疗效,其作用机理可能与VEGF、CTGF、CD31及vWF的表达、病理性血管生成、肝窦毛细血管化及肝纤维化血瘀证相关。     

补肾活血方通过调节PI3K/Akt/mTOR信号通路改善DOR大鼠卵巢储备功能

目的 观察补肾活血方调节磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路相关因子改善卵巢储备功能下降（DOR）大鼠卵巢储备功能的作用机制。方法 运用Ataya法腹腔注射环磷酰胺复制60只DOR模型大鼠，将其随机分为模型组、戊酸雌二醇组（0.000 9 g·kg^-1），补肾活血方高、中、低剂量组（33，16.5，8.25 g·kg^-1），同时另设正常组，每组12只；各组相应药物治疗，正常组和模型组给予等体积生理盐水，连续灌胃14 d，每天1次。治疗结束后，苏木素-伊红（HE）染色卵巢组织，光镜观察初级卵泡数、成熟卵泡数、总卵泡数的变化；免疫组化检测卵巢组织中血管内皮生长因子（VEGF）的表达，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测卵巢组织中PI3K，Akt，mTOR，半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）蛋白表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）法检测卵巢组织中PI3K，Akt，mTOR mRNA表达。结果 与正常组比较，模型组卵巢组织中成熟卵泡数量、总卵泡数量明显减少（P<0.05，P<0.01），卵巢组织中VEGF，Caspase-3表达升高（P<0.05），PI3K，Akt，mTOR蛋白及mRNA表达水平降低（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，补肾活血方中、高剂量组成熟卵泡数量、总卵泡数量均有不同程度上升（P<0.05，P<0.01），VEGF补肾活血方中剂量组升高最为明显（P<0.05），补肾活血方低、中、高剂量组及戊酸雌二醇组Caspase-3下降，补肾活血方中、高剂量组PI3K，Akt，mTOR蛋白及mRNA表达水平均升高（P<0.05，P<0.01），且补肾活血方中剂量组更加接近于正常组。结论 补肾活血方可以有效地改善DOR大鼠卵巢储备功能，促进卵泡数量增加。作用机制可能与补肾活血方通过增加卵巢组织中VEGF的表达有关，进而激活PI3K/Akt/mTOR信号通路，从而调节Caspase-3的含量，最后促进卵泡数量的增加。     

活血通络汤在激素性股骨头缺血性坏死兔造模过程中对VEGF、BGP和DLL4的影响

目的：研究活血通络汤在SANFH兔造模过程中对Delta样配体4（DLL4）、骨钙素（BGP）、血管内皮生长因子（VEGF）水平的影响。方法：将192只日本大耳兔随机分为模型组A、模型组B、模型对照组C、空白对照组D,各48只,A、B、C组运用贺西京造模法造模。A组第2周开始喂服中药饲料,B组第3周开始喂服中药饲料,C、D组均喂服等量普通饲料。分别于第2、5、8周末检测血中DLL4、BGP、VEGF的水平,同时做股骨头病理镜检,计算空骨陷窝率。结果：第8周时,C组VEGF浓度比D组明显低（P<0.01）,即VEGF表达明显减弱,A组VEGF浓度比C组高（P<0.05）,即VEGF表达增强,B组VEGF浓度比C组高（P>0.05）,差异无统计学意义;第8周时, A、B组BGP浓度比C组明显高（P<0.01）,表示成骨细胞分泌BGP明显增加。A组、B组、C组、D组的DLL4表达值在2、5、8周呈递增趋势;第8周时,A组、B组DLL4表达值低于C组（P>0.05）,差异无统计学意义,A组的增长幅度比C组大;第8周,C组空骨陷窝率明显高于D组（P<0.01）,即骨坏死明显加重,A组、B组空骨陷窝率明显低于C组（P<0.01）,即骨坏死明显减轻。结论：激素可明显抑制VEGF的表达,活血通络汤可上调DLL4表达水平,促进VEGF的表达,提高BGP的含量,从而促进骨坏死的修复,对干预SANFH有显著疗效。     

基于血管生成探讨补肾养精颗粒对早发性卵巢功能不全大鼠模型的影响＊

目的 基于血管生成及凋亡相关因子探讨补肾养精颗粒治疗早发性功能不全的机制。方法 选定动情周期正常的60只SD雌性大鼠，随机分为空白组、模型组、补肾养精颗粒组（低剂量组（1.75 g?kg^-1）、中剂量组（3.50 g?kg^-1）、高剂量组（7.00 g?kg^-1）、补佳乐组。通过阴道涂片观察动情周期的变化；ELISA检测大鼠血清E₂、AMH、NF-κB、MMP-2、Caspase-3、Caspase-9浓度；Western blot检测卵巢组织中MMP-2、MMP-9、VEGF、Caspase-3的表达；HE染色观察大鼠卵泡发育及血管分布情况。结果 ①模型组大鼠的动情周期明显延长，予补肾养精颗粒干预后明显缩短；②模型组的血清E₂、AMH、NF-κB、MMP-2浓度较低，予补肾养精颗粒干预后其表达升高（P < 0.05）；③模型组的Caspase-3、Caspase-9表达偏高，予补肾养精颗粒干预后其表达降低（P < 0.05）；④在卵巢组织MMP-2、MMP-9、VEGF的蛋白含量方面，模型组均低于空白组，予补肾养精颗粒干预后其表达升高；⑤在HE方面，模型组的卵泡数目及血管较少，予补肾养精颗粒干预后可改善。结论 补肾养精颗粒可通过升高血管生成相关因子NF-κB、MMP-2、MMP-9、VEGF的表达，降低凋亡相关因子Caspase-3、Caspase-9的表达，进而改善血清E2、AMH水平，促进卵巢血管的形成及卵泡的发育。     

补肾、健脾、活血中药对糖皮质激素性骨质疏松症大鼠骨组织Osterix mRNA及蛋白表达的影响

目的:观察糖皮质激素性骨质疏松症(glucocorticoid-induced osteoporosis,GIOP)大鼠模型骨组织成骨细胞特异基因(osterix,Osx)mRNA及蛋白表达,探讨GIOP的发病机制,并比较补肾、健脾、活血中药的疗效及其调控作用。方法:采用后肢肌注地塞米松(2.5mg/kg,每周2次,连续9周)的方法复制GIOP大鼠模型,按体质量分层随机分为正常组、模型空白组、补肾中药组、健脾中药组、活血中药组、骨疏康颗粒阳性对照组。灌胃给药9周。应用XR-26型双能X线骨密度仪测定股骨骨密度,以评价动物模型的成立及药物疗效。实时定量RT-PCR(real-time quantitative,RT-PCR)检测骨组织Osterix mRNA表达,Western Blot检测骨组织Osterix蛋白表达。结果:①股骨骨密度:与正常组比较,模型空白组明显降低(P<0.01);与模型空白组比较,补肾中药组明显升高(P<0.01),骨疏康颗粒阳性对照组明显升高(P<0.05),健脾中药组和活血中药组虽有升高趋势,但无统计学意义。②骨组织Osterix mRNA及蛋白表达:与正常组比较,模型空白组明显降低(P<0.01);与模型空白组比较,补肾中药组明显上调(P<0.01),骨疏康颗粒阳性对照组也有明显上调(P<0.05),健脾中药组和活血中药组虽有所升高,但无统计学意义。结论:①肌注地塞米松可以成功复制GIOP大鼠模型。②骨组织Osterix mRNA及蛋白表达水平降低可能是GIOP的发病机制之一。③补肾中药具有明显防治效果,其作用机制与上调骨组织Osterix mRNA及蛋白表达密切相关。     

参芪补肾活血汤改善兔股骨骨折延迟愈合的机制初探

[目的] 初步探讨参芪补肾活血汤对兔股骨骨折延迟愈合的作用效果。[方法] 采用外科手术截除30只新西兰大白兔左侧股骨中段10mm皮质骨的方法构建股骨愈合延迟模型,将模型动物随机分为模型组、参芪补肾活血汤高剂量组（10mL/kg）、参芪补肾活血汤低剂量组（5mL/kg）,每组10只,另取10只健康动物作为空白组。参芪补肾活血汤组按剂量每天灌胃1次,持续4周,空白组与模型组同法给予生理盐水。动物给药完成后收集血清样本与愈伤处骨组织样本,逆转录实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）法检测血清中骨形态发生蛋白（BMP）-2、BMP-7、转化生长因子-β1（TGF-β1）和血管内皮生长因子（VEGF）基因相对表达水平,苏木精-伊红染色法观察骨组织愈合情况,免疫组织化学法检测愈伤处骨组织中BMP-2、BMP-7、TGF-β1和VEGF蛋白表达水平。[结果] 病理学显示,模型组骨组织愈合缓慢,损伤区域明显,参芪补肾活血汤高剂量组则出现明显骨痂与骨组织形成。与空白组比较,模型组血清与组织中BMP-2、BMP-7、TGF-β1和VEGF表达水平均降低（P<0.01）,与模型组比较,参芪补肾活血汤高剂量血清与组织中BMP-2、BMP-7、TGF-β1和VEGF表达水平均升高（P<0.05）。[结论] 参芪补肾活血汤具有促进兔股骨愈合的效果,其机制可能是促进BMP-2、BMP-7、TGF-β1表达,诱导骨缺损区域血管形成。     

补肾方对激素性股骨头坏死大鼠的骨修复作用

目的:观察补肾方对激素性股骨头坏死(SONFH)大鼠股骨头骨修复的作用。方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常组,模型组,补肾方高、中、低剂量组和阳性药健骨生丸组。除正常组外其余各组臀肌注射21 mg·kg-1甲泼尼龙琥珀酸钠,1 d 1次,连续3 d,建立单纯性糖皮质激素股骨头坏死模型。各给药组从第4天开始,分别给予5.3,10.6,21.2 g·kg-1的补肾方和1.68 g·kg-1健骨生丸,给药6周后取血和股骨头,HE染色观察股骨头组织的病理学改变,Micro-CT扫描观察股骨头骨形态变化并进行骨计量学分析,ELISA检测血清骨形成标志物骨钙素(BGP)和降钙素(CT)含量。结果:模型组大鼠股骨头表现出大量空骨陷窝和脂肪细胞、骨小梁变窄或断裂、骨髓腔内血细胞减少、可见大量坏死区等组织病理学改变;还可见股骨头塌陷、骨质减少、骨小梁稀疏等影像学改变,骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁模式因子、骨小梁数量、骨密度等骨计量学参数降低而骨小梁分离度升高,血清BGP和CT含量也显著降低;与模型组比较,补肾方中、高剂量组能明显改善大鼠股骨头组织病理学改变程度,补肾方高、中、低剂量组均显著抑制骨坏死程度,中、高剂量组还显著升高血清BGP和CT的含量(P0.05,P0.01);健骨生丸组的作用与补肾方中剂量组的作用相当。结论:补肾方组能明显改善SONFH大鼠股骨头组织病理学和影像学改变,增加血清中BGP及CT的含量,这一促进骨修复的作用可能是其防治激素引起的股骨头骨坏死的机制之一。     

脉络宁复合液通过闭孔神经阻滞治疗大鼠早期激素性股骨头坏死

目的：探讨脉络宁复合液闭孔神经阻滞对大鼠早期激素性股骨头坏死（SONFH）的影响及作用机制。方法：将24只大鼠通过尾静脉注射内毒素10 μg·kg^-1,24 h后腹腔注射醋酸泼尼松龙20 mg·kg^-1·d^-1,每24 h注射1次,连续注射3 d。造模完成后,随机分为模型组12只,脉络宁复合液组12只,另有6只作为正常组。脉络宁复合液组从第4天开始在闭孔神经注射脉络宁复合液2 mg·kg^-1,每周注射3次,共8周。大鼠于造模后第9周的第1天采集动脉血,测定血脂的含量;取股骨头制备石蜡切片,观察股骨头组织病理的改变和定量分析空骨陷窝率、骨陷窝面积、骨小梁面积的变化;采用免疫组化法定量分析骨形成蛋白（BMPs）,转化生长因子-β₁（TGF-β₁）,血管内皮细胞生长因子（VEGF）,Ⅷ因子相关抗原（Ⅷ-R Ag）的变化。结果：模型组骨小梁稀疏,瘦长,结构紊乱,有断裂现象,可见部分骨细胞坏死,空骨陷窝增多;脉络宁复合液组骨小梁数量增加,结构基本清晰,多数为正常骨细胞,有少量坏死骨细胞,空骨陷窝明显减少。与模型组比较,脉络宁复合液组的空骨陷窝率、骨陷窝面积较模型组明显降低（P<0.05）;脉络宁复合液组的VEGF,BMPs,TGF-β₁的阳性面积比和Ⅷ-R Ag的微血管密度表达明显高于模型组（P<0.05）;脉络宁复合液组血脂含量明显降低（P<0.05）。结论：脉络宁复合液通过调控VEGF,BMPs,TGF-β₁,Ⅷ-R Ag的表达和血脂含量的下调,从而改善股骨头的微循环状态,促进坏死股骨头内血管和新骨的生成,能有效控制早期SONFH的发展。为临床治疗早期SONFH提供了理论依据。     

止血镇痛胶囊对外源性雌激素干预下未成年雌性大鼠卵巢和子宫的影响

目的 探讨止血镇痛胶囊对外源性雌激素干预下未成年雌性大鼠卵巢和子宫的影响。方法 将84只雌性大鼠随机分成空白组和模型组，空白组给予0.5% CMC-Na，模型组给予戊酸雌二醇，灌胃3周后，模型组大鼠随机分成模型对照组、卡巴克络对照组、独一味软胶囊对照组、止血镇痛胶囊低、中、高剂量组。各给药组均灌胃相应药物，空白对照组和模型对照组灌胃生理盐水。7 d后检测大鼠体重、子宫和卵巢脏器指数、血清指标、子宫和卵巢组织病理性以及子宫内膜组织中VEGF表达。结果 与模型对照组比较，止血镇痛胶囊中剂量组大鼠的体重十分明显地增加（P < 0.01）；3组动物的子宫系数均十分明显地减小（P < 0.01）；中、高剂量组大鼠血清中PROG浓度十分明显地升高（P < 0.01）；中、高剂量组大鼠子宫肌层平滑肌细胞透明变性、排列紊乱均减轻（P < 0.05或P < 0.01）；高剂量组大鼠卵巢组织的间质增生明显减轻（P < 0.05）；三组大鼠子宫组织VEGF蛋白表达量均升高（P < 0.05或P < 0.01）。结论 止血镇痛胶囊减轻大鼠子宫肌层平滑肌细胞透明变性、排列紊乱和卵巢组织的间质增生的作用,可能与血清中PROG浓度和子宫组织VEGF蛋白表达量有关，为探讨止血镇痛胶囊的化瘀调经作用提供了依据。     

补肾活血方对血管性痴呆大鼠海马神经细胞自噬的影响＊

目的 探究补肾活血方对血管性痴呆（Vascular Dementia， VD）大鼠模型自噬的影响。方法 52周龄SD雄性大鼠50只，随机分为假手术组（Sham组）、模型组（VD组）、模型+补肾活血方组（BSHX组）、模型+雷帕霉素组（Rap组）和模型+3-甲基腺嘌呤组（3-MA组），每组10只大鼠。除Sham组外其余各组采用两血管阻断法（2-VO）建立VD模型。BSHX组中药灌胃治疗28天；自噬干预组于造模前30 min侧脑室给药。运用Morris水迷宫测试各组大鼠的学习记忆能力；通过尼氏染色和透射电子显微镜（Transmission electron microscope，TEM）观察大鼠海马区病理形态及自噬变化；采用蛋白免疫印迹（Western blot）法和反转录实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测大鼠海马Beclin-1、P62以及微管相关蛋白1轻链3（LC3）蛋白及mRNA表达情况。结果 与VD组比较，BSHX组大鼠学习记忆能力显著提升（P<0.05），镜下观察BSHX组和3-MA组的细胞形态及数量均有改善，自噬小体鲜见，Beclin-1以及LC3蛋白和mRNA表达水平显著降低（P<0.05），P62蛋白和mRNA表达水平明显升高（P<0.05）结论 补肾活血方可以降低VD大鼠海马区Beclin-1和LC3蛋白及mRNA的表达，提高P62的表达，通过抑制自噬的发生，减轻对神经细胞的损伤，改善学习记忆能力。