地塞米松、维甲酸对大鼠肺发育的影响及与胰岛素样生长因子关系

目的探索地塞米松(Dex)、维甲酸(RA)对大鼠肺发育的影响及其与胰岛素样生长因子(IGF)_Ⅰ、(IGF)_Ⅱ的关系。方法将80只SD孕鼠分为4组,即对照组(A组)、Dex1组(B组)、Dex2组(C组)、RA组(D组)。A、B、D组于孕18～20d分别皮下注射生理盐水、Dex,腹腔注射RA,C组于生后1～3d皮下注射Dex。各组于孕18、20、21d(C组孕期不取)、生后1、3、5、7、10、14、21d取肺标本作病理学检查、辐射状肺泡计数(RAC)、IGF_Ⅰ、IGF_Ⅱ多肽或mRNA之肺表达强度。结果①形态学及肺表达:B、C组早期肺泡发育提前(数目多,壁薄),晚期则腔大数少;IGF_Ⅰ主要表达于肺胞分隔期(生后4～10d),A、D组等肺泡发育时,IGF_Ⅰ呈强阳性表达,其他各组或时间点则呈弱阳性或阴性表达;IGF_Ⅱ的表达主要见于出生前支气管,小血管等管道组织,受Dex等影响较小。②Westernblot结果:IGF_Ⅰ多肽的表达:A组生后5～7d达高峰,随后渐降低;B组孕20d～生后3d,各时间点强度明显高于A组(P<0.01),以后均低于A组(P<0.01);C组晚期强度明显低于A组(P<0.01);D组各时间点浓度明显高于A组(P<0.01)。IGF_Ⅱ多肽的表达:各组孕18d最高,随后渐降低直至微量。③RT_PCR结果:IGF_Ⅰ、IGF_ⅡmRNA表达的强度变化与各自的肽浓度变化相似。结论IGF_Ⅰ、IGF_Ⅱ与肺发育过程有密切关系,IGF_     

产前使用盐酸氨溴索、地塞米松对大鼠胎肺血小板源性生长因子-A表达的影响

目的探讨产前给盐酸氨溴索、地塞米松对大鼠胎肺血小板源性生长因子-A（PDGF-A）表达的影响。方法9只孕鼠随机分为盐酸氨溴索治疗组、地塞米松治疗组和9g/L盐水对照组,每组3只。分别于孕16、17、18d连续腹腔注射给药,孕19d每只孕鼠取4只胎鼠肺组织用反转录酶-聚合酶链反应（RT-PCR）检测PDGF-AmRNA表达水平,每只孕鼠取5只胎鼠肺组织用免疫组织化学法检测PDGF-A蛋白水平表达。结果1.盐酸氨溴索治疗组、地塞米松治疗组PDGF-AmRNA和蛋白表达水平均显著高于对照组（Pa〈0.01）。2.盐酸氨溴索治疗组PDGF-AmRNA和蛋白表达水平显著低于地塞米松治疗组（Pa〈0.01）。结论PDGF-A表达于胎肺组织。产前给盐酸氨溴索、地塞米松均能显著促进PDGF-A表达,PDGF-A高表达可能是盐酸氨溴索、地塞米松促胎肺成熟重要机制之一。     

盐酸氨溴索、地塞米松产前用药对大鼠胎肺形态发育影响的对比

目的比较产前3d给盐酸氨溴索、地塞米松及单次给地塞米松对大鼠胎肺形态发育的影响。方法孕鼠12只随机分为9g／L盐水对照组和产前盐酸氨溴索3d治疗组、地塞米松3d及1d治疗组4组，每组3只。孕d19每只孕鼠取6只胎鼠肺组织，通过光镜观察及电镜技术比较2种药物及不同疗程对胎肺形态发育的影响。结果1．光镜下3个治疗组每视野肺泡计数、平均肺泡表面积均高于对照组（Pa〈0．01），平均肺泡间隔厚度均低于对照组（Pa〈0．01）。2．光镜下地塞米松3d治疗组每视野肺泡计数、平均肺泡表面积均高于地塞米松1d治疗组，平均肺泡间隔厚度低于地塞米松1d治疗组（Pa〈0．01）。3．光镜下地塞米松3d及1d治疗组每视野肺泡计数、平均肺泡表面积均高于盐酸氨溴索治疗组，平均肺泡间隔厚度低于盐酸氨溴索治疗组（Pa〈0．01）。4．透射电镜观察：治疗组Ⅱ型肺泡上皮内多见板层小体，尤以地塞米松3d治疗组更为多见，且染色深、致密，线粒体等细胞器多；对照组难见板层小体，少见细胞器。结论产前应用地塞米松、盐酸氨溴索均能显著促进胎肺发育；多次地塞米松优于单次地塞米松治疗；多次及单次地塞米松疗效均优于盐酸氨溴索治疗。     

青春期精索静脉曲张对大鼠睾丸的影响与表皮生长因子的变化

目的观察青春期精索静脉曲张对大鼠睾丸的影响和表皮生长因子（EGF）的变化，探讨精索静脉曲张不育的机制。方法雄性wistar大鼠24只建立左侧精索静脉曲张模型作为实验组，18只为假手术组。术后4周、8周和12周采血并取双侧睾丸。光镜观察睾丸组织学变化并对生精功能评分；ELISA法测血清EGF浓度；RT-PCR法检测睾丸EGFmRNA表达。结果实验组睾丸重量减轻，生精功能受损，呈双侧性并进行性加重。术后8周实验组血清EGF水平显著低于假手术组（P〈0．01），4周和12周时差异无显著性意义（P〉0．05）。RT-PCR显示实验组左侧睾丸EGFmR—NA表达量术后4周（P〈0．05）、8周和12周（P〈0．01）均低于假手术组；右侧睾丸表达量术后8周（P〈0．01）和12周（P〈0．05）低于假手术组。结论青春期精索静脉曲张可使睾丸EGFmRNA表达量持续降低，引起睾丸发育障碍。     

不同剂量多疗程地塞米松对早产大鼠肺WNT信号转导途径的影响

目的 探讨产前孕鼠应用不同剂量多疗程地塞米松对早产大鼠肺WNT信号转导途径的影响.方法 孕SD大鼠12只随机分为对照组、地塞米松小剂量组和地塞米松大剂量组,每组4只.于孕第16、17、18天,连续3 d腹腔注射药物.对照组予9 g/L盐水;地塞米松小剂量组予地塞米松0.4 ms/(ks·d);地塞米松大剂量组予地塞米松0.8 mg/(kg·d),均用9 g/L盐水稀释至0.5 mL.取孕19 d胎鼠肺组织,RT-PCR法检测WNT信号转导途径中WNT7b、WNT5a、WNT2、糖原合成酶-3β(GSK-3β)、β-连环蛋白(β-cate-nin)基因mRNA的表达.结果 地塞米松小剂量及大剂量组胎肺WNT7b(0.55±0.19、0.64±0.54)及β-catenin基因mRNA的表达量(2.03±0.58、2.40±0.89)均显著高于对照组(WNTTb:0.18±0.10,β-catenin:1.77±0.54)(Pa<0.01),WNT5a mRNA(0.57±0.26、1.13±0.53)和GSK-3β基因mRNA(1.04±0.46、1.09±0.56)表达量均显著低于对照组(WNT5a:1.48±0.70,GSK-3β:2.22±1.02)(P<0.05,0.01),WNT2的表达量与对照组相比差异无统计学意义.结论 产前给予地塞米松影响胎肺WNT7b、WNT5a、β-catenin及GSK-3β基因的表达,可能通过引起WNT信号转导途径障碍导致胎肺形态发育异常,造成胎肺功能缺陷.     

表皮生长因子对新生未成熟大鼠高氧性损伤肺组织纤维化的影响

目的 探讨外源性表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）对新生大鼠高氧性损伤肺组织纤维化的影响。方法 取胎龄21d剖宫产出生的新生Sprague-dawley（SD）大鼠持续吸入95％的O2制作未成熟肺高氧性损伤模型，随机分为高氧＋EGF组和高氧＋生理盐水（NS）组，另设空气＋NS对照组；所有组按给药（或NS）时间分为3个亚组，即：a亚组（1—3d）、b亚组（4～6d）、c亚组（1～6d）；各亚组均于生后3、7、14d分批处死采取肺组织标本。应用Masson三色染色、纤维化评分及羟脯氨酸含量测定判断肺组织纤维化的程度。结果 空气＋NS组未见胶原沉积增多现象，高氧＋NS组生后7d胶原沉积明显增多，14d程度加重，7、14d高氧＋EGF组较高氧＋NS组胶原沉积明显减少；羟脯氨酸（HYP）的含量和纤维化评分也表明7、14d时高氧＋EGF组胶原纤维的含量较高氧＋NS组明显减少（P〈0．01）；在高氧＋EGF组中b亚组效果不及a亚组和c亚组。结论 表皮生长因子可以减轻新生未成熟大鼠高氧性损伤肺组织纤维化程度，在肺损伤早期应用效果更好。     

表皮生长因子对新生未成熟大鼠高氧性损伤肺组织纤维化的影响

目的探讨外源性表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)对新生大鼠高氧性损伤肺组织纤维化的影响。方法取胎龄21d剖宫产出生的新生Sprague-dawley(SD)大鼠持续吸入95%的O2制作未成熟肺高氧性损伤模型,随机分为高氧 EGF组和高氧 生理盐水(NS)组,另设空气 NS对照组;所有组按给药(或NS)时间分为3个亚组,即:a亚组(1~3d)、b亚组(4~6d)、c亚组(1~6d);各亚组均于生后3、7、14d分批处死采取肺组织标本。应用Masson三色染色、纤维化评分及羟脯氨酸含量测定判断肺组织纤维化的程度。结果空气 NS组未见胶原沉积增多现象,高氧 NS组生后7d胶原沉积明显增多,14d程度加重,7、14d高氧 EGF组较高氧 NS组胶原沉积明显减少;羟脯氨酸(HYP)的含量和纤维化评分也表明7、14d时高氧 EGF组胶原纤维的含量较高氧 NS组明显减少(P<0·01);在高氧 EGF组中b亚组效果不及a亚组和c亚组。结论表皮生长因子可以减轻新生未成熟大鼠高氧性损伤肺组织纤维化程度,在肺损伤早期应用效果更好。     

胎肺扩张对肺发育的影响

先天性隔疝主要的死亡原因是该病所并存的肺发育不良。近年来,为提高该病的生存率,人们对肺发育及其影响因素进行了广泛而深入的探讨,其中胎肺扩张与肺发育间的关系的研究尤为引人注目。本文就胎肺扩张在肺发育中的作用及其临床意义作一概述。一、肺的发育［１］通常将...     

上皮生长因子对大鼠先天性膈疝模型肺发育的影响

目的　探讨上皮生长因子 (EGF)对先天性膈疝 (CDH)模型肺发育不良的影响 ,尤其是对Ⅱ型细胞的影响。方法　 2 0只雌鼠配种后第 8.5d给予除草醚 (Nitrofen) 1 0 0mg ;第 1 8.5d将孕鼠随机分为三组 :CDH ,地塞米松 (Dex)和EGF组。第 2 1d剖宫取出胎鼠及其肺组织 ,进行组织学观察和图像分析。结果　实验组致畸率达 61 .7%。EGF组与Dex组肺重量与体重之比 (Lw/Bw)均较CDH组高(P <0 .0 1 )。EGF组肺组织形态明显改善 ,并且随EGF剂量增加 ,改善作用明显加强。透射电镜观察结果 :EGF组Ⅱ型细胞分化较成熟 ,板层小体和细胞器多见 ;CDH组分化不成熟 ,胞浆内存在大量糖原颗粒。计数结果 :EGF ,Dex和CDH组平均分别为 65± 4 .5 ,31± 3 .1和 8± 1 .5(P <0 .0 5)。结论　EGF对CDH大鼠肺发育不良具有明显的改善作用 ,尤其对Ⅱ型细胞有明显的促分化作用。EGF产前应用有助于纠正大鼠CDH表面活性物质缺陷 ,从而为CDH的治疗提供一种新的可能手段     

表皮生长因子对先天性膈疝大鼠模型胎肺活性物质的影响

目的探讨表皮生长因子（EGF）对大鼠先天性膈疝（CDH）模型肺发育活性物质的影响，了解EGF的可能作用机制。方法建立大鼠CDH模型。随机分为正常、CDH、CDH加EGF组，采用免疫组织化学方法检测各组胎肺组织甲状腺转录因子-1（TTF-1）、转化生长因子（TGFβ1）表达情况。结果 TTF-1和TGFβ1在各实验组中均有表达，且二者在正常、CDH和CDH加EGF组的两两比较均有显著性差异（只〈0．05）。随EGF剂量增加，TTF-1表达增强，而TGFβ1表达减弱，各组间均有显著性差异（Pa〈0．05）。结论EGF对CDH大鼠胎肺组织TTF-1和TGFβ1表达部位和强度均有影响，可能是其影响CDH肺发育机制之一。     

产前孕鼠应用地塞米松与倍他米松对早产仔鼠脑发育的影响

目的 比较产前孕鼠使用地塞米松、倍他米松对早产仔鼠脑发育的影响.方法 取15只孕鼠随机分为5组:地塞米松1剂组[0.2 mg/(kg·d),1 d]、地塞米松3剂组[0.2 mg/(kg·d),3 d]、倍他米松1剂组[0.2 ms/(kg·d),1 d]、倍他米松3剂组[0.2 mg/(kg·d),3 d]及对照组.于孕第19天处死大鼠,取早产仔鼠称其体质量及脑质量,应用免疫组织化学检测其脑神经元特异性烯醇化酶(NSE)表达情况.结果 地塞米松1剂组、地塞米松2剂组及倍他米松3剂组早产仔鼠体质量、脑质量、脑质量/体质量、脑皮质及海马区NSE表达均较对照组显著降低(Pa<0.05,0.01).与地塞米松1剂组、倍他米松1剂组比较,地塞米松3剂组、倍他米松3剂组对早产仔鼠脑发育影响更大;地塞米松3剂组海马区NSE表达较倍他米松3剂组低(P<0.05),地塞米松1剂组仔鼠体质量、脑质量、脑质量/体质量、脑皮质及海马区的NSE表达均较倍他米松1剂组明显降低(Pa<0.05,0.01).结论 产前应用糖皮质激素可损伤早产仔鼠脑发育,多次使用比单次使用更加明显;而倍他米松相对地塞米松而言,对仔鼠脑发育的影响小,临床应考虑使用低毒性的倍他米松替代地塞米松.     

EGF对先天性膈疝大鼠胎肺发育中相关活性物质的影响

目的 表皮生长因子(EGF)对先天性膈疝(CDH)大鼠肺发育不良具有明显的改善作用,本研究探讨EGF对大鼠CDH模型肺发育中相关活性物质的影响,进而了解EGF可能的作用机制.方法 建立大鼠CDH模型,将实验大鼠随机分为正常组、CDH组、CDH EGF组,采用免疫组织化学方法检测各组胎肺组织中表皮生长因子受体(EGFR)、甲状腺转录因子-1(TTF-1)以及表面活性蛋白B(SP-B)等活性物质的表达情况.结果 EGFR,TTF-1,SP-B在各实验组中均有表达.与正常组相比,EGFR在CDH组和CDH EGF组中表达强度均有显著性差异(P＜0.05).SP-B在CDH组与正常组,CDH EGF组与CDH组中表达强度的比较均有显著性差异(P＜0.05).TTF-1在正常组、CDH组和CDH EGF组的两两比较也均有显著性差异(P＜0.05).在不同EGF剂量组的胎肺组织中EGFR、SP-B和TTF-1均有表达,各指标在不同EGF剂量组间的表达强度均有显著性差异(P＜0.05),且EGFR、SP-B和TTF-1的表达随EGF作用剂量的增加呈现逐渐增加的趋势(P＜0.05).结论 表皮生长因子对CDH胎肺组织EGFR,TTF-1,SP-B的表达部位有影响,并且对其表达强度有明显上调作用.     

产前重复激素治疗对仔鼠星形胶质细胞发育的影响

目的观察产前不同疗程的地塞米松(DEX)治疗对仔鼠星形胶质细胞(AS)发育的影响。方法SPF级SD孕大鼠34只,随机分为4种情况用药,产前1剂组8只于孕17 d肌注DEX 0.8 mg/(kg.d),产前3剂组8只于孕17、18、19 d各肌注DEX0.8 mg/(kg.d),产前4剂组10只于孕17、18、192、0 d各肌注DEX 0.8 mg/(kg.d),对照组8只肌注等量生理盐水。对各组孕鼠所生的仔鼠,分别于生后d1、7、14检测大脑白质与海马胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况,并与对照组比较。结果产前激素治疗3剂、4剂组7日龄、14日龄鼠脑海马、白质GFAP的表达较对照组减少,1剂组与对照组相比无明显差异(P>0.05)。结论重复糖皮质激素注射会影响AS成熟。     

谷氨酰胺和表皮生长因子对新生鼠坏死性小肠结肠炎的影响

目的探讨谷氨酰胺(Gln)和表皮生长因子(EGF)对新生鼠坏死性小肠结肠炎(NEC)肠黏膜修复的影响。方法新生1日龄Wistar大鼠40只随机分为4组,A组(正常对照组),B组(NEC模型组),C组(NEC Gln),D组(NEC EGF Gln)。建立NEC模型,4 d后分别取近回盲段2~3 cm肠道组织固定、包埋、切片。HE染色光镜下作病理学检查,应用免疫组织化学技术检测肠黏膜增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,TUNEL法检测肠黏膜细胞凋亡。结果B组HE染色切片见肠黏膜损伤,病理评分的中位积分为3分;C、D组损伤程度较轻,病理评分的中位积分为1分。B组PCNA阳性细胞数低于A组(P<0.01);C、D组PCNA阳性细胞数高于B组(P<0.01);且D组PCNA阳性细胞数高于C组(P<0.05)。B组肠黏膜细胞凋亡数高于A组(P<0.01);C、D组肠黏膜细胞凋亡数低于B组(P<0.01);且D组肠黏膜细胞凋亡数低于C组(P<0.05)。结论NEC新生鼠肠黏膜受损,增殖减慢,细胞凋亡数增加;补充Gln和EGF可促进NEC新生鼠肠黏膜隐窝细胞的增殖,减少肠黏膜细胞的凋亡,加快肠黏膜修复。     

胃肠功能障碍早产儿胃液表皮生长因子水平变化及意义

目的研究不同胎龄早产儿发生胃肠功能障碍后胃液中表皮生长因子(EGF)水平变化,探讨其在胃肠功能障碍的病理生理过程中的作用,为寻找早期预测早产儿胃肠功能的客观指标提供理论依据。方法本院新生儿监护室2006年1月-2009年6月收治160例不同胎龄早产儿,随机分为胃肠功能障碍组80例(观察组)和非胃肠功能障碍组80例(对照组),采用ELISA方法检测其胃液中EGF水平变化,观察组收集样本时间均为症状表现12 h内,对照组为入院3 d内。结果观察组及对照组均按不同胎龄分为4组:28～30周组,30+1～32周组,32+1～34周组,34+1～36+6周组,每组20例,观察组胃液EGF质量浓度(ng.L-1)分别为68.2±11.4,172.0±34.4,284.8±30.6,444.4±82.4,对照组胃液EGF质量浓度(ng.L-1)分别为:343.0±45.2,494.4±29.4,703.3±118.1,947.8±158.1,EGF随胎龄不同,分泌水平随之变化,胎龄越大,其表达水平越高。胃肠道EGF的分泌水平与胎龄呈正相关。结论早产儿胃肠衰竭时EGF分泌水平明显降低,反映了胃肠道功能的损害程度。     

血小板源性生长因子对新生大鼠高氧肺损伤的影响

目的　探讨血小板源性生长因子 (PDGF)在新生大鼠高氧肺损伤中时空作用机制。方法　应用免疫组织化学法定位PDGF表达 ,反转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测各时间点 (生后 4、7、10、14d)PDGFmRNA水平。结果　随日龄增加 ,PDGF A、 B含量发生不同的变化。高氧暴露下PDGF BmRNA含量及其表达均显著高于空气组 (P <0 .0 5 ,<0 .0 1)。而PDGF AmRNA水平及其表达却显著低于空气组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。结论　高氧降低PDGF A水平 ,增加PDGF B含量。PDGF A、 B共同参与高氧暴露下肺组织损伤过程 ,是肺发育阻滞的重要因素。     

胰岛素样生长因子结合蛋白2在新生鼠肺发育中的作用

目的探索胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)2在新生鼠肺发育中的作用。方法SD孕鼠80只分为4组,即A:对照组;B:地塞米松(Dex)1组;C:Dex2组;D:维A酸(RA)组。A、B、D组分别于孕18～20d皮下注射生理盐水、Dex,腹腔注射RA;C组于生后1～3d皮下注射Dex。各组分别于孕18、20、21d(C组孕期不取)、生后1、3、5、7、10、14、21d取肺标本作形态学检查、免疫组织化学、Westernblot及RT PCR检测。结果1.肺组织形态学:B、C组早期肺泡发育提前,数目多,壁薄,晚期则明显落后于A、D组。2.IGFBP2肺表达:A组中IGFBP2主要在胎肺组织中表达,孕18d左右表达最强,随后表达渐减弱。B、C组表达趋势同A组,但生后各时间点均较A组增强;D组生后各时间点均较A组减弱。3.Westernblot:IGFBP2多肽表达强度各组孕18d表达最强,随后渐降低;B、C组生后各时间点表达强度明显高于A组(P均<0.01);D组各时间点浓度均明显低于A组(P均<0.01)。4.RT PCR:IGFBP2mRNA表达的强度变化规律与其肽浓度变化相似。结论IGFBP2在肺发育过程起重要作用,其浓度过高则影响肺发育。