黄芩苷对人结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响及机制研究

目的基于STAT3/Bcl-2信号通路探究黄芩苷对人结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响。方法实验分为空白组及黄芩苷25,50,100,200,400μg/mL组,空白组用不含黄芩苷Gibco RPMI 1640培养基培养,黄芩苷各组采用相应浓度黄芩苷培养,分别处理结肠癌SW480细胞24 h后,采用CCK-8法、Edu染色法、Annexin V-FITC/PI法检测经上述处理细胞的增殖和凋亡情况,采用Western blot法检测人结肠癌SW480细胞中促进凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3和抑制凋亡相关蛋白Bcl-2以及转录相关蛋白STAT-3的表达情况。结果黄芩苷各组的细胞增殖率均明显低于空白组(P均0.05),且细胞增殖率随着黄芩苷浓度的增高而缓慢下降,当黄芩苷浓度达400μg/mL时,增殖率下降1/4;人结肠癌SW480细胞凋亡率有随着黄芩苷浓度的增加而逐渐升高的趋势。随着黄芩苷浓度的增加,Bax蛋白表达量逐渐增加,黄芩苷100,200,400μg/mL组明显高于空白组(P均0.05),但黄芩苷200μg/mL和400μg/mL组比较差异无统计学意义(P0.05);STAT-3和Bcl-2蛋白表达量逐渐降低,黄芩苷50,100,200,400μg/mL组均明显低于空白组(P均0.05);黄芩苷50,100,200,400μg/mL组Caspase-3蛋白表达量呈下降趋势,但与空白组比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论黄芩苷能诱导人结肠癌SW480细胞凋亡并抑制其增殖,且与黄芩苷浓度呈一定的量效关系,其机制可能与调节STAT3/Bcl-2通路有关。     

黄芩素在伊立替康抑制结肠癌细胞增殖中的作用研究

目的:研究黄芩素在伊立替康抑制结肠癌细胞增殖中的作用及相关机制。方法:用结肠癌HT-29细胞作为研究对象。以50、100、200 μmol/L黄芩素、5 μmol/L伊立替康分别处理结肠癌HT-29细胞。MTT实验和平板克隆实验检测细胞增殖和克隆形成能力; Western blotting法实验检测Src激酶、Yes相关蛋白(YAP)及大肿瘤抑制因子激酶1(LATS1)磷酸化蛋白表达; 免疫荧光实验检测细胞YAP表达分布。结果:50 μmol/L黄芩素组、100 μmol/L黄芩素组、200 μmol/L黄芩素组均能增加伊立替康对HT-29细胞的增殖和克隆抑制作用。50 μmol/L黄芩素组、100 μmol/L黄芩素组、200 μmol/L黄芩素组均可下调结肠癌HT-29细胞p-Src蛋白表达,上调p-YAP、p-LATS1蛋白表达。200 μmol/L黄芩素组能增加结肠癌HT-29细胞的细胞质YAP分布。结论:黄芩素通过抑制Src-YAP信号通路增强伊立替康对结肠癌细胞的抑制作用。     

木香烃内酯通过PI3K/AKT信号通路调控结直肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移

目的:探讨木香烃内酯对结直肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及作用机制。方法:不同浓度(10、20、40μmol/L)木香烃内酯作用结直肠癌细胞SW480,并设空白对照组、溶剂对照组和紫杉醇组,MTT和平板克隆实验检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western Blot检测与增殖、凋亡、侵袭和迁移相关蛋白、LASP1、PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达。应用Lipofectamine~(TM)2000将真核表达载体pCDNA-LASP1和空载体pCDNA导入SW480细胞,观察LASP1过表达后木香烃内酯对SW480增殖、凋亡、迁移和侵袭及PI3K/AKT信号通路的影响。结果:与空白对照组比较,40μmol/L木香烃内酯组SW480细胞活力、细胞迁移和侵袭数量显著降低、凋亡率显著升高,CDK1、CyclinD1、MMP-2、MMP-9、LASP1、PI3K、AKT、mTOR蛋白表达显著降低,Caspase-3、Caspase-9蛋白表达显著升高。空白对照组和溶剂对照组各检测指标差异无统计学意义(P0.05)。LASP1过表达可逆转木香烃内酯对SW480细胞增殖、迁移、侵袭及PI3K、AKT、mTOR蛋白表达的抑制作用,并逆转木香烃内酯对SW480细胞的凋亡促进作用。结论:木香烃内酯可能通过抑制PI3K/AKT信号通路调控结直肠癌细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移。     

黄芩苷通过影响miRNA的表达抑制乳腺癌细胞的侵袭转移

目的:从miRNA角度探讨黄芩苷对乳腺癌侵袭与转移的影响及可能的机制。方法:黄芩苷作用于乳腺癌MCF-7细胞,运用免疫组化检测TGF-β和VEGF表达的变化,筛选最佳药物浓度;用miRNA芯片筛选受黄芩苷调控的差异miRNA,qRT-PCR对芯片结果中上调的miRNA进行验证,Western-blot检测Bcl-2、Caspase-9、Caspase-3、p-p38、p53的表达,MTT法检测细胞生存率,Transwell实验检测细胞侵袭与转移,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:用25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L的黄芩苷作用于乳腺癌细胞,免疫组化显示TGFβ、VEGF的表达下降,筛选出最佳药物浓度为50μmol/L;黄芩苷干预后miRNA芯片筛选出miR-126表达上调最明显,并以qRT-PCR验证。黄芩苷或miR-126 mimics作用于乳腺癌细胞后Bcl-2表达水平下降,Caspase-9和Caspase-3的裂解产物、p-p38、p53表达水平提高。Transwell试验表明黄芩苷干预或转染miR-126 mimics后乳腺癌细胞的侵袭转移能力降低,MTT法显示黄芩苷或miR-126 mimics均可抑制乳腺癌细胞的增殖,流式细胞术显示黄芩苷与miR-126 mimics促进癌细胞凋亡。结论:黄芩苷能抑制乳腺癌细胞的增殖及侵袭转移,其机制可能与上调miR-126的表达有关。     

透骨草提取物对人结肠癌SWⅢ-C细胞增殖及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的:观察透骨草提取物对人结肠癌SWⅢ-C细胞增殖的影响,探讨透骨草提取物对SWⅢ-C细胞增殖影响的分子机制。方法:MTT法检测透骨草提取物对SWⅢ-C细胞增殖的影响,荧光显微镜观察透骨草提取物对SWⅢ-C细胞形态的影响,免疫组化方法检测SWⅢ-C细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:6.25~100μg/mL透骨草提取物处理的SWⅢ-C细胞增殖抑制率与对照组相比显著增加(P0.05),而且随透骨草浓度的增加,抑制率逐渐增加。透骨草提取物对SWⅢ-C细胞的半数抑制浓度(IC50)为38.36μg/mL。荧光显微镜下可见,38.36μg/mL透骨草提取物处理的SWⅢ-C细胞,体积缩小,细胞核固缩、呈新月状且边集。38.36μg/mL透骨草提取物处理的SWⅢ-C细胞Bcl-2蛋白表达显著低于对照组(P0.05),而Bax蛋白表达明显高于对照组(P0.05)。结论:透骨草提取物可以抑制人结肠癌SWⅢ-C细胞增殖,诱导SWⅢ-C细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2蛋白表达、上调Bax蛋白表达有关。     

复方苦参注射液联合表柔比星对膀胱癌细胞凋亡的影响

目的:探究复方苦参注射液、表柔比星及两药联合应用对人膀胱癌T24细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法:将膀胱癌T24细胞分为空白对照组、复方苦参注射液60μl/ml组、表柔比星4.6μmol/L组及联合给药(复方苦参注射液60μl/ml+表柔比星4.6μmol/L)组。CCK-8法观察膀胱癌T24细胞增殖,流式细胞术检测膀胱癌T24细胞凋亡,蛋白免疫印迹实验检测膀胱癌T24细胞凋亡关键蛋白的表达情况。结果:与空白对照组相比,复方苦参注射液60μl/ml和表柔比星4.6μmol/L能显著抑制膀胱癌T24细胞增殖(P<0.01),且联合用药能起到协同增效作用(P<0.01)。复方苦参注射液60μl/ml和表柔比星4.6μmol/L能显著诱导膀胱癌细胞凋亡(P<0.01),两药联合使用促进凋亡作用更加明显(P<0.01)。复方苦参注射液60μl/ml和表柔比星4.6μmol/L能下调膀胱癌细胞凋亡相关蛋白pro-Caspase 3和Bcl-2的表达(P<0.05),上调Cleaved PARP、Bax和Cleaved-Caspase 3蛋白的表达(P<0.05),降低Bcl-2/Bax比值(P<0.05),联合用药作用更加明显(P<0.05)。结论:复方苦参注射液与表柔比星能够抑制膀胱癌细胞增殖,促进膀胱癌细胞凋亡,两药联合应用起到协同增效作用。     

黄芩苷对Hela细胞凋亡的影响

目的探讨黄芩苷诱导Hela细胞的凋亡作用及对PI3K/AKT/mTOR通路的影响。方法培养Hela细胞后分为空白组、卡铂组(40μg/mL)及黄芩苷低、高剂量组(40、80μmol/L),处理24 h。MTT法检测细胞增殖,Annexinv-FITC/PI双染色和hoechst 33342染色检测细胞凋亡,Western blot法检测p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达。结果与空白组比较,黄芩苷(40、80μmol/L)能抑制细胞增殖(P<0.01),增加细胞凋亡率(P<0.01),抑制p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达(P<0.01),且细胞出现明显的染色质凝集、核萎缩、凋亡小体增多现象。结论黄芩苷可能通过下调PI3K/AKT/mTOR通路,从而具有抑制HeLa细胞增殖、促进凋亡的作用。     

姜黄素对人肾透明细胞癌细胞株786-O作用的实验研究

目的探讨姜黄素对人肾透明细胞癌细胞786-O体外增殖及其诱导细胞凋亡的影响。方法 MTT法观察对癌细胞生长的影响,DAPI凋亡染色检测姜黄素对细胞凋亡的诱导作用,Western Blot检测抑凋亡蛋白Bcl-2的表达。结果MTT结果表明姜黄素对细胞786-O具有较好抑制作用,25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L浓度的姜黄素处理48h对细胞增殖抑制率分别为(45.90±1.78)%、(79.76±1.49)%、(91.11±1.38)%,并呈现一定剂量依赖关系;凋亡染色显示细胞在作用48h后,有典型的凋亡形态出现,且随着浓度的增大作用更为明显;Western Blot显示姜黄素可下调Bcl-2蛋白表达,50μmol/L和100μmol/L浓度作用较为明显。结论姜黄素可抑制人肾透明细胞癌细胞786-O的生长,并能诱导其凋亡,其作用机制可能与下调Bcl-2蛋白表达有关。     

黄芪甲苷对异丙肾上腺素诱导的H9C2心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨黄芪甲苷(Astragaloside IV,ASIV)对异丙肾上腺素(Isoproterenol,ISO)诱导的H9C2心肌细胞凋亡的抑制作用及机制。方法:H9C2心肌细胞传代后随机分为正常对照组、异丙肾上腺素(10μmol/L)组、普萘洛尔(2μmol/L)组和黄芪甲苷(25、50、100μmol/L)组,采用流式细胞术检测H9C2心肌细胞凋亡率;运用JC-1荧光探针检测各组细胞线粒体膜电位的变化;采用Western Blot分别测定线粒体和胞浆中细胞色素C(Cytochrome C,Cyt-C)的蛋白表达。结果:与正常对照组相比,异丙肾上腺素组的凋亡率显著增加,线粒体膜电位降低,细胞色素C外流,线粒体细胞色素C表达减少而胞浆中表达增多。与模型组相比,黄芪甲苷(50、100μmol/L)组能明显降低凋亡率,提高线粒体膜电位及减少细胞色素C外流,且呈一定剂量依赖性。结论:黄芪甲苷可通过线粒体凋亡途径抑制异丙肾上腺素诱导的心肌细胞凋亡。     

基于ERK/MAPK信号通路探讨青藤碱对SW480结肠癌细胞活性抑制作用的研究

目的:探讨青藤碱对SW480结肠癌细胞活性抑制作用及对细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase,ERK)/丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)信号通路的影响。方法:选用SW480人结肠癌细胞株,设对照组、空白组及青藤碱不同剂量组,分别采用相应药物进行处理。采用CCK-8法检测青藤碱对SW480细胞增殖的抑制作用,采用流式细胞术分析青藤碱对SW480细胞凋亡的影响,采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测各组SW480细胞B淋巴细胞瘤2(B lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 related X protein,Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cysteine-containing aspartic acid proteolytic enzymes-3,Caspase-3)、细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinase 1/2,ERK1/2)、磷酸化ERK1/2(phosphorylated ERK1/2,p-ERK1/2)蛋白表达水平。结果:干预24、48、72 h后,与对照组比较,青藤碱4、8、16、20 mmol/L组SW480细胞增殖抑制率较高,且青藤碱4 mmol/L组8 mmol/L组16 mmol/L组及20 mmol/L组,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组比较,青藤碱4、8、16 mmol/L组SW4800细胞凋亡率较高,Bax、Caspase-3蛋白表达水平较高,且青藤碱4 mmol/L组8 mmol/L组16 mmol/L组,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组比较,青藤碱4、8、16 mmol/L组Bc L-2、p-ERK1/2蛋白表达水平较低,且青藤碱4 mmol/L组8 mmol/L组16 mmol/L组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:青藤碱能剂量依赖性抑制SW480结肠癌细胞增殖活性,促进细胞凋亡,其作用可能与抑制ERK/MAPK信号通路活性,调节Bc L-2、Bax、Caspase-3等相关凋亡蛋白表达有关。     

黄芩苷通过增强自噬介导顺铂对宫颈癌C-33A/cis细胞敏感性的影响

目的:探究黄芩苷对顺铂耐受的宫颈癌C-33A细胞(C-33A/cis)顺铂化疗敏感性的影响,并初步探究其分子机制。方法:使用不同浓度(10、30、100μmol/L)顺铂作用宫颈癌C-33A细胞和C-33A/cis细胞,CCK-8法检测细胞增殖情况;使用不同浓度(20、40μmol/L)黄芩苷协同不同浓度(10、30、100μmol/L)顺铂作用宫颈癌C-33A/cis细胞,设置顺铂单用组和黄芩苷协同组,CCK-8法检测细胞增殖情况。使用不同浓度(20、40μmol/L)黄芩苷协同30μmol/L顺铂作用宫颈癌C-33A/cis细胞,设置顺铂单用组和黄芩苷协同组,自噬特征蛋白MAPLC3II/MAPLC3I比例评价细胞自噬水平;实时定量PCR检测自噬相关基因Beclin-1、Atg5和Atg12的表达。结果:顺铂对C-33A细胞的IC50值为28.32μmol/L,对C-33A/ci细胞的IC50值为78.95μmol/L,C-33A/cis细胞耐药指数为2.79; 20、40μmol/L黄芩苷协同10、30μmol/L顺铂时,对C-33A/cis细胞的抑制率明显高于顺铂单用组; 20、40μmol/L黄芩苷协同30μmol/L顺铂时,C-33A/cis细胞MAPLC3II/MAPLC3I比值明显高于顺铂单用组,自噬水平明显提高; 30μmol/L顺铂作用时,C-33A细胞与C-33A/cis细胞自噬基因Beclin-1、Atg5和Atg12的表达没有明显差别; 20、40μmol/L黄芩苷协同30μmol/L顺铂时,C-33A/cis细胞自噬基因Beclin-1、Atg5和Atg12的表达均高于顺铂单用组。结论:黄芩苷能明显增强宫颈癌C-33A细胞对顺铂化疗敏感性,其机制与增强细胞自噬水平有关。     

苦参碱体外诱导人结肠腺癌SW480细胞凋亡的实验研究

目的:观察苦参碱(MT)诱导人结肠腺癌细胞株SW480凋亡的作用并探讨其可能机制。方法:以不同浓度MT处理人结肠腺癌细胞株SW480,分别通过MTT法检测MT对SW480细胞的增殖抑制作用,光镜观察、Hochest 33258荧光染色观察MT对SW480细胞变化的影响,AnnexinⅤ-FITC法检测MT对SW480细胞凋亡的影响,荧光定量PCR法检测MT对SW480细胞中Caspase3、Bcl-2 mRNA表达的影响。结果:MT对体外培养的SW480细胞增殖具有明显的抑制作用,并可诱导其发生凋亡,其作用呈剂量和时间依赖性,48 h IC50=0.70mg.mL-1;光镜观察显示,凋亡细胞变圆,体积缩小,Hochest 33258荧光强染;经MT作用的SW480细胞,其Bcl-2表达低于正常组,Caspase3表达则显著高于正常组。结论:MT在体外能抑制SW480细胞的增殖并诱导细胞凋亡,其机制可能与诱导凋亡有关。     

红景天苷对胶质瘤U87-MG细胞增殖和侵袭能力的影响

目的观察红景天苷对胶质瘤U87-MG细胞增殖和侵袭能力的影响,探讨其诱导U87-MG细胞凋亡机制。方法不同浓度红景天苷和喜树碱加入U87-MG细胞中,作用24 h后,MTT法测定U87-MG细胞增殖,流式细胞术检测U87-MG细胞凋亡率,Transwell法检测U87-MG细胞侵袭能力,间接荧光标记法测定细胞内活性氧(ROS)水平,Western blot检测U87-MG细胞Caspase-3、Bcl-2、Bax、E-cadherin、N-cadherin和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达。结果与空白对照组比较,各给药组U87-MG细胞生长抑制作用明显,10、50、100μg/m L红景天苷作用U87-MG细胞后,细胞侵袭能力显著下降,10、50、100μg/m L红景天苷作用U87-MG细胞48 h后均能诱导U87-MG细胞凋亡;ROS水平与红景天苷浓度呈正相关;10、50、100μg/m L红景天苷上调Caspase-3、Bax和E-cadherin的表达,下调Bcl-2和N-cadherin和MMP-9的表达。结论红景天苷可诱导U87-MG细胞凋亡、抑制U87-MG细胞的侵袭能力。     

马钱子碱对人结肠癌细胞SW480增殖和周期的影响及机制研究

目的探讨马钱子碱对人结肠癌细胞株SW480的增殖和周期的影响及可能的分子机制。方法将试验分为空白对照组和马钱子碱高(8μmol/L)、中(4μmol/L)、低剂量组(2μmol/L),细胞生长曲线检测马钱子碱干预前后各组SW480细胞的增殖情况;流式细胞术检测马钱子碱对各组SW480细胞周期的影响;RT-PCR检测马钱子碱对SW480细胞中Wnt3a、β-catenin、C-myc、CyclinD1的mRNA表达的调节作用;Western Blot试验检测马钱子碱对SW480细胞中Wnt3a、β-catenin、C-myc、CyclinD1蛋白表达的调节作用。结果细胞生长曲线表明,在一定范围内,马钱子碱给药浓度越高,对SW480细胞增殖的抑制作用越显著,以高剂量组为最优。流式细胞术试验表明,马钱子碱可显著升高G2/M期的SW480细胞数量,从而将SW480周期阻滞在G2/M期。RT-PCR和Western Blot试验结果显示,马钱子碱干预后Wnt3a、β-catenin、C-myc、CyclinD1的mRNA和蛋白表达相较于正常对照组其表达明显降低。结论马钱子碱可通过调节Wnt/β-catenin信号通路抑制结肠癌细胞SW480增殖并将SW480细胞周期阻滞在G2/M期。     

黄芩苷通过增强自噬介导顺铂对宫颈癌C-33A/cis细胞敏感性的影响北大核心CSCD

目的:探究黄芩苷对顺铂耐受的宫颈癌C-33A细胞(C-33A/cis)顺铂化疗敏感性的影响,并初步探究其分子机制。方法:使用不同浓度(10、30、100μmol/L)顺铂作用宫颈癌C-33A细胞和C-33A/cis细胞,CCK-8法检测细胞增殖情况;使用不同浓度(20、40μmol/L)黄芩苷协同不同浓度(10、30、100μmol/L)顺铂作用宫颈癌C-33A/cis细胞,设置顺铂单用组和黄芩苷协同组,CCK-8法检测细胞增殖情况。使用不同浓度(20、40μmol/L)黄芩苷协同30μmol/L顺铂作用宫颈癌C-33A/cis细胞,设置顺铂单用组和黄芩苷协同组,自噬特征蛋白MAPLC3II/MAPLC3I比例评价细胞自噬水平;实时定量PCR检测自噬相关基因Beclin-1、Atg5和Atg12的表达。结果:顺铂对C-33A细胞的IC50值为28.32μmol/L,对C-33A/ci细胞的IC50值为78.95μmol/L,C-33A/cis细胞耐药指数为2.79; 20、40μmol/L黄芩苷协同10、30μmol/L顺铂时,对C-33A/cis细胞的抑制率明显高于顺铂单用组; 20、40μmol/L黄芩苷协同30μmol/L顺铂时,C-33A/cis细胞MAPLC3II/MAPLC3I比值明显高于顺铂单用组,自噬水平明显提高; 30μmol/L顺铂作用时,C-33A细胞与C-33A/cis细胞自噬基因Beclin-1、Atg5和Atg12的表达没有明显差别; 20、40μmol/L黄芩苷协同30μmol/L顺铂时,C-33A/cis细胞自噬基因Beclin-1、Atg5和Atg12的表达均高于顺铂单用组。结论:黄芩苷能明显增强宫颈癌C-33A细胞对顺铂化疗敏感性,其机制与增强细胞自噬水平有关。     

黄连素调控GRP78诱导结肠癌细胞凋亡的研究

目的:考察黄连素是否通过调节GRP78表达而促进SW480细胞凋亡。方法:MTT法检测不同浓度黄连素对结肠癌细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡、Western blot法检测细胞GRP78、Bcl-2、Bax、GRP94的表达。结果:与对照组比较,不同浓度黄连素可呈浓度依赖性抑制SW480和HT-29细胞的增殖,其对SW480细胞的作用较强。黄连素可促进SW480细胞凋亡,抑制其GRP78表达,使Bax表达上调,Bcl-2表达下调。Bi X激活GRP78表达后,受黄连素作用的SW480细胞凋亡率降低,Bax表达下调,Bcl-2表达上调,但不同处理组GRP94表达均无显著变化。结论:黄连素可通过下调GRP78的表达来促进SW480细胞凋亡。     

淫羊藿苷干预ConA诱导体外BRL-3A细胞损伤的机制

目的:研究淫羊藿主要成分淫羊藿苷对ConA(刀豆蛋白)致体外BRL-3A细胞(大鼠肝细胞)损伤的影响和作用机制。方法:体外培养BRL-3A细胞,分别加入25、50、100μmol/L的淫羊藿苷24h,再以100μg/ml的ConA诱导损伤24h,MTT法检测BRL-3A细胞的存活率,考察细胞上清液中谷草转氨酶、谷丙转氨酶、超氧化物歧化酶、丙二醛、谷胱甘肽过氧化物酶含量,以荧光探针DCFH-DA检测细胞内活性氧含量,免疫细胞化学方法检测肝细胞Bax、Bcl-2表达水平。结果:淫羊藿苷显著提高ConA刺激后BRL-3A的存活率,25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L淫羊藿苷均明显降低谷草转氨酶的含量;100μmol/L淫羊藿苷明显降低谷丙转氨酶的含量,并明显升高超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性,降低丙二醛、活性氧含量,增强Bcl-2的表达,降低Bax的表达。结论:淫羊藿苷能明显改善ConA诱导的BRL-3A细胞损伤,作用机制与淫羊藿苷抗氧化相关。     

藤黄诱导人结肠癌细胞HCT116和SW480凋亡及调节BAX、Bcl-2和p53表达的研究

目的:研究藤黄对人结肠癌细胞的诱导凋亡作用及相关分子机制。方法:采用Annexin V-FITC/PI双染法、流式细胞法、免疫细胞化学染色法检测藤黄干预后对结肠癌细胞株HCT116和SW480的细胞凋亡、细胞周期及凋亡相关蛋白BAX、Bcl-2以及p53的影响。结果:1.25μg/ml、2.5μg/ml藤黄干预HCT116细胞48h,细胞凋亡率为11.28%、27.31%,1.25μg/ml、2.5μg/ml及5μg/ml藤黄干预SW480细胞48h,细胞凋亡率分别为15.84%、20.71%、35.61%,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。0.625μg/ml、1.25μg/ml、2.5μg/ml藤黄干预HCT116细胞48h,2.5μg/ml、5μg/ml藤黄干预SW480细胞48h,G2/M期细胞所占比例与对照组比较差异有统计学意义;当干预浓度为2.5μg/ml时,HCT116细胞S期细胞所占比例与对照组比较差异有统计学意义。藤黄干预后HCT116和SW480细胞的BAX和p53蛋白表达明显上调,Bcl-2蛋白表达明显下调。结论:藤黄对人结肠癌细胞HCT116和SW480有明显的促凋亡作用,呈浓度依赖性,其机制可能和调节BAX、Bcl-2与p53蛋白的表达,产生G2/M期及S期阻滞有关。     

姜黄素调控结肠癌SW480细胞skp2-p27kip通路的研究

目的：探讨姜黄素抑制结肠癌细胞增殖并促进其凋亡的分子机制。方法：通过MTT检测不同浓度姜黄素（0,7.5,15,30,60μmol/L）处理结肠癌细胞SW480后凋亡情况;通过蛋白免疫印迹方法检测不同浓度姜黄素（0,7.5,15,30,60μmol/L）处理结肠癌细胞后细胞中skp2、p27kip蛋白表达情况。结果：姜黄素能抑制结肠癌细胞SW480增殖并促进其凋亡,有浓度和时间依赖;姜黄素降低了结肠癌细胞SW480中skp2蛋白的表达（P〈0.05）,而促进了p27kip蛋白的表达,有时间和剂量依赖,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：姜黄素能抑制结肠癌细胞SW480的增殖并促进其凋亡,有时间和剂量依赖,这种抗癌效应可能与干扰skp2-p27kip通路有关。     

黄芩苷通过IκBα/NF-κB通路调节Aβ_(25-35)诱导的HT22细胞凋亡

目的探讨黄芩苷通过IκBα/NF-κB通路调节Aβ25-35诱导的HT22细胞凋亡。方法将HT22细胞分为空白组、模型组(40μmol/L Aβ_(25-35))、黄芩苷组(50μmol/L),多奈哌齐组(20μmol/L),给药组预处理1 h后加入Aβ_(25-35)。24 h后,MTT检测细胞存活率并观察细胞形态,Annexin V-FITF/PI检测细胞凋亡,Western blot法检测p-IκBα、p-NF-κB、TNF-α, IL-1β蛋白表达。结果与模型组比较,黄芩苷组与多奈哌齐组的细胞形态较完整、细胞密度较高、细胞间隙较小,细胞存活率升高(P0.01),细胞凋亡率降低(P0.01);p-IκBα,p-NF-κB, TNF-α, IL-1β蛋白表达较低(P0.05,P0.01)。结论黄芩苷可能通过抑制由Aβ_(25-35)激活的IκBα/NF-κB通路,减少TNF-α, IL-1β分泌,从而以减少神经元的凋亡,提高细胞的存活率。