弹性蛋白酶损伤肺致炎的地鼠血清中一氧化氮和肿瘤坏死 …

目的 观察由弹性蛋白酶损伤肺致炎的地鼠血清中一氧化氮（ＮＯ）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）的动态变化,并初步探讨两者在炎症中的作用。方法 建立弹性蛋白酶损伤肺致炎金黄地鼠模型,用组化和免疫组化方法检测气道上皮细胞和肺内单核巨噬细胞一氧化氮合酶活性,测定血清中ＮＯ和ＴＮＦ－α的动态变化。结果 弹性蛋白酶损伤肺致炎地鼠气道上皮细胞和肺内单核巨噬细胞ＮＯＳ活性明显加强,在炎症早期血清中ＮＯ和ＴＮＦ－α含量     

细胞因子在气道上皮细胞iNOS表达中的作用研究

目的　探讨气道上皮细胞表达诱导型一氧化氮合成酶 (inducible nitric oxide synthase,i NOS)的能力及炎性细胞因子在气道上皮细胞一氧化氮 (NO)产生中的调节作用。方法　取原代培养的大鼠气道上皮细胞用 IL- 1β(10 ng/ ml)或 TNF- α(5 ng/ m l)处理 16小时 ,而后用特异性引物 RT- PCR研究 i NOS m RNA的表达 ,用特异性抗 i NOS单克隆抗体免疫细胞化学方法研究 i NOS蛋白的表达。NO的终末产物硝酸盐及亚硝酸盐水平的测定采用改良 Griess法。结果　 RT- PCR显示 ,经 IL- 1β及 TNF- α处理 16小时的大鼠气道上皮细胞表达 i NOS m R-NA。免疫组织化学提示 ,IL- 1β及 TNF- α可诱导大鼠气道上皮细胞 i NOS蛋白的表达并刺激 NO产生 ,其硝酸盐及亚硝酸盐水平较正常对照组增高 (P<0 .0 1)。结论　气道上皮细胞具有表达 i NOS的能力。细胞因子 IL- 1β及TNF- α可诱导大鼠气道上皮细胞 i NOS的表达及 NO产生     

诱导型一氧化氮合酶在哮喘大鼠肺组织的表达

目的　观察哮喘大鼠肺组织中诱导型一氧化氮合酶 (i NOS)活性的表达 ,探讨一氧化氮在哮喘大鼠气道炎症中的作用。方法　用卵白蛋白作为致敏原制备哮喘大鼠模型 ,用 SP免疫组化染色方法检测肺组织 i NOS的表达并观察 i NOS在气道组织分布的改变。结果　哮喘大鼠肺组织 i NOS的表达阳性率 (90 % )明显高于正常对照组 (2 0 % ) (P<0 .0 0 1)。哮喘大鼠气道组织 i NOS表达阳性细胞主要位于气道上皮细胞、气道平滑肌细胞、血管内皮和平滑肌细胞、浸润的中性粒细胞和巨噬细胞 ,而淋巴细胞表达不明显。用甲基强的松龙处理后哮喘大鼠肺组织i NOS表达阳性率 (30 % )明显降低。结论　以上结果提示一氧化氮在哮喘气道炎症中起重要作用 ,用甲基强的松龙治疗哮喘可以使哮喘大鼠肺组织中 i NOS表达阳性率降低 ,提示哮喘时产生过多的一氧化氮可能有加重气道炎症的作用     

一氧化氮在哮喘气道炎症中的作用

目的了解一氧化氮(NO)在哮喘气道炎症中的作用.方法分别测定卵蛋白(OVA)致敏大鼠气道炎性细胞数,血清中IL-6、TNF-α水平及肺组织还原辅酶Ⅱ硫辛酰胺脱氢酶(NADPH)、一氧化氮合酶(NOS)含量.结果哮喘大鼠气道炎性细胞增多,特别是中性粒细胞和膜白介素-2受体阳性(mIL-2R+)细胞增多[哮喘组分别是1.98×107个/L和(23.8±7.9)个/HP,对照组分别是0.61×107个/L和0个/HP],血清中IL-6、TNF-α含量升高[哮喘组分别是(207.75±35.07)ng/L和(358.75±70.74)ng/L,对照组分别是(59.88±3.60)ng/L和(55.25±32.41)ng/L],哮喘组大鼠肺组织NADPH组化法染成蓝黑色,呈强阳性反应,而对照组呈弱阳性.结论 NO可引发哮喘大鼠气道炎症反应.     

清带口服液抗炎和免疫作用的实验研究

目的:探讨清带口服液的抗炎、免疫作用及对炎症介质一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的影响.方法:用角叉菜胶、组胺、乙酸造成炎症模型,观察其抗炎作用和对炎症液中NO、NOS的影响,并探讨其对小鼠免疫器官重量、碳粒廓清功能及血清溶血素的作用.结果:该方能显著抑制不同致炎物引起的大鼠急性足肿,降低腹腔毛细血管通透性,抑...     

糖尿病小鼠一氧化氮与一氧化氮合酶活性测定结果分析

目的　观察Ⅰ型糖尿病 (DM)小鼠模型血清一氧化氮 (NO)与组织一氧化氮合酶 (NOS)的变化 ,探讨NO在胰岛细胞中损伤机制。方法　用柯萨奇B4病毒 (CB4V)感染Swiss小鼠建立DM模型 ,应用放射免疫法 ,检测其血清NO与组织NOS活性 ,并分析两者之间的关系。结果　DM模型小鼠血清NO含量随血糖升高和胰岛素水平下降而升高 ,组织NOS活性随血清NO含量升高而增强 ,且两者呈正相关 (r =0 .8175 ,P <0 .0 1)。结论　NO可能是造成胰岛 β细胞损伤的主要因素。     

被动吸烟大鼠肺组织、肺泡灌洗液、血清中一氧化氮合酶及一氧化氮的变化

目 的：观察被动吸烟对大鼠肺组织、肺泡灌洗液、血清中NO（一氧化氮）及NOS（一氧化氮合酶）的影响,探讨被动吸烟在大鼠慢性气道炎症中的作用。方法：将40只健康清洁级雄性Wistar大鼠,随机分为两组：正常对照组20只,被动吸烟组20只,后者每天被动吸烟1次,每次燃烧香烟共计21支。12周后,将两组大鼠处死,测定血清、肺组织、肺泡灌洗液的一氧化氮及一氧化氮合酶含量。结果：被动吸烟大鼠肺组织、血清及肺泡灌洗液中NOS与NO较正常对照组显著增加(P<0.05)。结论：被动吸烟可导致大鼠肺组织、血清及肺泡灌洗液中的N0S含量增加,诱发大量NO产生从而形成大量自由基,促进炎症产生与发展。     

雷公藤内酯酮对小鼠腹腔巨噬细胞分泌NO和TNF-α的影响

目的　观察雷公藤内酯酮(T7) 对活化的小鼠腹腔巨噬细胞(MΦ) 分泌一氧化氮(NO) 和肿瘤坏死因子-α(TNF- α) 的影响。方法　分离、纯化巨噬细胞, 给予不同浓度T7 进行培养, 以Griess试剂检测培养上清液中的NO含量, 以MTT法检测培养上清液中的TNF- α活性。结果　T7 在浓度0 4~3 2 mg/L、时间4~24 h范围内对MΦ分泌的NO和TNF- α具有显著抑制作用(P<0 .01), 且呈剂量和时间依赖关系。结论　T7可以抑制MΦ的活性。     

香菇多糖对糖尿病大鼠巨噬细胞脂质过氧化和一氧化氮的影响

目的：研究香菇多糖(LNT)对糖尿病大鼠巨噬细胞脂质过氧化作用和一氧化氮水平的影响。方法：SD大鼠分三组，正常对照组、糖尿病组、LNT治疗组，分别灌洗大鼠腹腔及肺泡巨噬细胞，并测定巨噬细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—PX)、一氧化氮合酶(NOS)的活性及一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)的含量。结果：糖尿病大鼠腹腔及肺泡巨噬细胞内SOD、GSH-PX、NOS活性及NO含量下降，MDA含量增高，经LNT治疗后，SOD、GSH-PX、NOS活性及NO含量升高，MDA含量下降。结论：LNT可提高糖尿病大鼠巨噬细胞抗脂质过氧化作用及NO水平。     

慢性阻塞性肺疾病和缺氧性肺动脉高压的发病机理及药物防治研究

目的研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)和缺氧性肺动脉高压的发病机理及中药814、肺舒灵的防治作用.方法建立弹性酶、吸烟、细菌感染、缺氧及脂多糖诱发COPD、肺动脉高压鼠模型及体外肺泡巨噬细胞、肺泡Ⅱ型上皮细胞培养,利用形态定量病理学、电镜、病理生理、免疫组化及分子生物学技术检测.结果1、814、肺舒灵对COPD造成的气道、肺、肺小动脉的病理性结构改建有抑制(减轻)作用,降低肺动脉高压.2、814、肺舒灵能保护肺血管内皮细胞;抑制肺泡巨噬细胞肿瘤坏死因子TNF-α的产生和一氧化氮合酶NOS的异常表达;促进肺泡巨噬细胞发生凋亡.3、通过培养细胞的免疫组化,West-ern,Northern杂交检测,提示814可拮抗TNF-α对肺表面活性物质A、B、mRAN表达的抑制,并证明表面活性物质的基因表达变化与肺气肿病变的发生发展相关.提示内源性表面活性物质系统的改善有助于肺气肿的减轻.4.COPD及肺动脉高压肺组织中基质金属蛋白酶MMP-9、MMP-12 mRNA表达增强,肺舒灵有抑制MMP表达增强,防治COPD的作用.结论814、肺舒灵对动物实验性COPD、缺氧性肺动脉高压有明显防治作用.其主要作用机理可能是保护肺血管内皮细胞,抑制肺泡巨噬细胞TNF-α的产生和iNOS的表达,减少炎症因子,从而起到防治COPD的作用.     

苗药头花蓼提取物血清药理学研究方法的建立及验证

目的：建立并验证头花蓼提取物血清药理学研究方法。方法以大鼠为含药血清的供体,MTT法确定空白血清及含药血清对小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)活性的影响,采用10 ng/mL脂多糖(LPS)建立RAW264.7细胞炎症损伤模型,Griess试剂法检测细胞上清液中一氧化氮(NO)的释放量,以确定体系中的血清添加量和大鼠取血时间。以NO、TNF-α为指标测定含药血清的抗炎活性。结果大鼠按人临床用药等效剂量的27倍给予头花蓼水提醇沉提取物,与模型组相比,体系中加入1.5%(V/V)末次给药后90 min的含药血清能够显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞释放NO (P<0.001)。同时,该方法制备的含药血清能够显著抑制细胞释放NO和TNF-α(P<0.01或P<0.001)。结论本实验条件下制备的头花蓼含药血清具有明显的抗炎作用,该血清药理学方法可用于头花蓼提取物含药血清药效及作用机制研究。     

角膜碱烧伤后房水一氧化氮及一氧化氮合酶的动态变化

目的：探讨角膜碱烧伤后房水一氧化氮（NO）与炎症反应的关系。方法：用健康家兔动态观察对照组、实验组和对侧眼组眼内炎症反应及房水一氧化氮合酶（NOS）和NO2^-／NO3^-的活性。结果：角膜碱烧伤后炎症反应与房水NOS和NO活性呈动态变化,实验组明显高于对侧眼组,且上两组高于对照组。结论：房水NO的变化与角膜碱烧伤后的眼内炎症反应密切相关。     

慢性肝病病人外周血中NO和TNF-〆含量的检测

1目的　探讨慢性肝病病人外周血中一氧化氮 (NO)和肿瘤坏死因子 α(TNF- α)含量的变化及其意义。 2方法　采用 Griess法和双抗体夹心 EL ISA法测定 11例慢性迁延性肝炎 (CPH)、12例慢性活动性肝炎(CAH)、17例肝硬化 (L C)病人外周血中 NO和 TNF- α的含量 ,并与 33例正常人进行了比较。 3结果　慢性肝病病人血清中 TNF- α与 NO明显高于对照组 (t=2 .377～ 7.0 74,P<0 .0 5 ) ,且 TNF- α与 NO呈正相关 (r=0 .811,P<0 .0 1)。 4结论　 TNF- α参与了肝脏的活动性病变过程 ,NO对病毒性肝炎肝细胞有损伤作用     

慢性充血性心力衰竭患者血浆TNF-α、NOS活性和NO的变化及其意义

目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮合酶(NOS)活性和一氧化氮(NO)在慢性充血性心力衰竭(CHF)患者血浆中的变化以及三者之间的相互关系。方法 80例CHF患者和20名健康对照组抽取静脉血检测TNF-α、NOS活性和NO；TNF-α含量测定采用放射免疫法，NOS活性、NO含量测定采用化学比色法。结果 CHF组的TNF-α、NOS活性、NO水平均明显高于对照组，且随着心衰程度的加重，各项指标的含量逐渐升高；在TNF-α、NOS活性、NO两两之间及它们与反映心功能的射血分数(EF)值之间存在着显著的直线相关关系。结论 TNF-α、NOS、NO可能参与了心衰的发生、发展，它们是反映心衰严重程度及预后的重要指标。     

再灌注兔吸入一氧化氮对肺组织一氧化氮合酶表达的影响

目的　探讨再灌注时吸入一氧化氮 (NO)对兔肺一氧化氮合酶 (NOS)同功酶表达的影响 .方法　 40只健康新西兰大白兔随机分成 4组 ,每组 10只 .假手术组 ( 组 ) ;假手术+吸入 NO组 ( 组 ) ;缺血再灌注组 ( 组 ) ;缺血再灌注 +吸入 NO组 ( 组 ) .通过阻断左肺门 6 0 min,随即阻断右肺门 ,造成左肺单侧再灌注 2 40 min. , 组在阻断右肺门前 5min吸入 5 0× 10 - 6NOppm.再灌注 2 40 min后 ,各组取左下叶组织 ,采用免疫组化方法检测再灌注肺 NOS同功酶表达变化 .结果　 1 , 组肺组织未见 i NOS的表达 ,e NOS在内皮细胞表达正常 . 2 组内皮细胞、肺泡上皮细胞、平滑肌细胞等均可见大量 i NOS表达 (分别为 91.6 7%,83.3%和 81.6 %.与 相比 P<0 .0 5 ) ,e NOS表达下调 (5 6 .5 7%.与 相比 P<0 .0 5 ) . 组肺组织 i NOS表达受抑制 ,e NOS表达正常 .结论　 1再灌注肺组织 e NOS表达减弱 ,i NOS表达增强 ,导致 NO合成增多 ,造成肺组织缺血灌注损伤 . 2吸入NO能抑制肺组织 i NOS表达 ,维持 e NOS在内皮细胞的正常表达 ,减轻肺再灌注损伤 .     

内毒素诱导急性肺损伤幼鼠血NO、ET-1含量和肺NOS活性及mRNA表达的研究

本研究通过内毒素(LPS)诱导的ALI模型,动态观察血浆NO和ET-1浓度变化、肺组织NOS活性改变、以及肺组织内源型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达,探讨NO、NOS和ET参与ALI的作用机制.     

硝基精氨酸-赖氨酸三肽的合成及对巨噬细胞一氧化氮合酶的影响

目的合成硝基精氨酸-赖氨酸三肽,并研究其对巨噬细胞一氧化氮(NO)产生及一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法液相合成法合成硝基精氨酸-赖氨酸三肽。脂多糖(LPS)刺激巨噬细胞表达诱导性一氧化氮合酶(iNOS),检测不同浓度的硝基精氨酸-赖氨酸三肽对巨噬细胞NO产生的抑制效果、以及对NOS活性及蛋白表达的影响。结果①硝基精氨酸-赖氨酸三肽可显著抑制LPS刺激的巨噬细胞产生NO并呈浓度依赖性。在同一浓度下,硝基精氨酸-赖氨酸三肽较NG-硝基-L-精氨酸(L-NNA)作用增强。②硝基精氨酸-赖氨酸三肽可显著降低巨噬细胞iNOS的活性,对于巨噬细胞的结构型一氧化氮合酶(cNOS)活性无明显影响。③硝基精氨酸-赖氨酸三肽对于巨噬细胞内iNOS的蛋白表达无明显影响。结论硝基精氨酸-赖氨酸三肽通过抑制巨噬细胞iNOS活性而抑制NO产生,并呈剂量依赖性。     

被动吸烟对大鼠肺组织、肺泡灌洗液、血清中NO及NOS的影响

目的 观察被动吸烟对大鼠肺组织、肺泡灌洗液、血清中一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)的影响,探讨被动吸烟在大鼠慢性气道炎症中的作用.方法 将40只健康清洁级雄性Wistar大鼠,随机分为两组:正常对照组20只,被动吸烟组20只,后者每天被动吸烟1次,每次燃烧香烟共计21支.12周后,将两组大鼠处死,测定血清、肺组...     

染氟大鼠血清NO、NOS、SOD的变化

目的 :探讨染氟大鼠血清中一氧化氮 ( NO)浓度、一氧化氮合酶 ( NOS)活性及超氧化物歧化酶 ( SOD)含量的变化。方法 :血清 NO浓度采用硝酸还原酶法、血清中 NOS活性采用 NOS催化 L—Arg生成 NO法、血清中 SOD含量采用亚硝酸盐显色法。结果 :( 1 )染氟大鼠血清中 NO浓度为 ( 1 1 .1 5± 3.58μ mol/L)、NOS活性为 ( 4.60± 1 .0 7U/ml)均明显低于对照组 NO( 1 5.86± 5.82 μ mol/L)和 NOS( 8.1 1± 1 .2 2 u/ml) ( P<0 .0 5)。 ( 2 )染氟大鼠血清 SOD含量( 84 .53± 8.36NU /ml)与对照组 SOD ( 85.84± 1 4 .4 7NU/ml)差异无显著性 ( P>0 .0 5)。结论 :本文提示染氟可降低体内 NO浓度和 NOS的活性 ,而 NO与 SOD含量之间的关系仍需进一步研究     

中枢神经系统感染者血清和脑脊液中NO、NOS动态变化的研究

目的观察中枢神经系统(CNS)感染患者脑脊液(CSF)及血清中一氧化氮(nitric oxide,NO)浓度、总一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活力的动态变化,为临床辅助治疗中枢神经系统感染采用NO、NO前体或NOS抑制剂提供实验室依据。方法采用硝酸还原酶法和化学比色法检测30例CNS感染患者治疗前、治疗2周后CSF中及入院时、住院第3、59、、14天血清中NO浓度、总NOS活力的动态变化。结果CNS感染患者血清中NO浓度、总NOS活力在入院时及住院第9天明显增高(P<0.05或0.01),其它时间点的变化无统计学意义;治疗前CSF中NO浓度、总NOS活力较对照组及治疗2周后明显增高(P<0.05)。结论说明NO、NOS参与了CNS炎症过程,提示临床采用NO、NOS前体或NOS抑制剂辅助治疗CNS感染在病程的早期和中期将是最合适的。