苯那普利对糖尿病大鼠肾组织氧化应激和羰基应激的影响

目的 通过研究苯那普利对糖尿病大鼠肾脏氧化应激及羰基应激的影响,探索它的肾保护机制.方法 大鼠分为正常对照组(A组)、未处理糖尿病组(B组)和苯那普利治疗组(C组).12周后测定各组大鼠肾重/体重比、血糖、糖化血红蛋白(HbAle) 24 h尿蛋白定量,并分析各组大鼠肾组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、总巯基及羰基水平.结果 B组大鼠肾重/体重比、24 h尿蛋白定量、肾组织MDA及羰基水平均明显高于A组,SOD、GSH-PX及总巯基低于A组.与B组相比,C组大鼠肾重/体重比、24 h尿蛋白定量、肾组织MDA及羰基水平下降,GSH-PX升高.结论 苯那普利可抑制糖尿病大鼠肾脏肥大,并降低尿蛋白排泄率,这种肾保护作用可能与其改善氧化应激及羰基应激有关.     

普伐他汀对糖耐量受损合并代谢综合征患者脂肪细胞因子的影响

目的 观察普伐他汀对糖耐量受损（IGT）合并代谢综合征（MS）患者临床血生化指标及抵抗素、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）的影响.方法 将60例新诊断IGT合并MS患者分为普伐他汀组（30例）和生活干预组（30例）,比较两组治疗前和治疗16周后血脂、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、抵抗素、TNF-α及IL-6的变化.结果 普伐他汀组较生活干预组胆固醇[（4.45±0.60）mmol/L vs（5.58±0.96）mmol/L,t=-5.42,P＜0.01]及HOMA-IR[3.22±0.64 vs3.58±0.71,t=-2.05,P＜0.05）]明显下降,抵抗素[（1.97±0.72）μg/L vs（2.76 ±0.73）μg/L,t=-4.26,P＜0.01]、TNF-α[（9.36±2.03）μg/L vs（13.87±2.30）μg/L,t=-8.06,P＜0.01]、IL-6[（3.50±0.99）μg/L vs（6.32±1.17）μg/L,t=-10.06,P＜0.01]水平明显降低.结论 普伐他汀可明显改善IGT合并MS患者的胰岛素抵抗,显著降低抵抗素、TNF-α、IL-6的浓度,改善血管炎症反应.     

唑来膦酸对乏氧骨肉瘤细胞HIF-1α和VEGF表达的影响

目的研究唑来膦酸在乏氧的环境下对骨肉瘤LM8细胞株缺氧诱导因子1-α（HIF—1α）和血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法建立骨肉瘤细胞体外乏氧培养模型,观察唑来膦酸对骨肉瘤LM8细胞HIF-1α和VEGF表达影响。RT-PCR法检测HIF-1α和VEGF mRNA转录水平;免疫组化和ELISA法分别检测HIF-1α和VEGF蛋白表达情况。结果与常氧组相比,单纯乏氧组和唑来膦酸乏氧组的HIF-1α mRNA转录水平无明显改变（P〉0．05）;但在乏氧条件下,唑来膦酸能明显抑制HIF-1α蛋白的表达。而唑来膦酸能剂量依赖性抑制乏氧条件下VEGF mRNA及其蛋白表达水平（P〈0．05）。结论在乏氧条件下唑来膦酸能够抑制骨肉瘤LM8细胞HIF-1α蛋白的表达,从而使VEGF mRNA及其蛋白表达水平明显下降。     

辛伐他汀和非诺贝特对小鼠肝脏载脂蛋白M表达的影响及调控机制

目的 探讨辛伐他汀和非诺贝特及两者联合对小鼠肝脏载脂蛋白M（apoM）表达的影响及其机制,为防治动脉粥样硬化提供依据.方法 32只C57BL/6N小鼠按数字表法分为四组,对照组：普通饮食喂养;他汀组：辛伐他汀[10 mg/（kg·d）]干预;贝特组：非诺贝特[100 mg/（kg·d）]干预;联合组：辛伐他汀[10 mg/（kg·d）]和非诺贝特[100 mg/（kg·d）]干预,4周后分别检测小鼠肝脏apoM mRNA和蛋白、肝细胞核因子-1α（HNF-1α）mRNA、肝X受体-α（LXRα）mRNA的表达.结果 辛伐他汀和非诺贝特均上调apoM mRNA（1.97±0.04;2.02±0.02）和蛋白、HNF-1α mRNA（1.74±0.05;1.71±0.04）的表达,联合组（3.07±0.03;2.57±0.03）升高程度高于他汀组（1.97±0.04;1.74±0.05）和贝特组（2.02±0.02;1.71±0.04）（P＜0.05）.辛伐他汀下调LXRα mRNA（1.00±0.02）表达（P＜0.05）,非诺贝特上调LXRα mRNA（2.80±0.04）表达（P＜0.05）,联合组LXRα mRNA表达（1.56±0.03）与对照组（1.53±0.03）比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 辛伐他汀和非诺贝特可上调apoM表达,两者联合疗效更显著;其机制可能与两者调控HNF-1α和LXRα有关.     

尼古丁对PDLFs细胞NF-κB和p53表达的影响

目的 探讨尼古丁诱导人牙周膜成纤维细胞(PDLFs)凋亡的信号转导机制.方法 用不同浓度的尼古丁作用PDLFs细胞24 h后,测定NF-κB、p53、I-κB和Caspase3的基因表达水平.结果 尼古丁作用于PDLFs细胞24 h后,p53表达水平明显上调,而NF-κB表达水平明显下调,I-κB和Caspase3蛋白...     

氧化应激在间歇低氧诱导大鼠海马损伤中作用的研究

目的 探讨氧化应激在间歇低氧（IH）诱导大鼠海马损伤中的作用.方法 30只成年雄性Sprague-Dawley 大鼠随机分成对照组（CON组）、间歇低氧组（IH组）、Melatonin组（MEL组）,每组10只.采用化学比色法测定大鼠海马组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）水平,并采取RT-PCR方法检测海马组织中Cu/Zn SOD、GPx、CAT的mRNA水平.结果 （1）在IH组中,MDA的水平为（1.68±0.23）μmol/g protein,均高于对照组和MEL组的（1.25±0.14）μmol/g protein和（1.35±0.18）μmol/g protein（P＜0.05或P＜0.01）;（2）在IH组中,SOD的活性、Cu/ZnSOD、GPx、CAT的mRNA表达水平分别为（43.01±4.96）103NU/g protein、0.25±0.02、0.34±0.09、0.38±0.03,均低于对照组和MEL组的（61.12±5.68）103NU/g protein和（55.98±4.65）103NU/g protein、0.48±0.06和0.43±0.08、0.55±0.07和0.54±0.05、0.57±0.04和0.53±0.07（P＜0.05,P＜0.01）.结论 间歇低氧可通过氧化应激导致大鼠海马损伤,MEL能抑制间歇缺氧导致的氧化应激,从而对间歇低氧大鼠海马损伤具有保护作用.     

姜黄素对前列腺癌细胞C—erbB-2，Bax和Survivin表达的影响

目的探讨姜黄素对前列腺癌DU145细胞株C—erbB-2,Survivin和Bax的影响。方法利用细胞培养和SP免疫组织化学技术观察了前列腺癌细胞C—erbB-2,Survivin和Bax表达及姜黄素对它们的干预作用。结果对照组DU145细胞质中Survivin和C-erbB-2有较高表达,Bax表达很弱。姜黄素加入（浓度50μmol／m）后培养6h,12h,24h和48h,DU145细胞中Survivin,C—erbB-2表达逐渐减弱,而Bax逐渐增加,12—24h达高峰。结论姜黄素能够上调促凋亡基因Bax表达和下调Survivin和C—erbB-2表达,姜黄素抗肿瘤的途径之一干扰DU145细胞基因蛋白表达。     

越橘总黄酮对人宫颈癌细胞中TRAIL及其受体表达的影响

目的研究越橘总黄酮对人宫颈癌细胞株Hela细胞中TRAIL及其受体表达的影响。方法用浓度为0、0．025、0．25、2．5、和25μg／ml的越橘总黄酮处理Hela细胞24h后,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）方法检测越橘总黄酮对Hela细胞增殖的抑制作用,采用Hoechst33342／PI染色观察越橘总黄酮对Hela细胞凋亡的诱导作用,采用RT—PCR法检测不同浓度越橘总黄酮处理后的Hela细胞中TRAIL及其受体mRNA基因表达变化。结果0．025、0．25、2．5、和25μg／ml的越橘总黄酮对Hela细胞增殖的抑制率分别为22．08％、36．04％、42．10％和44．70％;0．25～25μg/ml的越橘总黄酮处理组细胞呈现明显的凋亡形态学改变;TRAIL和TRAIL—R2表达量明显高于空白对照组（P〈0．05）,TRAIL—R3和TRAIL—R4表达量明显低于空白对照组（P〈0．05）,而TRAIL—R1在各处理组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论越橘总黄酮诱导Hela细胞凋亡的机制可能与上调TRAIL及其受体TRAIL—R2基因的表达有关。     

外周血单核细胞血红素加氧酶1表达与糖尿病肾病的氧化应激机制的研究

目的探讨糖尿病肾病患者外周血单核细胞（PBMC）血红素加氧酶-1（HO-1）的表达与糖尿病肾病的关系及其可能机制。方法2型糖尿病患者伴或不伴糖尿病肾病各20例,正常对照组20例。比较各组空腹血糖、糖化血红蛋白（HbAlc）等基本资料,并检测三组血清中丙二醛（MDA）含量、外周血单核细胞活性氧（ROS）水平、HO-1mRNA水平、HO-1蛋白表达水平。结果在正常对照组、糖尿病组、糖尿病肾病组中,血清MDA水平分别为（14．23±5．07）nmoL／ml、（24．90±7．12）nmol／ml、（43．83-i-16．97）nmot／ml,三组相比,差异有统计学意义（F=37．022,P〈0．01）;PBMC的ROS水平分别为113．18±58．59、364．54±88．67、524．35±162．51,三组相比,差异有统计学意义（F=68．369,P〈0．01）;HO．1蛋白表达水平分别为22．84±9．98、36．72±15．85、58．1±15．93,三组相比,差异有统计学意义（F：31．302,P〈0．01）。HO-1mRNA的水平及蛋白表达水平与MDA水平均呈正相关（r=0．407,0．429,P〈0．05）。结论糖尿病肾病患者与糖尿病非肾病患者相比处于更严重的氧化应激状态并诱导的HO-1代偿性增高。提高HO-1表达将可能是改善糖尿病肾病患者氧化应激状态的可能途径。     

来曲唑对子宫内膜异位症模型大鼠的作用及对生殖系统影响的研究

目的 探讨第三代芳香化酶抑制剂（aromatase inhibitors,AIs）来曲唑对子宫内膜异位症模型大鼠的作用及对生殖系统的影响.方法 应用自体子宫内膜移植方法建立大鼠内异症模型,将20只建模成功大鼠随机分为来曲唑组和盐水对照组,比较治疗前后大鼠子宫内膜异位症（EM）病灶体积的变化;末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡情况;取对侧子宫角及卵巢,称重后行HE染色观察形态学变化.结果 来曲唑组异位病灶体积缩小[（28.75±2.28）mm3 vs（108.39±9.98）mm3,P〈0.01];来曲唑组异位内膜细胞凋亡率[（5.52±2.81）%]明显高于对照组[（2.11±1.70）%,P〈0.01];来曲唑组大鼠卵巢重量明显增加[（25.25±9.89）mg/100g vs（13.10±2.70）mg/100g,P〈0.01],卵巢呈多囊样改变;来曲唑组子宫重量减轻[（41.46±15.81）mg/100gvs（94.81±18.00）mg/100g,P〈0.05],内膜呈增生抑制改变.结论 来曲唑通过促进异位内膜细胞凋亡来治疗大鼠子宫内膜异位症模型.来曲唑会引起子宫内膜异位症模型大鼠卵巢过度刺激、子宫重量减轻、子宫内膜呈增生抑制状态.     

Leptin对人单核细胞CD86和HLA—DR表达的影响

目的探讨Leptin对人单核细胞协同刺激分子和HLA—DR表达的影响,为阐明瘦素在抗感染免疫中的作用提供依据。方法采用流式细胞术检测THP-1细胞和人外周血单核细胞表面CD86和HIA—DR的表达变化。结果经高浓度瘦素处理后,THP-1细胞CD86和HLA-DR的表达明显增强（CD86未处理组：8．78±1．66,CD86keption10：50．76±4．29,CD86keption100：95．20±4．90;HLA未处理组：20．75±2．12,HLAkeption10 102．14±5．75,HLAkeption：104．32±4．75）。人外周血单核细胞表面的CD86和HLA—DR的表达也出现了类似增加的现象（CD86未处理组：17．91±1．78,CD86keption100：48．80±3．60;HLA未处理组：34．10±2．76,HLAkeption100：88．86±3．53）。结论瘦素可以上调人单核细胞表面协同刺激分子和MHC-II类分子的表达,从而增强单核细胞的抗原提呈功能。     

高糖刺激对HK-2细胞脂联素受体基因及蛋白表达的影响

目的 了解体外高糖刺激对肾小管上皮细胞（HK-2）脂联素受体（adipoR）表达的影响.方法 将HK-2细胞在含10%胎牛血清的低糖DMEM培养液中培养至贴壁且80%融合时,无血清培养24 h,改用含葡萄糖1、2,4、6、8 mg/ml的培养液继续培养48 h,RT-PCR及westernblot检测ad-ipoR的表达.将HK-2细胞分别在含10%胎牛血清的高糖（4 mg/ml）、低糖（1 ms/ml）DMEM培养液中培养0、12、24、48、72、96 h后提取总RNA,RT-PCR检测adipoR mRNA的表达.结果 adipoR1/R2基因在HK-2细胞上均有表达,且adipoR1（0.63±0.12）基因表达量是adipoR2（0.16±0.03）的3.9倍,差异有统计学意义（P〈0.01）.各不同浓度葡萄糖及作用时间对HK-2细胞adipoR的基因表达无明显影响（P〉0.05）.westernblot检测到HK-2细胞上adipoR1的蛋白表达,其表达量不受葡萄糖浓度的影响（P〉0.05）.结论 adipoR1/R2基因在HK-2细胞上均有表达,且以adipoR1为主,提示adipoR1在肾脏疾病中具有更重要的意义.HK-2细胞adipoR的表达不受高糖的影响.     

瑞舒伐他汀对人单核-巨噬细胞组织因子表达的影响

目的探讨瑞舒伐他汀对氧化修饰低密度脂蛋白（OX-LDL）诱导的人单核-巨噬细胞组织因子（TF）表达影响及可能机制。方法据实验要求分空白对照组、OX-LDL组、多聚肌苷酸组、瑞舒伐他汀组。RT-PCR检测各组血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1（LOX-1）mRNA,TFmRNA表达,ELISA检测各组TF蛋白表达。结果OX-LDL组与空白对照组比较,LOX-1mRNA、TFmRNA表达增加[（3．25156±0．15772）VS（1±0）;（2．522451±0．138967）VS（1±0）],其差异均有统计学意义（P〈0．01）。多聚肌苷酸组、瑞舒伐他汀组与OX-LDL组比较,LOX-1mRNA、TFmRNA表达减少[（2．95139±0．157253）VS（3．25156±0．15772）、（2．877343±0．156558）VS（3．25156±0．15772）;（1．811956±0．169699）VS（2．522451±0．138967）、（1．687701．4-0．174647）vs（2．522451±0．138967）],其差异均有统计学意义（P〈0．05）。ox-LDL组与空白对照组比较,TF蛋白表达增加[（207．7233±1．154701）VS（184．8467±0．871799）],差异有统计学意义（P〈0．01）。多聚肌苷酸组、瑞舒伐他汀组与OX-LDL组比较,TF蛋白表达均减少[（197．8733±1．505003）vs（207．72334-1．154701）、（202．95674-2．722744）VS（207．7233±1．154701）],差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论LOX-1可能介导OX-LDL诱导的人单核-巨噬细胞TF表达增加。瑞舒伐他汀可通过下调单核-巨噬细胞LOX．1mRNA的表达下调TFmRNA表达,从而下调TF蛋白表达。     

EGCG对人前列腺癌裸鼠移植瘤生长和间隙连接蛋白43表达的影响

目的研究表没食子儿茶素没食子酸脂（EGCG）对前列腺癌裸鼠移植瘤生长和间隙连接蛋白43（Cx43）表达的影响,探讨EGCG防治前列腺癌的作用机制。方法分别采用四甲基偶氮唑蓝法、膜联蛋白／碘化丙锭双标流式细胞术和划痕标记荧光染料传输技术,体外观察不同浓度的EGCG（10、20、40mg/L）对人前列腺癌PC-3细胞的生长抑制率、凋亡率、细胞间间隙连接通讯功能（GJIC）的变化。采用PC-3细胞建立裸鼠皮下移植瘤动物模型,随机分为对照组和不同剂量的EGCG组（10、20、40mg/kg）,14d后称量移植瘤体重并计算抑瘤率,DNA原位缺口末端标记法和免疫组织化学分别检测凋亡指数（AI）和肿瘤微血管密度（MVD）,半定量逆转录聚合酶链反应检测移植瘤组织cx43mRNA的表达水平。结果20mg/L和40mg／L的EGCG均能明显抑制PC-3细胞的生长[（22．33±4．62）％,（38．67±5．67）％VS（3．47±0．31）％,P〈0．01]和诱导细胞凋亡[（7．84±1．37）％,（24．53±2．28）％V8（2．17±0．70）％,P〈0．01],并增强细胞间的GJIC功能。不同剂量的EGCG均能抑制裸鼠前列腺癌移植瘤生长,促进肿瘤细胞凋亡,减少肿瘤血管生成。（20、40mg/kg）EGCG能显著上调移植瘤组织Cx43mRNA的表达（0．58±0．08,0．80±0．07V80．42±0．04,P〈0．01）。EGCG对前列腺移植瘤的抑制作用、诱导细胞凋亡和上调Cx43表达的效应均随剂量的增加而增强,呈剂量依赖性（P〈0．05）。结论EGCG能上调Cx43在裸鼠前列腺癌组织中的表达和增强Cx43介导的间隙连接通讯功能,从而有效抑制前列腺癌移植瘤的生长。     

低分子肝素对脓毒症大鼠腹主动脉内皮细胞蛋白C受体和蛋白酶活化受体1表达的影响

目的观察低分子肝素（LMWH）对脓毒症大鼠腹主动脉内皮细胞（VEC）蛋白C受体（EPCR）和蛋白酶活化受体1（PARl）表达的影响。方法采用组织贴块法培养24只Wister大鼠腹主动脉VEC,1：3传代至第4代,分为对照组（n=6）、脓毒症组（LPS1μg／ml,n=6）、LMWH组（LPS1μg/ml＋LMWH5μg/ml,n=6）。分别在第1、3、5天采用流式细胞术（FCM）检测VEC表面的EPCR和PARl的表达。结果脓毒症组EPCR和PARl的表达各时间点均较对照组有明显下降（P〈0．05或P〈0．01）,以第5天最为明显（26．53±7．21VS39．26±2．62,q=6．45,P〈0．01：53．214±15．10VS86．54±11．34,q=6．94,P〈0．01）。LMWH组EPCR和PARl的表达各时间点均高于脓毒症组（P〈0．05）;与对照组比较,EPCR在第1天仍有明显降低（40．86±1．63VS45．41.1±2．82,q=3．51,P〈0．05）,但第3、5天接近对照组水平（41．20±3．32VS42．83±2．66,P〉0．05;39．23±3．33VS39．26±2．62,P〉0．05）,PARl各时问点与对照组比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论LMWH能有效改善脓毒症内皮细胞EPCR和PARl表达抑制的状态。     

严重烫伤后早期大鼠胃黏膜组织中热休克蛋白70表达变化及胰岛素干预作用

目的研究热休克蛋白（HSP70）在严重烫伤早期大鼠胃黏膜组织中动态表达变化及胰岛素和HSP70对严重烫伤早期大鼠胃黏膜组织的保护作用,探讨胰岛素促进HSP70表达的可能机制。方法采用大鼠烫伤模型,以免疫组织化学的方法和显微图像分析方法观察伤后3、6、12、24和48h不同时相点胃黏膜组织中HSP70的表达情况及胃黏膜组织的病理形态学变化。结果治疗组除12h时相点（9．40±1．52,P=0．065）外其余不同时相点HSP70的表达水平分别高于烫伤组相同时相点HSP70的表达水平[（6．80±1．10,8．60±0．55,10．80±1．64,11．40±1．34）,P〈0．05],治疗组各时相点胃黏膜损伤指数分别低于烫伤组相同时相点损伤指数[（4．05±O．36,11．97±1．15,20．98±2．83,13．92±O．94,1．60±0．55）,P〈0．05]。病理形态学变化显示对照组胃黏膜组织结构完整无损伤,烫伤早期SD大鼠胃黏膜组织损伤明显,治疗组SD大鼠胃黏膜组织损伤较烫伤组明显减轻。相关分析结果显示,HSP70与胃黏膜损伤指数、血糖之间呈正相关（r=0．904,0．961,P〈0．01）。结论胰岛素能够明显增强严重烫伤早期SD大鼠胃黏膜组织内HSP70的表达,促进胃黏膜组织HSP70的合成,可能是胰岛素保护胃黏膜组织的重要机制之一。     

大黄素对人膀胱癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用及其机制

目的探讨大黄素对人膀胱癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用,并探讨其作用机制。方法建立人膀胱癌细胞株BIU87裸鼠移植瘤模型,并随机分为4组：对照组、大黄素组、Z—VAD—FMK组、大黄素＋Z—VAD—FMK组。观察各组裸鼠移植瘤生长情况并绘制肿瘤生长曲线,4周后处死全部裸鼠,取出肿瘤组织,称瘤质量;HE染色观察肿瘤细胞形态,流式细胞分析仪细胞凋亡,RT-PCR检测各组肿瘤组织中AIF和EndoGmRNA的表达,Western blot检测各组肿瘤组织中AIF和EndoG蛋白的表达。结果大黄素组肿瘤生长速度明显慢于其他3组,大黄素组[（0．41±0．05）g]和大黄素＋Z-VAD—FMK组[（0．69±0．07）g]肿瘤较其他2组[（1．08±0．13、1．04±0．09）g]轻,差异有统计学意义（F=90．56、27．49,P〈0．01）,大黄素组与大黄素＋Z—VAD—FMK组相比差异也有统计学意义（t=10．01,P〈0．01）。流式细胞仪检测凋亡显示大黄素组细胞凋亡率[（42．71±2．69）％]明显高于大黄素＋Z-VAD—FMK组[（34．38±1．73）％]（t=6．38,P〈0．01）。RT—PCR和Western blot结果显示,大黄素＋Z—VAD—FMK组中AIF和EndoG的表达水平显著上调,与其他各组比较[（1．65±0．12）vs（1．24±0．08）、（0．51±0．07）、（0．48±0．04）;（2．12±0．16）vs（1．75±0．13）、（0．57±0．06）、（0．59±0．07）;（2．42±0．13）vs（1．73±0．11）、（0．78±0．07）;（0．75±0．08）;（3．13±0．25）vs（2．15±0．18）、（0．85±0．09）、（0．81±0．14）],差异均有统计学意义（F=303．22,319．32,409．38,258．53,P〈0．01）。结论大黄素能够明显抑制人膀胱癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能部分与大黄素可上调膀胱癌细胞BIU87中AIF和EndoG的表达,通过启动非Caspase依赖途径诱导细胞凋亡有关。     

脂多糖对人皮肤成纤维细胞胶原代谢的影响

目的探讨脂多糖（1ipopolysaccharide,LPS）对人皮肤成纤维细胞胶原代谢的影响,以了解LPS在增生性瘢痕形成中的生物学作用。方法取正常皮肤行成纤维细胞培养后,分为1个对照组及6个实验组。实验组分别与终浓度为0．005、0．010、0．050、0．100、0．500和1．000μg／ml大肠杆菌LPS（Ecoli055：B5）培养,对照组DMEM培养。用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法测定成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA及胶原酶mRNA的表达,并以同一个体相同代数的瘢痕组织成纤维细胞做对照。结果与对照组比较,LPS刺激浓度在0．005-0．1μg／ml时,促进正常皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达（0．323±0．041,0．303±0．063,0．391±0．071,0．344±0．086,0．488±0．059,0．401±0．087,0．616±0．107,0．434±0．084,0．823±0．092,0．542±0．082）,抑制胶原酶mR-NA表达（0．598±0．068,0．556±0．049,0．441±0．043,0．372±0．083,0．260±0．027）,且呈一定的剂量依赖性;当LPS刺激浓度为0．5μ／ml,上述作用下降（0．451±0．063,0．374±0．072,0．360±0．062）;而当LPS刺激浓度到达1．0μg/ml时,抑制正常皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达（0．162±0．025,0．171±0．061）,促进胶原酶mRNA表达（0．444±0．114）。LPS刺激浓度在0．1μg／ml时,成纤维细胞（0．823±0．092,0．542±0．082,0．260±0．027）Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA和胶原酶mRNA表达与同一个体增生性瘢痕组织成纤维细胞（0．829±0．049,0．569±0．038,0．277±0．059）近似。结论LPS对人皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA和胶原酶mRNA的表达,其直接调节可能是参与增生性瘢痕形成的重要机制。     

高糖对肾小管上皮细胞Toll样受体4表达的影响

目的本实验旨在探讨高糖对。肾小管上皮细胞Toll样受体4（TLR4）表达的影响及其在糖尿病。肾病中的意义。方法体外培养。肾小管上皮细胞（NRK-52E）,分成LG组（给予5mmol／L葡萄糖的DMEM培养）和HG组（给予25mmol／L葡萄糖的DMEM培养）,不同时间收集细胞,采用细胞免疫化学、Rt—PCR、WesternBlot检测TLR4蛋白和mRNA表达情况,同时取细胞培养上清液用Elisa法检测IL-6、TNF-α水平。结果在高糖刺激6hTLR4mRNA出现表达明显增高,维持较高表达至274h,而48h后表达有所下降（P〈0．05）。HG组培养24hTLR4蛋白升高,48hTLR4蛋白表达进一步升高,与LG组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。HG组NRK-52E上清液IL-6、TNF一仅的表达较LG组明显升高（P〈O．05）,并与TLR4蛋白呈正相关（r=0．799,0.820）。结论高糖可能通过上调NRK-52E的TLR4的表达,导致TNF-α、IL-6等炎性因子表达升高,TLR4参与了糖尿病肾病的进展。