皮质醇对马桑内酯致痫大鼠大脑皮层、海马γ-氨基丁酸免疫组化分布的影响

为了解皮质醇对马桑内酯致痫大鼠大脑皮层、海马γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）免疫组化分布的影响，应用免疫组化方法研究３组大鼠大脑皮层、海马γ－氨基丁酸免疫反应（ＧＡＢＡ－ＩＲ）阳性细胞的分布，以探讨马桑内酯致痫及人工合成皮质醇－地塞米松（Ｄｅｘ）的抗痫是否与ＧＡＢＡ系统相关。结果显示：马桑内酯致痫后大鼠大脑皮层、海马齿状回ＧＡＢＡ－ＩＲ阳性细胞较正常组明显减少，应用Ｄｅｘ后再致痫，大鼠大脑皮层、海马ＧＡＢＡ－ＩＲ细胞数居正常及致痫组之间，３组ＧＡＢＡ－ＩＲ细胞数经Ｆ检验有非常显著性差异（大脑皮层Ｆ值＝２０．９，Ｐ＜０．００１，海马Ｆ值＝４７．７，Ｐ＜０．０１），表明马桑内酯致痫可能有ＧＡＢＡ系统的参与，ＧＡＢＡ－ＩＲ阳性细胞的减少使大脑皮层及海马神经元脱抑制，临床表现抽搐。Ｄｅｘ可能通过抑制ＧＡＢＡ的再摄取、促使ＧＡＢＡ神经元蛋白合成，参与兴奋的抑制。     

青霉素对体外培养鼠脑γ－氨基丁酸能神经元及胶质细胞的影响

以免疫细胞化学方法观察了分离培养４天、１０天鼠大脑皮层、海马ＧＡＢＡ能神经元以及ＧＦＡＰ免疫反应阳性星形胶质细胞对大剂量致痫剂青霉素（Ｐｅｎｉｃｉｌｉｎ，ＰＥＮ）的反应。结果大剂量ＰＥＮ（３００μ／ｍｌ培养液）可引起培养海马及皮层γ－氨基丁酸（γ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃａｃｉｄ，ＧＡＢＡ）能神经元数目明显减少，星形胶质细胞显著增生，且尤以海马胶质细胞增生明显。提示：（１）脑内尤其海马区星形胶质细胞增生与癫痫发生、发展有一定的关系；（２）传统致痫剂ＰＥＮ可能是通过抑制ＧＡＢＡ能神经元功能、刺激星形胶质细胞增生，从而导致癫痫发作     

青霉素对体外培养鼠脑γ—氨基丁酸能神经元及胶质细胞的影响

经免疫细胞化学方法观察了分离培养４天，、１０天鼠大脑皮层、海马ＧＡＢＡ能神经元以及ＧＦＡＰ免疫反应阳性星形胶质细胞对大剂量致痫剂青霉素的反应。结果大剂量ＰＥＮ可引起培养海马及皮层γ－氨基丁酸能神经元数目明显减少，星形胶质细胞显著增生，且尤以海马胶质细胞增生明显。提示：（１）脑内尤其海马区星形胶南细胞增生与癫痫发生，发展有一定的关系。（２）传统致痫剂ＰＥＮ可能是通过抑制ＧＡＢＡ能神经元功能、刺激星形     

地塞米松对癫痫大鼠脑组织内IgG免疫反应阳性细胞分布的影响

目的：研究地塞米松对大鼠脑免疫反应的影响，探讨其对某些类型癫痫的治疗机理。方法：美解眠致痫及致痫前后的分别给予地塞米松的大鼠用免疫细胞化学法观察ＩｇＧ免疫反应阳性细胞在大鼠脑组织内分布。结果；致痫前给予地塞米松大鼠脑皮层和海马ＩｇＧ－ＩＲ细胞数比单纯致痫组减少；致痫后给予地塞米松组大鼠，只有海马ＩｇＧ－ＩＲ细胞数比单纯致痫组增多。     

马桑内酯致痫大鼠大脑皮层,海马NMDA受体亚单位1（NMDAR1） …

目的 探讨癫痫发病的发子机制。方法 采用原位杂交技术，研究了马桑内酯致痫大鼠大脑皮层、海马Ｎ－甲基－Ｄ－天安门冬氨酸受体亚单位１（ＮＭＤＡＲ１）ｍＲＮＡ表达的变化。结果 马桑内酶致痫大鼠顶叶大脑皮层及海马齿回ＮＭＤＡＲ１ｍＲＮＡＡ水平显著高于生理盐水对照组（Ｐ〈０．０１，Ｐ〈０．０５）。结论 马桑内酯上调脑组织内ＮＭＤＡＲ１ｍＲＮＡ水平，此可能是其致痫及惊痫及惊厥易感性增加的分子机制之一。     

癫痫状态大鼠海马GAD67mRNA,GABA—TmRNA表达水平的动态观察

为了研究癫痫状态下大鼠海马区ＧＡＤ６７ｍＲＮＡ、ＧＡＢＡ－ＴｍＲＮＡ的表达水平，采用马桑内酯（ｃｏｒｉａｒｉａｌａｃｔｏｎｅ，ＣＬ）侧脑室注射所致大鼠癫痫状态模型，动态观察ＣＬ致痫前后大鼠海马ＧＡＤ６７ｍＲＮＡ、ＧＡＢＡ－ＴｍＲＮＡ表达水平的变化，同时观察了动物行为学改变及脑电图变化。实验结果显示，侧脑室注射ＣＬ后约１５分钟，大鼠海马及皮质ＥＥＧ出现阵发性棘慢波及高波幅慢波；ＣＬ注射后１５～３０分钟，实验鼠均出现明显的连续发作性四肢抽动、尖叫等症状，且持续６～８小时。ＣＬ侧脑室注射后３０分钟、１小时、２小时、４小时或８小时各时限点组大鼠海马ＧＡＤ６７ｍＲＮＡ表达水平均低于正常对照组。ＣＬ注射后３０分钟组大鼠海马ＧＡＢＡ－ＴｍＲＮＡ表达水平高于正常对照组，但３０分钟后各时限组ＧＡＢＡ－ＴｍＲＮＡ表达水平与正常对照组比较增加不明显。提示ＣＬ所致癫痫持续状态的后期，大鼠海马ＧＡＤ６７ｍＲＮＡ、ＧＡＢＡ－ＴｍＲＮＡ表达信号的减弱，可能与致痫因素及癫痫持续后期合并的缺血、缺氧性脑损害致使海马区ＧＡＤ、ＧＨＢＡ－Ｔ免疫反应阳性细胞死亡有关。     

马桑内酯致痫大鼠大脑皮层,海马谷氨酸,门冬氨酸,甘氨酸及 …

为了探讨氨基酸类神经递质在癫痫发病中的作用,我们采用高效液相色谱仪（ＨＰＬＣ）结合紫外分光光度仪分析检测了马桑内酯（ＣＬ）致痫大鼠大脑皮层、海马Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｙ、ＧＡＢＡ的含量变化。结果显示：ＣＬ致痫组与正常对照组相比,Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｙ含量增加（Ｐ〈０．０１,Ｐ〈０．０５）;ＧＡＢＡ含量减少,但差异无显著性（Ｐ〉０．０５）。这些结果提示兴奋性和抑制性氨基酸在癫痫发病中具有重要作用,可能     

孕激素对癫痫大鼠大脑皮层,海马FOS蛋白表达的影响

本实验采用流式细胞免疫荧光技术对马桑内酯（ＣＬ）致痫及给予孕激素后再致痫大鼠大脑皮层、海马细胞ＦＯＳ表达进行定量检测。结果显示：ＣＬ致痫组大鼠皮层、海马ＦＯＳ表达的荧光指数（ＦＩ）和阳性细胞数较正常对照组明显增高（Ｐ＜０．０１）；给予孕酮（Ｐ）后再致痫组皮层、海马ＦＯＳ表达较单纯ＣＬ致痫组减少（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）。     

大鼠致痫后血清和脑组织皮质醇水平的测定及其意义

应用放免技术测定了马桑内酯致痫和对照组大鼠大脑皮层和海马脑组织皮质醇含量及血清皮质醇水平结果显示，血清对照组为２．７７±２．０７ｎｇ／ｍｌ，致痫组为０．９８±０．７５ｎｇ／ｍｌ，两组比较无显著差异（Ｐ＞０．０５）；海马正常对照组为２５．７７±１２．９８ｎｇ／ｇ湿重，致痫组为０．９８±０．４２ｎｇ／ｇ湿重组织，海马致痫组显著降低（Ｐ＜０．０１）；大脑皮层对照组为８．８３±１．９６ｎｇ／ｇ湿重，致痫组为０．３３±０．１１ｎｇ／ｇ湿重组织，大脑皮层致痫组降低极为显著（（Ｐ＜０．００１）。表明致痫后大鼠大脑皮层、海马脑组织皮质醇含量均明显降低，提示皮质醇在癫痫的发病中起重要作用。     

新型γ-氨基丁酸受体-GABAc受体得到确认

新型γ－氨基丁酸受体－ＧＡＢＡｃ受体得到确认γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）是中枢神经系统主要的抑制性神经递质。以前，ＧＡＢＡ受体按药理学特性分为ＧＡＢＡａ和ＧＡＢＡｂ两类。Ｄｏｗｌｉｎｇ实验室则选用白鲈的视杆双极细胞（Ｈ４），Ｂｏｒｍａｎ实验室则选用大鼠的...     

雌激素对癫痫大鼠大脑皮层,海马FOS蛋白表达的影响

目的了解雌激素对马桑内酯(CL)致痫大鼠中枢神经系统FOS蛋白(FOS)表达的影响。方法应用流式细胞免疫荧光技术对CL致痫及给予雌激素后再致痫大鼠大脑皮层、海马细胞FOS表达进行定量检测。结果CL致痫组大鼠大脑皮层、海马FOS表达的荧光指数(FI)和阳性细胞数较正常对照组明显增高(P＜0.01);给予雌二醇(E2)后再致痫组皮层、海马FOS表达较单纯CL致痫组增加(P＜0.05,P＜0.01)。结论由于FOS可作为神经元兴奋的标志,雌激素可以提高皮层、海马神经细胞的兴奋性,提示雌激素有致痫性。     

神经元GAD和GABA—T的活性与癫痫发病的关系

目的：研究探索神经元内谷氨酸脱羧酶（GAD）和γ－氨基丁酸转氨酶（GABA－T）的活性与癫痫发病的关系。方法：用致痫剂马桑内酯（CL）和抗痫剂苯妥因钠（PHT）处理大鼠培养海马神经元,用液体闪烁计数仪,紫外分光光度计检测培养神经元内GAD和GABA－T的活性。结果：与对照组比较,CL致痫组培养神经元内GAD活性和GABA－T的活性显著增高,运用抗痫剂PHT处理致痫神经元后,与CL致痫组比较,神经元内GABA－T活性显著降低,与对照组比较差异不显著。结论：在癫痫发病中,痫性神经元GAD和GABA－T活性增高。     

马桑内酯致癫痫大鼠大脑皮层及海马氨基酸含量的测定

脑内主要的兴奋性氨基酸(ＥＡＡｓ)有谷氨酸(Ｇｌｕ)和天冬氨酸(Ａｓｐ),抑制性氨基酸(ＩＡＡｓ)有γ氨基丁酸(ＧＡＢＡ)和甘氨酸(Ｇｌｙ)。我们采用高效液相色谱仪结合紫外分光光度仪检测了马桑内酯(ＣＬ)致癫痫大鼠大脑皮层、海马Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｙ及ＧＡＢＡ的含量变化,探讨癫痫发作的病理生理机制。材料和方法:　雌性ＳＤ大鼠12只,体重160～180ｇ。行双侧卵巢摘除术。术后第8天将动物随机分成正常对照组(Ｎ)和ＣＬ致癫痫组(ＣＬ),每组6只。立体定位仪下行右侧侧脑室注药。Ｎ组注入生理盐水2μｌ,ＣＬ组按50μｌ/ｋｇ体重注入ＣＬ。…     

迷走神经刺激对戊四氮致痫大鼠脑内GABA和Glu免疫反应阳性细胞的影响

谷氨酸(Ｇｌｕ)和γ氨基丁酸(ＧＡＢＡ)是脑内一对重要的兴奋性/抑制性神经递质,在维持脑正常功能中起重要作用,两者的失衡将导致脑的兴奋性改变,是癫痫产生的基础。迷走神经刺激(ｖａｇｕｓｎｅｒｖｅｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ,ＶＮＳ)是一种新型的抗癫痫方法,其有效性和安全性已为实验和临床所证实[1,2],但其抗癫痫的作用机理仍不清楚。本实验以大鼠戊四氮(ｐｅｎｔｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｚｏｌ,ＰＴＺ)致痫模型为研究对象,应用免疫组化技术观察ＶＮＳ对癫痫大鼠大脑皮层及海马ＧＡＢＡ和Ｇｌｕ免疫反应阳性神经元的影响,以探讨ＶＮＳ抗癫痫…     

贝美格致痫大鼠皮层、海马γ—氨基丁酸和谷氨酸免疫反应细胞的改变

目的 γ－氨基丁酸（GABA）和谷氨酸（Glu）是脑内重要的抑制性和兴奋性神经递质，二者与癫痫发作密切相关，为了阐明癫痫发病的病理生理机制。方法 我们采用免疫细胞化学及PAP法，观察了贝美格（Bemegride,Be)腹腔致痫大鼠顶叶大脑皮层、海马CA1、CA3、齿状回Glu和GABA免疫反应细胞的改变。结果 图像分析结果显示：Be致痫组大脑皮层、海马Glu免疫反应平均阳性细胞数及光密度较正常对照组明显增加（P＜0．01）；GABA细胞数及光密度减少（P＜0．01）。结论 提示贝美格致痫作用与调节脑内GABA和Glu系统的兴奋性有关。     

戊四氮致痫对大鼠海马星形胶质细胞的影响

目的　探讨戊四氮（ＰＴＺ）致痫对大鼠海马星形胶质细胞的影响。方法　应用免疫组织化学方法观察ＰＴＺ致痫后大鼠海马内胶原纤维酸性蛋白（ＧＦＡＰ）变化的特点,同时观察了不同强度的痫性发作与ＧＦＡＰ改变的关系。结果　ＧＦＡＰ改变于ＰＴＺ致痫后１２ｈ 开始,２４ｈ 达到高峰,７２ｈ 已开始回落,并且痫性发作的强度与ＧＦＡＰ改变有一定的联系。结论　癫痫与星形细胞之间确有一定联系。     

γ—氨基丁酸,谷氨酸能神经纤维在大鼠垂体前叶的分布

本文报告大鼠垂体前叶γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ），谷氨酸（Ｇｌｕ）能神经纤维的直接支配。ＧＡＢＡ和Ｇｌｕ免疫反应神经纤维呈斑片状分布在大鼠垂体前叶远侧部，虽然部分沿血管走行，但大部分神经纤维迂曲于腺细胞周，并与腺细胞接触。神经纤维可见膨体型、细和中等粗细三种类型，其上有大量的膨体。在垂体前叶也发现有ＧＡＢＡ、Ｇｌｕ免疫反应细胞分布。     

雌孕激素对马桑内酯致癫痫大鼠大脑皮层和海马氨基酸含量的影响

我们已经在动物身上证明了雌激素的致癫病性和孕激素的抗癫癌作用，然而其作用机制尚不清楚。为此，我们采用高效液相色谱仪（HPLC）结合紫外分光光度仅检测了马桑内酯（CL）致癫痫大鼠大脑皮层、海马谷氨酸（Glu）、门冬氨酸（Asp）、甘氨酸（Gly）及γ-氨基丁酸（GABA）的含量变化及雌二醇（E2）、孕酮对它们的影响，旨在探讨雌、孕激素的作用机制。材料和方法：雌性SD大鼠24只，体重ito－180g，行双侧卵巢摘除术。术后随机分为正常对照组（l组）、几致癫病组（2组）、应用马后致癫病组（3组）及应用孕酮后致癫病组（4组）。l、2组…     

马桑内酯致痫大鼠大脑皮质,海马NMDA受体亚单位1mRNA表达的 …

ＮＭＤＡ受体与惊厥和癫痫易感性的形成密切相关。为了探讨癫痫发病的分子机制，采用原位杂交技术，研究了马桑内酯致痫大鼠大脑皮质、海马ＮＭＤＡ受体亚单位１（ＮＭＤＡＲ１）ｍＲＮＡ表达的动态变化。结果显示，马桑内酯致痫大鼠顶叶大脑皮质及海马齿状回ＮＭＤＡＲ１ ｍＲＮＡ水平显著高于生理盐水对照组（Ｐ〈０．０１，Ｐ〈０．０５）。提示：马桑内酯上调脑组织内ＮＭＤＡＲ１亚单位ｍＲＮＡ水平，可能是其致痫及使惊厥易感     

致痫大鼠海马神经元氨基酸类物质含量变化的研究

目的 研究癫痫发病中海马神经元氨基酸类物质的合成，分泌情况，探索癫痫发病的可能机制。方法 用马桑内酯致痫培养大鼠海马神经元细胞，用高效液相色谱法测定培养神经元细胞内外谷氨酸（Glu) ,天门冬氨酸（Asp)，γ-氨基丁酸（GABA），甘氨酸（Gly）的含量。结果 致痫海马神经元细胞Glu合成相对增加，分泌显著性增加（P＜0．01）；Asp合成没有明显增加（P＞0．05），或相对养活，分泌显著性增加（P＜0．01）；GABA分泌显著性减少（P＜0．01），合成相对地减少；Gly合成分泌有显著性减少（P＜0．01）。结论 癫痫发病中，痫性神经元细胞合成和／或分泌异常是癫痫发病中氨基酸类神经递质平衡紊乱的基础。