激素性股骨头坏死发病机理的实验研究

目的:探讨激素性股骨头缺血坏死的发病机理。方法:成年日本大耳白兔 32 只,随机分为模型组与对照组。模型组每周2次肌肉注射醋酸泼尼松龙10 mg·kg-1, 对照组每周 2 次肌肉注射生理盐水每只 2 ml,共 6周。观察实验前及实验后第2,4,6周两组动物血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、血液流变学参数和股骨头光镜及透射电镜组织病理学变化。结果:模型组实验 2 周、4 周 TG、TC、全血粘度、血浆粘度显著高于对照组(P<0.01)。模型组股骨头骨质疏松,光镜下空骨陷窝数增多,脂肪细胞数增多,透射电镜股骨头部分骨细胞体积缩小,核固缩,较多骨细胞已坏死溶解成碎片。结论:①大剂量激素可导致兔股骨头缺血性坏死;②高脂血症和血液流变学因素在激素性股骨头坏死的发病机理中可能起重要作用。     

高压氧对兔激素性股骨头坏死的血液流变学影响

目的:通过检测兔激素性股骨头坏死造模及高压氧治疗过程中的血液流变学变化,探讨激素性股骨头坏死的发病机理。方法:健康日本成年大耳白兔48只,随机分模型组(36只)及对照组(12只)。模型组每周2次肌肉注射醋酸泼尼松龙10 mg/kg,对照组每周2次肌肉注射生理盐水2 m l,共6周。随后将模型组随机分高压氧治疗组(12只)及对照组(12只),治疗组行高压氧治疗,对照组呼吸常压新鲜空气。检测试验后2周、4周、6周、8周、10周、12周兔血液流变学参数变化、观察组织形态学变化。结果:模型组实验2、4、6周全血粘度、血浆粘度均显著高于对照组;股骨头骨质疏松,镜下空骨陷窝数和脂肪细胞数逐渐增多,骨细胞体积缩小,核固缩。高压氧治疗后全血粘度、血浆粘度均低于对照组,坏死的骨细胞有修复现象,并可见新生骨细胞。结论:大剂量激素可造成兔血流变学特性恶化,可能是兔股骨头坏死的重要原因之一;高压氧可使恶化的血液流变学趋向好转,对股骨头坏死有一定治疗作用。     

高压氧治疗激素性股骨头坏死的血液流变学改变与意义

目的:观察血液流变学在激素性股骨头坏死造模及高压氧治疗过程中的阶段性变化,探讨激素性股骨头坏死的发病机理。方法:健康日本成年大耳白兔60只,随机分模型组(42只)及对照组(18只)。模型组每周2次肌肉注射醋酸泼尼松龙10 mg/kg,对照组每周2次肌肉注射生理盐水2 ml,共6周。随后将模型组随机分高压氧治疗组(16只)及对照组(16只),治疗组行高压氧治疗,对照组呼吸常压新鲜空气。检测实验后2,4,6,8,10,12周兔血液流变学参数变化、组织病理学变化及影像学变化。结果:模型组实验2,4,6周全血黏度,血浆黏度均显著高于对照组;模型组股骨头骨质疏松,光镜下空骨陷窝数增多,脂肪细胞数增多,部分骨小梁断裂,透射电镜股骨头骨细胞体积缩小,核固缩,较多骨细胞已坏死溶解成碎片。高压氧治疗组全血粘度,血浆黏度均低于对照组,光镜下可发现坏死的骨细胞有修复现象,透射电镜可见新生骨细胞。结论:大剂量激素可造成兔血流变学特性恶化,可能是兔股骨头坏死的重要原因,高压氧可使恶化的血液流变学趋向好转,对股骨头坏死有治疗作用。     

兔激素性股骨头坏死造模中的致死因素与干预分析

目的:探讨单纯糖皮质激素诱导建立兔股骨头坏死动物模型中的致死因素与干预思路,以优化造模方式。方法:新西兰大白兔40只随机分为四组,A组为单纯激素注射组,每周2次肌肉注射醋酸泼尼松龙,每次8mg/kg,连续6周;B组为激素+青霉素注射组,在A组基础上每周2次肌肉注射青霉素钠4万U/只;C组为激素+青霉素+雷尼替丁注射组,在B组基础上每周2次肌肉注射雷尼替丁25mg/只;D组为空白对照组,肌肉注射生理盐水5mL。观察各组一般形态学、死亡率、组织病理学。结果:A、B、C组均造模成功,其中C组生存状况最好,体重减轻最少。三组动物死亡率分别是50%、30%、10%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:单一激素醋酸泼尼松龙可以成功诱导兔激素性股骨头坏死动物模型,通过预防性应用抗生素与制酸剂,可以显著减少模型动物死亡率。     

桃红四物汤对激素性股骨头缺血坏死模鼠TGF-β_1 mRNA转录的影响

目的 观察桃红四物汤对激素性股骨头缺血性坏死大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA转录的影响,探讨其防治激素性股骨头坏死的作用机制.方法 模型组每周2次腹腔注射醋酸泼尼松龙24.5 mg/kg,经6周诱导出早期激素性股骨头缺血坏死的模型,随机分为治疗组16只和对照组16只,分别灌服桃红四物汤和生理盐水,在灌胃后第6、8周,检测股骨头局部TGF-β1mRNA的转录水平.结果 治疗组股骨头局部TGF-β1 mRNA的转录水平呈逐渐增强的趋势,而对照组股骨头局部TGF-β1 mRNA的转录水平则呈逐渐减弱的趋势,2组差异显著.结论 桃红四物汤可促进激素性股骨头缺血坏死模鼠股骨头局部TGF-β1 mRNA的转录水平,促进坏死股骨头的修复.     

大鼠激素性股骨头坏死模型建立及病理学评价

目的:建立大鼠激素性股骨头坏死模型,并对使用激素后不同时段大鼠股骨头病理学改变进行观察和评价.方法:4月龄健康Wistar大白鼠36只,雌雄各半,随机分成两组.实验组24只肌肉注射地塞米松磷酸钠(10 mg/kg),每周1次;对照组12只肌肉注射等量的生理盐水,共注射14周.两组均于肌肉注射药物后2、6、8、10、12、14周处死动物,取大白鼠双侧股骨头,HE和Masson染色后,观察股骨头单位面积内骨小梁面积百分率、骨小梁宽度、最大脂肪细胞直径、每高倍镜视野下空泡陷窝数量和单位面积骨小梁内胶原含量.结果:实验组单位面积内骨小梁面积百分率、每高倍镜视野下空泡陷窝数量与对照组比较从2周开始就有显著统计学意义(P＜0.01);实验组单位面积骨小梁内胶原含量、骨小梁宽度、最大脂肪细胞直径与对照组比较从6周开始有显著统计学意义(P＜0.01).结论:建立了大鼠激素性股骨头坏死动物模型,其病理学特点表现为全股骨头坏死和修复反应差.     

间断应用激素法制备兔股骨头缺血性坏死模型

目的 通过比较持续应用激素组与间断应用激素组实验动物在死亡率、x线片、ECT、MRI和光镜下表现,制备激素性股骨头缺血性坏死模型,探讨降低实验动物死亡率的方法.方法 40只新西兰大耳白兔分2组.对照组20只,臀肌注射醋酸氧化泼尼松龙,按8 mg/kg,每周两次,共8周16次;实验组20只,臀肌注射醋酸氢化泼尼松龙,按8 mg/kg,注射3周,停药3周,再继续用药5周.分别于注射药物后2、4、6、8周处死,取材前分别做X线片、ECT、MRI检查,取材后光镜观察骨髓、骨细胞、骨小梁的变化.结果 死亡率比较,实验组明显低于对照组(PO.05).讨论 ①大剂量激素对实验动物的打击是相当严重的,对于机体免疫系统和循环系统的损害是其死亡的主要原因.②持续应用激素组与间断应用激素组均制造出成功的股骨头坏死模型,间隔停药期骨组织坏死程度不仅没减轻而是进一步加重.     

低分子肝素钙预防激素性股骨头坏死的实验研究

目的研究低分子肝素钙对激素性股骨头坏死预防作用及对血栓形成的影响。方法健康Wistar大鼠15只,随机分为A组5只,臀肌注射地塞米松磷酸钠15mg/kg每周1次;B组5只,臀肌注射地塞米松磷酸钠15mg/kg每周1次,皮下注射低分子肝素钙2000u/kg,1次/d;C组5只为空白对照组。6周后取双侧股骨头,观察外观后脱钙做切片,行HE染色计算空骨陷窝率、观察骨小梁面积,用磷钨酸苏木素染色观察血栓。结果三组股骨头外观无明显差别;三组空骨陷窝率差别有统计学意义（P〈0.05）;磷钨酸苏木素染色观察可见A组有血栓形成;三组骨小梁面积比差别有统计学意义（P〈0.05）。结论 B组通过预防血栓的形成使激素性股骨头坏死的发生率明显低于A组,皮下注射低分子肝素钙是预防激素性股骨头坏死的途径之一,但不能预防骨质疏松的发生。     

活血化瘀法对激素性股骨头缺血坏死血液流变学的影响

为探讨活血化瘀法对激素性股骨头缺血性坏死模兔的血液流变学的影响,采用每周2次臀肌注射7.5mg/kg醋酸氢化泼尼松的方法,建立激素性股骨头缺血性坏死模型,喂服活血化瘀中药,进行血液流变学指标的测定。结果造模动物全血低切粘度、全血高切粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数等均明显上升,而治疗组上述改变明显减轻。说明血流变异常是激素性股骨头缺血坏死的重要原因之一,活血化瘀中药可对抗激素的作用。     

建立幼犬股骨头坏死模型的实验研究

目的: 为研究Perthes病治疗建立理想的动物模型。方法: 采用健康未成年杂种犬20只,随机分为两组,一组每周肌肉注射甲基强的松龙(16 mg/kg)2次;另一组用液氮冷冻股骨头,术后定期行X线、MRI、ECT检查,并取股骨头行组织切片了解股骨头坏死情况。结果: 两实验组均出现股骨头缺血性坏死,激素组第4周复制成功率为40.0%,第8周成功率为75.0%,总成功率为55.6%;而液氮冷冻组第4周复制成功率为90.0%,第8周成功率为100.0%,总成功率95.0%。结论: 单独使用激素或液氮冷冻股骨头均可建立幼犬股骨头坏死模型,但单用激素并非一定引起股骨头坏死。液氮冷冻建立的幼犬股骨头坏死可作为研究Perthes病治疗的理想动物模型。     

辛伐他汀联合阿仑磷酸钠预防兔激素性股骨头坏死

目的:探讨联合使用辛伐他汀和阿仑磷酸钠对兔激素性股骨头缺血坏死的预防作用。方法:健康成年日本大白兔40只随机分为四组。A组:肌注地塞米松(2.5mg/kg.d);B组:肌注地塞米松(2.5mg/kg.d)和口服辛伐他汀(20mg/d);C组:肌注地塞米松(2.5mg/kg.d)、口服辛伐他汀(20mg/d)及阿仑磷酸钠(10mg/d);D组:空白对照组肌注生理盐水。分别测定用药前(0周)和用药后4、6、8周的血清胆固醇、甘油三酯含量。于用药后第4、6、8周分批处死后行X线摄片及组织学观察。结果:A组中血清胆固醇、甘油三酯含量显著高于其它3组(均P<0.01);A组动物1只死亡,余9只中6只11髋发生股骨头坏死,B组中有1只2髋在用药8周后发生了股骨头坏死,C组与D组均无股骨头坏死发生。结论:辛伐他汀和阿仑磷酸钠联合使用,能预防激素性股骨头坏死的发生、发展。     

激素性股骨头缺血性坏死模型的建立与评价

目的建立和评价激素性股骨头缺血性坏死的动物模型。方法随机分为实验组、对照组，每组10只SD大鼠，强迫间断立位，实验组每周2次腹腔注射醋酸泼尼松龙24．5mg／kg，对照组每周2次腹腔注射同等剂量的生理盐水，6周后成功诱导出股骨头缺血性坏死的早期模型．造模后进行组织病理学及电镜超微形态观察。结果①光镜观察：模型组空缺骨陷窝明显增多，骨小梁细疏，髓腔脂肪细胞增大增多，与对照组比较，有显著差异（P〈0．01）。②电镜观察：实验组骨细胞数量减少，退变固缩或出现脂滴，成骨细胞减少，髓内脂肪细胞增大增多，对照组骨细胞富含粗面内质网，多聚核糖体多，线粒体发达，嵴结构清晰，核异染色质丰富，核仁可见。结论应用大剂量激素结合强迫立位法．能够诱导出典型的股骨头缺血性坏死模型。     

激素合并内毒素诱导大鼠股骨头坏死扫描电镜观察

目的以扫描电镜观察大鼠激素合并内毒素诱导股骨头缺血性坏死模型病理变化，为实验和临床研究提供标准化动物模型。方法雄性SD大鼠8只，尾静脉注射大肠埃希氏杆菌脂多糖（LPS，Lipopolysaccharide）10μg/kg（wt）一次，肌肉注射甲基强的松龙20mg／kg（wt）三次。另2只为空白对照。6周后处死，取股骨头，扫描电镜观察。结果造模大鼠股骨头表面失去小丘样结构，不光滑并有塌陷，呈蜂窝状改变。结论糖皮质激素合并内毒素可诱导出大鼠股骨头坏死早期病理变化。     

葛根素通过AMPK-mTOR-ULK1通路激活自噬改善大鼠激素性股骨头坏死的研究

目的 探讨葛根素通过AMPK-mTOR-ULK1信号通路对激素性股骨头坏死早期血管内皮细胞自噬的干预作用。方法 将48只雄性SD大鼠按随机数表法分成4组（每组12只）。对照组：单纯肌肉注射生理盐水,2 mL/次,共3次,间隔24 h。模型组：肌肉注射甲基强的松龙,20 mg/kg,共3次,间隔24 h。葛根素干预组：同模型组方法造模,在最后1次臀肌注射完甲基强的松龙后给予葛根素100 mg/（kg·d）腹腔注射。雷帕霉素干预组：同模型组方法造模,在最后1次臀肌注射完甲基强的松龙后同时给予雷帕霉素[1.2 mg/（kg·d）,自噬特异性激动剂]腹腔注射。造模后2周、4周后处死实验动物,取出双侧后肢的股骨头及主要供血血管。HE染色光镜下观察股骨头坏死情况;利用免疫组化法和RT-PCR方法检测Beclin1、LC3、P62、AMPK、mTOR和ULK1的mRNA与蛋白的表达;采用ELISA法检测血管内皮损伤标记物6-keto-PGF1a的表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠骨细胞坏死加重,血管内皮细胞6-keto-PGF1a的表达增加,差异有统计学意义（P <0.05）,血管内皮细胞中...     

激素法与液氮法在兔股骨头坏死造模中的应用比较研究

目的分析比较激素法与液氮法在股骨头坏死动物模型的应用。方法 30只兔随机分为3组,A组为单纯激素注射组,兔子每周2次臀肌注射醋酸泼尼松龙,每次8 mg/kg,连续6周;B组为用液氮将股骨头冷冻坏死;C组为空白对照组。对一般形态学、影像学MRI、组织病理学等进行观测。结果 A、B两组股骨头均出现缺血性坏死表现,空骨陷窝率较对照组明显增高(P<0.01),并且3周时A组空骨陷窝率明显低于B组(P<0.01),6周时A组与B组空骨陷窝率无明显差异(P>0.05)。A组兔全身药物反应明显,骨坏死修复晚且能力差,且骨陷窝空虚率随时间延长而增加(P<0.01)。B组兔造模所需时间短,骨修复反应大,随着实验观察时间延长,骨坏死程度是进行性减轻(P<0.01)。结论通过单纯激素或液氮冷冻股骨头均可建立兔非创伤性缺血性坏死动物模型,前者较适合于病因、病理方面或者综合性研究;后者更适合于标准化治疗的研究。     

丹参用于兔股骨头坏死的治疗

目的建立兔股骨头坏死动物模型并应用于股骨头坏死的治疗研究。方法用氢化可的松注射液按每次10mg/kg肌内注射,每周2次连续给药6周,第12周每组随机抽取2只解剖进行肉眼观察,数字摄片,光镜、电镜检查,并进行手术治疗。结果给氢化可的松6周后,第12周兔激素性股骨头坏死动物模型已建立。随后进行手术治疗,治疗组均比对照组股骨头损坏程度较轻,尤其第2治疗组用浸透丹参的同种异体骨植入填塞效果更好,采用Ridit分析,第2治疗组与第1治疗组、第3治疗组之间差异有显著性意义（P〈0.05）。对照组呈进行性坏死。结论长期大量使用氢化可的松注射液可引起激素性股骨头坏死,采用浸透丹参的同种异体骨植入填塞,疗效较好,对临床治疗激素性股骨头坏死可能有积极的参考意义。     

股骨头缺血性坏死介入治疗的实验研究

目的:探讨激素性股骨头缺血性坏死发病机理及介入治疗效果。方法:成年新西兰大白兔40只随机分成三组。A组为空白对照组;B组为激素组,给予臀部肌肉注射地塞米松2.5mg/kg,每周3次,连续给药20周;C组为激素+治疗组,在20周时从双侧股动脉灌注复方丹参各5ml、蝶脉灵各1.0ml/kg。24周全部处死动物,观察X线平片、血管造影及股骨头病理学变化。结果A组X线片全程无变化,B组、C组20周时见股骨头内密度局限性减低,部分可见大小不等的囊状透光区。24周时B组股骨头密度减低持续存在,囊状透光区有扩大倾向。而C组股骨头骨坏死有部分修复。血管造影显示三组动物髋关节区血管分布无差异。光镜下B组见典型的骨坏死灶及软骨下区较多空缺骨陷凹,髓腔内基本为脂肪细胞所取代,与A组差异明显(P<0.01)。C组与B组相比较却减轻(P<0.05),但仍未恢复至A组水平(P<0.05)。结论:髓腔内脂肪细胞增生肥大造成填塞而引起微循环障碍是导致股骨头缺血性坏死的重要病理因素。血管造影检查对ANFH诊断无特异性,从股骨头供血动脉快速注入高浓度扩血管和改善微循环药物,能疏通股骨头的营养血管,防止骨坏死进一步恶化,有利于坏死的骨质修复。     

苗医熏蒸疗法对兔早期激素性股骨头坏死血流变化的实验研究

目的:探求苗医熏蒸疗法对兔早期激素性股骨头坏死血脂、血流变的影响.方法:将健康成年新西兰兔48只随机分为6组:A组:正常饲养；B组:给予隔天注射一次地塞米松2.5m∥kg；C组:给予隔天注射一次地塞米松2.5mg/kg,同时每天给予灌胃辛伐他汀1.7mg/kg;D纽:给予隔天注射一次地塞米松2.5mg/kg,同时给予苗药熏蒸每天一次,30min；E组:给予隔天注射一次地塞米松2.5mg/kg,并给予灌胃苗药浓缩液,每次15ml,每天早晚各一次；F组:给予隔天注射一次地塞米松2.5mg/kg,并给予灌胃苗药浓缩液,每次15ml,每天早晚各一次,同时给予苗药浓缩液熏蒸每天一次,30min.8周后结束实验取血测定血脂和血液流变学的变化.结果:苗医熏蒸疗法能够改善激素导致的兔股骨头坏死病变部位血脂和血液流变学指标.结论:苗医熏蒸疗法能有效促进兔早期激素性股骨头坏死病变部位血液供给.     

复方巴戟天合剂对大鼠激素性股骨头缺血性坏死的组织学研究

目的探讨复方巴戟天合剂对激素性股骨头缺血性坏死大鼠股骨头的组织学影响。方法 SD大白鼠72只,随机分成正常组、模型组、对照组、治疗组,每组18只。建立大鼠激素性股骨头缺血性坏死模型,对照组、治疗组每日给药1次,于实验后第4、8、12周分3批处死动物,取股骨头空骨陷窝、成骨细胞、破骨细胞及胶原面积进行统计学分析。结果空骨陷窝率模型组与正常组差异有统计学意义(P<0.01),治疗组与对照组较模型组差异有统计学意义(P<0.01);治疗组与对照组成骨细胞计数较模型组差异有统计学意义(P<0.01),破骨细胞计数较模型组差异有统计学意义(P<0.01);治疗组与对照组胶原面积百分比与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论复方巴戟天合剂对激素性股骨头缺血性坏死有明显的预防和治疗作用。     

尿激酶和阿司匹林联合应用对股骨头缺血坏死微血管内凝血的干预作用

目的制造免股骨头缺血坏死（ANFH）模型;验证PTS与ANFH的密切关系,并探讨尿激酶与阿司匹林联合预防免激素性股骨头坏死的作用。方法选用健康日本大耳白免36只,随机均分为3组。第1组为模型组：先分2次间隔2周分别按10ml／kg量静脉注射马血清,第2次注射马血清2周后,再连续肌注甲基强的松龙10mg／kg·d,共7天,之后口服强的松1．25mg／kg·d至实验完。第Ⅱ组为治疗组（马血清和激素加药物预防）：按第1纽方法用马血清和激素;另外,第-个月每周2次静脉注射尿激酶8万U／kg／d,之后灌服阿司匹林5mg／kg·d至实验结束。第Ⅲ组为对照组,每日于耳缘静脉注射生理盐水2ml。分期分批取血采用放射免疫法测定内皮素（ET-1）、免疫比浊法测定抗凝血酶-Ⅲ（A-Ⅲ）和D-二聚体（D-dimer）的变化。股骨头组织取样石蜡切片作HE染色;冰冻切片Sudan染色。结果3个月时,模型组AT-Ⅲ[（61．44±5．05）mg／L]较治疗组和对照组降低;D-dimer[（0．53±0．19）μg／ml]和ET-1[（47．84±12．09）μg／L]较治疗组和对照组升高。模型组骨坏死的发生率100％,治疗组骨坏死的发生率25％,显著低于模型组。对照组未见骨坏死。结论激素性股骨头坏死的发病与高凝状态有关,联合应用尿激酶与阿司匹林能有效预防兔激素性股骨头坏死的发生。